通过实时聚合酶链反应检测和多重、同时量化病原体的方法

摘要

一种方法，其用于检测和多重、同时量化一个或多个试验样品中的李斯特菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲杆菌和/或大肠杆菌O157:H7的任何组合，所述方法通过使用实时聚合酶链反应(PCR)的多重扩增反应进行。所述方法中的步骤是：(a)从所述试验样品或样品中提取DNA；(b)准备待检测和量化的病原体的特异性反应混合物，以便该反应混合物包括对于提取的DNA的酶促扩增和待检测和量化的病原体的鉴定所需的试剂；(c)通过使用PCR的多重扩增反应，扩增所述反应混合物；和(d)同时确定所述病原体在所述试验样品或样品中的存在与否并量化。所述方法的具体特征在于：(i)用于DNA的酶促扩增的反应混合物有几组确定为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2，SEQ ID No.4和SEQ ID No.5，SEQ ID No.7和SEQ ID No.8，SEQ ID No.10和SEQ ID No.11的寡核苷酸引物对，及具有确定为SEQ ID No.3、SEQ ID No.6、SEQ ID No.9和SEQ ID No.12的寡核苷酸序列的探针；(ii)所述病原体的任何组合的存在与否和量化是通过每种病原体特异性的荧光信号或荧光发射确定的。