欧洲型、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA检测方法

摘要

本发明提供一种鉴别欧洲型、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的血清学方法，该方法是针对美洲型PRRSV非结构蛋白Nsp7蛋白的1～23和59～259氨基酸序列，建立美洲型PRRSV Nsp7蛋白的原核重组表达载体pET-32a-JXA1-ΔNsp7；针对欧洲型PRRSV Nsp7蛋白表位1～23和59～269氨基酸序列，建立欧洲型PRRSV非结构蛋白Nsp7的原核重组表达载体pET-32a-LV-ΔNsp7。重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达。利用经镍柱亲和纯化的美洲型Nsp7蛋白作为包被抗原制备用于美洲型PRRSV抗体检测的间接ELISA诊断试剂盒；以纯化的欧洲型Nsp7蛋白作为包被抗原，优化了欧洲型PRRSV抗体检测间接ELISA方法；两种试剂盒的发明可用于PRRSV抗体的分型检测。