燕子花花期调控基因IlWRKY22及其应用

摘要

本发明公开了一种来源于燕子花花被片转录因子

说明书

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种燕子花花期调控基因

背景技术

燕子花（

花的形成标志着植物从营养生长开始向生殖生长进行转变，该过程是由遗传因子和环境因子协同调节的复杂过程，它直接影响植株个体的生长发育和繁衍，关系到农作物的产量，对园林植物而言，花朵何时绽放意味着植物的重要观赏性状何时能在园林景观中呈现。因此，研究开花时间对园林花卉的生产发展具有重要价值。

WRKY转录因子是近些年发现的植物特有的、数量较多的转录因子家族之一。大多数WRKY转录因子都被证明参与了植物应对生物与非生物胁迫的响应过程。如连接水杨酸和茉莉酸的信号转导通路，增强对白粉病菌的抗性、调控植物抗毒素的合成等方面，在花期调控方面，拟南芥的

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够推迟花期的燕子花

本发明采用对燕子花WRKY家族基因分析的方法，筛选得到转录因子

本发明目的按以下技术方案实现：

一种燕子花开花调控基因

本发明提供了含有上述编码基因的载体。

本发明提供了上述基因在抑制开花方面的应用。

本发明具有收益如下：

本发明成功克隆了燕子花

本发明不仅丰富了燕子花花期调控理论，也可用于基因育种调控花期。

附图说明

附图 1是

附图2是野生型和过表达

附图3是野生型和过表达

具体实施方式

下面实例为对本发明的技术方案作进一步进行详细描述，但不用来限制本发明的保护范围。

实施例1：燕子花

本发明所用的过表达载体是pCAMBIA1300-GFP，插入

植物过表达载体pCAMBIA1300-

以燕子花

采用花序侵染法将

实施例2：过表达

无菌环境下将消毒后的转基因拟南芥、转空载体拟南芥和野生型拟南芥种子播种于点在含25 mg·L

实施例3：燕子花

采用实施例1中获得的含有pCAMBIA1300-

（1）从-80 ℃冰箱中取出带有重组质粒的农杆菌GV3101活化，在28 ℃培养箱中黑暗环境中培养36 h，挑取单克隆菌株进行PCR鉴定，再将鉴定正确的菌液在YEP液体培养基中扩大培养。

（2）将农杆菌摇至OD

（3）挑选长势良好的烟草无菌苗，将幼嫩的叶片切成1 cm

（4）将摇好的菌液集菌，用重悬液（1/2 MS+20 g/L蔗糖）重悬，然后把预培养的烟草叶片浸泡在重悬液中不停地晃动5 min，侵染后放至滤纸上晾干，再重新放回培养基上共培养2 d。

（5）把叶片放到筛选培养基上光照培养，每15 d换一次培养基，培养基成分为MS+1mg·L

（6）叶片分化出不定芽时，将不定芽切下转移至1/2 MS固体培养基（含20 g·L

（7）将生根的烟草幼苗移到营养土中继续培养，并切下叶片提取DNA进行PCR验证，将阳性烟草幼苗继续培养直到收获种子，继续筛选下一代阳性植株。

实施例4：过表达

将收获的烟草种子烘干后，同时消毒并播种在含25 mg·L

前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。