燕子花早花基因IlSEP3及其应用

摘要

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及燕子花早花基因

说明书

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及燕子花早花基因

背景技术

花是园林植物最主要的观赏部位之一，而开花时间是影响观花植物观赏及商业价值的重要因素，关于开花时期的调控是观赏植物育种工作者持续关注的重要研究方向。燕子花（

发明内容

本发明的目的是提供燕子花

本发明另一目的在于提供上述燕子花早花调控基因的蛋白。

本发明又一目的在于提供上述燕子花早花调控基因的应用。

本发明目的按如下技术方案实现。

一种燕子花早花基因

一种燕子花早花基因

本发明还提供了含有前述编码基因的表达载体pCAMBIA1300。

本发明还提供了含有前述表达载体的农杆菌GV3101。

本发明进一步提供了前述基因在促进拟南芥开花方面的应用。

进一步地，所述应用为构建

本发明具有以下效果。

本发明对燕子花花被片的转录组数据中MADS-box家族基因进行分析，筛选得到MADS-box-related转录因子基因

本发明所述

附图说明

附图1燕子花

附图2燕子花IlSEP3蛋白在本氏烟草中的亚细胞定位图。Bright field：明场照片；GFP：绿色荧光蛋白；Merged：明场和GFP叠加。

附图3燕子花

具体实施方式

下面结合具体实施例及附图来进一步详细完整地阐述本发明，而非限制本发明。

实施例1目的基因的克隆。

从燕子花花被片的转录组数据库中获取

GTGAGGGGGAGAGTGGAGC-3’，下游引物序列：5’-TTATGTGCAGGGATGGCTTCCGTGAGAC-3’。用全能型RNA提取试剂盒（康为世纪）按照说明书提取燕子花花被片总RNA，用反转录试剂盒（TaKaRa）将燕子花花被片总RNA进行反转录制备cDNA，以反转录后的cDNA为模板，采用KOD-Plus-Neo（东洋纺）高保真酶进行PCR克隆，反应条件为：95 ℃预变性5 min；95 ℃变性30 s，60 ℃退火 45 s，72 ℃延伸1 min 30 s，35个循环(变性-延伸)；72 ℃再延伸10min，4 ℃保存。PCR产物用1 %琼脂糖凝胶电泳检测，如图1，将单一条带使用胶回收试剂盒（OMEGA）按照说明书回收纯化目的条带，将胶回收产物连接至pEASY-Blunt Zero CloningVector载体，转化DH5 α大肠杆菌感受态细胞，PCR筛选阳性克隆，挑取阳性单克隆进行测序。

实施例2亚细胞定位分析。

采用同源重组的方法，将不含终止密码子的

pCAMBIA1300-

实施例3燕子花

使用蘸花法将实施例2中含有pCAMBIA1300-