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一种清真肉类食品检测装置及其检测方法

摘要

本发明涉及一种清真肉类食品检测装置及其检测方法,其中,所述清真肉类食品检测装置,包括:至少一个检测组件,所述检测组件包括样品管、固定柱、毛细管和试纸板,所述固定柱可拆卸盖设于所述样品管上,以备可操作性地打开或关闭所述样品管;所述试纸板可操作性地位于所述固定柱上或从所述固定柱掉落至样品管内;所述毛细管缠绕于所述固定柱上,所述毛细管的一端位于样品管外,所述毛细管的另一端伸入所述样品管内,以备可操作性地将所述毛细管内的液体注入所述样品管内;加热器,设有加热腔,所述样品管至少底部能够伸入所述加热腔。

著录项

  • 公开/公告号CN116026815A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2023-04-28

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 中国农业大学;

    申请/专利号CN202210867268.X

  • 申请日2022-07-21

  • 分类号G01N21/78(2006.01);G01N33/558(2006.01);

  • 代理机构北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11690;

  • 代理人张丹

  • 地址 100083 北京市海淀区圆明园西路2号

  • 入库时间 2023-06-19 19:27:02

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2023-07-21

    授权

    发明专利权授予

  • 2023-05-16

    实质审查的生效 IPC(主分类):G01N21/78 专利申请号:202210867268X 申请日:20220721

    实质审查的生效

  • 2023-04-28

    公开

    发明专利申请公布

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域,尤其涉及一种清真肉类食品检测装置及其检测方法。

背景技术

伊斯兰教严禁食用猪源食品,一些伊斯兰国家制定了严格的规定,要求生产商和进口商在其产品上加盖清真证书,以区别于非清真产品。但肉类食品的掺假现象频繁发生,由于猪肉成本低于牛羊肉,一些生产厂家为了降低成本,会在清真肉类食品中掺入猪肉。肉制品在经过添加调味料、香精香料和多次加工之后,仅通过感官无法完全辨别肉类成分,如若清真食品中掺入猪肉成分,将极大的违背伊斯兰教徒的宗教信仰,甚至引发宗教矛盾。

发明内容

鉴于上述的分析,本发明实施例旨在提供一种清真肉类食品检测装置及其检测方法,用以解决上述问题。

一方面,本发明提供了一种清真肉类食品检测装置,包括:

至少一个检测组件,所述检测组件包括样品管、固定柱、毛细管和试纸板,所述固定柱可拆卸盖设于所述样品管上,以备可操作性地打开或关闭所述样品管;所述试纸板可操作性地位于所述固定柱上或从所述固定柱掉落至样品管内;所述毛细管缠绕于所述固定柱上,所述毛细管的一端位于样品管外,所述毛细管的另一端伸入所述样品管内,以备可操作性地将所述毛细管内的液体注入所述样品管内;

加热器,设有加热腔,所述样品管至少底部能够伸入所述加热腔。

进一步地,所述固定柱设有与所述试纸板相配合的插槽,所述插槽贯通所述固定柱的两端;

所述插槽相对的两个侧壁上分别设有供插针穿过的穿孔;

所述试纸板位于所述固定柱上时,所述插针位于两个穿孔内,所述试纸板的底部插入插槽内并于所述插针抵接,以备将所述试纸板固定在插槽内;将所述插针从所述穿孔取出后,所述试纸板从所述固定柱掉落至所述样品管内。

进一步地,所述固定柱包括柱体部和底板部,所述柱体部位于所述底板部上方;

所述底板部与所述样品管相配合,所述底板部可拆卸盖设于所述样品管的管口;

所述插槽从所述柱体部的顶端延伸至所述底板部的底端;

所述穿孔位于所述柱体部的侧壁底部,两个穿孔的连线与所述插槽的中心线垂直相交。

进一步地,所述柱体部设有卡板部,所述底板部设有供所述毛细管穿过的插孔;

所述毛细管卡入所述卡板部内,沿所述柱体部向下旋转缠绕,所述毛细管的末端从所述插孔伸入所述样品管内。

进一步地,所述底板部设有卡槽部;

所述样品管的管口设有与所述卡槽部相配合的环形凸起,所述环形凸起至少一部分可拆卸嵌入至所述卡槽部。

进一步地,所述清真肉类食品检测装置还包括组装板,可拆卸设置于所述加热腔上,以备所述组装板可操作地打开或关闭所述加热腔;

所述组装板设有与所述检测组件数量相等的组装部,所述检测组件可拆卸设置于所述组装部内,所述检测组件与所述组装部一一对应。

进一步地,所述固定柱的底板部与所述组装部相配合,所述底板部可拆卸设置于所述组装部;

所述组装部设有滑槽,所述底板部设有与所述滑槽相配合的滑块。

进一步地,所述检测组件设有多根毛细管,毛细管的颜色、图案、粗细、编号中的至少一种与毛细管唯一对应,以备区分毛细管内的液体种类。

进一步地,所述加热器还设有存储腔,以备用于存放检测组件。

另一方面,本发明提供了一种清真肉类食品检测方法,通过上述的清真肉类食品检测装置实施,包括如下步骤:

步骤一:将RPA试剂、CRISPR/Cas试剂、running buffer分别装载到不同的毛细管中,并用凡士林封口;

将待检测样品的提取基因组放入样品管内;

步骤二:将步骤一中装载完成的三根毛细管缠绕在固定柱上;

将固定柱盖设于样品管上;

将三根毛细管的末端分别伸入至样品管内;

将插针插入两个穿孔内,试纸板插入插槽内并与插针抵接;

将样品管放入加热腔内;

步骤三:加热器将加热腔加热至37℃,将RPA试剂吹入样品管内,37℃加热10min;然后将CRISPR/Cas试剂吹入样品管内,37℃继续加热20min;而后将running buffer吹入样品管内,最后从所述穿孔内的插针拔出试纸板掉入样品管;

步骤四:通过观察试纸板的显色反应,判断待检测样品中是否掺有猪肉。

所述步骤一中,三根毛细管中分别装有2-20μL的RPA试剂、20-150μL的CRISPR/Cas试剂、80-200μL的running buffer试剂;优选的,5-12μL的RPA试剂、40-100μL的CRISPR/Cas试剂、80-150μL的running buffer试剂,更优选的,装有9.5μL的RPA试剂、70μL的CRISPR/Cas试剂、120μL的running buffer试剂。

所述三根毛细管的颜色不同,即通过毛细管颜色区分毛细管内试剂的类型。

RPA试剂包括2-10μL再悬浮的RPA酶溶液、0.5-5μL的ddH

其中,RPA-F的序列为

5’-ACATCATATCTCCAAAGCACCTTCAACAGACGG-3’(SEQ ID NO:1),RPA-R的序列为

5’-TCTGATTAGGCATGAAAAAGGCTTGTGCTCCC-3’(SEQ ID NO:2)。

所述CRISPR/Cas试剂包括ddH2O、NEB bufferr2.1、crRNA、Cas12a和cut probe;优选的,包括4-12μL的NEB bufferr2.1、2-10μL的crRNA、2-10μL的Cas12a和0.2-1.2μL的cutprobe(浓度为10μmol/L);更优选的,包括51.2μL的ddH2O、8μL的NEB bufferr2.1、5μL的crRNA(浓度为1μmol/L)、5μL的Cas12a(浓度为1μmol/L)和0.8μL的cut probe(浓度为10μmol/L);

其中,crRNA的序列为

5’-UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUGGAAGGCAGCUCCCAAAAC-3’(SEQ ID NO:3),cutprobe的序列为5’-AGTACCGATAGATACAGAC-3’(SEQ ID NO:4)。

running buffer包括4x SSC、1%BSA和0.05%Tween20。

待检测样品的提取基因组是采用使用市售的基因组提取试剂盒提取清真食品的基因组。

试纸板检测线(T线)上喷涂的是链霉亲和素和TCP探针孵育结合后的复合物,TCP探针序列为:5’-CTATCGGTACTATACA-/Biotin/-3’(SEQ ID NO:5),质控线(C线)上喷涂的是链霉亲和素和CCP探针孵育结合后的复合物,CCP探针序列为:5’-/Biotin/-ATACAGAC-3’(SEQ ID NO:6)。

所述试纸板上的LFAs在使用前,将2.5μL的AuNPs-DNA预先滴到LFAs的结合垫上,该DNA序列为5’-/SH/-TTTTTTTTGTCTGTAT-3’(SEQ ID NO:7)。

所述步骤三中,使用滴管将毛细管内的液体吹入样品管。由于毛细管力,样品管中的混合物沿着LFAs向上迁移。3min后,肉眼观察T线和C线的红色条带,整个检测过程不到35min。

与现有技术相比,本发明至少可实现如下有益效果之一:

(1)能够提高肉类检测灵敏度和特异性,能够实现集成装置的一体化连贯操作,满足对清真肉类食品进行是否猪肉掺假的快速、简便、灵敏、特异性的现场检测需求;

(2)高灵敏度:通过建立RPA和CRISPR/Cas12a协同的双重信号放大机制以提高检测灵敏度;

(3)高特异性:通过CRISPR/Cas12a实现特异性的二次把关,大幅度提高检测特异性;

(4)低成本:通过免抗体标记降低试纸条的成本,且实现结果的可视化呈现;

(5)操作简便:配套开发一种实现RPA、CRISPR/Cas12a和LFAs一体化连贯操作的集成装置,使整个检测过程在不打开样品管盖的基础上完成下一步操作,从而避免气溶胶的污染,降低检测的假阳性概率,并采用电热水槽实现温度的可控化,保证RPA和CRISPR/Cas12a在恒温下进行。

本发明中,上述各技术方案之间还可以相互组合,以实现更多的优选组合方案。本发明的其他特征和优点将在随后的说明书中阐述,并且,部分优点可从说明书中变得显而易见,或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点可通过说明书以及附图中所特别指出的内容中来实现和获得。

附图说明

附图仅用于示出具体实施例的目的,而并不认为是对本发明的限制,在整个附图中,相同的参考符号表示相同的部件。

图1为具体实施方式中清真肉类食品检测装置(试纸板位于插槽上)的结构示意图(一);

图2为具体实施方式中清真肉类食品检测装置(试纸板位于插槽上)的结构示意图(二);

图3为具体实施方式中清真肉类食品检测装置(试纸板位于插槽上)的剖视图;

图4为具体实施方式中清真肉类食品检测装置(试纸板位于样品管内)的结构示意图;

图5为具体实施方式中清真肉类食品检测装置(试纸板位于样品管内)的剖视图;

图6为具体实施方式中清真肉类食品检测装置的局部爆炸图;

图7为具体实施方式中固定柱的结构示意图(一);

图8为具体实施方式中固定柱的结构示意图(二);

图9为具体实施方式中固定柱的结构示意图(三);

图10为具体实施方式中固定柱的结构示意图(四);

图11为具体实施方式中组装板的结构示意图;

图12为具体实施方式中加热器的局部结构示意图;

图13为具体实施方式中检测清真食品中猪肉掺假的灵敏度示意图;

图14为具体实施方式中检测清真食品中猪肉掺假的特异性示意图。

附图标记:

1-检测组件;11-样品管;111-环形凸起;12-固定柱;121-插槽;122-穿孔;123-柱体部;123a-卡板部;124-底板部;124a-卡槽部;124b-插孔;124c-滑块;13-毛细管;14-试纸板;2-加热器;21-加热腔;211-限位条;212-第一装配口;22-存储腔;221-存储盖;222-第二装配口;23-加热模块;3-组装板;31-组装部;311-滑槽;32-识别区。

具体实施方式

下面结合附图来具体描述本发明的优选实施例,其中,附图构成本发明一部分,并与本发明的实施例一起用于阐释本发明的原理,并非用于限定本发明的范围。

在本发明实施例的描述中,需要说明的是,除非另有明确的规定和限定,术语“相连”应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接可以是机械连接,也可以是电连接可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连。对于本领域的普通技术人员而言,可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

全文中描述使用的术语“顶部”、“底部”、“在……上方”、“下”和“在……上”是相对于装置的部件的相对位置,例如装置内部的顶部和底部衬底的相对位置。可以理解的是装置是多功能的,与它们在空间中的方位无关。

本发明通常的工作面可以为平面或曲面,可以倾斜,也可以水平。为了方便说明,本发明实施例放置在水平面上,并在水平面上使用,并以此限定“高低”和“上下”。

实施例一

本实施例公开了一种清真肉类食品检测装置,如图1~图12所示,包括:

至少一个检测组件1,所述检测组件1包括样品管11、固定柱12、毛细管13和试纸板14,所述固定柱12可拆卸盖设于所述样品管11上,以备可操作性地打开或关闭所述样品管11;所述试纸板14可操作性地位于所述固定柱12上或从所述固定柱12掉落至样品管内;所述毛细管13缠绕于所述固定柱12上,所述毛细管13的一端位于样品管14外,所述毛细管13的另一端伸入所述样品管14内,以备可操作性地将所述毛细管13内的液体注入所述样品管内,所述毛细管13用于盛放与待检测样品反应的试剂;

加热器2,设有加热腔21,所述样品管11至少底部能够伸入所述加热腔21,以备所述样品管11能够在所述加热腔21内进行加热。

本发明的清真肉类食品检测装置(以下简称为检测装置),将用于存放待检测样品的样品管11、载有反应试剂的毛细管13以及用于显示反应结果的显色试纸板14通过固定柱12集成在一起,方便使用者更简单便捷地进行检测操作。

所述固定柱12设有与所述试纸板14相配合的插槽121,所述插槽121贯通所述固定柱12的两端,具体地,所述插槽121贯通所述固定柱12的上下两端,当固定柱12安装在样品管11上时,插槽121与所述样品管11连通。优选地,所述插槽121竖直贯通固定柱12的上下两端,且插槽121的延伸线与所述固定柱12的中心线平行。

所述插槽121相对的两个侧壁上分别设有供插针穿过的穿孔122。

所述试纸板14位于所述固定柱12上时,所述插针位于两个穿孔122内,所述试纸板14的底部插入插槽121内并于所述插针抵接,以备将所述试纸板14固定在插槽121内;将所述插针从所述穿孔122取出后,所述试纸板14从所述固定柱12掉落至所述样品管11内。

优选地,所述插针为钢针。

为防止试纸板14位于固定柱12上时不慎掉落至样品管11内,所述插针位于两个穿孔122之间时能够将所述插槽121完全赌上,即位于两个穿孔122内插针向上或向下投影能够覆盖插槽121的上下两个敞口,以避免试纸板14从插针与插槽121内壁间的空隙掉落,保证当插针位于两个穿孔122之间时,试纸板14的底部始终与插针抵接,即将试纸板14限定在插槽121内,而不掉入样品管内。

优选地,所述试纸板14的长度大于所述插槽121的长度,以便操作试纸板14,以及避免试纸板14陷入插槽121内无法取出。

所述固定柱12包括柱体部123和底板部124,所述柱体部123位于所述底板部124的上方,即柱体部123的底端与底板部124的顶部表面连接。

所述底板部124与所述样品管11相配合,所述底板部124可拆卸盖设于所述样品管11的管口处,具体地,所述底板部124设有卡槽部124a,所述样品管11的管口设有与所述卡槽部相配合的环形凸起111,所述环形凸起111围设于样品管11的管口外,所述环形凸起111起至少一部分可拆卸嵌入至所述卡槽部124a。所述卡槽部124a设有一侧敞开的凹槽,所述环形凸起111从所述卡槽部124a凹槽敞开的一侧插入,使一部分环形凸起111嵌入卡槽部124a的凹槽内,实现将底板部124可拆卸盖设在样品管11的管口上。

所述插槽121从所述柱体部123的顶端延伸至所述底板部124的底端,所述穿孔122位于所述柱体部123的侧壁底部,两个穿孔122的连线与所述插槽121的中心线垂直相交。

为方便更稳定地将毛细管13固定在固定柱12上,所述柱体部123的侧壁上设有卡板部123a,所述底板部124设有供所述毛细管13穿过的插孔124b,底板部124盖设在样品管11上时插孔124b与样品管11连通。

所述毛细管13卡入所述卡板部123a内,沿所述柱体部123向下旋转缠绕,所述毛细管13的末端从所述插孔124b伸入所述样品管11内。

为方便拆卸毛细管13,所述卡板部123a的形状为“┐”形,即卡板部123a包括与所述柱体部123侧壁垂直连接的横板和与所述柱体部123侧壁平行的竖板,优选地,所述横板的顶部端面与所述柱体部123的顶部端面齐平,所述竖板的长度为s,柱体部123的长度为L,L/4≤s≤L/2。

为了进一步提高毛细管13在固定柱12上的稳定性,优选固定柱12的形状为非圆柱形,本实施例中,固定柱12的形状类似“R”,具体地,在插槽121相对的两外侧壁向外延伸出延伸板,两个延伸板与插槽121的外壁共同限位出一个中空的半敞开的柱形空间,两个延伸板的顶端和底端分别设有限位块,以限位出毛细管13的缠绕空间。

所述底板部124上的插孔124b的数量与所述毛细管13的数量相等,所有的插孔124b可以分布在所述柱体部123的一侧,也可以分布在所述柱体部123的两侧。

根据所需待检测样品的类型,所述检测组件1上可以设置合适的毛细管13根数,即所述检测组件1可以包括多根毛细管13,每根毛细管13内优选盛放不同的检测所需的试剂。

为方便区分不同毛细管13内安装的试剂,毛细管13的颜色、图案、粗细、编号等中的至少一种与毛细管内的液体唯一对应,以备区分毛细管内的液体种类。例如可以单独通过不同颜色的毛细管区分不同毛细管内的液体,可以通过不同图案的毛细管区分不同毛细管内的液体,可以通过不同粗细的毛细管区分不同毛细管内的液体,可以通过不同编号的毛细管区分不同毛细管内的液体,当然也可以是通过毛细管的颜色、图案、粗细、编号等两种或几种的组合区分不同毛细管内的液体,只要能够将多个毛细管中的液体一一进行区分即可。

为了提高检测装置的检测效率,所述检测装置包括多个结构相同的检测组件1,以备能够同时检测多个样品。

优选地,所述检测装置还包括组装板3,所有检测组件1可拆卸安装在组装板3集成在一起,组装板3可拆卸设置于所述加热腔21上,能够可操作地打开或关闭所述加热腔,即检测组件1通过组装板3使得样品管11的部分位于加热腔21内,以备加热腔21对样品管11进行加热。

为方便组装板3的拆卸,所述加热腔21的顶部敞开,组装板3嵌设在加热腔21的顶部,优选地,所述加热腔21的内壁四周设有限位条211,一方面,避免表面组装板3掉落到加热腔21内;另一方面,对组装板3进行定位固定。

进一步为了方便组装板3的安装拆卸,所述加热腔21侧壁上设有与加热腔21顶部敞口贯通的第一装配口212,以便使用者从加热腔21顶部取下组装板3。

优选地,所述组装板3安装至加热腔21的顶部后,所述组装板3的顶部端面与所述加热器2的顶部端面齐平。

所述组装板3设有与所述检测组件1数量相等的组装部31,所述检测组件1可拆卸设置于所述组装部31内,所述检测组件1与所述组装部31一一对应。具体地,所述固定柱12的底板部124与所述组装部31相配合,所述底板部124可拆卸设置于所述组装部31。

优选地,所述组装部31设有滑槽311,所述底板部124设有与所述滑槽311相配合的滑块124c。

所述滑槽311为U形滑槽,所述滑块124c为与U形滑槽相配合的U形滑块。将滑块124c对准滑槽311插入进去,实现将检测组件1整体装配至组装部31上;对所述底板部124施力,将滑块124c从滑槽311内拔出,实现将检测组件1整体从组装部31上拔下。

为方便区分组装板3上所有的检测组件1,所述组装板3上设有与所述组装部31唯一对应的识别区32,即识别区32的数量与组装部31的数量相等,且识别区32与组装部31一一对应。识别区32设有与其唯一对应的文字、数字或图案等。

优选地,所述加热器2还设有存储腔22,以备用于存放检测组件1和组装板3。进一步优选地,所述存储腔22包括可拆卸的存储盖221,以备可操作性地打开或关闭存储腔22,所述存储腔22的顶部敞开,所述存储盖221盖设在存储腔22的顶部。

为方便打开存储盖221,所述存储腔22的侧壁上开设有第二装配口222,所述第二装配口222与存储腔22的敞口贯通,且第一装配口212与第二装配口222相对设置。

所述存储盖221的顶部端面与所述组装板3的顶部端面齐平。

优选地,所述加热器2为水浴加热器,所述加热腔21盛放有用于加热样品管的水。所述加热器2还包括加热模块23,用于对加热腔21内的水进行加热。

进一步优选地,所述加热器2上设有控制面板,所述控制面板与所述加热模块23连接,能够控制加热模块23的温度或功率,方便使用者对水浴温度的控制。

所述检测组件1中各部件、组装板3采用3D打印制成。

实施例二

本实施例公开了一种清真肉类食品检测方法,通过实施例一公开的清真肉类食品检测装置实施,包括如下步骤:

步骤一:将RPA试剂、CRISPR/Cas试剂、running buffer分别装载到不同的毛细管中,并用凡士林封口;

将待检测样品的提取基因组放入样品管内;

步骤二:将步骤一中装载完成的三根毛细管缠绕在固定柱上;

将固定柱盖设于样品管上;

将三根毛细管的末端分别伸入至样品管内;

将插针插入两个穿孔内,试纸板插入插槽内并与插针抵接;

将样品管放入加热腔内;

步骤三:加热器将加热腔加热至37℃,将RPA试剂吹入样品管内,37℃加热10min;然后将CRISPR/Cas试剂吹入样品管内,37℃继续加热20min;而后将running buffer吹入样品管内,最后从所述穿孔内的插针拔出试纸板掉入样品管;

步骤四:通过观察试纸板的显色反应,判断待检测样品中是否掺有猪肉。

所述步骤一中,三根毛细管中分别装有9.5μL的RPA试剂、70μL的CRISPR/Cas试剂、120μL的running buffer试剂,所述三根毛细管的颜色不同,即通过毛细管颜色区分毛细管内试剂的类型。

所述RPA试剂包括5.9μL再悬浮的RPA酶溶液、2.1μL的ddH

所述CRISPR/Cas试剂包括51.2μL的ddH2O、8μL的NEB buffer r2.1、5μL的crRNA(浓度为1μmol/L)、5μL的Cas12a(浓度为1μmol/L)和0.8μL的cut probe(浓度为10μmol/L),其中,crRNA的序列为5'-UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUGGAAGGCAGCUCCCAAAAC-3'(SEQ ID NO:3),cut probe的序列为5'-AGTACCGATAGATACAGAC-3'(SEQ ID NO:4)。

所述running buffer包括4x SSC、1%BSA和0.05%Tween20。

待检测样品的提取基因组是采用使用市售的基因组提取试剂盒提取清真食品的基因组。

所述步骤二中,试纸板上敷设有侧流层析试纸条(LFAs),包括检测线(T线)和质控线(C线),其中,检测线(T线)上喷涂的是链霉亲和素和TCP探针孵育结合后的复合物,TCP探针序列为:5'-CTATCGGTACTATACA-/Biotin/-3'(SEQ ID NO:5),质控线(C线)上喷涂的是链霉亲和素和CCP探针孵育结合后的复合物,CCP探针序列为:5'-/Biotin/-ATACAGAC-3'(SEQID NO:6)。

所述试纸板上的LFAs在使用前,将2.5μL的AuNPs-DNA预先滴到LFAs的结合垫上,该DNA序列为5'-/SH/-TTTTTTTTGTCTGTAT-3'(SEQ ID NO:7)。

所述步骤三中,使用滴管将毛细管内的液体吹入样品管。由于毛细管力,样品管中的混合物沿着LFAs向上迁移。3min后,肉眼观察T线和C线的红色条带,整个检测过程不到35min。

如果清真食品中含有猪肉成分,则试纸条只有一条红线,即T线不显色,C线显红色。如果清真食品中不含猪肉成分,则试纸条显示两条红线,即T线和C线均显红色。经测定,该方法的定性检测线为0.01g/100g(图13),特异性较好(图14)。

与阴性对照组(基因组DNA换成ddH

本发明所述的一种清真肉类食品检测装置及其检测方法具有以下优点:

(1)本发明的3D打印快速检测装置实现了RPA、CRISPR/Cas和LFAs的一体化和连贯操作,即在完成上一步操作后,无需打开样品管的管盖,可直接进行下一步反应,进而避免气溶胶的污染,降低假阳性概率,还实现了检测的便携化。

(2)该装置实现了水槽的电热可控温性能,保证RPA和CRISPR/Cas反应均在37℃恒温下进行。

(3)利用本发明的3D打印快速检测装置进行现场检测时操作简便,不需要额外的大型仪器设备和专业技术人员,裸眼可视检测结果。

(4)该便携式3D打印快速检测装置无需昂贵的模具,可小批量生产,成本低。

(5)本发明的检测方法快速、灵敏度高、特异性好、成本低廉且结果可视化。具体表现为整个检测过程在35min内即可完成,相较于传统方法,大幅度提高了整个过程的检测速度;集成了RPA和CRISPR/Cas的双重信号放大,提高了检测灵敏度;且CRISPR/Cas可为特异性做二次把关,大幅度提高了检测的特异性;利用免抗体标记的LFAs实现了肉类检测结果的低成本、可视化呈现。

(6)在本发明的基础上,通过设计不同的RPA引物和crRNA,利用本发明的检测装置及其检测方法,可以实现对不同肉类的检测。

以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到的变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

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