临床血流感染无乳链球菌的快速检测方法

摘要

本发明公开了临床血流感染无乳链球菌的快速检测方法，涉及医学检验技术领域，本发明包括以下步骤：S1：对临床疑似感染无乳链球菌病人按要求抽取血液注入血培养瓶中；S2：将血培养瓶放置于全自动血培养检测系统培养，待仪器报警提示阳性；S3：取出阳性血培养瓶，抽取血培养瓶中适量培养液涂片，用革兰染色法染色后烘干，用显微镜检查；S4：若在显微镜下观察到革兰阳性球菌，则抽取血培养瓶中的培养液45～55ul，使用B族链球菌胶体金免疫层析法检测试剂检测，检测结果若为阳性，则判为无乳链球菌阳性，提示病人感染无乳链球菌。本发明操作简便、检测效率快。

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，具体是指临床血流感染无乳链球菌的快速检测方法。

背景技术

传统的临床血流感染无乳链球菌(GroupBstreptococcus，GBS)的实验诊断方案是“血培养+转种固体培养基+细菌培养生化鉴定”，其中，转种培养一般需要隔夜，细菌培养生化鉴定一般也需要隔夜，因此，“转种固体培养基+细菌培养生化鉴定”至少需要48小时时间，即第三天才能出检测报告，由于无乳链球菌血流感染的对象主要是围生期孕产妇与新生儿，感染对象一般处于免疫力低下时期，病情进展迅速，需要紧急治疗，但是传统细菌鉴定需耗费至少48小时，显然难以满足临床紧急诊治需求，因此，我们现提出一种临床血流感染无乳链球菌的快速检测方法来解决以上问题。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：临床血流感染无乳链球菌的快速检测方法，包括以下步骤：

S1：对临床疑似感染无乳链球菌病人按要求抽取血液注入血培养瓶中；

S2：将血培养瓶放置于全自动血培养检测系统培养，待仪器报警提示阳性；

S3：取出阳性血培养瓶，抽取血培养瓶中适量培养液涂片，用革兰染色法染色后烘干，用显微镜检查；

S4：若在显微镜下观察到革兰阳性球菌，则抽取血培养瓶中的培养液45～55ul，使用B族链球菌胶体金免疫层析法检测试剂检测，检测结果若为阳性，则判为无乳链球菌阳性，提示病人感染无乳链球菌。

作为改进，所述S1中血培养瓶包括需氧血培养瓶、厌氧血培养瓶和儿童血培养瓶。

作为改进，所述S4中抽取血培养瓶中的培养液50ul。

采用以上结构后，本发明具有如下优点：

一、本发明操作简便，能检测提示阳性血瓶中培养出无乳链球菌，B族链球菌检测试剂(胶体金免疫层析法)具有针对血流感染无乳链球菌(GBS)快速检测的潜力；

二、本发明中胶体金免疫层析法检测需氧培养瓶、厌氧培养瓶、儿童培养瓶培养的GBS，结果均为阳性，检测20例非GBS均为阴性，胶体金免疫层析法检测血瓶中的GBS不受血培养瓶成分影响；

三、本发明中胶体金免疫层析法共检测3例无乳链球菌、20例革兰阳性球菌、2例革兰阴性杆菌、1例革兰阳性杆菌，1例革兰阳性球菌跟革兰阴性杆菌的混合液，结果与全自动细菌培养鉴定仪相符，革兰阳性球菌、革兰阳性杆菌和革兰阴性杆菌，均不能对胶体金免疫层析法检测血培养瓶中的GBS造成干扰；

四、本发明中胶体金免疫层析法在GBS血流感染的快速检测中抗干扰能力好，具备良好的临床应用潜力，而且相对传统的培养生化鉴定方法，胶体金免疫层析法快速检测诊断GBS血流感染可在时间上缩短48小时以上，在操作上简便快捷，能较好地提高临床诊治效率。

附图说明

图1是本发明临床血流感染无乳链球菌的快速检测方法中显微镜下的革兰阳性球菌。

具体实施方式

下面结合附图对本发明进行详细说明。

结合附图1，临床血流感染无乳链球菌的快速检测方法，包括以下步骤：

S1：对临床疑似感染无乳链球菌病人按要求抽取血液注入血培养瓶中，血培养瓶包括需氧血培养瓶、厌氧血培养瓶和儿童血培养瓶；

S2：将血培养瓶放置于全自动血培养检测系统培养，待仪器报警提示阳性；

S3：取出阳性血培养瓶，抽取血培养瓶中适量培养液涂片，用革兰染色法染色后烘干，用显微镜检查；

S4：若在显微镜下观察到革兰阳性球菌，则抽取血培养瓶中的培养液45～55ul，使用B族链球菌胶体金免疫层析法检测试剂检测，检测结果若为阳性，则判为无乳链球菌阳性，提示病人感染无乳链球菌。

实验验证：

2021年2月1日：建立无乳链球菌感染的血瓶模型，并采用快速检测方案，结果为阳性；

2021年2月8日：检测无乳链球菌1例，结果为阳性；

2021年2月15日：检测无乳链球菌1例，结果为阳性；

2021年2月15日：检测肺炎克雷伯杆菌1例，结果为阴性；

2021年2月23日：检测屎肠球菌菌1例，结果为阴性；

2021年2月23日：检测弗劳地枸橼酸杆菌1例，结果为阴性；

2021年2月25日：检测金黄色葡萄球菌1例，结果为阴性；

2021年2月27日：检测金黄色葡萄球菌1例，结果为阴性；

2021年3月2日：检测革兰阳性杆菌1例，结果为阴性；

2021年3月9日：检测粪肠球菌1例，结果为阴性；

2021年3月15日：检测星座链球菌1例，结果为阴性；

2021年3月30日：检测革兰阴性杆菌与革兰阳性球菌混合感染1例，结果为阴性；

2021年12月14日：检测藤黄微球菌1例，结果为阴性；

2022年2月12日：检测金黄色葡萄球菌1例，结果为阴性；

2022年2月28日：检测金黄色葡萄球菌1例，结果为阴性；

2022年3月22日：检测中间葡萄球菌1例，结果为阴性；

2022年3月30日：检测溶血葡萄球菌1例，结果为阴性；

2021年9月15日：检测无乳链球菌1例，结果为阳性；

2022年10月10日：检测溶血葡萄球菌1例，结果为阴性；

2022年10月11日：检测肺炎链球菌1例，结果为阴性；

2022年10月11日：检测华纳葡萄球菌1例，结果为阴性；

2022年10月25日：检测人葡萄球菌1例，结果为阴性；

2022年10月31日：检测溶血葡萄球菌1例，结果为阴性；

2022年11月5日：检测金黄色葡萄球菌1例，结果为阴性；

2022年11月20日：检测金黄色葡萄球菌1例，结果为阴性；

本发明操作简便，能检测提示阳性血培养瓶中培养出无乳链球菌，B族链球菌检测试剂(胶体金免疫层析法)具有针对血流感染无乳链球菌(GBS)进行快速检测的潜力；本发明中胶体金免疫层析法检测厌氧培养瓶、需氧培养瓶、儿童培养瓶培养的GBS，结果均为阳性，检测20例非GBS均为阴性，胶体金免疫层析法检测血培养瓶中的GBS不受血培养瓶成分影响；本发明共检测3例无乳链球菌、20例革兰阳性球菌、2例革兰阴性杆菌、1例革兰阳性杆菌，1例革兰阳性球菌跟革兰阴性杆菌的混合液，结果与全自动细菌培养鉴定仪相符，革兰阳性球菌、革兰阳性杆菌和革兰阴性杆菌，均不能对胶体金免疫层析法的检测血培养瓶中的GBS造成干扰；本发明胶体金免疫层析法在GBS血流感染的快速检测中抗干扰能力好，具备良好的临床应用潜力，而且相对传统的培养生化鉴定方法，胶体金免疫层析法快速检测诊断GBS血流感染可在时间上缩短三天以上，在操作上简便快捷，能较好地提高临床诊治效率。

以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，附图中所示的也只是本发明的实施方式之一，实际的实施例并不局限于此。总而言之，如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的结构方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。