一种Balb/C小鼠腹水澄清处理装置及方法

摘要

本发明公开了一种Balb/C小鼠腹水澄清处理装置及方法，沉降过滤单元包括包括沿着进液方向布置的脱脂棉、滤布、木质纤维滤芯、由硅藻土助滤剂制成的第一过滤层和由湿强树脂制成的第二过滤层；蠕动泵的进液口与沉降过滤单元相连；深层过滤单元包括接料容器和过滤桶，所述过滤桶设于接料容器的容器口处，过滤桶上的进料口与蠕动泵的出液口相连，过滤桶上的出液口与接料容器的内壁面相贴合。本发明同时进行两种过滤装置的有效叠加，既保证了澄清度，又加快了过滤速度，同时也减少了单一使用深层过滤器的成本，提高了工作效率。

说明书

技术领域：

本发明涉及一种Balb/C小鼠腹水澄清处理装置及方法。

背景技术：

在制备单克隆抗体中，将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔，产生腹水，抽取的腹水就是得到的第一步单克隆抗体，需要经过纯化才能得到纯的单抗。腹水中含有大量的油脂，若脂质未去除，会导致柱床堵塞，柱效严重下降。而且若油脂未去除干净，纯化出来的抗体可能会出现沉淀。

目前，在使用腹水进行单抗纯化之前，对腹水进行预处理的目的就是去除细胞和残渣、小颗粒物，以及小鼠腹水中的一些脂肪等物质，采用了进行过滤、离心及试剂吸附等进行单一的澄清处理方式，这些澄清处理方式，在展现一方面优势的同时，另一方面过滤后的液体澄清的不足、离心后存在漂浮物需要进行处理去除才可用于后续实验，以及使用试剂吸附后成本的增加。而拥有一个好的小鼠腹水澄清处理方法，能够使得我们在进行单抗的纯化时，减少或是避免一些问题的出现，在纯化效果上也有些许的帮助。

发明内容：

本发明是为了解决上述现有技术存在的问题而提供一种Balb/C小鼠腹水澄清处理装置及方法。

本发明所采用的技术方案有：

一种Balb/C小鼠腹水澄清处理装置，包括

沉降过滤单元，所述沉降过滤单元包括包括沿着进液方向布置的脱脂棉、滤布、木质纤维滤芯、由硅藻土助滤剂制成的第一过滤层和由湿强树脂制成的第二过滤层；

蠕动泵，所述蠕动泵的进液口与沉降过滤单元相连；

深层过滤单元，所述深层过滤单元包括接料容器和过滤桶，所述过滤桶设于接料容器的容器口处，过滤桶上的进料口与蠕动泵的出液口相连，过滤桶上的出液口与接料容器的内壁面相贴合。

进一步地，所述沉降过滤单元还包括料斗、过滤管、输液管和排卸管，三个过滤管间隔布置，木质纤维滤芯、第一过滤层和第二过滤层分别置于三个过滤管内，在每个过滤管的管壁上设有两个台阶面，且两台阶面分别置于过滤管的两侧，在过滤管的两侧管口处分别螺纹连接两个输液管，其中一侧输液管抵触在过滤管的一侧台阶面上，另外一侧输液管将木质纤维滤芯或第一过滤层或第二过滤层抵触在对应过滤管的另一侧台阶面上，在每个过滤管上连接一根排卸管，三个排卸管对于置于木质纤维滤芯、第一过滤层和第二过滤层的前侧。

进一步地，所述排卸管上设有阀门。

进一步地，所述过滤管采用透明管。

进一步地，所述脱脂棉的厚度为0.5-1cm，滤布为400目筛的滤布，脱脂棉与滤布均折至圆锥形状，并由外至内设置在料斗内。

进一步地，所述蠕动泵的出液口处连接有压力表，压力表的量程为0-0.5MPa。

进一步地，所述过滤桶内设有过滤网，过滤网的孔径为0.04-9µm。

进一步地，所述过滤桶包括桶体和盖体，在桶体内设有用于支撑过滤网的台阶面，盖体与桶体螺纹连接，在盖体上设有进料口和排气阀。

本发明还公开了一种Balb/C小鼠腹水澄清处理方法，

1）取小鼠腹水室温水浴化冻，清洗过滤液体所用到的器材后，搭建沉降过滤单元以及深层过滤单元；

2）剪取与料斗大小相匹配的滤布和脱脂棉，先将滤布折至圆锥形状，放入漏斗里边，将脱脂棉浸湿，挤去多余水分并放置于滤布之上，将化冻好的小鼠腹水，倒入搭建好的沉降过滤单元内，小鼠腹水在自身重力作用下，逐级流过木质纤维滤芯、第一过滤层和第二过滤层进行过滤；

3）按照小鼠腹水的过滤量，调整蠕动泵至适应流速范围内，打开深层过滤单元中的排气阀，通过蠕动泵抽取经过沉降过滤单元过滤后的小鼠腹水至过滤桶内，待过滤桶内充满液体后，关闭排气阀，在蠕动泵的驱动下，小鼠腹水通过过滤网的过滤后，最终贴着接料容器的容器壁流入接料容器内，由此得到澄清的滤液；

4）在观察到过滤管内存在堵塞或者液体流通不畅情况时，打开与对应过滤管相连排卸管上的阀门进行排卸。

本发明具有如下有益效果：

针对背景技术中的过滤后的液体澄清的不足、离心后存在漂浮物需要进行处理去除才可用于后续实验，以及使用试剂吸附后成本的增加，复杂步骤增加。本发明提供了较好的过滤澄清度，不需要添加试剂处理，操作简洁，过滤之后的液体可直接用于后续实验。

与现有方法相较，同时进行两种过滤装置的有效叠加，高纯度木质纤维的交错形成三维结构能提供优秀的截留作用，截留腹水中的微小颗粒物（如细胞碎片），硅藻土助滤剂，也提供了良好的颗粒吸附效果，对于木质纤维未能截留下来的微细物质，起到吸附作用。既保证了澄清度，又加快了过滤速度，同时也减少了单一使用深层过滤器的成本，提高了工作效率；出液口贴壁能够很好的保护小鼠腹水中我们所需的目的蛋白，防止高空坠落造成的损伤，破坏蛋白稳定性。

附图说明：

图 1 为本发明结构图。

图 2 为沉降过滤单元的结构图。

具体实施方式：

下面结合附图对本发明作进一步的说明。

如图1和和2，本发明一种Balb/C小鼠腹水澄清处理装置，包括沉降过滤单元、蠕动泵3和深层过滤单元。

沉降过滤单元包括包括沿着进液方向布置的脱脂棉、滤布、木质纤维滤芯11、由硅藻土助滤剂制成的第一过滤层12和由湿强树脂制成的第二过滤层13，蠕动泵的进液口与沉降过滤单元相连。深层过滤单元包括接料容器21和过滤桶22，过滤桶22设于接料容器21的容器口处，过滤桶22上的进料口211与蠕动泵的出液口相连，过滤桶22上的出液口212与接料容器21的内壁面相贴合。

本发明中的沉降过滤单元还包括料斗14、过滤管15、输液管16和排卸管17，三个过滤管15间隔布置，木质纤维滤芯11、第一过滤层12和第二过滤层13分别置于三个过滤管15内，在每个过滤管15的管壁上设有两个台阶面，且两台阶面分别置于过滤管15的两侧。

在过滤管15的两侧管口处分别螺纹连接两个输液管16，其中过滤管15一侧输液管16抵触在过滤管15的一侧台阶面上，过滤管15另外一侧的输液管16将木质纤维滤芯11或第一过滤层12或第二过滤层13抵触在对应过滤管15的另一侧台阶面上，实现木质纤维滤芯11或第一过滤层12或第二过滤层13在对应过滤管15内的轴向定位。

在每个过滤管15上连接一根排卸管17，三个排卸管17对于置于木质纤维滤芯11、第一过滤层12和第二过滤层13的前侧。在过滤管15内的堵塞物过多时，通过打开排卸管17，将堵塞在过滤管15内的堵塞物排出。

排卸管17上设有阀门18，用于开闭排卸管17。过滤管15采用透明管，方便观察过滤管15内是否存在堵塞的情况，用以方便及时打开阀门18。

本发明中的木质纤维滤芯11中木质纤维的交错形成三维结构能提供优秀的截留作用，截留腹水中的微小颗粒物（如细胞碎片），硅藻土助滤剂，也提供了良好的颗粒吸附效果，对于木质纤维未能截留下来的微细物质，起到吸附作用。

脱脂棉的厚度为0.5-1cm，滤布为400目筛的滤布，脱脂棉与滤布均折至圆锥形状，并由外至内设置在料斗14内。脱脂棉和滤布可以过滤除去腹水中的油脂以及悬浮物。

蠕动泵3的出液口处连接有压力表4，压力表4的量程为0-0.5MPa。在过滤桶22内设有过滤网23，过滤网23的孔径为0.04-9µm。过滤网23可以过滤除去较大颗粒物，以及一些腹水中的胶质。

本发明中的过滤桶22包括桶体和盖体，在桶体内设有用于支撑过滤网23的台阶面，盖体与桶体螺纹连接，在盖体上设有进料口211和排气阀。

本发明的使用方法为：

1）取小鼠腹水室温水浴化冻，清洗过滤液体所用到的器材后，搭建沉降过滤单元以及深层过滤单元。

2）剪取与料斗14大小相匹配的滤布和脱脂棉（所用滤布为400目筛的滤布，脱脂棉厚度约0.5-1cm，按需选择），先将滤布折至圆锥形状，放入漏斗里边，将脱脂棉浸湿，挤去多余水分（无滴水即可），并放置于滤布之上，将化冻好的小鼠腹水，倒入搭建好的沉降过滤单元内，小鼠腹水在自身重力作用下，逐级流过木质纤维滤芯11、第一过滤层12和第二过滤层13进行过滤。

3）按照小鼠腹水的过滤量，调整蠕动泵至适应流速范围内，打开深层过滤单元中的排气阀，通过蠕动泵抽取经过沉降过滤单元过滤后的小鼠腹水至过滤桶22内，液体经过压力表，此时压力表无压力，读数应为零，经过压力表后，液体流入滤桶22内待过滤桶22内充满液体后，关闭排气阀，此时压力表读数为零，在蠕动泵的驱动下，小鼠腹水通过过滤网23的过滤后，最终贴着接料容器21的容器壁流入接料容器21内，由此得到澄清的滤液；随着过滤的进行，当过滤到一定体积之后，由于过滤腹水时，过滤桶中的木质纤维滤芯11、由硅藻土助滤剂制成的第一过滤层12和湿强树脂制成的第二过滤层13会截留微小颗粒物，而微小颗粒物的残留，则会造成过滤通道的减少，从而堵塞过滤桶，从而导致过滤流出液速度降低，压力表读数随之增加，依据压力表压力增加的情况可以判断出过滤桶的过滤情况，在过滤效果降低到一定程度后再去更换新的过滤桶进行过滤，同时观察压力表读数，压力表读数是否在目的蛋白的耐压范围内，如果压力表读数大于目的蛋白耐压范围，则可以选择降低流速，此时压力表读数会随着降低，那么此时还可以进行过滤，否则需要更换新的过滤桶。

4）在观察到过滤管15内存在堵塞或者液体流通不畅情况时，打开与对应过滤管15相连排卸管17上的阀门18进行排卸。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下还可以作出若干改进，这些改进也应视为本发明的保护范围。