肺炎支原体感染对BALB/c小鼠和哮喘BALB/c小鼠肺组织CysLTs及其受体表达的研究

摘要

目的：
　　肺炎支原体是人呼吸道感染中重要的病原微生物之一，流行病学及一些临床研究提示，肺炎支原体感染同哮喘的发作关系密切。肺炎支原体感染可以诱发哮喘发作或使得慢性哮喘持续存在。哮喘的发作同多种因素有关，例如接触致敏原、吸入冷空气、呼吸道感染等。其中呼吸道感染同哮喘的发作关系极为密切。白三烯介导的气道慢性炎症是哮喘发病中重要机制，与哮喘的发生和发展有密切的关系。一些临床研究表明，肺炎支原体肺炎患儿血、尿中白三烯水平明显升高，但是相关的基础研究较少。本实验通过对正常小鼠和哮喘小鼠感染肺炎支原体后，肺组织中白三烯及其受体表达的变化，探讨肺炎支原体感染是否可通过白三烯途径参与哮喘的发病机制，为肺炎支原体感染与哮喘发病的关系奠定理论依据。
　　方法：
　　144只SPF级BALB/c小鼠，雌雄各半，随机分为正常对照组、肺炎支原体感染组、哮喘组、哮喘后接种肺炎支原体组。用培育好的肺炎支原体鼻腔接种小鼠，建立肺炎支原体感染小鼠模型;卵蛋白腹腔注射并4％卵蛋白雾化激发，建立小鼠急性哮喘模型;正常对照组以磷酸盐缓冲溶液(PBS)代替肺炎支原体及卵蛋白的雾化和激发。分别于模型制作完成后第3、7、14、21、30天取材。对各组小鼠肺组织石蜡包埋切片后行HE染色观察病例变化;ELISA法检测各组支气管肺泡灌洗液中CysLTs的含量;免疫组化及Western-blot法检测各组小鼠肺组织CysLTs-R蛋白表达的情况。
　　结果：
　　1、病理学改变:哮喘组炎症反应最明显，出现大量炎症细胞浸润，肺间隔增宽;肺炎支原体(MP)感染组于第7天和14天炎症反应最明显。2、肺组织CysLTs-R蛋白的表达:CysLTs-R主要表达在各级支气管（细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气管）上皮细胞中表达;于光镜下观察可看到肺炎支原体感染组、哮喘(OVA)组及哮喘后支原体感染(OVA-MP)组CysLTs-R含量的的表达明显高于正常对照组;其中OVA+MP组的表达高于OVA组。3、ELISA检测小鼠BALF中CysLTs含量:MP感染组BALB/c小鼠BALF中CysLTs含量较正常对照组明显增高，P＜0.05，差异有统计学意义，其中小鼠感染MP后CysLTs含量在第7、14天达到高峰，P＜0.05，差异有统计学意义;OVA+MP组较OVA组小鼠BALF中CysLTs水平明显增高，P＜0.05，差异有统计学意义。4、Western-blot法检测小鼠肺组织CysLTs-R的表达:MP感染组的CysLTs-R均较正常对照组表达强度增加，P＜0.05，差异有统计学意义;CysLTs-R蛋白在OVA+MP组较OVA+PBS组的表达强度明显增强，P＜0.05，差异有统计学意义。
　　结论：
　　CysLTs及其受体在肺炎支原体感染小鼠肺泡灌洗液、肺组织中的表达增高。肺炎支原体感染可以增加正常BALB/c小鼠及已哮喘小鼠CysLTs-R蛋白的表达。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

实验材料与方法

实验结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 白三烯及其受体的种类和白三烯在支气管哮喘发病中的作用

在学期间科研成绩

致谢

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