一种有效抑制IL-8、TNF-α和IL-6的皮肤抗炎组合物

摘要

本发明提供了一种有效抑制IL‑8、TNF‑α和IL‑6的皮肤抗炎组合物，包括棕榈酰四肽‑7、棕榈酰五肽‑4和精氨酸/赖氨酸多肽，能同时高效抑制炎症因子IL‑8、TNF‑α和IL‑6的分泌，使复配组合物达到抗菌消炎、温和抗敏、修复受损细胞，并能有效祛痘的效果，用于制备化妆品、药品或保健品，能提高细胞的自我修复能力，抵抗外界空气污染，并起到舒缓祛痘的功效，从而实现长期肤质改善，稳定性更好，溶解性更强、保质期更长，更绿色安全、无刺激且无须防腐剂。

说明书

本申请要求申请号为2021105342058，申请日为2021年5月17日，发明创造名称为“一种有效抑制IL-8、TNF-α和IL-6的皮肤抗炎组合物”的优先权。

技术领域

本发明涉及护肤品技术领域，具体涉及一种皮肤抗炎组合物，尤其涉及一种能有效抑制IL-8、TNF-α和IL-6，并具有祛痘功效的皮肤抗炎组合物。

背景技术

随着人类社会发展、环境污染、生活压力激增等因素影响，都市人员的皮肤问题开始日渐暴露，暗沉、色斑、痤疮、粉刺、敏感等等，因此美容护肤越来越受人们的重视，除了追求卓越的功效，安全性和稳定性也是人们关注的重点。

空气中的颗粒物对皮肤的伤害很大，不仅会堵塞毛孔，使皮肤变得暗沉粗糙，还会刺激皮肤，导致皮肤敏感、泛红、干燥等不适，出现皮肤瘙痒、皮肤过敏等症状。空气污染和紫外线被认为是造成皮肤污染和头发污染的主要因素之一。全球超过80％的消费者认为皮肤会吸收空气中的污染物。

针对空气污染及痤疮等引发的皮肤问题，众多炎症细胞因子是引发问题的根源。在众多炎症细胞因子中，起主要作用的是TNF-α、IL-8、IL-1β、IL-6等，其中与保护肌肤关系抗菌消炎最密切的主要有TNF-α和IL-8，与祛痘相关的是IL-6。

TNF-α(肿瘤坏死因子)是炎症反应过程中出现最早、最重要的炎性介质，能激活中性粒细胞和淋巴细胞，使血管内皮细胞通透性增加，调节其他组织代谢活性并促使其他细胞因子的合成和释放。

IL-8能刺激中性粒细胞、T淋巴细胞和嗜酸性粒细胞的趋化，促进中性粒细胞脱颗粒，释放弹性蛋白酶，损伤内皮细胞，使微循环血流淤滞，组织坏死，造成器官功能损伤。

在皮脂腺细胞中，雄激素在5а-还原酶的作用下可以转化为活性更强的二氢睾酮(DHT)，进一步刺激炎症因子IL-6的高表达，从而增强了诱发痤疮的能力。因此，抑制炎症因子IL-6 还可抑制痤疮，达到治疗痤疮的效果。

但是现有的能够有效抑制炎症因子，并能有效祛痘的产品，普遍存在要么效果好但不够温和安全，要么较温和但效果不尽如人意。

因此，寻找一种更加安全、温和，且可以抑制多种炎症因子，并能有效祛痘的皮肤抗炎组合物迫在眉睫。

发明内容

针对以上问题，本发明提供一种皮肤抗炎组合物，包括棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4 和精氨酸/赖氨酸多肽，能同时高效抑制炎症因子IL-8、TNF-α和IL-6的表达，使复配组合物达到抗菌消炎，温和抗敏，修复受损细胞，并能有效祛痘的效果，用于制备的化妆品或药品、保健品等，能提高细胞的自我修复能力，抵抗外界空气污染，并起到舒缓祛痘的功效，从而实现长期肤质改善，更绿色安全、无刺激、稳定且无须防腐剂。

一方面，本发明提供了一种皮肤抗炎组合物，主要包括三种成分，其中第一种成分为棕榈酰四肽-7，第二种成分为棕榈酰五肽-4，第三种成分为精氨酸/赖氨酸多肽。

棕榈酰四肽-7(Palmitoyl Tetrapeptide-7)，分子式：C

棕榈酰五肽-4(Palmitoyl Pentapeptide-4)，分子式是C

精氨酸/赖氨酸多肽(Arginine/lysine Polypeptide)，CAS号：31014-78-5，是一种富含精氨酸和赖氨酸的聚合多肽(L-Arginine,polymer with L-lysine)，与皮肤的相容性佳，不易过敏，具有较好的防老、抗皱效果，对皮肤、眼睛有很低的刺激性，具有优良的乳化、抗静电、分散、去污能力。

发明人经过大量研究发现，棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽三种成分复配时，在温和抗炎方面有明显的协同增效作用，能大幅提升抑制炎症因子IL-8、TNF-α和IL-6分泌的能力，同时还具有较好的祛痘效果，并且抗炎效果温和无刺激，绿色安全，且稳定性非常好，溶解性更好，且无需防腐剂，能用于长期的肤质改善。

进一步地，所述三种成分的体积比为：棕榈酰四肽-7∶棕榈酰五肽-4∶精氨酸/赖氨酸多肽＝1～10％∶1～10％∶0.5～10％。

研究证明，当棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽三种成分处于一定比例范围时，具有更好的协同增效作用。

另一方面，本发明提供了一种组合物在制备抑制炎症因子分泌的制剂上的用途，所述抗炎护肤品组合物包括三种成分，其中第一种成分为棕榈酰四肽-7，第二种成分为棕榈酰五肽-4，第三种成分为精氨酸/赖氨酸多肽。

进一步地，所述炎症因子包括IL-8、IL-6和TNF-α。

进一步地，所述三种成分的体积比为：棕榈酰四肽-7∶棕榈酰五肽-4∶精氨酸/赖氨酸多肽＝1～10％∶1～10％∶0.5～10％。

在一些方式中，所述制剂包括护肤品、药品或保健品。

再一方面，本发明提供了一种组合物在制备抑制IL-8、IL-6或TNF-α中的一种或多种的制剂上的用途。

进一步地，所述三种成分的体积比为：棕榈酰四肽-7∶棕榈酰五肽-4∶精氨酸/赖氨酸多肽＝1～10％∶1～10％∶0.5～10％。

再一方面，本发明提供了一种组合物在制备祛痘制剂上的用途，所述抗炎护肤品组合物包括三种成分，其中第一种成分为棕榈酰四肽-7，第二种成分为棕榈酰五肽-4，第三种成分为精氨酸/赖氨酸多肽。

进一步地，所述皮肤抗炎组合物通过抑制炎症因子IL-8、IL-6和TNF-α的分泌实现祛痘的效果。

进一步地，所述三种成分的体积比为：棕榈酰四肽-7∶棕榈酰五肽-4∶精氨酸/赖氨酸多肽＝1～10％∶1～10％∶0.5～10％。

在一些方式中，所述制剂包括护肤品、药品或保健品。

在一些方式中，本发明提供的包括棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽的抗炎护肤品组合物制备的护肤品、药品或保健品，在不损本发明效果的范围内，可以根据需要而适宜配合在化妆品、准药品领域中通常配合的各种成分，例如粉末成分、保湿剂、增稠剂、金属离子掩蔽剂、色素、pH调节剂、皮肤营养剂、维生素、防腐剂、抗氧化剂、抗氧化助剂、香料等。

本发明提供了一种皮肤抗炎组合物，其有益效果为：

1、能同时有效抑制炎症因子IL-8、TNF-α和IL-6的分泌，并且具有明显的协同增效的作用；

2、能提高细胞的自我修复能力，抵抗外界空气污染，并起到舒缓祛痘的功效，从而实现长期肤质改善；

3、稳定性更好，保质期更长；

4、溶解性增强，无需添加增溶剂；

5、更绿色安全、无刺激且无须防腐剂。

附图说明

图1为实施例2中的棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽及其组合在抑制炎症因子IL-6方面的作用示意图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细描述，需要指出的是，以下所述实施例旨在便于对本发明的理解，而对其不起任何限定作用。

实施例1不同组合物对空气污染引起的IL-8和TNF-α的防护能力

接种：按1E4个/孔的接种密度接种正常人表皮角质形成细胞至96孔板中，培养箱(37℃、 5％CO2、95％RH)中孵育过夜。

配液：按照实验设计(见表1)配置受试物工作液。

采用的棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽都是98％纯的粉末，经配制成溶液后再进行实验，其中具体配比为：

棕榈酰四肽-7溶液：100ppm＝100mg/L的质量浓度+10-20％甘油+1-5％吐温+0.5-1％防腐剂(苯氧乙醇)+74-88.5％水；

棕榈酰五肽-4溶液：50ppm＝50mg/L的质量浓度+10-20％甘油+1-5％吐温+0.5-5％防腐剂 (苯氧乙醇)+74-88.5％水；

精氨酸/赖氨酸多肽溶液：1000ppm＝1000mg/L的质量浓度+1-5％己二醇+95-99％水。

空气粉尘刺激：根据表1实验具体设计，待96孔板中细胞铺板率达到40％～50％时，按照体积比添加相应的药物溶液，进行分组刺激，0.1mg/mL空气粉尘量被添加到每个孔中 (空白对照孔不添加空气粉尘)，每组设3个复孔。培养箱(37℃、5％CO2、95％RH)中继续培养。

收集细胞上清：培养24h后，收集细胞培养上清液于EP管中，收集完后置于-80℃冰箱冷冻保存。

通过ELISA检测分析各样品组对IL-8和TNF-α的影响情况，各样品组对IL-8和TNF-α的抑制情况见表1。

表1、不同活性物质组合抑制空气污染引起的角质形成细胞中炎症因子IL-8和TNF-α的分泌

由表1可知，单独1％棕榈酰四肽-7对IL-8的抑制率只有9.21％，对于TNF-α的抑制率达到11.91％；单独3％棕榈酰五肽-4对TNF-α几乎没有抑制，对于IL-8的抑制率只能达到5.82％；即使将棕榈酰四肽-7含量提高到3％，将棕榈酰五肽-4的含量提高到5％，对 IL-8和TNF-α的抑制率依然没有明显提升。而单独5％精氨酸/赖氨酸多肽对IL-8和TNF-α的抑制率虽然较棕榈酰四肽-7和棕榈酰五肽-4高，但也仅在25％左右。

当采用1％棕榈酰四肽-7和3％棕榈酰五肽-4进行复配时，对IL-8和TNF-α的抑制率仅有微小提升，但效果依然不理想；同样，采用1％棕榈酰四肽-7或3％棕榈酰五肽-4分别与5％精氨酸/赖氨酸多肽复配，对IL-8和TNF-α的抑制率都有了一定的提升，但依然难以达到理想的抑制IL-8和TNF-α表达的效果。

而当采用1％棕榈酰四肽-7、3％棕榈酰五肽-4和5％赖氨酸/精氨酸多肽三者共同进行复配时，对IL-8和TNF-α都起到了非常好的抑制作用，对IL-8和TNF-α的抑制率都达到接近80％，效果非常显著。说明棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽三种组分在对炎症因子IL-8和TNF-α的抑制作用上具有明显的协同作用。

不过棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和赖氨酸/精氨酸多肽三者之间的比例关系，对于抑制IL-8和TNF-α分泌的效果也有一定影响，当采用3％棕榈酰四肽-7、5％棕榈酰五肽-4和5％精氨酸/赖氨酸多肽时，对于抑制炎症因子IL-8和TNF-α的效果进一步上升，分别达到99.18％和97.34％。

实施例2棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽在抑制炎症因子IL-6方面的协同增效作用

痤疮是一种多因素导致的疾病，局部雄激素代谢异常是其最主要的病因之一，雄激素过多可导致皮脂腺体积增大和皮脂分泌增多，毛囊皮脂腺导管角化异常，致皮脂排泄不畅，形成脂栓，引发痤疮。在皮脂腺细胞中，雄激素在5а-还原酶的作用下可以转化为活性更强的二氢睾酮(DHT)，进一步刺激炎症因子IL-6的高表达，从而增强了诱发痤疮的能力。因此，抑制炎症因子IL-6可抑制痤疮，达到治疗痤疮的效果。

本实施例分别采用单一成分和组合物对炎症因子IL-6的抑制情况进行比较。

主要实验过程为：Raw264.7小鼠巨噬细胞株在37℃，含5％CO2，利用10％FBS的DMEM培养基正常培养。细胞长到90％密度的时候，将其按照8x10

由图1可见，经过LPS处理后Raw264.7细胞对炎症因子IL-6的分泌明显上调，在阳性对照地塞米松处理后，IL-6的量被抑制。棕榈酰五肽-4对炎症因子IL-6无显著抑制作用，棕榈酰四肽-7对炎症因子IL-6具有较低的抑制作用，但低于阳性对照地塞米松；棕榈酰四肽-7和棕榈酰五肽-4复配对炎症因子IL-6的抑制作用与单独使用棕榈酰四肽-7无明显差异，但仍低于阳性对照地塞米松；精氨酸/赖氨酸多肽对炎症因子IL-6有明显抑制作用；棕榈酰四肽-7或棕榈酰五肽-4，与精氨酸/赖氨酸多肽两者复配时，对炎症因子IL-6的抑制作用较单独使用精氨酸/赖氨酸多肽效果仍然无明显差异；但棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽 -4和精氨酸/赖氨酸多肽三者复配而成的组合物的抑制率显著高于单独使用精氨酸/赖氨酸多肽效果，且显著强于阳性对照地塞米松(P<0.01)，说明棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4 和精氨酸/赖氨酸多肽三种组分在对炎症因子IL-6的抑制作用上具有明显的协同作用。

实施例3棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽组合物的长期放置稳定性研究

本实施例按照表2所示配制不同样品溶液，进行长期放置稳定性研究，稳定性测试是指放入48℃恒温箱中3个月，观察样品溶液是否出现浑浊、变质等异常现象，并比较经稳定性考察的样品溶液与新配制样品溶液是否有区别。由于棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽三者中，精氨酸/赖氨酸多肽有时并不稳定，因此通过检测样品溶液中精氨酸/赖氨酸多肽的含量来评估样品溶液与新配制样品溶液是否有区别，其中精氨酸/赖氨酸多肽的检测方法为：HPLC峰面积积分；同时考察样品溶液的保质期。检测结果如表2 所示。

表2、不同活性物质的长期放置稳定性研究

由表2可见，单独精氨酸/赖氨酸多肽溶液的稳定性不高，经长期高温储存后，含量出现明显下降，存在11.3％的偏差，而且保质期也较短，仅为12个月；而当采用棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽三者组合后，可以明显提高精氨酸/赖氨酸多肽的稳定性，经长期高温储存后，精氨酸/赖氨酸多肽的含量始终保持稳定，保质期延长至36 个月以上，可见采用本发明提供的组合物，可以明显提高稳定性，方便长期储存和运输。

实施例4棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽组合物的抑菌增效研究

本实施例分别按照表3配制水溶液，并复配入各种防腐方案，每隔7、14、21、42天取样镜检，对比其抑菌性能。

表3、不同活性物质的抑菌增效研究

由表3可以看出，单独棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽以及棕榈酰四肽-7与棕榈酰五肽-4连用的抑菌性能都不好，需要添加防腐剂帮助抑菌；精氨酸/赖氨酸多肽与防腐剂复合后，在两周后对细菌有轻微的抑菌增效性能；而棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽三者复配后，能够使抑菌性能显著增强，无需再添加任何防腐剂，使用更加安全环保。

实施例5棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4和精氨酸/赖氨酸多肽组合物的祛痘效果。

本实施例分别采用如表5所述的10组样品溶液进行祛痘功效测试，招募并筛选300名健康、有痘痘的志愿者随机分为10个组，每组30人，分别对10组样品进行测试。志愿者年龄主要集中在18-30岁，77％志愿者长痘量在5颗以上/月。受试部位前2-3天不能使用任何化妆品或外用药品。实验前，志愿者需要清洁面部。实验中，每组志愿者，每天早晚涂抹对应样品2次，每次分别按1mg/cm

表4、人体皮肤祛痘功效问卷调研结果

由表4可见，样品组10的祛痘效果最好，样品组9次之，且样品组9和10都明显好于样品组1～8，故优选样品组10为最佳组合方式。

虽然本发明披露如上，但本发明并非限定于此。任何本领域技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，均可作各种更动与修改，因此本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。