用于使用模板转换反应进行cDNA合成和单细胞转录组概况分析的方法和组合物

摘要

本申请披露了用于以改善的逆转录、模板转换以及预扩增合成cDNA以增加由个体细胞产生的cDNA文库的收率和平均长度的方法。这些新方法包括将TSO 3'端的单个核苷酸残基换成锁核酸(INA)、使用甲基基团供体、和/或高于常规所用的MgCb浓度。结合这些差异的单细胞转录组分析具有全长覆盖度、改善的灵敏度和准确度，具有较少偏差并且更易进行成本有效的自动化。本发明还提供了在3'端包含锁核酸的cDNA分子、包含这些cDNA分子的组合物和cDNA文库，以及用于单细胞转录组概况分析的方法。