一种以MxA作为标志物进行重症病毒性肺炎相关疾病的诊断的用途

摘要

本发明公开了MxA或其结合抗体或片段在制备预警个体重症病毒性肺炎的诊断试剂中的用途，所述诊断个体属于重症病毒性肺炎的诊断试剂盒中含有诊断试剂，诊断试剂包含有MxA或其结合抗体或片段，并通过MxA或其结合抗体或片段来与个体的血液、血浆或血清的样品相比较进行检测。被发明中，MxA结合抗体或其片段从肺炎人群中甄别出重症病毒性肺炎的灵敏度和特异性为85％和89.1％，以MxA作为生物标志物用于重症病毒性肺炎的诊断，其诊断检出效果是非常突出的。

说明书

技术领域

本发明属于生物诊断制品技术领域，尤其是一种以MxA或其结合抗体或片段在制备预警个体重症病毒性肺炎的诊断试剂中的用途。

背景技术

病毒性肺炎是儿童社区获得性肺炎常见疾病之一，也是最严重的类型之一，多发生于6个月~5岁的婴幼儿。常见的呼吸道病毒包括呼吸道合胞病毒、流感病毒、腺病毒、副流感病毒和鼻病毒等。新发病毒有人类偏肺病毒、博卡病毒、新型冠状病毒、人禽流感病毒等。重症病毒性肺炎临床表现为反复高热不退、全身中毒症状重、精神萎靡或烦躁、气促、口唇发绀甚至呼吸衰竭等，其病程长、治疗难度大、病情进展快，病死率可高达10％，存活者中14％～60％可遗留不同程度的后遗症，如闭塞性细支气管炎（BO）等，是目前造成婴幼儿肺炎死亡和致残的重要原因之一。迄今，重症病毒性肺炎的发病机制仍不明确，认为可能与病毒性本身以及诱发机体的炎症反应相关，免疫系统的激活和细胞因子或炎性介质的大量释放起至关重要的作用。

病毒感染过程中会发生分泌Ⅰ型干扰素(IFNs)的细胞反应。Ⅰ型IFNs参与天然免疫反应，具有免疫调节、抗细胞增殖和抗病毒的作用。尽管有时被用作病毒的生物学标志物，但Ⅰ型IFNs在体液中的半衰期较短，没有显示出良好的诊断效能。Ⅰ型IFNs的抗病毒活性多来自一些蛋白质，通过产生黏病毒耐药蛋白A(MxA)进行介导。MxA在流感病毒感染中首次描述为抗病毒蛋白，随后发现其对多种RNA病毒及一些DNA病毒均具有广谱的抗病毒活性。

为此，我们提出一种以MxA或其结合抗体或片段在制备预警个体重症病毒性肺炎的诊断试剂中的用途。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以MxA或其结合抗体或片段在制备预警个体重症病毒性肺炎的诊断试剂中的用途，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种以MxA或其结合抗体或片段在制备预警个体重症病毒性肺炎的诊断试剂中的用途，包括如下：

MxA或其结合抗体或片段在制备预警重症病毒性肺炎诊断试剂中的用途，所述诊断试剂通过检测个体样品中的MxA含量，来预警个体是否处于发展为重症病毒性肺炎的风险中。

MxA或其结合抗体或片段在制备预警个体重症病毒性肺炎的诊断试剂中的用途，所述诊断试剂通过检测个体样品中的MXA的含量，并与正常水平相比较，来诊断病毒性肺炎。

MxA或其结合抗体或片段在制备预警个体重症病毒性肺炎的诊断试剂中的用途，所述诊断试剂通过检测个体样品中的MxA含量，来预警个体是否处于发展为重症病毒性肺炎的风险中。

MxA或其结合抗体或片段在制备预警个体重症病毒性肺炎的诊断试剂中的用途，所述诊断试剂通过检测个体样品中的MxA的含量，并与正常水平相比较，来诊断病毒性肺炎。

一种以MxA作为标志物进行重症病毒性肺炎相关疾病的诊断产品，包括如下：

一种甄别个体属于非重症病毒性肺炎还是重症病毒性肺炎诊断产品，该诊断产品中含有诊断试剂，诊断试剂包含有MxA的结合抗体或结合抗体片段，并通过该结合抗体或结合抗体片段来与个体样品中的MxA相结合，进而检测样品中的MxA含量进行诊断。

一种判断个体是否患有病毒性肺炎的诊断产品，该诊断产品中含有诊断试剂，诊断试剂包含有MxA的结合抗体或结合抗体片段，并通过该结合抗体或结合抗体片段来与个体样品中的MxA相结合，进而检测样品中的MxA含量进行诊断。

再进一步的实施例中，所述诊断试剂通过其结构和/或组分组成，可采用任意方法检测MxA的含量，包括但不限制于电泳法、免疫荧光法、直接竞争法、间接竞争法、ELISA法、RIA法、流式细胞仪法或免疫层析法等方法。

MxA在重症病毒性肺炎相关疾病的诊断方案，包括如下：

一种诊断个体是否患有病毒性肺炎的方法，所述方法包括使用诊断试剂检测个体样品中MxA含量的步骤，检测后进一步与正常水平相互比较，来进一步确定个体是否患有病毒性肺炎。

一种诊断个体区分属于非重症病毒性肺炎和重症病毒性肺炎的方法，所述方法包括使用诊断试剂检测个体样品中MxA含量的步骤，来进一步区分个体属于非重症病毒性肺炎和重症病毒性肺炎。

再进一步的实施例中，所述诊断试剂通过其结构和/或组分组成，可采用任意方法检测MxA的含量，包括但不限制于电泳法、免疫荧光法、直接竞争法、间接竞争法、ELISA法、RIA法、流式细胞仪法或免疫层析法等方法。

再进一步的实施例中，所述个体的样品为取自所述个体的全血、血浆或血清的一种或多种。

再进一步的实施例中，所述所述正常水平可以参照未患有病毒感染的MxA含量水平，比如正常人的MxA含量水平。在本发明中，正常水平可以以MxA含量是否大于20ng/mL为界限实施。

再进一步的实施例中，所述诊断试剂中设置有MxA的警戒线标识标记，所述警戒线标识标记用于给使用者比对参考样品中的MxA含量是否超出了正常人水平；所述警戒线标识标记优选包含对应于样品MxA含量为18～25ng/mL时的检测结果；所述警戒线标识标记最优选的包含MxA含量为20ng/mL时的检测结果。

再进一步的实施例中，所述诊断试剂中设置有MxA的警戒线标识标记，所述警戒线标识标记用于给使用者比对参考样品中的MxA含量是否超出了设定水平；所述警戒线标识标记优选包含对应于样品MxA含量为90～110ng/mL时的检测结果；所述警戒线标识标记最优选的包含MxA含量为100ng/mL时的检测结果。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：MxA检测从肺炎人群中甄别出非重症的灵敏度和特异性为89.1％和85％，且从肺炎人群中甄别出重症的灵敏度和特异性为85％和89.1％，以MxA作为生物标志物用于病毒性肺炎的诊断、非重症病毒性肺炎和重症病毒性肺炎的甄别，其诊断检出效果是非常突出的。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明的技术构思是将MxA作为生物标志物，以开发预警重症病毒性肺炎的诊断方案、诊断产品和用途。

实施例1，本发明首先提供了MxA在预警重症病毒性肺炎诊断试剂备中的相关用途，包括如下：

MxA或其结合抗体或片段在制备预警重症病毒性肺炎诊断试剂中的用途，所述诊断试剂通过检测个体样品中的MxA含量，来预警个体是否处于发展为重症病毒性肺炎的风险中。

MxA或其结合抗体或片段在制备病毒性肺炎诊断试剂中的用途，所述诊断试剂通过检测个体样品中的MxA的含量，并与正常水平相比较，来诊断病毒性肺炎。

MxA作为生物标志物在预警重症病毒性肺炎诊断试剂中的用途，所述诊断试剂通过检测个体样品中的MxA含量，来预警个体是否处于发展为重症病毒性肺炎的风险中。

MxA作为生物标志物在制备病毒性肺炎诊断试剂中的用途，所述诊断试剂通过检测个体样品中的MxA的含量，并与正常水平相比较，来诊断病毒性肺炎。

实施例2，本发明其次还进一步直接提供了MxA在重症病毒性肺炎相关疾病的诊断方案，包括如下：

一种诊断个体是否患有病毒性肺炎的方法，所述方法包括使用诊断试剂检测个体样品中MxA含量的步骤，检测后进一步与正常水平相互比较，来进一步确定个体是否患有病毒性肺炎。

一种诊断个体区分属于非重症病毒性肺炎和重症病毒性肺炎的方法，所述方法包括使用诊断试剂检测个体样品中MxA含量的步骤，来进一步区分个体属于非重症病毒性肺炎和重症病毒性肺炎。

实施例3，本发明第三方面还提供了以MxA为生物标志物的诊断产品，包括如下：

一种甄别个体属于非重症病毒性肺炎还是重症病毒性肺炎诊断产品，该诊断产品中含有诊断试剂，诊断试剂包含有MxA的结合抗体或结合抗体片段，并通过该结合抗体或结合抗体片段来与个体样品中的MxA相结合，进而检测样品中的MxA含量进行诊断。

一种判断个体是否患有病毒性肺炎的诊断产品，该诊断产品中含有诊断试剂，诊断试剂包含有MxA的结合抗体或结合抗体片段，并通过该结合抗体或结合抗体片段来与个体样品中的MxA相结合，进而检测样品中的MxA含量进行诊断。

根据本发明具体实施情况以及结合本领域知识，以上本发明所提供的用途、诊断方法或诊断产品中：所提及的诊断试剂通过其结构和/或组分组成，可采用任意方法检测MxA的含量，包括但不限制于电泳法、免疫荧光法、直接竞争法、间接竞争法、ELISA法、RIA法、流式细胞仪法或免疫层析法等方法。

根据本发明具体实施情况以及结合本领域知识，以上本发明所提供的用途、诊断方法或诊断产品中：所提及的个体的样品为取自所述个体的全血、血浆或血清。

根据本发明具体实施情况以及结合本领域知识，以上本发明所提供的用途、诊断方法或诊断产品中：所述正常水平可以参照未患有病毒感染的MxA含量水平，比如正常人的MxA含量水平。在本发明中，正常水平可以以MxA含量是否大于20ng/mL为界限实施。

根据本发明具体实施情况以及结合本领域知识，以上本发明所提供的用途、诊断方法或诊断产品中：预警个体是否处于发展为重症病毒性肺炎的风险中，样品中MxA含量是否大于100ng/mL。

根据本发明具体实施情况以及结合本领域知识，以上本发明所提供的用途、诊断方法或诊断产品中：所述诊断试剂中设置有MxA的警戒线标识标记，所述警戒线标识标记用于给使用者比对参考样品中的MxA含量是否超出了正常人水平；所述警戒线标识标记优选包含对应于样品MxA含量为18～25ng/mL时的检测结果；所述警戒线标识标记最优选的包含MxA含量为20ng/mL时的检测结果。

根据本发明具体实施情况以及结合本领域知识，以上本发明所提供的用途、诊断方法或诊断产品中：预警个体是否处于发展为重症病毒性肺炎的风险中,所述诊断试剂中设置有MxA的警戒线标识标记，所述警戒线标识标记用于给使用者比对参考样品中的MxA含量是否超出了设定水平；所述警戒线标识标记优选包含对应于样品MxA含量为90～110ng/mL时的检测结果；所述警戒线标识标记最优选的包含MxA含量为100ng/mL时的检测结果。

临床验证

未列出的临床实验具体手段参考国家相关标准和行业通常做法，此处不再赘述。

一、试验以MxA检测试剂盒作为研究验证测试对象。

MxA检测试剂盒检测试剂盒可通过本发明的申请人在先申请的申请号为CN113866428A的中国发明专利中所记载的方法予以制备。

二、试验参与对象选取重庆医科大学附属儿童医院的57例病毒性肺炎病例及10例外科斜疝手术对照病例进行验证研究。病毒性肺炎诊断标准符合《诸福棠实用儿科学》，重症病毒性肺炎诊断标准符合中华医学会儿科学分会呼吸学组制定的《儿童社区获得性肺炎管理指南（2013修订）》

三、试验方法：

1. MxA检测试剂盒分别检测67例病人：以MxA含量20ng/mL为病毒性肺炎诊断阈值。以MxA含量100ng/mL为重症病毒性肺炎诊断阈值。若检测结果显示个体样品中MxA含量大于20ng/mL，不大于100 ng/mL，则标记为病毒性肺炎。若检测结果显示个体样品中MxA含量大于100ng/mL，则标记为重症病毒性肺炎。若MxA含量不大于20ng/mL，则标记为正常。

2.以常规手段确诊57例病人：以多种临床常规手段对57例病人病情情况进行确诊，确定其真实病情。

3.比较对比MxA检测试剂盒诊断标记结果与常规手段确诊结果差异，统计检测灵敏度和特异性。

四、试验结果：

按照前述试验方法，试验验证结果如下表1和表2所示：

表1重庆医科大学附属儿童医院67例试验结果

五、结果统计

以表1结果统计各情况下的特异性和灵敏性。

统计表1数据：

①MxA检测从所有人群中进行病毒性肺炎感染诊断的灵敏度和特异性，警戒值MxA含量为20ng/mL时的检测结果

灵敏度：入院常规确诊全身感染57例，其中MxA检测正确检出57例，灵敏度100％；

特异性：入院常规确诊非病毒感染10例，其中MxA检测正确检出非病毒感染10例，灵敏度100％；

②MxA检测甄别非重症病毒性肺炎和重症病毒性肺炎的灵敏度和特异性，警戒值MxA含量为100ng/mL时的检测结果

1）

入院常规确诊非重症病毒性肺炎37例，其中MxA检测正确检出33例；

入院常规确诊重症病毒性肺炎20例，其中MxA检测正确17例；

也即，MxA检测从肺炎人群中甄别出非重症的灵敏度和特异性为89.1％和85％，且从肺炎人群中甄别出重症的灵敏度和特异性为85％和89.1％。

由此可见，以MxA作为生物标志物用于病毒性肺炎的诊断、非重症病毒性肺炎和重症病毒性肺炎的甄别，其诊断检出效果是非常突出的。

此外，为了便于临床使用，可以进一步在MxA检检测试剂盒上设计MxA的病毒性肺炎、或者非重症病毒性肺炎和重症病毒性肺炎的警戒线标识标记，所述警戒线标识标记例如可以是对应于样品MxA含量为20ng/mL时的检测结果样式和样品MxA含量为100ng/mL时的检测结果样式。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何标记视为限制所涉及的权利要求。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。