一种用于刑侦的通过分析植物残存综合特征判断其离体时间的方法

摘要

本发明涉及一种用于刑侦的通过分析植物残存综合特征判断其离体时间的方法，具体涉及离体植物材料中可溶性蛋白质或水分的变化在判断植物材料离体时间中的应用，主要方法为以相应的植物材料作为参照物，检测植物材料在离体后不同时间段含水量或可溶性蛋白质含量，并绘制含量变化与时间的线性关系图，确定离体植物材料的离体时间；本发明涉及的技术方案在刑侦物证分析中具有重要的意义。

说明书

技术领域

本发明涉及一种通过分析植物残存特征，判断出其离开活体植株时间范围的方法。属于刑侦技术领域。

背景技术

每种植物在生长发育过程中，呈现其固有的与发育阶段相适应的形态学、组织学、细胞学、分子生物学特征。当植物受到损害、剥离自母体后，其上述特征会随着时间的推移发生系列变化。植物鲜活组织离开活体后，会逐步失水萎蔫、充盈的组织结构会塌缩、细胞内含物会逐步降解、含量会降低、还会产生代谢分解新产物。

中国文献《离体杏叶失水过程中几个生理指标变化研究》(李金光，王有年等，北京农学院学报，1995年第2期)，研究了以离体杏叶片为试材，探讨了杏叶片失水过程中的几个生理指标的变化情况，结果表明：在杏叶片的失水过程中，随着水分胁迫程度的加强，脯氨酸含量上升；在轻度胁迫至中度胁迫中期，超氧化物歧化酶(SOD)活性升高，丙二醛(MDA)含量下降；在中度胁迫中期至重度胁迫期间，SOD活性降低，MDA含量升高，中度胁迫中期是叶片不受失水伤害的极限。

中国文献《杂交水稻离体叶片衰老与蛋白质代谢的关系》(宋松泉，苏卫珍等，中山大学学报论丛)，以离体杂交水稻叶片为材料，研究了叶片衰老与蛋白质代谢的关系，杂交水稻离体叶片衰老时，叶片中的叶绿素和蛋白质含量下降，游离氨基酸含量增加，氨肽酶与内肽酶的活性显著上升，说明在衰老叶片中氨肽酶和内肽酶的作用是蛋白质降解的主要原因。

现有技术中，通过离体植物材料的生理指标的变化与植物材料离体时间的关系并未报道，但是，通过检测离体植物材料的生理指标变化，判断其离体时间范围，可以为刑侦物证分析提供支持。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明涉及一种通过分析植物残存综合特征，判断出其离开活体植株时间范围的方法。

本发明技术方案如下：

离体植物材料中可溶性蛋白质或水分的变化在判断植物材料离体时间中的应用。

根据本发明优选的，离体植物材料中可溶性蛋白质或水分的变化判断植物材料离体时间在刑侦物证分析中的应用。

根据本发明优选的，离体植物材料包括植物叶片。

进一步优选的，离体三七叶片或鸢尾叶片中可溶性蛋白质的变化在判断叶片离体时间中的应用。

进一步优选的，离体木槿叶片或麦冬叶片中水分的变化在判断叶片离体时间中的应用。

上述离体植物材料中水分变化判断植物材料离体时间的方法，包括如下步骤：

(1)以相应的植物材料作为参照物，检测植物材料在离体后不同时间段的含水量；并绘制含水量与时间的线性关系图；

(2)检测离体植物材料的含水量，并根据步骤(1)中的线性关系图，确定离体植物材料的离体时间。

根据本发明优选的，步骤(1)中相应的植物材料为与离体植物材料相同物种，相同生长状态未离体的植物材料。

根据本发明优选的，步骤(1)中含水量的检测方法采用烘干法。

根据本发明优选的，上述方法中离体植物材料为离体木槿叶片或麦冬叶片。

进一步优选的，离体木槿叶片的检测时间段为离体后至48h，在该时间段内检测次数不低于6次。

进一步优选的，离体麦冬叶片的检测时间段为离体后至72h，在该时间段内检测次数不低于8次。

上述离体植物材料中可溶性蛋白质变化判断植物材料离体时间的方法，包括如下步骤：

a以相应的植物材料作为参照物，检测植物材料在离体后不同时间段的可溶性蛋白质含量；并绘制蛋白质含量与时间的线性关系图；

b检测离体植物材料的可溶性蛋白质含量，并根据步骤a中的线性关系图，确定离体植物材料的离体时间。

根据本发明优选的，步骤a中相应的植物材料为与离体植物材料相同物种，相同生长状态未离体的植物材料。

根据本发明优选的，步骤a中可溶性蛋白质含量的检测方法采用考马斯亮蓝法。

根据本发明优选的，上述方法中离体植物材料为离体三七叶片或鸢尾叶片。

进一步优选的，离体三七叶片的检测时间段为离体后至100h，在该时间段内检测次数不低于7次。

进一步优选的，离体鸢尾叶片的检测时间段为离体后至100h，在该时间段内检测次数不低于7次。

有益效果

本发明通过检测植物残存组织中蛋白质或水分的变化与时间的关系，判断植物残存组织离开活体时间，在刑侦物证分析中具有重大意义。

附图说明

图1为①组木槿叶片含水量与离体时间的关系图；

图2为②组木槿叶片含水量与离体时间的关系图；

图3为Ⅰ组木槿叶片蛋白含量与离体时间的关系图；

图4为Ⅱ组木槿叶片蛋白含量与离体时间的关系图；

图5为①组三七叶片含水量与离体时间的关系图；

图6为②组三七叶片含水量与离体时间的关系图；

图7为Ⅰ组三七叶片蛋白含量与离体时间的关系图；

图8为Ⅱ组三七叶片蛋白含量与离体时间的关系图；

图9为①组鸢尾叶片含水量与离体时间的关系图；

图10为②组鸢尾叶片含水量与离体时间的关系图；

图11为Ⅰ组鸢尾叶片蛋白含量与离体时间的关系图；

图12为Ⅱ组鸢尾叶片蛋白含量与离体时间的关系图；

图13为①组麦冬叶片含水量与离体时间的关系图；

图14为②组麦冬叶片含水量与离体时间的关系图；

图15为Ⅰ组麦冬叶片蛋白含量与离体时间的关系图；

图16为Ⅱ组麦冬叶片蛋白含量与离体时间的关系图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步阐述，但本发明所保护的范围不限于此。

实施例中未详加说明的内容均按本领域现有技术。

实施例1

取7月份济南市地区，相同生理状态、相同生长部位的木槿叶片，存放于24-26℃的室内。

(一)离体木槿叶片水分的变化判断木槿叶片的离体时间，包括如下步骤：

在木槿植物的相同生长部位随机采取木槿叶12片，分成2个平行组，分别为①组、②组，每组木槿叶为4片，进行检测实验。

①组：离体木槿叶4片，以离体1h、4h、11h、25h、36h、48h分别称取木槿叶片总重量，分别为：1.3051g、1.0571g、0.7379g、0.4362g、0.3624g、0.3257g；以烘干法检测木槿叶片干重为0.2988g,分别计算上述离体时间的含水量见表1，并由表1中的实验数据绘制含水量与时间的线性回归方程图，见图1。

由图1可以看出，线性回归方程为：y＝-0.0154x+0.7626，R

表1木槿叶片含水量与离体时间的关系

②组：离体木槿叶片水分含量检测方法同①组，检测木槿叶片干重为0.3341g，具体检测结果见表2，绘制含水量与离体时间的线性回归方程图，见图2。

由图2可以看出，线性回归方程为：y＝-0.0143x+0.757，R

表2木槿叶片含水量与离体时间的关系

验证实验：采取与步骤(一)相应部位的木槿叶4片，检测离体7h木槿叶片总重量为0.9248g，检测离体7h木槿叶片含水量为67.69％；

利用上述检测的含水量67.69％与①组的线性回归方程计算离体木槿叶片的离体时间为6h，与实际离体时间7h相差仅1h。

利用上述检测的含水量67.69％与②组的线性回归方程计算离体木槿叶片的离体时间为5.6h，与实际离体时间7h相差仅1.4h

由此可以看出，通过木槿叶片离体后水分含量判断离体时间误差小，准确度高。

(二)离体木槿叶片可溶性蛋白质的变化判断木槿叶片的离体时间，包括如下步骤：

在木槿植物的相同生长部位随机采取木槿叶，分成2个平行组，分别为Ⅰ组、Ⅱ组，进行检测实验。

Ⅰ组：离体木槿叶片样品，以离体0h、5h、8h、9h、26h分别检测可溶性蛋白质含量，利用考马斯亮蓝法进行检测，具体步骤为：利用考马斯亮蓝G-250蛋白染色试剂，以牛血清蛋白作为蛋白质标准液，并于595nm处绘制标准曲线；称取少许离体木槿叶片样品，利用液氮和高通量组织研磨器进行研磨后，加入1.8mL的ddH

注意事项：样液倒入比色杯后3-5min内测定，每次测定后都需酒精清洗，后用ddH

检测结果见表3；根据表3中离体时间与可溶性蛋白质含量，绘制蛋白质与离体时间的线性回归方程图，见图3。

由图3可以看出，线性回归方程为：y＝-0.0763x+3.5696，R

表3木槿叶片蛋白质含量与离体时间的关系

Ⅱ组：离体木槿叶片可溶性蛋白质含量检测方法同Ⅰ组，具体检测结果见表4，绘制蛋白质与离体时间的线性回归方程图，见图4。

由图4可以看出，线性回归方程为：y＝-0.0348x+2.6559，R

表4木槿叶片蛋白质含量与离体时间的关系

实施例2

(一)离体三七叶片水分的变化判断三七叶片的离体时间，包括如下步骤：

在三七植物的相同生长部位随机采取三七叶片，分成2个平行组，分别为①组、②组，进行检测实验。

①组：离体三七叶片水分含量检测方法参照实施例1中的①组，检测三七叶片干重为0.02g,具体检测结果见表5，绘制含水量与离体时间的线性回归方程图，见图5。

由图5可以看出，线性回归方程为：y＝-0.0118x+0.82，R

表5三七叶片含水量与离体时间的关系

②组：离体三七叶片水分含量检测方法参照实施例1中的①组，检测三七叶片干重为0.0192g，具体检测结果见表6，绘制含水量与离体时间的线性回归方程图，见图6。

由图6可以看出，线性回归方程为：y＝-0.0126x+1.0033，R

表6三七叶片含水量与离体时间的关系

(二)离体三七叶片可溶性蛋白质的变化判断三七叶片的离体时间，包括如下步骤：

在三七植物的相同生长部位随机采取三七叶片，分成2个平行组，分别为Ⅰ组，进行检测实验。

Ⅰ组：离体三七叶片可溶性蛋白质含量检测方法参照实施例1中的Ⅰ组，具体检测结果见表7，绘制蛋白质与离体时间的线性回归方程图，见图7。

由图7可以看出，线性回归方程为：y＝0.0183x+0.8019，R

表7三七叶片蛋白质含量与离体时间的关系

Ⅱ组：离体三七叶片可溶性蛋白质含量检测方法参照实施例1中的Ⅰ组，具体检测结果见表8，绘制蛋白质与离体时间的线性回归方程图，见图8。

由图8可以看出，线性回归方程为：y＝0.0185x+0.7597，R

表8三七叶片蛋白质含量与离体时间的关系

验证实验：采取与步骤(二)相应部位的三七叶片，检测离体28h三七叶片重量为0.128g，计算蛋白含量为1.2843％

利用上述检测的蛋白含量1.2843％与Ⅰ组的线性回归方程计算离体三七叶片的离体时间为26.3，与实际离体时间28h相差仅1.7h。

利用上述检测的蛋白含量1.2843％与Ⅱ组的线性回归方程计算离体三七叶片的离体时间为28.8h，与实际离体时间28h相差仅0.8h。

由此可以看出，通过三七叶片离体后可溶性蛋白质含量判断离体时间误差小，准确度高。

实施例3

(一)离体鸢尾叶片水分的变化判断鸢尾叶片的离体时间，包括如下步骤：

在鸢尾植物的相同生长部位随机采取鸢尾叶片，分成2个平行组，分别为①组、②组，进行检测实验。

①组：离体鸢尾叶片水分含量检测方法参照实施例1中的①组，检测鸢尾叶片干重为0.2356g,具体检测结果见表9，绘制含水量与离体时间的线性回归方程图，见图9。

由图9可以看出，随着时间的推移，发现鸢尾叶片含水量与离体时间并不呈现线性关系。

表9鸢尾叶片含水量与离体时间的关系

②组：离体鸢尾叶片水分含量检测方法参照实施例1中的①组，检测鸢尾叶片干重为0.473g具体检测结果见表10，绘制含水量与离体时间的线性回归方程图，见图10。

由图10可以看出，随着时间的推移，发现鸢尾叶片含水量与离体时间并不呈现线性关系。

表10鸢尾叶片含水量与离体时间的关系

(二)离体鸢尾叶片可溶性蛋白质的变化判断鸢尾叶片的离体时间，包括如下步骤：

在鸢尾植物的相同生长部位随机采取鸢尾叶片，分成2个平行组，分别为Ⅰ组、Ⅱ组，进行检测实验。

Ⅰ组：离体鸢尾叶片可溶性蛋白质含量检测方法参照实施例1中的Ⅰ组，具体检测结果见表11，绘制蛋白质与离体时间的线性回归方程图，见图11。

由图11可以看出，线性回归方程为：y＝0.0131x+0.2718，R

表11鸢尾叶片蛋白质含量与离体时间的关系

Ⅱ组：离体鸢尾叶片可溶性蛋白质含量检测方法参照实施例1中的Ⅰ组，具体检测结果见表12，绘制蛋白质与离体时间的线性回归方程图，见图12。

由图12可以看出，线性回归方程为：y＝0.0146x+0.2889，R

表12鸢尾叶片蛋白质含量与离体时间的关系

验证实验：采取与步骤(二)相应部位的鸢尾叶片，检测离体28h鸢尾叶片重量为请0.288g，计算蛋白含量为0.6629％。

利用上述检测的蛋白含量0.6629％与Ⅰ组的线性回归方程计算离体鸢尾叶片的离体时间为29.8h，与实际离体时间28h相差仅1.8h。

利用上述检测的蛋白含量0.6629％与Ⅱ组的线性回归方程计算离体鸢尾叶片的离体时间为25.6h，与实际离体时间28h相差仅2.4h

由此可以看出，通过鸢尾叶片离体后可溶性蛋白质含量判断离体时间误差小，准确度高。

实施例4

(一)离体麦冬叶片水分的变化判断麦冬叶片的离体时间，包括如下步骤：

在麦冬植物的相同生长部位随机采取麦冬叶片，分成2个平行组，分别为①组、②组，进行检测实验。

①组：离体麦冬叶片水分含量检测方法参照实施例1中的①组，检测麦冬叶片干重为0.0456g,具体检测结果见表13，绘制含水量与离体时间的线性回归方程图，见图13。

由图13可以看出，线性回归方程为：y＝-0.004x+0.64，R

表13麦冬叶片含水量与离体时间的关系

②组：离体麦冬叶片水分含量检测方法参照实施例1中的①组，检测麦冬叶片干重为0.0477g，具体检测结果见表14，绘制含水量与离体时间的线性回归方程图，见图14。

由图14可以看出，线性回归方程为：y＝-0.0071x+0.64，R

表14麦冬叶片含水量与离体时间的关系

验证实验：采取与步骤(一)相应部位的麦冬叶，检测离体7h麦冬叶片总重量为0.1156g，检测离体7h麦冬叶片含水量为60.55％。

利用上述检测的含水量60.55％与①组的线性回归方程计算离体麦冬叶片的离体时间为8.6h，与实际离体时间7h相差仅1.6h。

利用上述检测的含水量60.55％与②组的线性回归方程计算离体麦冬叶片的离体时间为4.9h，与实际离体时间7h相差仅2.1h

由此可以看出，通过麦冬叶片离体后水分含量判断离体时间误差小，准确度高。

(二)离体麦冬叶片可溶性蛋白质的变化判断麦冬叶片的离体时间，包括如下步骤：

在麦冬植物的相同生长部位随机采取麦冬叶片，分成2个平行组，分别为Ⅰ组、Ⅱ组，进行检测实验。

Ⅰ组：离体麦冬叶片可溶性蛋白质含量检测方法参照实施例1中的Ⅰ组，具体检测结果见表15，绘制蛋白质与离体时间的线性回归方程图，见图15。

由图15可以看出，随着时间的推移,发现麦冬叶片蛋白含量与离体时间并不呈现线性关系。

表15麦冬叶片蛋白质含量与离体时间的关系

Ⅱ组：离体麦冬叶片可溶性蛋白质含量检测方法参照实施例1中的Ⅰ组，具体检测结果见表16，绘制蛋白质与离体时间的线性回归方程图，见图16。

由图16可以看出，随着时间的推移,发现麦冬叶片蛋白含量与离体时间并不呈现线性关系。

表16麦冬叶片蛋白质含量与离体时间的关系

综上，本发明发现离体植物材料中可溶性蛋白质或水分的变化与离体时间成一定的线性关系，有利于判断植物材料离体时间，进一步实验证明离体三七叶片或鸢尾叶片中可溶性蛋白质的变化与离体时间成一定的线性关系，可以有效判断所述植物材料的离体时间；离体木槿叶片或麦冬叶片中水分的变化与离体时间成一定的线性关系，可以有效判断所述植物材料的离体时间，本发明涉及的技术方案在刑侦物证分析中的具有重要意义。