一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的方法

摘要

本发明提供了一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的方法，包括：S1)将带根的斑兰叶组培苗的根部浸泡在硫酸锌溶液中进行处理；S2)将处理后的斑兰叶组培苗移栽至栽培基质中且栽培基质保持70％～85％湿度进行炼苗培养；S3)将炼苗培养后的斑兰叶组培苗定植。与现有技术相比，本发明提供的方法能够提高斑兰叶组培苗移栽成活率，缩短组培苗瓶内瓶外育苗时间，还可提高斑兰叶组培苗主要香气组分含量尤其是2‑乙酰‑1‑吡咯啉的含量，进而有效提高了斑兰叶的生产效率及种苗质量。

说明书

技术领域

本发明属于植物繁育培养技术领域，尤其涉及一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的方法。

背景技术

斑兰叶，学名香露兜(Pandanus amaryllifolius)，英译商品名(Pandan leaf),国内译为板兰香，又名斑斓叶、香兰叶、板兰叶，为露兜树科(Pandanaceae)露兜树属(Pandanus)多年生常绿园艺作物。露兜树科有3属约800种多种植物，该属植物的原生生态环境差异很大，经济用途各异，能够应用于医疗和烹饪领域，属内有很多物种能治疗牙痛和风湿病，开发利用前景广阔。其中，斑兰叶是该属中具有独特“粽香”香味的植物。而且斑兰叶叶片富含角鲨烯、亚油酸、草蒿脑和甾醇等活性成分，具有增强细胞活力、加快新陈代谢、提高人体免疫力、抑制癌细胞生长等作用，被誉为“东方人的香草”。斑兰叶除了味道尚佳外，因其汁液具有较强的抗氧化成分，具有消暑，清凉去火、安神、镇定及舒筋活络的功效，具有非常高的经济开发价值。

我国斑兰叶属境外引进作物，起初引进到兴隆地区种植，随后逐渐发展到海南其他地区、云南等地区种植，如今广东、台湾等省分也部分种植斑兰叶。东南亚不少国家用它的叶汁当作添加香料来为糕点和饮料提升品质，是热带地区人们常用的食品香料之一。以斑兰叶为主要材料，制作的斑兰蛋糕、斑兰香精、斑兰酱、斑兰西米、斑兰糖浆等产品已经成为热带地区著名的特色食品，深受广大消费者的喜爱。作为一种深受人们喜爱的香料用品和具有重要用途的热带农产品，长期以来存在需求旺盛与供应不足的问题，并且随着生活品质不断提高，我国对斑兰叶的需求还将不断增加。斑兰叶作为典型的热带特色香料作物，对发展地方特色经济、提高边远地区农民收入和生活水平具有重要意义，发展前景广阔。

斑兰叶由于其花果未见，传统种植以分糵繁育为主。此方法对母株的生长程度至少两年以上，且需要分蘖的苗有限，无法满足产业对于高通量种苗繁育的要求，而高通量种苗繁育技术的缺乏制约了斑兰叶产业进一步发展。并且，斑兰叶组培苗开始大批量繁育后，移栽时也会出现因长势差异，出现移栽成活率低，瓶内炼苗到瓶外炼苗的步骤多且时间长，及香味不足等问题。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的方法，该方法可显著提高斑兰叶组培苗的移栽成活率和组培苗的香味，尤其是2-乙酰-1-吡咯啉的含量得到明显提升。

本发明提供了一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的方法，包括：

S1)将带根的斑兰叶组培苗的根部浸泡在硫酸锌溶液中进行处理；

S2)将处理后的斑兰叶组培苗移栽至栽培基质中且栽培基质保持70％～85％湿度进行炼苗培养；

S3)将炼苗培养后的斑兰叶组培苗定植。

优选的，所述带根的斑兰叶组培苗高6～10cm，具有完整根系与2～6片展开叶。

优选的，所述硫酸锌溶液的浓度为30～80mg/mL。

优选的，所述步骤S1)中处理的时间为20～30h；处理时保持叶片湿润；处理时的温度为25℃～28℃；处理时的光照强度为2000～4000lx；处理时的光照时间为6～12h。

优选的，所述步骤S2)中栽培基质为0.5～0.8cm的沙石；炼苗培养时用炼苗营养液使栽培基质保持70％～85％湿度；所述炼苗营养液包括5mg/L～10mg/L碳酸氢铵、5mg/L～8mg/L过磷酸钙、10mg/L～15mg/L氯化钾与水。

优选的，所述步骤S2)中炼苗培养的时间为20～40天；炼苗培养的光照强度为2000～4000lx；炼苗培养的光周期为光照时长8～12h。

优选的，所述步骤S3)中定植前施加基肥；所述基肥包括有机肥与氮磷钾复合肥；所述有机肥与氮磷钾复合肥的质量比为(500～1000)：(30～50)。

优选的，所述有机肥的使用量为500～1000kg/666.7cm

优选的，所述定植的温度为28℃～35℃；定植时的光照强度为3000～8000lx；定植的光周期为光照时长8～12h；定植时的浇水量使土地湿透60％～80％。

本发明提供了一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的方法，包括：S1)将带根的斑兰叶组培苗的根部浸泡在硫酸锌溶液中进行处理；S2)将处理后的斑兰叶组培苗移栽至栽培基质中且栽培基质保持70％～85％湿度进行炼苗培养；S3)将炼苗培养后的斑兰叶组培苗定植。与现有技术相比，本发明提供的方法能够提高斑兰叶组培苗移栽成活率，缩短组培苗瓶内瓶外育苗时间，还可提高斑兰叶组培苗主要香气组分含量尤其是2-乙酰-1-吡咯啉的含量，进而有效提高了斑兰叶的生产效率及种苗质量。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供了一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的方法，包括：S1)将带根的斑兰叶组培苗的根部浸泡在硫酸锌溶液中进行处理；S2)将处理后的斑兰叶组培苗移栽至栽培基质中且栽培基质保持70％～85％湿度进行炼苗培养；S3)将炼苗培养后的斑兰叶组培苗定植。

其中，本发明对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。

在本发明中，所述带根的斑兰叶组培苗的高度优选为6～10cm；所述带根的斑兰叶组培苗优选具有完整根系与2～6片开展叶。

将带根的斑兰叶组培苗的根部浸泡在硫酸锌溶液中进行处理；在本发明中，优选将带根的斑兰叶组培苗的根部培养基洗干净后，沥干水分，然后将根部浸泡在硫酸锌溶液中进行处理；所述硫酸锌溶液的浓度优选为30～80mg/mL，更优选为40～70mg/mL，再优选为40～60mg/mL，再优选为45～55mg/mL，最优选为50mg/mL；所述处理的时间优选为20～30h，更优选为24～26h；；处理时的光照强度优选为2000～4000lx；处理时的光照时间优选为6～12h；处理时优选保持叶片湿润，更优选用喷壶喷出水雾保持组培苗叶片湿润；所述处理时的温度优选为25℃～28℃。

将处理后的斑兰叶组培苗移栽至栽培基质中且栽培基质保持70％～85％湿度进行炼苗培养；所述栽培基质为本领域技术人员熟知的栽培基质即可，并无特殊的限制，本发明中优选为0.5～0.8cm的沙石；移栽时所述栽培基质的湿度优选为80％～85％；炼苗时为防止基质过湿，尚有水分时不宜浇水，优选待基质未干透时，炼苗营养液使栽培基质保持70％～85％湿度；以质量分数计，所述炼苗营养液优选包括5mg/L～10mg/L碳酸氢铵、5mg/L～8mg/L过磷酸钙、10mg/L～15mg/L氯化钾与水，更优选包括8mg/L～10mg/L碳酸氢铵、5mg/L～6mg/L过磷酸钙、10mg/L～12mg/L氯化钾与水，再优选包括10mg/L碳酸氢铵、5mg/L过磷酸钙、10mg/L氯化钾与水；炼苗培养时优选用炼苗营养液使栽培基质保持70％～80％湿度；所述炼苗培养的时间优选为20～40天，更优选为25～35天，再优选为30天；所述炼苗培养的温度优选为25℃～28℃；所述炼苗培养时光照强度优选为2000～4000lx；炼苗培养的光周期优选为光照时长8～12h。

最后，将炼苗培养后的斑兰叶组培苗定植；定植前优选施加基肥；所述基肥优选以有机肥为主，更优选包括有机肥与氮磷钾复合肥；所述有机肥优选为优质有机肥或商品有机肥；所述氮磷钾复合肥优选为复合肥(15-15-15)；所述有机肥与氮磷钾复合肥的质量优选比为(500～1000)：(30～50)；所述有机肥的使用量为500～1000kg/666.7cm

本发明提供的方法能够提高斑兰叶组培苗移栽成活率，缩短组培苗瓶内瓶外育苗时间，还可提高斑兰叶组培苗主要香气组分含量尤其是2-乙酰-1-吡咯啉的含量，进而有效提高了斑兰叶的生产效率及种苗质量。

为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的方法进行详细描述。

以下实施例中所用的试剂均为市售。

实施例1

选择斑兰叶带根6～10cm，具有完整根系和2～6片开展叶的组培苗浸泡在含50mg/mlZnSO

对照例1

选择斑兰叶带根6～10cm，具有完整根系和2-6片开展叶的组培苗浸泡在含10mg/ml IBA、50mg/ml ZnSO

对照例2

选择斑兰叶带根6～10cm，具有完整根系和2～6片开展叶的组培苗浸泡在含纯水液体培养中1d，期间用浮漂保证只浸泡种苗根部，用喷壶喷出水雾保证种苗叶片湿润，处理时的光照强度为3000lx，光照时间为10h，移栽炼苗需置于25～28℃的炼苗温度；液体培养后需要将组培苗移栽至含0.5～0.8cm沙石的栽培基质中，保持基质80％～85％的湿度，防止基质过湿，尚有水分时不宜浇水，待基质未干透时，用含1％碳酸氢铵+0.5％过磷酸钙+1％氯化钾的水溶液，浇至70％～80％湿度为标准进行炼苗，炼苗培养时的光照强度为3000lx，炼苗培养的光周期为光照时长10h；炼苗培养30d后定植，定植前应施基肥，基肥以有机肥为主，每666.7m

对照例3

选择斑兰叶带根6～10cm，具有完整根系和2～6片开展叶的组培苗浸泡在含10mg/ml NAA、50mg/ml LaCl的液体培养中1d，期间用浮漂保证只浸泡种苗根部，用喷壶喷出水雾保证种苗叶片湿润，处理时的光照强度为3000lx，光照时间为10h，移栽炼苗需置于25～28℃的炼苗温度；液体培养后需要将组培苗移栽至含0.5～0.8cm沙石的栽培基质中，保持基质80％～85％的湿度，防止基质过湿，尚有水分时不宜浇水，待基质未干透时，用含1％碳酸氢铵+0.5％过磷酸钙+1％氯化钾的水溶液，浇至70％～80％湿度为标准进行炼苗，炼苗培养时的光照强度为3000lx，炼苗培养的光周期为光照时长10h；炼苗培养30d后，定植前应施基肥，基肥以有机肥为主，每666.7m

对照例4

选择斑兰叶带根6～10cm，具有完整根系和2～6片开展叶的组培苗浸泡在含10mg/ml NAA、50mg/ml LaCl的液体培养中1d，期间用浮漂保证只浸泡种苗根部，用喷壶喷出水雾保证种苗叶片湿润，处理时的光照强度为3000lx，光照时间为10h，移栽炼苗需置于25～28℃的炼苗温度；液体培养后需要将组培苗移栽至含0.5～0.8cm沙石的栽培基质中，保持基质80％～85％的湿度，防止基质过湿，尚有水分时不宜浇水，待基质未干透时，用纯水溶液，浇至70％～80％湿度为标准进行炼苗，炼苗培养时的光照强度为3000lx，炼苗培养的光周期为光照时长10h；炼苗培养30d后，定植前应施基肥，基肥以有机肥为主，每666.7m

对照例5

选择斑兰叶带根6～10cm，具有完整根系和2～6片开展叶的组培苗浸泡在含10mg/ml IBA的液体培养中1d，期间用浮漂保证只浸泡种苗根部，用喷壶喷出水雾保证种苗叶片湿润，处理时的光照强度为3000lx，光照时间为10h，移栽炼苗需置于25～28℃的炼苗温度；液体培养后需要将组培苗移栽至含0.5～0.8cm沙石的栽培基质中，保持基质80％～85％的湿度，防止基质过湿，尚有水分时不宜浇水，待基质未干透时，用含1％碳酸氢铵+0.5％过磷酸钙+1％氯化钾的水溶液，浇至70％～80％湿度为标准进行炼苗，炼苗培养时的光照强度为3000lx，炼苗培养的光周期为光照时长10h；炼苗培养30d后，定植前应施基肥，基肥以有机肥为主，每666.7m

对照例6

选择斑兰叶带根6～10cm，具有完整根系和2～6片开展叶的组培苗浸泡在含纯水液体培养中1d，期间用浮漂保证只浸泡种苗根部，用喷壶喷出水雾保证种苗叶片湿润，处理时的光照强度为3000lx，光照时间为10h，移栽炼苗需置于25～28℃的炼苗温度；液体培养后需要将组培苗移栽至含0.5～0.8cm沙石的栽培基质中，保持基质80％～85％的湿度，防止基质过湿，尚有水分时不宜浇水，待基质未干透时，用水溶液，浇至70％～80％湿度为标准进行炼苗，炼苗培养时的光照强度为3000lx，炼苗培养的光周期为光照时长10h；炼苗培养30d后，定植前应施基肥，基肥以有机肥为主，每666.7m

在定植60d后对斑兰叶新鲜叶子中各特征香气物质含量进行测量，并统计实施例1及对照例1～6中组培苗移栽成活率与香气含量，结果见表1。测试方法如下：(1)样品预处理：采摘不同处理的斑兰叶，用浸湿无水乙醇的纱布擦净叶面杂质，分别称取4g剪碎的斑兰叶于50mL的离心管中，加入12mL的无水乙醇并用玻璃棒使样品浸没，在400W、40KHz、50℃下超声波萃取60min，萃取液无水硫酸钠干燥后，经0.22μm有机相针式过滤器(尼龙)过滤入进样瓶中，于4℃冰箱保存待测。(2)气象色谱-质谱联用仪(GC-MS)测定：气象色谱条件：DB-WAX(30m×0.25mm×0.25μm)弹性石英毛细管柱，载气为高纯氦气(99.999％)，载气流量1mL/min，不分流经样，进样口温度为250℃，接口温度为250℃。色谱柱初始温度为50℃，保持2min，以5℃/min升温至100℃，再以6℃/min升温至250℃，保持5min；质谱条件：离子源源为EI；电压70eV；离子源温度230℃；四极杆温度150℃，进样口温度为250℃，扫描质量范围30～450amu。

表1不同培养方法组培苗移栽成活率、香气含量对比

由表1可以看出，采用本发明的一种提高斑兰叶组培苗移栽成活率与香味的技术方法，移栽成活率达98％以上。采用本发明所提供的增香处理的培育2个月后，2-乙酰-1-吡咯啉含量达72μg/g；叶绿醇含量达111μg/g；角鲨烯含量达302μg/g，相比其他对照方法，2-乙酰-1-吡咯啉含量提升20％以上，起到增香效果，为最优的培育方法。