一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法

摘要

本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法，在生物安全尸检室内，将尸体置于防喷溅尸检隔离装置内进行处理，包括以下步骤：1)将尸体解剖取出肺脏，将肺脏在固定液中浸泡后取出，获得肺脏标本；2)采用弹线法将钛白染料在肺脏标本表面进行水平横断面基准线定位后划锯切线，再将肺脏标本进行冷冻；3)将冷冻后的肺脏标本沿锯切线进行锯切，并用CT扫描验证，获得断层标本；4)将断层标本进行病理取材、清洗、刷胶后进行影像化处理，封存。本发明提供的一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法，为后续研究病毒性肺炎保留下珍贵的临床病理资料，避免操作者在制作过程中的不必要的感染。

说明书

技术领域

本发明属于医学生物技术领域，涉及一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方 法，具体涉及一种基于病毒性肺炎(尤其是具有高传染性的肺炎，如新型冠状病毒肺炎、SARS 等)患者肺脏的断层的临床诊断、科研与教学标本的制备方法。

背景技术

病毒性肺炎、尤其是具有高度传染性的病毒性肺炎，已经成为严重威胁整个人类健康和 生命的传染性疾病。未来，病毒性肺炎很有可能成为长期困扰人类社会的公共卫生疾病。因 此，我们有必要保存尽可能多的病毒性肺炎病例素材，充分研究它们的影像学和病理学情况， 以期为更好的认识这一类传染性疾病打下坚实的基础。

医学的进步离不开病理解剖。病理学能够揭示疾病的本质，包括病因、发病原理和疾病 过程中机体器官、组织、细胞甚至分子发生的改变及其规律，是现代医学起源和发展的根基。 由解剖获得的病毒性肺炎病理研究结果，对于认识病毒性肺炎的病理改变和本质、揭示发生 机制和发展规律、完善临床诊治方案，都有重大帮助，并能从根本上寻找病毒性肺炎的致病 和致死原因，给临床救治危重症患者提供依据。

病理是影像学的基础，影像学是病理的表现。病毒性肺炎的主要受累靶器官是呼吸系统， 主要为肺实质。然而，由于缺少兼顾安全性的传染性尸检样本制备方法，目前对于病毒性肺 炎肺部标本仍然缺乏可供遵循的标准化流程。更重要的是，目前病毒性肺炎的研究和诊断， 多处于将病理形态学与临床影像割裂开来、或仅仅是浅度对应的状态，缺乏将二者深度融合 的研究方案。因此，对死于病毒性肺炎患者的肺脏，亟需进行高度融合临床影像与解剖病理 的对照研究，建立病毒性肺炎数据库、制作出集临床解剖、病理、影像于一体的临床科研与 教学标本。

断层解剖学是利用断层切锯法研究人体形态结构的一门科学。它能够在原位保持机体结 构的基础上，准确呈现断面形态变化及机体各结构的位置毗邻关系；通过追踪连续断层或借 助计算机进行结构的三维重建和定量分析；它密切结合了影像诊断学和介入放射学，是解剖 学与医学影像学结合的产物。将病毒性肺炎患者的肺脏进行断层影像诊断及病理诊断相结合， 能够为该类疾病的教学、科研及影像诊断提供形态学依据。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的 断层标本的制备方法，利用该方法制作出的病毒性肺炎肺部横断面断层标本，能够充分满足 影像、病理的临床诊断、教学和科研需求，每个断层标本都实现了影像资料和病理资料相互 对应；并且，由于制作出的断层标本干净整洁，经中性福尔马林充分固定，可以实现长期保 存，不但在用于教学、科研和临床影像诊断时直观、生动，而且能够为人类未来研究病毒性 肺炎保留下珍贵的临床病理资料。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的 断层标本的制备方法，在生物安全尸检室内，将尸体置于防喷溅尸检隔离装置内进行处理， 包括以下步骤：

1)将尸体解剖取出肺脏，将肺脏在固定液中浸泡后取出，获得肺脏标本；

2)采用弹线法将钛白染料在步骤1)获得的肺脏标本表面进行水平横断面基准线定位后 划锯切线，再将肺脏标本进行冷冻；

3)将步骤2)冷冻后的肺脏标本沿锯切线进行锯切，并用CT扫描验证，获得断层标本；

4)将步骤3)获得的断层标本进行病理取材、清洗、刷胶后进行影像化处理，封存。

优选地，所述尸体置于防喷溅尸检隔离装置内进行处理，包括以下步骤：

a)所述防喷溅尸检隔离装置包括经隔离面隔离的污染源腔室和半清洁腔室，打开污 染源腔室上与隔离面相邻的一侧侧面的帘门，将尸体置于污染源腔室内，关闭帘 门后，通过与隔离面相邻的另一侧侧面上设有的至少一个第一操作口和/或与隔 离面相对的侧面上设有的至少一个第二操作口，对尸体进行解剖，取出肺脏；

b)所述半清洁腔室上与隔离面相对的侧面设有第二隔离掀帘，通过第二隔离掀帘上 设有的至少一个第三操作口，将肺脏经隔离面上设有的第一隔离掀帘由污染源腔 室转移至半清洁腔室；

c)将肺脏放置于半清洁腔室内设置的标本存放容器内，进行固定液浸泡后获得肺脏 标本，再将肺脏标本进行划锯切线后，打开第二隔离掀帘，取出肺脏标本进行冷 冻；

d)将冷冻后的肺脏标本经第二隔离掀帘放入半清洁腔室，通过第三操作口进行锯切 获得断层标本，并将断层标本进行病理取材、清洗、刷胶后密封，再经第二隔离 掀帘取出进行影像化处理；

e)将影像化处理后的断层标本经第二隔离掀帘放入半清洁腔室制作标本盒后取出。

优选地，所述防喷溅尸检隔离装置，包括有相邻的污染源腔室和半清洁腔室，所述污染 源腔室与半清洁腔室经隔离面隔离，所述隔离面上设有第一隔离掀帘；所述污染源腔室上， 与所述隔离面相邻的一侧侧面为帘门，与所述隔离面相邻的另一侧侧面上设有至少一个第一 操作口，与所述隔离面相对的侧面上设有至少一个第二操作口；所述半清洁腔室上，与所述 隔离面相对的侧面上设有第二隔离掀帘，所述第二隔离掀帘上设有至少一个第三操作口。

更优选地，所述污染源腔室的顶部设有顶板，所述顶板下方设有多根支撑杆。

进一步优选地，所述顶板下方设有4根支撑杆。

更优选地，所述第一隔离掀帘、第二隔离掀帘、帘门为上开启式可开闭结构。

更优选地，所述第一操作口和/或第二操作口均为2个。

更优选地，所述第三操作口为2个。

更优选地，所述第一操作口、第二操作口和第三操作口上设有密封接口的操作手套。

更优选地，所述半清洁腔室内设有标本存放容器。

优选地，步骤1)中，所述尸体为病毒性肺炎患者的尸体。所述病毒性肺炎包括且不限 于新型冠状病毒肺炎或SARS。

优选地，步骤1)中，所述尸体在置于防喷溅尸检隔离装置前，需要先剃去尸体的毛发， 去除尸体皮肤上的污垢和油渍，用消毒液消毒后，采用绷带将尸体定型。

更优选地，所述消毒液为体积百分比为70-80％的乙醇水溶液。最优选地，所述消毒液为 体积百分比为75％的乙醇水溶液。

更优选地，所述尸体定型按照解剖学姿势进行。

优选地，步骤1)中，所述解剖取出肺脏，是将尸体的气管截断，采用T形切开法切开胸腔，摘除胸骨及肋软骨，暴露胸腔，再切断动脉、气管、肺根及肺韧带，取出肺脏。

优选地，步骤1)中，所述肺脏在固定液中浸泡，是先经气管断端开口处，灌注固定液 入肺脏，再将注满固定液的肺脏浸泡于固定液中。

更优选地，所述固定液为5-15％的中性福尔马林溶液。最优选地，所述固定液为10％的 中性福尔马林溶液。

更优选地，所述肺脏在固定液中的浸泡时间为46-50h。

优选地，步骤1)中，所述肺脏标本要倾倒出固定液，先用清水冲洗后，吸干肺脏标本 表面的水分，再静置晾干。

更优选地，所述肺脏标本表面的水分采用吸水滤纸吸干。

更优选地，所述静置晾干是将吸干表面水分的肺脏标本置于吸水滤纸上，在阴凉避光处 静置4-6小时晾干。

优选地，步骤2)中，所述水平横断面基准线定位以气管纵轴为冠状线，与之垂直者划 为横断线。

优选地，步骤2)中，所述钛白染料为二氧化钛。

优选地，步骤2)中，所述锯切线的划线深度为1-2cm。

优选地，步骤2)中，所述肺脏标本在冷冻前要密封。

优选地，步骤2)中，所述冷冻是将肺脏标本在≤-30℃下冷冻4-6天。

优选地，步骤3)中，所述锯切前需要将肺脏标本进行固定，所述肺脏标本应固定在带 锯机上。

优选地，步骤3)中，所述锯切采用带锯机进行。

更优选地，所述带锯机的锯耗小于2mm。

更优选地，所述带锯机上，固定挡板与锯条的间距等于要锯切的肺脏标本厚度加上锯耗 的一半。

优选地，步骤3)中，所述断层标本的厚度与CT的扫描厚度一致。

更优选地，所述断层标本的厚度与CT的扫描厚度均为0.7-0.9mm。

优选地，步骤4)中，所述病理取材，包括以下步骤：

A)在室温下观察断层标本的病理变化，对出现形态学改变的病变区域，要进行病灶 组织取检；

B)将取检的病灶组织依次进行梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡、取检组织石蜡包埋、病理组织切片、展片附贴、组织切片二甲苯脱蜡、HE染色、梯度酒精 脱水、二甲苯透明、树胶封片处理，获得HE染色切片。

更优选地，步骤A)中，所述病理变化选自颜色、质地、实变、黏液变中的一种或多种。

优选地，步骤4)中，所述清洗为用水冲洗。

优选地，步骤4)中，所述清洗后，吸干断层标本表面的水分，再静置晾干。

更优选地，所述断层标本表面的水分采用吸水滤纸吸干。

更优选地，所述静置晾干是将吸干表面水分的断层标本置于吸水滤纸上，在阴凉避光处 静置4-6小时晾干。

优选地，步骤4)中，所述刷胶是采用明胶液涂刷断层标本的表面，再静置晾干。

更优选地，所述明胶液为胶原蛋白通过水解而得。

更优选地，所述明胶液的浓度为15-25％。

更优选地，所述明胶液的涂刷次数为1-3次。

更优选地，所述静置晾干为在阴凉避光处静置晾干。

优选地，步骤4)中，所述影像化处理是将清洗、刷胶后的断层标本的两个断面分别用 扫描仪扫描后，储存于电子计算机硬盘。

优选地，步骤4)中，所述封存是将清洗、刷胶后的断层标本置于装有保存液的标本盒 中永久性封存。

更优选地，所述保存液为4-6％的中性福尔马林溶液。

更优选地，所述标本盒为聚甲基丙烯酸甲酯板材质的标本盒。

本发明第二方面提供上述方法在制作病毒性肺炎患者肺脏的断层标本中的用途。

如上所述，本发明提供的一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法，具有以 下有益效果：

(1)利用本发明的方法制作出的病毒性肺炎肺部横断面断层标本，能够充分满足影 像、病理两个学科的临床诊断、教学和科研需求，每个断层标本都实现了影像 资料和病理资料相互对应。

(2)利用本发明的方法制作出的病毒性肺炎肺部横断面断层标本干净整洁，经中性 福尔马林充分固定，可以实现长期保存，为后续研究病毒性肺炎保留下珍贵的 临床病理资料。

(3)利用本发明的方法制作出的病毒性肺炎肺部横断面断层标本，其制备过程充分 考虑了病毒性肺炎所具有的传染性，防护效果明显，避免操作者在制作过程中 的不必要的感染。

附图说明

图1显示为本发明中的一种防喷溅尸检隔离装置的整体结构示意图。

图2显示为本发明制作的基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的解剖结构图。

图3显示为本发明制作的基于间质性肺炎患者肺脏的断层标本的HE染色切片图。

图4显示为本发明制作的基于病情危重的病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的HE染色切 片图。

附图标记

1 污染源腔室

2 半清洁腔室

3 第一隔离掀帘

4 帘门

5 第一操作口

6 第二操作口

7 第二隔离掀帘

8 第三操作口

9 操作手套

10 顶板

11 支撑杆

12 标本存放容器

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步阐述本发明，应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用 于限制本发明的保护范围。

以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露 的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加 以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精 神下进行各种修饰或改变。

须知，下列实施例中未具体注明的工艺设备或装置均采用本领域内的常规设备或装置； 所有压力值和范围都是指相对压力。

此外应理解，本发明中提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还可以 存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤，除非另有说明； 还应理解，本发明中提到的一个或多个设备/装置之间的组合连接关系并不排斥在所述组合设 备/装置前后还可以存在其他设备/装置或在这些明确提到的两个设备/装置之间还可以插入其 他设备/装置，除非另有说明。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤 的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本发明可实施的范围，其相对关系的 改变或调整，在无实质变更技术内容的情况下，当亦视为本发明可实施的范畴。

本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法，在生物安全尸检室内， 将尸体置于防喷溅尸检隔离装置内进行处理，包括以下步骤：

1)在生物安全尸检室内，将尸体置于防喷溅尸检隔离装置内进行处理，解剖取出肺脏， 将肺脏在固定液中浸泡后取出，获得肺脏标本；

2)采用弹线法将钛白染料在步骤1)获得的肺脏标本表面进行水平横断面基准线定位后 划锯切线，再将肺脏标本进行冷冻；

3)将步骤2)冷冻后的肺脏标本沿锯切线进行锯切，并用CT扫描验证，获得断层标本；

4)将步骤3)获得的断层标本进行病理取材、清洗、刷胶后进行影像化处理，封存。

上述生物安全尸检室为常规使用的符合生物安全尸检操作要求的尸检室。所述生物安全 尸检室能够进行负压过滤，并配有专用操作台，还应当具有淋浴或卫生设施、空调或冷暖气 设备以及专用污水处理系统。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，所述尸体置于防 喷溅尸检隔离装置内进行处理，包括以下步骤：

a)所述防喷溅尸检隔离装置包括经隔离面隔离的污染源腔室和半清洁腔室，打开污 染源腔室上与隔离面相邻的一侧侧面的帘门，将尸体置于污染源腔室内，关闭帘 门后，通过与隔离面相邻的另一侧侧面上设有的至少一个第一操作口和/或与隔 离面相对的侧面上设有的至少一个第二操作口，对尸体进行解剖，取出肺脏；

b)所述半清洁腔室上与隔离面相对的侧面设有第二隔离掀帘，通过第二隔离掀帘上 设有的至少一个第三操作口，将肺脏经隔离面上设有的第一隔离掀帘由污染源腔 室转移至半清洁腔室；

c)将肺脏放置于半清洁腔室内设置的标本存放容器内，进行固定液浸泡后获得肺脏 标本，再将肺脏标本进行划锯切线后，打开第二隔离掀帘，取出肺脏标本进行冷 冻；

d)将冷冻后的肺脏标本经第二隔离掀帘放入半清洁腔室，通过第三操作口进行锯切 获得断层标本，并将断层标本进行病理取材、清洗、刷胶后密封，再经第二隔离 掀帘取出进行影像化处理；

e)将影像化处理后的断层标本经第二隔离掀帘放入半清洁腔室制作标本盒后取出。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，所述防喷溅尸检 隔离装置，如图1所示，包括有相邻的污染源腔室和半清洁腔室，所述污染源腔室与半清洁 腔室经隔离面隔离，所述隔离面上设有第一隔离掀帘；所述污染源腔室上，与所述隔离面相 邻的一侧侧面为帘门，与所述隔离面相邻的另一侧侧面上设有至少一个第一操作口，与所述 隔离面相对的侧面上设有至少一个第二操作口；所述半清洁腔室上，与所述隔离面相对的侧 面上设有第二隔离掀帘，所述第二隔离掀帘上设有至少一个第三操作口。

上述污染源腔室和半清洁腔室的材质为透明塑料膜。由于病理尸检操作时间长、内脏组 织剖面暴露面积大，需要使用透光率好，能够耐反复折叠的透明塑料膜，才能适合病理尸检 场景。

在一个优选的实施例中，如图1所示，所述污染源腔室的顶部设有顶板，所述顶板下方 设有多根支撑杆。所述支撑杆用于支撑起污染源腔室，并同时带动支撑半清洁腔室，形成足 够的空间便于尸体在污染源腔室内存放，并在半清洁腔室内处理制作标本。

具体来说，所述顶板下方设有4根支撑杆。能够使污染源腔室得到比较稳定的支撑，保 持足够的空间。

上述顶板和支撑杆的材质为透明硬塑料。具有一定的支撑能力。

在一个优选的实施例中，如图1所示，所述第一隔离掀帘、第二隔离掀帘、帘门为上开 启式可开闭结构。所述第一隔离掀帘第一隔离掀帘、第二隔离掀帘、帘门的开口由下至上掀 开。

所述第一隔离掀帘能够阻断尸体解剖时产生的气溶胶及体液迸溅入半清洁腔室。同时， 打开第一隔离掀帘可以将尸体解剖后取得的人体标本转移至半清洁腔室进行后续处理。

所述第二隔离掀帘能够在将人体标本进行固定液保存操作时，阻断可能存在的固定液迸 溅到隔离装置外的情况。同时，打开第二隔离掀帘可以将进行固定液保存的人体标本转移至 其它场所。

所述可开启式帘门能够开启，用于放置尸体。

在一个优选的实施例中，如图1所示，所述第一操作口5和/或第二操作口6均为2个。 便于操作者能够对污染源腔室的尸体进行双手操作。

在一个优选的实施例中，如图1所示，所述第三操作口为2个。便于操作者能够对半清 洁腔室的人体标本进行双手操作。

在一个优选的实施例中，如图1所示，所述半清洁腔室内设有标本存放容器。所述标本 存放容器为装有固定液的密封罐。能够杜绝切取的人体标本在移动过程中成为污染源。

在一个优选的实施例中，如图1所示，所述第一操作口、第二操作口和第三操作口上设 有密封接口的操作手套。所述操作手套能够便于操作者对污染源腔室和/或半清洁腔室的人体 标本进行解刨时，避免污染源腔室和/或半清洁腔室内的污染源接触操作者。同时，在未进行 解刨操作时，能够封闭第一操作口、第二操作口和第三操作口。

在一个优选的实施例中，如图1所示，所述半清洁腔室内设有标本存放容器。所述标本 存放容器为装有固定液的密封罐，可用于放置肺脏。能够杜绝切取的人体标本在移动过程中 成为污染源。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，所述尸体为病毒 性肺炎患者的尸体。所述病毒性肺炎包括且不限于新型冠状病毒肺炎或SARS。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，所述尸体在置于 防喷溅尸检隔离装置前，需要先剃去尸体的毛发，去除尸体皮肤上的污垢和油渍，用消毒液 消毒后，采用绷带将尸体定型。

在一个优选的实施例中，所述消毒液为体积百分比为70-80％的乙醇水溶液，优选体积百 分比为75％的乙醇水溶液，从而具有最佳的杀菌效果。

在一个优选的实施例中，所述尸体定型按照解剖学姿势进行。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤1)中，所 述解剖取出肺脏，是将尸体的气管截断，采用T形切开法切开胸腔，摘除胸骨及肋软骨，暴 露胸腔，再切断动脉、气管、肺根及肺韧带，取出肺脏。

在一个具体的实施例中，所述胸骨及肋软骨的摘除，是在切开胸腔后，剥离胸廓外组织， 暴露肋骨，用软骨刀自第二肋骨开始切断两侧肋软骨，再用手术刀将胸锁关节切断，用肋骨 剪剪断两侧第一肋骨，将肋弓提起，紧贴胸骨及肋软骨后面，分割膈肌和纵膈后摘除。

其中，自第二肋骨开始切断两侧肋软骨时，切线距离肋软骨与肋骨交界处为0.5-1cm。

在一个具体的实施例中，切断动脉、气管，是切断无名动脉及左锁骨下动脉，在胸廓肋 软骨断面，用解剖刀在气管分叉处上方3-4cm处截断气管。

在一个具体的实施例中，切断肺根及肺韧带时，要将肺与纵膈分开，避开肺根周围的血 管神经，垂直切断肺根和肺韧带。取出肺脏后，注意观察肺门处支气管、肺动脉、肺静脉、 支气管动脉和支气管肺门淋巴结的位置和完整性。特别注意，左肺根前方有膈神经和心包膈 血管，后方有迷走神经；右肺根前方有副神经和心包膈血管，后方有迷走神经，上方有奇静 脉弓，应注意避开。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤1)中，所 述肺脏在固定液中浸泡，是先经气管断端开口处，灌注固定液入肺脏，再将注满固定液的肺 脏浸泡于固定液中。

在一个优选的实施例中，所述固定液为5-15％的中性福尔马林溶液，优选为10％的中性 福尔马林溶液。

在一个优选的实施例中，所述肺脏在固定液中的浸泡时间为46-50h，优选为48h。

上述灌注固定液入肺脏时，需要将气管在距气管分叉处约5cm的地方切断，用缠有纱布 条的一次性输液器塑胶管插入气管的断端，使其外端与气管断口相对齐，在塑胶管与气管内 壁间围衬上纱布，再用缝线绕气管外扎紧。用注射器吸取固定液从塑胶管的中央注入缓慢分 批注人，如果灌注过程中气管内有气体，应将肺轻轻提起，同时拔出注射器，将肺慢慢放下 让气体排出，当看到固定液将要流出时再插人注射器灌注，注入的量以不能注入为度。注射 时压力不要过大，防止管壁破裂。如发现有漏液的地方可用止血钳掐住或用线扎住。

上述注满固定液的肺脏浸泡于固定液时，将肺脏上端(即气管断端)固定于塑料桶上方， 保持正常的解剖学位置。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤1)中，所 述肺脏标本倾倒出固定液，再用清水冲洗后，吸干肺脏标本表面的水分，再静置晾干。

在一个优选的实施例中，所述肺脏标本表面的水分采用吸水滤纸吸干。

在一个优选的实施例中，所述静置晾干是将吸干表面水分的肺脏标本置于吸水滤纸上， 在阴凉避光处静置4-6小时晾干。期间注意及时更换吸水滤纸，仔细观察晾干中肺脏标本的 状况，注意要保持肺组织有一定湿润度又不能过于干燥。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤2)中，所 述水平横断面基准线定位以气管纵轴为冠状线，与之垂直者划为横断线。保证断层标本标志 线与肺纵轴表面横断面定位线的一致。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤2)中，所 述弹线法为本领域常规使用的方法。具体来说，即用一条沾了钛白染料的线，两个人每人拿 一端然后弹在肺组织表面，实际就是用线来代替笔，用钛白染料来代替墨水，对标本表面进 行水平横断面基准线定位。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤2)中，所 述钛白染料为二氧化钛。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤2)中，所 述锯切线的划线深度为1-2cm。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤2)中，所 述肺脏标本在冷冻前要密封。防止传染。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤2)中，所 述冷冻是将肺脏标本在≤-30℃下冷冻4-6天，优选为在-30℃下冷冻5天。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤3)中，所 述锯切前需要将肺脏标本进行固定。具体来说，所述肺脏标本应固定在带锯机上。具体来说， 所述肺脏标本固定在带锯机的固定挡板上。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤3)中，所 述锯切采用带锯机进行。所述带锯机为常规使用的细木工带锯机。具体来说，所述带锯机为 MJ345E型细木工带锯机。

在一个优选的实施例中，所述带锯机的锯耗小于2mm。所述带锯机根据锯切肺脏标本的 部位不同调整锯条张力。

在一个优选的实施例中，所述带锯机上，固定挡板与锯条的间距等于要锯切的肺脏标本 厚度加上锯耗的一半。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤3)中，所 述断层标本的厚度与CT的扫描厚度一致。

在一个优选的实施例中，所述断层标本的厚度与CT的扫描厚度均为0.7-0.9mm，优选为 0.8mm。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤3)中，所 述断层标本应仔细测量长度和宽度，并逐一记录在案，将断层标本置于塑料袋内，塑料袋上 用防水油性笔标记序号后，按顺序放入-30℃医用冰冻冰柜中暂存。不可在高温环境下放置时 间过长，以防标本受损。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤4)中，所 述病理取材，包括以下步骤：

A)在室温下观察断层标本的病理变化，对出现形态学改变的病变区域，要进行病灶组 织取检；

B)将取检的病灶组织依次进行梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡、取检组织石蜡 包埋、病理组织切片、展片附贴、组织切片二甲苯脱蜡、HE染色、梯度酒精脱水、二甲苯透明、树胶封片处理，获得HE染色切片。

在一个优选的实施例中，步骤A)中，所述病理变化包括但不限于颜色、质地、实变、黏液变等。

步骤B)中，上述梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡、取检组织石蜡包埋、病理组织切片、展片附贴、组织切片二甲苯脱蜡、HE染色、梯度酒精脱水、二甲苯透明、树胶封片 处理等步骤，均为对病灶组织进行的常规处理手段，具体参见《现代实验病理技术》中第四 章“切片制作与染色技术”(军事医学科学出版社，2012年8月第1版，主编：彭瑞云、李 杨，副主编：高亚兵、刘超，主审：王德文)。

步骤B)中，所述HE染色切片用于供显微镜下观察病理组织学变化。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤4)中，所 述清洗为用水冲洗。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤4)中，所 述清洗后，吸干断层标本表面的水分，再静置晾干。

在一个优选的实施例中，所述断层标本表面的水分采用吸水滤纸吸干。

在一个优选的实施例中，所述静置晾干是将吸干表面水分的断层标本置于吸水滤纸上， 在阴凉避光处静置4-6小时晾干。期间注意及时更换吸水滤纸。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤4)中，所 述刷胶是采用明胶液涂刷断层标本的表面，再静置晾干。

在一个优选的实施例中，所述明胶液的浓度为15-25％，优选为20％。

在一个优选的实施例中，所述明胶液的涂刷次数为1-3次，优选为2次。

上述明胶液为胶原蛋白通过水解而得。所述胶原蛋白(简称胶原)是动物的皮、骨中最重 要的蛋白质组分。在断层标本表面涂抹明胶液，可以起到隔绝空气、稳定组织形态的作用。

在一个优选的实施例中，所述静置晾干为在阴凉避光处静置晾干。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤4)中，所 述影像化处理是将清洗、刷胶后的断层标本的两个断面分别用扫描仪扫描后，储存于电子计 算机硬盘。作为永久科研资料。

在本发明提供一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法中，步骤4)中，所 述封存是将清洗、刷胶后的断层标本置于装有保存液的标本盒中永久性封存。

在一个优选的实施例中，所述保存液为4-6％的中性福尔马林溶液，优选为5％的中性福 尔马林溶液。

在一个优选的实施例中，所述标本盒为聚甲基丙烯酸甲酯板材质的标本盒。所述标本盒 采用透明的聚甲基丙烯酸甲酯板制作，用三氯甲烷(氯仿)连接结合面，在标本盒侧面用电 钻钻一小孔作为注液孔，以备注药防腐，将清洗、刷胶后的断层标本放入标本盒内，加封上 盖，经侧面注液孔注入保存液，然后封堵注液孔，保存。注意结合面和注液孔的连接一定要 紧密，以免日后损坏和漏水。

实施例1

在符合操作要求的具有负压过滤的生物安全尸检内，剃去病毒性肺炎患者尸体的毛发， 去除尸体皮肤上的污垢和油渍，用75％的乙醇水溶液消毒后，采用绷带将尸体按照解剖学姿 势进行定型。

打开防喷溅尸检隔离装置的污染源腔室一侧侧面上的上开启式可开闭结构的帘门，将定 型的病毒性肺炎患者尸体放入污染源腔室，关闭帘门。操作者经第一操作口和/或第二操作口 上的密封接口的操作手套，将手伸入污染源腔室内，对尸体进行病理解剖。先将病毒性肺炎 患者尸体的气管截断，采用T形切开法切开胸腔，剥离胸廓外组织，暴露肋骨，用软骨刀自 第二肋骨开始切断两侧肋软骨，切线距离肋软骨与肋骨交界处为0.75cm，再用手术刀将胸锁 关节切断，用肋骨剪剪断两侧第一肋骨，将肋弓提起，紧贴胸骨及肋软骨后面，分割膈肌和 纵膈后摘除胸骨及肋软骨，暴露胸腔。再切断无名动脉及左锁骨下动脉，在胸廓肋软骨断面， 用解剖刀在气管分叉处上方3.5cm处截断气管。再将肺与纵膈分开，避开肺根周围的血管神 经，垂直切断肺根和肺韧带，取出肺脏。取出肺脏后，注意观察肺门处支气管、肺动脉、肺 静脉、支气管动脉和支气管肺门淋巴结的位置和完整性。特别注意，左肺根前方有膈神经和 心包膈血管，后方有迷走神经；右肺根前方有副神经和心包膈血管，后方有迷走神经，上方 有奇静脉弓，应注意避开。

然后，操作者经第三操作口上的密封接口的操作手套，将手伸入半清洁腔室内，掀起第 一隔离掀帘，将污染源腔室内取出的肺脏，转移至半清洁腔室内的标本存放容器内，关闭第 一隔离掀帘。

对标本存放容器内的肺脏进行保存处理，先经气管断端开口处，灌注10％的中性福尔马 林溶液入肺脏，即将气管在距气管分叉处约5cm的地方切断，用缠有纱布条的一次性输液器 塑胶管插入气管的断端，使其外端与气管断口相对齐，在塑胶管与气管内壁间围衬上纱布， 再用缝线绕气管外扎紧。用注射器吸取10％的中性福尔马林溶液从塑胶管的中央注入缓慢分 批注人，如果灌注过程中气管内有气体，应将肺轻轻提起，同时拔出注射器，将肺慢慢放下 让气体排出，当看到10％的中性福尔马林溶液将要流出时再插人注射器灌注，注入的量以不 能注入为度。注射时压力不要过大，防止管壁破裂。如发现有漏液的地方可用止血钳掐住或 用线扎住。

再将注满10％的中性福尔马林溶液的肺脏在标本存放容器内的10％的中性福尔马林溶液 中浸泡48h后取出，获得肺脏标本，浸泡时将肺脏上端(即气管断端)固定于塑料桶上方， 保持正常的解剖学位置。取出浸泡后的肺脏标本倾倒出0％的中性福尔马林溶液，再用清水冲 洗后，采用吸水滤纸吸干肺脏标本表面的水分，将吸干表面水分的肺脏标本置于吸水滤纸上， 在防喷溅尸检隔离装置的阴凉避光处静置5小时晾干。仔细观察晾干中肺脏标本的状况，注 意要保持肺组织有一定湿润度又不能过于干燥。

采用弹线法将作为钛白染料的二氧化钛粉在肺脏标本表面进行水平横断面基准线定位， 以气管纵轴为冠状线，与之垂直者划为横断线。以1.5cm深度划锯切线，然后将肺脏标本密 封。操作者将手伸出第三操作口上的密封接口的操作手套，掀起第二隔离掀帘，取出密封的 肺脏标本，在在-30℃下冷冻5天。

操作者掀起第二隔离掀帘，将冷冻后的肺脏标本放入半清洁腔室内，同时将MJ345E型 细木工带锯机放入半清洁腔室内，关闭第二隔离掀帘。操作者经第三操作口上的密封接口的 操作手套，将手伸入半清洁腔室内，将肺脏标本固定在带锯机的固定挡板上，采用细木工带 锯机沿锯切线进行锯切，获得断层标本。细木工带锯机的锯耗小于2mm，固定挡板与细木工 带锯机的锯条的间距等于要锯切的肺脏标本厚度加上锯耗的一半。锯切时，要用CT扫描验 证，断层标本的厚度与CT的扫描厚度一致，均为0.8mm。断层标本应仔细测量长度和宽度， 并逐一记录在案，将断层标本置于密封袋内，密封袋上用防水油性笔标记序号后。操作者可 将手伸出第三操作口上的密封接口的操作手套，掀起第二隔离掀帘，取出密封的断层标本， 按顺序放入-30℃医用冰冻冰柜中暂存。

操作者也可经第三操作口上的密封接口的操作手套，将手伸入半清洁腔室内，继续进行 病理取材。即先在室温下观察断层标本的病理变化，对出现形态学改变的病变区域，要进行 病灶组织取检，病理变化包括但不限于颜色、质地、实变、黏液变等。取检的病灶组织依次 进行梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡、取检组织石蜡包埋、病理组织切片、展片附贴、 组织切片二甲苯脱蜡、HE染色、梯度酒精脱水、二甲苯透明、树胶封片处理，获得HE染色 切片用于供显微镜下观察病理组织学变化。

病理取材后的断层标本用水冲洗后，采用吸水滤纸吸干断层标本表面的水分，将吸干表 面水分的断层标本置于吸水滤纸上，在阴凉避光处静置4-6小时晾干。期间注意及时更换吸 水滤纸。然后，采用20％的由胶原蛋白水解而得的明胶液涂刷断层标本的表面2次，再在防 喷溅尸检隔离装置的阴凉避光处静置晾干，用透明袋密封。

操作者将手伸出第三操作口上的密封接口的操作手套，掀起第二隔离掀帘，取出密封的 断层标本，将断层标本的两个断面分别用扫描仪扫描后，储存于电子计算机硬盘，作为永久 科研资料。

最后，掀起第二隔离掀帘，将密封的断层标本，放入半清洁腔室内，关闭第二隔离掀帘。 操作者经第三操作口上的密封接口的操作手套，将手伸入半清洁腔室内，将断层标本去除密 封，放入透明的聚甲基丙烯酸甲酯板制作的标本盒中，用三氯甲烷(氯仿)连接结合面，在 标本盒侧面用电钻钻一小孔作为注液孔，将断层标本放入标本盒内，加封上盖，经侧面注液 孔注入5％的中性福尔马林溶液，然后封堵注液孔，保存。注意结合面和注液孔的连接一定要 紧密，以免日后损坏和漏水。操作者将手伸出第三操作口上的密封接口的操作手套，掀起第 二隔离掀帘，将装有断层标本的标本盒转移至长期保存的地方。上述过程中，防喷溅尸检隔 离装置保证污染源不直接接触操作者。

本发明中制备的断层标本，如图2所示，其解剖结构清晰、病灶展示度高，能够很好的 满足大体观察所需。

本发明中制备的断层标本可通过其HE染色切片进行验证：

如图3所示，断层标本的HE染色切片中肺间质充血水肿，淋巴细胞、单核细胞浸润，致使部分肺泡间隔增宽，肺泡腔内无渗出物或仅见少量浆液，说明断层标本在显微镜下表现 符合间质性肺炎，是属于病毒性肺炎患者中间质性肺炎患者的肺脏。

再如图4所示，断层标本的HE染色切片中除了肺间质受累以外，病变还可波及肺泡腔， 肺泡腔内出现多少不等的浆液、纤维素，单核细胞、巨噬细胞等。说明断层标本在显微镜下 表现属于特别严重的病毒性肺炎。该病毒性肺炎患者的断层标本的HE染色切片中，浆液纤 维素性渗出物浓缩可以在肺泡腔面形成一层均匀红染的膜状物，即透明膜。

由此可见，本发明中制备的断层标本的HE染色切片，如图3、4所示，图像清晰、能够完美展示病毒性肺炎肺组织图像。

综上所述，本发明提供的一种基于病毒性肺炎患者肺脏的断层标本的制备方法，为后续 研究病毒性肺炎保留下珍贵的临床病理资料，避免操作者在制作过程中的不必要的感染。所 以，本发明有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。

上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技 术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡 所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等 效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。