一种烟草NtCNGC4基因在制备调控株高和叶片氨基酸含量的烟草突变体材料中的应用

摘要

本发明公开了一种烟草NtCNGC4基因在制备调控株高和叶片氨基酸含量的烟草突变体材料中的应用，突变体材料的创制方法包括以下步骤：(1)选择NtCNGC4基因中较特异的23nt核苷酸序列为CRISPR/Cas9的引导序列，并将该序列片段与CRISPR/Cas9载体进行连接、转化和PCR扩增检测，PCR阳性克隆，获得CRISPR/Cas9‑NtCNGC4编辑载体；(2)利用所构建的CRISPR/Cas9‑NtCNGC4编辑载体，进行遗传转化和组培，获得烟草NtCNGC4发生敲除编辑的植株。本发明获得的NtCNGC4基因敲除的烟草基因编辑植株较为矮小，叶片氨基酸含量显著降低。