尼罗罗非鱼mstnb纯合敲除系的建立方法及以此获得的快速生长品系

摘要

本发明提供一种尼罗罗非鱼mstnb纯合敲除系的建立方法及以此获得的快速生长品系，所述方法包括：(1)将尼罗罗非鱼mstn基因gRNA与Cas9 mRNA混合，并室温孵育获得gRNA与Cas9 mRNA的复合物；向复合物中加入小分子染料混合均匀即得CRISPR/Cas9基因编辑的显微注射液，(2)使人工授精后一细胞期尼罗罗非鱼受精卵均匀平躺于培养皿中；(3)将所述显微注射液转至微型针管中并利用显微注射仪将其注射至所述步骤(2)固定的细胞受精卵中,(4)注射后将受精卵转入26±2℃恒温循环水孵化系统中进行孵化。本发明方法获得的mstnb突变尼罗罗非鱼在七月龄较野生型体重增长50％左右，为提高尼罗罗非鱼养殖产量提供重要支撑，具有良好的应用前景。