一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用

摘要

本发明提供了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用。本发明分离克隆了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi并通过表达分析和组织染色对其启动子活性进行鉴定，进一步利用Pssi控制Cas9核酸酶的表达，开发出CRISPR/Cas9介导同源定向修复的无筛选标记系统。本发明表明，在转基因植物中，Pssi启动子可以驱动Cas9核酸酶在茎、茎尖和小穗高表达，而在愈伤组织、根、叶等器官中低表达或不表达；该系统能在单子叶植物中高效去除筛选标记基因，在T1代中即可获得大量的标记基因纯合删除植株，其筛选标记被完全删除的效率为55.6％，可以在转基因植物的后代中获取大量的无筛选标记基因植株。