抗犬胰脂肪酶特异性单链抗体、质粒载体及方法

摘要

本发明抗犬胰脂肪酶特异性单链抗体、质粒载体及方法，提供了一种重组蛋白，该重组蛋白氨基酸序列由犬胰脂肪酶的两个优势表位重复串联组成，并采用大肠杆菌偏爱密码子将重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列，化学合成核苷酸序列并构建重组表达载体，从而提高重组蛋白在大肠杆菌中的表达量。本发明还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库，经淘选筛选得到对应cPL单链抗体scfv序列，将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG抗体序列表达载体，通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体，纯化单克隆抗体，通过免疫荧光正交实验确定最佳单抗配对组合。