实现全脑突触后神经元胞体标记的重组腺相关病毒及其应用

摘要

本发明公开了一种通过将特定类型启动子介导的、耦连核定位序列H2B的荧光蛋白元件构建成双链载体，然后包装成高滴度的血清型1型重组腺相关病毒，可高效实现全脑范围内多种细胞类型突触后神经元胞体的标记。相比使用染料和其他重组腺相关病毒只能标记轴突投射的神经纤维，本发明可以直接标记神经元胞体且标记亮度和效率更高。相比于嗜神经病毒，本发明的标记毒性更小、安全性更高且能介导目的基因长时间稳定表达。本发明不仅适用于机械手工切片，而且适用于自动或半自动的全脑成像系统，用于展示突触后神经元胞体的标记。进一步的，结合全脑成像系统，能更直观在三维水平展示特定脑区和脑区内细胞突触后神经元胞体在全脑水平的整体分布以及在全脑范围内众多脑区和亚脑区的分布，还在同一个样本中并行展示和比较不同实验个体、不同脑区、同一脑区不同细胞类型对输出环路中不同脑区或不同类型突触后神经元调控强弱的差异。