一种体外筛选PD-L1的DNA核酸适配体的方法及其在癌症诊断中的应用

摘要

一种体外筛选程序性细胞死亡受体1‑配体1(PD‑L1)高亲和力和特异性DNA核酸适配体的新方法，简称内编码‑SELEX(Encoded‑SELEX)。本方法的起始随机DNA文库包含两个随机序列区域和位于其间的含有Ⅱ型限制性内切酶识别位点的固定区域(即内编码)。利用MCP‑SELEX预先富集文库，随后将文库与PD‑L1均相孵育，然后加入限制性内切酶。能够与PD‑L1结合的序列，其内编码结构被破坏，因而序列不被限制性内切酶切断，PCR扩增得以保留。所获得的核酸适配体具有内编码长度越长亲和力越高的特点，便于快速遴选高亲和力核酸适配体。荧光标记的核酸适配体成功用于正常人扁桃体组织和多种肿瘤组织切片PD‑L1表达水平的荧光成像，性能与抗体相当，具有优越应用价值。