用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的组合物

摘要

本发明提供用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的药学组合物，其包含由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

说明书

技术领域

本发明涉及用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染引发的疾病的组合物。

背景技术

严重急性呼吸综合征冠状病毒2又被称为COVID-19、SARS-CoV-2、2019-nCoV病毒。世界卫生组织(WHO)针对COVID-19宣布了国际公共卫生紧急事件(PHEIC)，并于2020年3月11日将COVID-19宣布为继香港流感(1968)、甲型H1N1流感(2009)之后的全球性流行病(pendemic)。当感染者的飞沫(唾液)渗透到呼吸道或眼睛、鼻子和嘴巴的粘膜时，会传染COVID-19。并且当感染时，在经过2～14天(估计)的潜伏期后会出现发热、咳嗽或呼吸困难等呼吸道症状以及肺炎等主要症状，但偶尔也出现无症状感染病例。

根据RNA复制和转录酶(RdRp)核酸序列的差异，冠状病毒分为α、β、γ及δ组。COVID-19病毒是一种与SARS-CoV及MERS-CoV病毒一同感染到β组人群的病毒(SubunitVaccines Against Emerging Pathogenic Human Coronaviruses.Wang N，Shang J，JiangS，Du L.Frontmicrobiol.2020Feb 28；11：298.)，COVID-19的核酸序列与SARS-CoV、MERS-CoV的一致度分别为80％和50％(Wu C.et al.Analysis of therapeutic targets forSARS-CoV-2and discovery of potential drugs by computationalmethods.2020FebActa Pharmaceutica Sinica B)。

冠状病毒是一种长度为26-32kb的阳性单链RNA病毒，当通过宿主细胞的受体进入宿主时，在制备两种大的多聚蛋白：pp1a(486kDa)、pp1ab(790kDa)之后，由此使用病毒本身的蛋白酶：3CL蛋白酶(也称为3CLpro或Mpro)来生成16种非结构蛋白，上述16种非结构蛋白包括病毒的转录(transcription)和复制(replication)所需的聚合酶(RdRp)、解旋酶(Helicase)、核糖核酸酶(ribonucleoclease)及3CLpro等(Autoprocessingmechanism ofsevere acute respiratory syndrome coronavirus 3C-like protease(SARS-CoV3CLpro)from its polyproteins.muramatsu T，Kim YT，Nishii W，Terada T，Shirouzum，Yokoyama S.FEBS J.2013may；280(9)：2002-13.doi：10.1111)。

3CLpro是一种分子量为34kDa的蛋白质(306个氨基酸)，据报道，其初始丰度是从pp1a、pp1ab自动切出的(自动加工(autoprocessing))(Autoprocessingmechanism ofsevere acute respiratory syndrome coronavirus 3C-like protease(SARS-CoV3CLpro)from its polyproteins.muramatsu T，Kim YT，Nishii W，Terada T，Shirouzum，Yokoyama S.FEBS J.2013may；280(9)：2002-13.doi：10.1111)。3CLpro是由结构域I、II、III组成的二聚体(dimer)结构，活性位点(底物结合部位)位于结构域I、II之间的裂缝(cleft)中。活性位点在冠状病毒之间良好地保存氨基酸序列及三维结构(96％的结构与SARS-CoV一致)。最近，中国的Jin Z.,组报道了COVID-19 3CLpro的结构(Protein DataBank ID 6LU7)，其中，表现出12个冠状病毒3CLpro之间的结构差异的位点为结构域III和表面环(surface loops)，并且保存的活性位点高(Structure ofmpro from COVID-19virus and discovery of its inhibitors.Jin Z，Du X，Xu Y，Deng Y，Lium，Zhao Y，Zhang B，Li X，Zhang L，Peng C，Duan Y，Yu J，Wang L，Yang K，Liu F，Jiang R，Yang X，You T，Liu X，Yang X，Bai F，Liu H，Liu X，Guddat LW，Xu W，Xiao G，Qin C，Shi Z，JiangH，Rao Z，Yang H.Nature.2020Apr9.doi：10.1038/s41586-020-2223-y)。

如上所述，由于3CLpro的氨基酸序列及结构在冠状病毒之间的变化小，尤其3CLpro的功能对病毒增殖是必备的，因而3CLpro是冠状病毒治疗剂的重要靶标之一。当前作为COVID-19治疗剂来开发中的洛匹那韦(Lopinavir，phase 3：NCT04252274、NCT04251871、NCT04255017、ChiCTR2000029539)、利托那韦(Ritonavir，phase 3：NCT04251871、NCT04255017、NCT04261270)、地瑞那韦(Darunavir，phase 3：NCT04252274)等均靶向3CLpro，这些药物最初被FDA批准为人类免疫缺陷病毒(HIV：HumanImmunodeficiency Virus)的蛋白酶抑制剂(Therapeutic options for the 2019novelcoronavirus(2019-nCoV).Li G，De Clercq E.Nat Rev Drug Discov.2020mar；19(3)：149-150.doi：10.1038)。

作为与用于改善或治疗冠状病毒感染症的药学组合物有关的技术，韩国授权专利第1913789号公开了用于治疗由冠状病毒感染引发的疾病的化合物，美国公开专利第2006-0257852号公开了与严重急性呼吸综合征冠状病毒有关的技术，但没有公开本发明的用于预防或治疗冠状病毒感染症的组合物，其包含冠状病毒3CL蛋白酶的活性抑制剂作为有效成分。

发明内容

本发明的一目的在于，提供用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的药学组合物，其包含由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的再一目的在于，提供用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的药学组合物，其包含由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的另一目的在于，提供用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的药学组合物，其包含由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的还有一目的在于，提供用于预防或改善严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的食品组合物，其包含由化学式1表示的化合物或其食品学上可接受的盐。

本发明的又一目的在于，提供用于预防或改善严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的食品组合物，其包含由化学式2表示的化合物或其食品学上可接受的盐。

本发明的又一目的在于，提供用于预防或改善严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的食品组合物，其包含：由化学式1表示的化合物或其食品学上可接受的盐；以及由化学式2表示的化合物或其食品学上可接受的盐。

本发明的又一目的在于，提供严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的治疗方法，其包括将治疗有效量的由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐给予需要其的受试者的步骤。

本发明的再一目的在于，提供严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的治疗方法，其包括将治疗有效量的由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐给予需要其的受试者的步骤。

本发明的又一目的在于，提供严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的治疗方法，其包括将治疗有效量的由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐给予需要其的受试者的步骤。

本发明的再一目的在于，提供抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2组合物，其包含由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的又一目的在于，提供抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2组合物，其包含由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的又一目的在于，提供抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2组合物，其包含由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的又一目的在于，提供3CL蛋白酶的活性抑制剂，其包含由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明的又一目的在于，提供3CL蛋白酶的活性抑制剂，其包含由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明的又一目的在于，提供3CL蛋白酶的活性抑制剂，其包含：由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐；以及由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明人发现对严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病具有预防或治疗效果的化合物并确认其对严重急性呼吸综合征冠状病毒2的抑制效果，由此完成了本发明。

本发明的一方面，本发明提供用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的药学组合物，其包含由下述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

化学式1：

由上述化学式1表示的化合物为扎鲁司特(Zafirlukast)，国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)名称为环戊基3-{2-甲氧基-4-[(邻甲苯基磺酰基)氨基甲酰基]苄基}-1-甲基-1H-吲哚-5-基氨基甲酸酯(Cyclo pentyl 3-{2-methoxy-4-[(o-tolylsulfonyl)carbamoyl]benzyl}-1-methyl-1H-indol-5-ylcarbamate)。

在本发明中，由上述化学式1表示的化合物可以抑制3CL蛋白酶活性。由此，上述化学式1的化合物可以应用于抑制已经感染严重急性呼吸综合征冠状病毒2的宿主细胞(个体)中的病毒增殖。

本发明的再一方面，本发明提供用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的药学组合物，其包含由下述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

化学式2：

由上述化学式2表示的化合物为磺吡酮(Sulfinpyrazone)，国际纯粹与应用化学联合会名称为1，2-二苯基-4-[2-(苯基亚磺酰基)乙基]吡唑烷-3，5-二酮(1，2-diphenyl-4-[2-(phenylsulfinyl)ethyl]pyrazolidine-3，5-dione)。通常已知上述磺吡酮用作血小板聚集抑制剂，并且尚未公开其抑制3CL蛋白酶活性效果或抗COVID-19效果。

在本发明中，由上述化学式2表示的化合物可以抑制3CL蛋白酶活性，因而上述化学式2的化合物可以应用于抑制已经感染严重急性呼吸综合征冠状病毒2的宿主细胞(个体)中的病毒增殖。

本发明的另一方面，本发明提供用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的药学组合物，其包含由下述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由下述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

化学式1：

化学式2：

在本发明中，包含由上述化学式1及2表示的化合物的联合用药学组合物可以抑制3CL蛋白酶活性。上述化学式1及2的化合物根据它们的组合具有协同效果，可以应用于抑制已感染严重急性呼吸综合征冠状病毒2的宿主细胞(个体)中的病毒增殖。

在本发明中，由上述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由上述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐能够以1：99的重量比至99：1的重量比混合，但不限于此。

并且，在本发明中，由上述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由上述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐可以被同时、分别或依次联合给药，并且可以单次或多次给予。考虑到所有上述因素，重要的是以能够以最小量获得最大效果而没有副作用的量给药，这可以由本发明所属技术领域的普通技术人员容易确定。

具体地，本发明的包含上述化学式1的化合物的组合物、包含化学式2的化合物的组合物或包含化学式1及2的化合物的组合物可以抑制在个体感染严重急性呼吸综合征冠状病毒2后，病毒处理相关蛋白质以在个体中增殖的蛋白质分段步骤。这不同于抑制病毒感染第一阶段的活性，尤其不同于抑制病毒宿主细胞(个体)感染的结合(病毒进入(entry))的机制。

以下，将详细描述本发明。

本发明中所使用的术语仅用于描述特定实施例，而并非旨在限定本发明。除非在文脉上明确表示不同的含义，单数的表达包括复数的表达。在本发明中，“包括”或“具有”等术语所要指定说明书中所记载的特征、步骤、结构或这些组合的存在，而不得理解为预先排除一个或一个以上的其他特征或步骤、结构或这些组合的存在或附加可能性。

除非另有定义，否则包括技术性或科学性的术语在内的所有术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。诸如词典中所定义的术语之类的通常使用的术语应被解释为具有与相关技术的文脉中所具有的含义一致的含义，除非在本发明中明确定义，否则不应以理想性或过于形式化的含义来解释。

在本发明中，抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2可以表示对严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病，即，严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或由此引发的疾病的预防性治疗或改善。并且，抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2可以被解释为降低病毒活性的所有行为，包括抑制严重急性呼吸综合征冠状病毒2在受试者中的增殖、死亡等。

在本说明书中，上述“预防“是指通过给予上述药学组合物来抑制或延迟由严重急性呼吸综合征冠状病毒2的感染或由严重急性呼吸综合征冠状病毒2的感染引发的疾病的所有行为。并且，上述“治疗”是指通过给予上述药学组合物来改善或有益地改变由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染引发的疾病症状的所有行为。

由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染引发的疾病可以是呼吸道疾病。例如，上述严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病可以在病毒感染后经过2天至14天的潜伏期后出现症状。这些症状包括例如高烧、咳嗽、呼吸短促、肺炎、腹泻等胃肠道症状、器官功能不全(肾衰竭、肾功能不全等)、败血性休克、严重时甚至是死亡，并且包括由上述病毒感染引发的任何症状。

本发明的由上述化学式1表示的化合物或由上述化学式2表示的化合物不仅包括其药学上可接受的盐，而且包括可通过常规方法制备的异构体、水合物及溶剂化物。

在本发明中，药学上可接受的盐是指通常用于医药行业的盐，例如包括：由钙、钾、钠、镁等制成的无机盐；由盐酸、硝酸、磷酸、溴酸、碘酸、高氯酸和硫酸等制成的无机酸盐；由乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、马来酸、琥珀酸、草酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、丙酸、乳酸、乙醇酸、葡萄糖酸、半乳糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、葡萄糖醛酸、天冬氨酸由酸、抗坏血酸、碳酸、香草酸、氢碘酸等制成的有机酸盐；由甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸和萘磺酸制成的磺酸盐；由甘氨酸、精氨酸、赖氨酸等制成的氨基酸盐；以及由三甲胺、三乙胺、氨、吡啶、甲基吡啶等制成的胺盐等，但本发明中表示的盐的种类不受所列出的这些盐的限制。

上述药学上可接受的盐还可以相应地适用于食品学上可接受的盐。

本发明的药学组合物可以进一步包含不增加药效但通常用于药学组合物来可提高气味、味道、视觉等的成分。并且，本发明的药学组合物可以进一步包含药学上可接受的添加剂。药学上可接受的添加剂包括，例如淀粉、糊化淀粉、微晶纤维素、乳糖、聚维酮、胶体二氧化硅、磷酸氢钙、乳糖、甘露醇、糖浆、阿拉伯胶、预胶化淀粉、玉米淀粉、粉状纤维素、羟丙基纤维素、欧巴代、羟乙酸淀粉钠、巴西棕榈铅、合成硅酸铝、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸铝、硬脂酸钙、白糖、右旋糖、山梨糖醇和滑石粉等，但不限于此。另外，上述药学组合物可以包含具有单独使用或以往使用的抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2活性的物质。

本发明的上述药学组合物包含药学上可接受的载体，并且可以配制成用于口服或非口服的人体或兽医用。当配制本发明的药学组合物时，可以使用填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂和表面活性剂等稀释剂或赋形剂。用于口服给药的的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂及胶囊剂等，这些固体制剂可以通过在含有本发明的化合物的药学组合物中混合至少一种赋形剂例如淀粉、碳酸钙(Calcium carbonate)、蔗糖(Sucrose)或乳糖(Lactose)及明胶等来制备。并且，除了简单的赋形剂之外，还可以使用镁、硬脂酸酯及滑石粉等润滑剂。用于口服的液体制剂包括悬浮剂、口服液剂、乳剂及糖浆剂等，除了作为通常使用的简单稀释剂的水及及石蜡之外，还可以包括各种赋形剂，例如保湿剂、甜味剂、芳香剂及防腐剂等。用于非口服给药的制剂包括无菌水溶液、非水溶液、悬浮液、乳剂、冻干制剂及栓剂。作为非水溶剂及悬浮溶剂，可以使用诸如丙二醇(Propylene glycol)、聚乙二醇及橄榄油之类的植物油，以及诸如油酸乙酯之类的可注射酯等。作为栓剂的基质，可以使用维比索尔(witepsol)、聚乙二醇、吐温61、可可脂、月桂酸酯、甘油明胶等。

本发明的“水合物”是指由上述化学式1表示的化合物或由上述化学式2表示的化合物中，水通过分子间力非共价键合，并且可以包括化学计量或非化学计量的水。具体地，基于1摩尔的活性成分，上述水合物能够以约0.25摩尔至约10摩尔的比例包含水，更加具体地，能够以约0.5摩尔、约1.5摩尔、约2摩尔、约2.5摩尔、约3摩尔等的比例包含水，但不限于此。

本发明的“溶剂化物”是指由上述化学式1表示的化合物或由上述化学式2表示的化合物中，溶剂而并非为水通过分子间力键合，并且可以包括化学计量或非化学计量的水。具体地，基于1摩尔的活性成分，上述水合物能够以约0.25摩尔至约10摩尔的比例包含水，更加具体地，能够以约0.5摩尔、约1.5摩尔、约2摩尔、约2.5摩尔、约3摩尔等的比例包含水，但不限于此。

本发明的药学组合物可以根据期望的方法口服给药或非口服给药，当非口服给药时，优选地，选择皮肤外用或腹腔内注射、直肠内注射、皮下注射、静脉注射、肌肉内注射、胸部内注射的注入方式。

并且，本发明的药学组合物可通过吸入给药。其可将药物直接输送到肺部，并且无毒且能够以少量的剂量表现出更长的作用持续时间。吸入给药可以使用可通过气道、鼻腔等吸入的药学制剂进行给药，上述药学制剂可包括含有药物的可吸入粒子或液滴。这些吸入给药不限于此，例如，可以使用干粉吸入装置(DPI)或压缩计量吸入器(pressurizedmetered dose inhaler，pMDI)之一。药物粒子被轻轻地(lightly)压缩到例如包含在输送装置(干粉吸入器)内部的易碎(frangible)基质内。当操作时，输送装置从基质磨蚀(abrades)一些药物粒子，并将它们分散到将药物粒子输送到气道的吸气口中。代替性地，药物粒子可以是包含在输送装置(干粉吸入器)的储存室内部的自由流动性(freeflowing)粉末。储存室可以是装置内部的一体型腔室，或者是小皿、泡罩或操作前插入于装置内部的性能相似的储存室。当操作时，装置将一些药物粒子从储存室分散出来后，将它们分散到将药物粒子输送到气道的吸气口中。

可以将本发明的上述药学组合物给予个体来预防或治疗由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或严重急性呼吸综合征冠状病毒2引发的疾病。本发明中所使用的术语“个体”或“受试者”是指患有由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或严重急性呼吸综合征冠状病毒2引发的疾病，以及患有通过给予本发明的上述药学组合物可使症状好转的疾病的包括人类在内的马、绵羊、猪、山羊、狗等哺乳动物，但优选指人类。

本发明中所使用的术语“给药”是指通过任何合适的方法将本发明的药学组合物引入个体。给药途径可以通过可到达靶标组织的任何普通途径口服或非口服给药。并且，本发明的药学组合物可通过可将其移动到靶标细胞的任何装置来给药。

本发明的药学组合物以药学有效量给药。本发明中所使用的术语“药学有效量”是指足以以适用于医学治疗的合理的受益/风险比来治疗疾病的量，有效量水平可根据患者的体重、性别、年龄、健康状况、严重程度、药物活性、对药物的敏感性、给药时间、给药途径和排泄率、治疗期间、包括同时使用的药物在内的因素以及其他医学领域众所周知的因素来确定。本发明的药学组合物可以作为单独的治疗剂给药或与其他治疗剂联合给药，并且可以与以往的治疗剂依次或同时给药，可以单次或多次给药。考虑到所有上述因素，重要的是以能够以最小量获得最大效果而没有副作用的量给药，这可以由本发明所属技术领域的普通技术人员容易确定。

例如，在本发明的药学组合物中，可将由上述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以0.0001mg/kg至500mg/kg的剂量，优选以0.001mg/kg至100mg/kg的剂量给药，上述给药能够一天一次或分次给药。

并且例如，在本发明的药学组合物中，可将由上述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐以0.0001mg/kg至500mg/kg的剂量，优选以0.001mg/kg至100mg/kg的剂量给药，上述给药能够一天一次或分次给药。

并且例如，在本发明的药学组合物中，可将由上述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由上述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐以上述提及的适当给药范围的组合来给药。

除了由上述化学式1表示的化合物和/或由上述化学式2表示的化合物之外，本发明的上述药学组合物还可包含表现出相同或相似药效的一种以上的有效成分。

本发明提供严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染引发的疾病的预防或治疗方法，其包括以治疗有效量给予组合物的步骤，上述组合物包含由上述化学式1表示的化合物；由上述化学式2表示的化合物或由上述化学式1表示的化合物及由上述化学式2表示的化合物的组合。

本发明中所使用的术语“治疗有效量”是指有效预防严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染引发的疾病的由上述化学式1表示的化合物；由上述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐或由上述化学式1表示的化合物及由上述化学式2表示的化合物的组合量。

本发明提供严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的治疗方法，其包括将治疗有效量的由上述化学式2表示的化合物或由上述化学式1表示的化合物及由上述化学式2表示的化合物的组合给予需要其的受试者的步骤。

通过给予包含由上述化学式1表示的化合物或由化学式2表示的化合物组合物，不仅在征兆发作之前治疗疾病本身，而且抑制或避免其征兆。在疾病的管理中，特定活性成分的预防或治疗剂量可根据疾病或状态的本质(nature)和严重程度以及活性成分的给药途径而变化。剂量及剂量频率可根据个别患者的年龄、体重及反应而变化。本发明所属技术领域的普通技术人员可考虑这些因素来容易选择合适的剂量用法。

上述受试者可以是包括人类在内的哺乳类等。

上述治疗方法还可包括与由上述化学式1表示的化合物；由上述化学式2表示的化合物；或组合物一同给予治疗有效量的有助于治疗疾病的附加活性制剂的步骤，上述组合物包含由上述化学式1表示的化合物及由上述化学式2表示的化合物的组合，附加活性制剂可以与包含由上述化学式1表示的化合物或由化学式2表示的化合物的组合物一同表现出协同效果或辅助效果。

本发明还提供用于制备严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染引发的疾病的治疗用药剂的由上述化学式1表示的化合物；由上述化学式2表示的化合物；或包含由上述化学式1表示的化合物及由上述化学式2表示的化合物的组合的组合物的用途。可在用于制备药剂的由上述化学式1或2表示的化合物中混合可接受的助剂、稀释剂、载体等，并通过与其他活性制剂一同制成复合制剂来具有活性成分的相乘作用。

本发明提供用于治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的由化学式1表示的化合物；由上述化学式2表示的化合物；或由上述化学式1表示的化合物及由上述化学式2表示的化合物的组合。

本发明提供用于预防或治疗严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的由上述化学式1表示的化合物；由上述化学式2表示的化合物；或由上述化学式1表示的化合物及由上述化学式2表示的化合物作为有效成分的药学组合物。

本发明的还有一方面，提供抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2组合物，其包含由上述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的又一方面，提供抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2组合物，其包含由上述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的又一方面，提供抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2组合物，其包含由上述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由上述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。

本发明的又一方面，提供3CL蛋白酶的活性抑制剂，其包含由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明的又一方面，提供3CL蛋白酶的活性抑制剂，其包含由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明的又一方面，提供3CL蛋白酶的活性抑制剂，其包含由化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐。

由于3CLpro的氨基酸序列及结构在冠状病毒之间的变化小，尤其3CLpro的功能对病毒增殖是必备的，因而可将3CLpro用作冠状病毒治疗剂的重要靶标之一。

在本发明中，由上述化学式1表示的化合物；由上述化学式2表示的化合物；或由上述化学式1表示的化合物及由上述化学式2表示的化合物的组合对3CL蛋白酶的活性具有优异的抑制效果。

可从上述中确认，本发明的扎鲁司特、磺吡酮以及扎鲁司特和磺吡酮可在肺部病变率方面表现出非常优异的改善效果，因而可以表现出对感染的快速治疗及改善效果。

除非相互矛盾，否则在本发明的用途、组合物、治疗方法中提及的事项同样适用。

本发明的又一方面，本发明提供用于预防或改善严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的食品组合物，其包含由下述化学式1表示的化合物或其食品学上可接受的盐。

化学式1：

本发明的又一方面，本发明提供用于预防或改善严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的食品组合物，其包含由下述化学式2表示的化合物或其食品学上可接受的盐。

化学式2：

本发明的又一方面，提供用于预防或改善严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染疾病的食品组合物，其包含由下述化学式1表示的化合物或其食品学上可接受的盐以及由下述化学式2表示的化合物或其食品学上可接受的盐。

化学式1：

化学式2：

在上述药学组合物中的描述内容均可适用于由上述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐以及由上述化学式2表示的化合物或其药学上可接受的盐。

在本发明中，上述食品组合物可以原样添加活与其他食品或食品成分一同使用，并且可以根据常规方法适当地使用。

在本说明书中，上述“食品组合物”是指使用具有对人体有用的功能性的原料或成分来制备及加工的食品。

上述食品的种类没有特别的限制。可以添加到包含由上述化学式1表示的化合物或其食品学上可接受的盐的组合物中的食品的例子包括各种汤、饮料、茶、口服液、酒精饮料及维生素复合剂等，可以包括常规含义上的所有保健食品。除上述之外，本发明的包含由上述化学式1表示的化合物或其食品学上可接受的盐的组合物可含有各种营养剂、维生素、电解质、调味剂、着色剂、果胶及其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、乙醇、碳酸饮料中使用的碳酸化剂等。另外，本发明的食品组合物可以含有用于制备天然果汁、果汁饮料和蔬菜饮料的果肉。这些成分可以单独使用或混合使用。

本发明的药学组合物具有预防或治疗由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或严重急性呼吸综合征冠状病毒2引发的疾病的效果。

本发明的食品组合物具有预防或改善由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染或严重急性呼吸综合征冠状病毒2引发的疾病的效果。

附图说明

图1示出基于AI新药平台(DeepMatcher

图2通过图表示出本发明的化学式1及化学式2的化合物的细胞毒性评价及细胞病变抑制功效评价结果。

图3示出在使用本发明的化学式1及化学式2的化合物处理之前和之后的细胞形态的观察结果。

图4示出本发明的化学式1及化学式2的化合物的3CL蛋白酶活性的结果。

图5示出本发明的化学式1及2的化合物的ACE2和SARS-CoV-2 Spike S1蛋白质结合活性的药物功效评价结果。

图6示出用于根据肺叶(Lung lobe)分为①至⑤，并根据重量评价肺部病变率的基准的肺部图。

图7为示出肉眼治疗率的确认结果的图，其中，NC(阴性对照组(Negativecontrol))、VC(病毒对照组(Virus control))、PC(阳性对照(Positive control)、瑞德西韦(Remdesivir))、Za(扎鲁司特(Zafirlukast))、Za+Sulf(扎鲁司特和磺吡酮)。

图8示出通过进行实验确认的肉眼肺部病变率。

具体实施方式

为了便于理解本发明而提出实施例。提供下述实施例仅仅是为了更加便于理解本发明，而本发明内容不限于实施例。

制备例1.扎鲁司特(Zafirlukast)

使用了商购的扎鲁司特(CAS Number：107753-78-6)。

制备例2.磺吡酮(Sulfinpyrazone)

使用了商购的磺吡酮(CAS Number：57-96-5)。

制备例3.扎鲁司特和磺吡酮的联合使用

将上述扎鲁司特及磺吡酮联合使用。

实施例1.抑制COVID-19 3CL蛋白酶的候选化合物的筛选

在本发明中，基于COVID-19 3CL蛋白酶的蛋白质-配体复合体结构信息(ProteinData Bank ID 6LU7：The crystal structure of COVID-19main protease in complexwith an inhibitor N3，DOI：10.2210/pdb6LU7/pdb)，通过基于AI新药平台(DeepMatcher

实施例2.SARS CoV-2抗病毒(细胞病变抑制作用)药物评价

-材料(药物)：扎鲁司特、磺吡酮

-试验病毒及细胞株：一种SARS CoV-2(NCCP-43326)，VERO细胞(cell)

-试验浓度及重复次数：2剂量(Dose)(10-20μM)/重复2次

实施例2-1：细胞毒性测定(Cell cytotoxicity assay)(细胞毒性评价)

-将DMEM(5％FBS，1％Antibiotic-Antimycotic)用作细胞培养液，并通过MTT测定法(mTT assay)对试验试样(药物)进行了细胞毒性评价。并且，当制备不同试验浓度的试样时所使用的溶剂(DMSO)的最终浓度为0.5％以下。

按以下顺序进行了细胞毒性评价。

1)以每孔5×10

2)在将以不同试验浓度制备的试样(药物)以100μL/well分株(包括培养液)后，在37℃、5％CO

3)在确认细胞状态后，以10μL/well添加MTT溶液，然后在37℃、5％CO

4)在反应4小时后，以100μL/well添加MTT溶液(solution)，然后使用沉淀物充分溶解甲腊(formazan)晶体，并用酶标仪(plate reader)在570nm测量了吸光度。

5)根据正常细胞和用试验试样(药物)处理的组的比例，按下述式1计算细胞毒性比。

数学式1

细胞存活率(Cell Viability)(％)＝Test OD/Control OD×100％

实施例2-2：CPE减少测试(细胞病变抑制率(CPE Reduction)Test)(细胞病变抑制功效评价)

以如下方法进行了细胞病变抑制功效评价。

1)以每孔5×10

2)使用DMEM(不含FBS(FBS free)，1％抗生素-抗真菌剂(antibiotic-antimycotic))培养基以100μL/well分株后，在37℃、5％CO

3)感染1小时后，去除病毒，然后将以不同试验浓度制备的试样(药物)以100μL/well分株(包括培养液)后，在37℃、5％CO

4)在确认细胞状态后，以10μL/well添加MTT溶液，然后在37℃、5％CO

5)在反应4小时后，以100μL/well添加MTT溶液(solution)，然后使用沉淀物充分溶解甲腊(formazan)晶体，并用酶标仪(plate reader)在570nm测量了吸光度。

6)根据正常细胞和用试验试样(药物)处理的组的比例，按下述式2计算细胞毒性比。

数学式2

Virus inhibition rate(％)＝(Test OD-Virus OD)/(Control OD-Virus OD)×100％

根据上述实施例2-1及实施例2-2确认的基于细胞毒性的抗COVID-19功效评价结果如下表1及图2。

表1

进行抗COVID-19功效评价的结果，参照表1及图2，确认到扎鲁司特和/或磺吡酮药物均具有优异的细胞存活率，以20μM为准，扎鲁司特具有75.6±3.9％的细胞病变抑制功效，磺吡酮具有40.7±8.0％的细胞病变抑制功效。

实施例3.根据药物处理的细胞形态的观察

-材料(药物)：扎鲁司特、磺吡酮

-试验病毒及细胞株：一种SARS CoV-2(NCCP-43326)，VERO细胞(cell)

-试验浓度及重复次数：2剂量(10-20μM)/重复2次

针对用病毒处理之前和之后的每个细胞，观察了当用药物处理时发生的细胞形态变化，其结果示于图3。

如图3中所确认，在对照组中，可以确认到被病毒感染的细胞(Virus)的形态变化大于未被病毒感染的细胞(Nomal)。

相反，可以确认到，在被病毒感染的细胞上用扎鲁司特和磺吡酮处理的每个实验组的形态变化小。

实施例4.3CL蛋白酶(3-chymotrypsin-like protease)抑制功效分析(assay)

-材料(药物)：扎鲁司特、磺吡酮

-试验3CL Protease：

GC376 is purchased from Aobious(catalog number AOB36447)

3CL蛋白酶测定(3CL Protease assay)Buffer(BPS catalog number 79956)

3CL Protease Substrate(BPS catalog number 79952)

-试验浓度及重复次数：10剂量(0.001-30μM)/重复2次

以如下方法进行了使用时差荧光共振能量转移测定法的3CL Protease抑制功效分析。

1)将每种药物以10mM的浓度溶解在100％DMSO中来使用，并在保持100％DMSO浓度的同时进行了中间稀释过程。

2)用3CL蛋白酶测定(3CL Protease assay)缓冲液将该化合物稀释67.5倍后，用10ul的稀释试样和40ul的缓冲液制备了DMSO浓度为0.3％的50ul反应液。

3)使每种药物在室温下静置30分钟后，混合以使3CL蛋白酶的底物的最终浓度达到50uM。

4)使该反应物在常温下反应12小时以上。

5)然后，从Infinitem1000酶标仪(Tecan)中读取TR-FRET信号。

由此确认的SARS-CoV-2 3CL蛋白酶蛋白活性的药物功效评价结果如下表2、表3及图4。

表2

表3

参照表2、3及图4，确认到浓度为30μM的扎鲁司特抑制3CL蛋白酶的活性约为45％以上，浓度为30μM的磺吡酮抑制3CL蛋白酶的活性约为20％。因此，确认到扎鲁司特和/或磺吡酮对3CL蛋白酶(3-chymotrypsin-like protease)的活性具有抑制效果。

实施例5.通过CE2：Spike S1时差荧光共振能量转移分析评价药物对ACE2和SARS-CoV-2Spike S1蛋白质结合活性的功效

-材料(药物)：扎鲁司特、磺吡酮

-试验ACE2及Spike S1蛋白：

ACE2，His-Tag，Eu-labeled(BPS Bioscience，100705)

Spike S1，Fc fusion，Avi-tag，Biotin Labeled(SARS-CoV-2)(BPS Bioscience，100679)

Anti-Spike，Neutralizing Antibody(Activemotif，91361)

-试验浓度及重复次数：10剂量(0.002-30μM)/重复2次以如下方法进行了ACE2：Spike S1时差荧光共振能量转移分析。

1)使用1x ACE2-Spike TR-FRET缓冲液将ACE2-Eu稀释至1ng/uL(12nm)后，以5uL的量分株到每个孔中。

2)使用1x ACE2-Spike TR-FRET缓冲液将染料标记(Dye-labeled)的受体稀释100倍后，将稀释的染料标记的受体以5uL的量添加到每个孔中。

3)将以不同浓度制备的试样(药物)以5uL的量添加到孔中。

4)使用1x ACE2-Spike TR-FRET缓冲液将Spike S1-Biotin稀释至20ng/uL(200nm)后，将稀释的Spike S1-Biotin以5uL的量添加到被指定为试验组和对照组的孔中。

5)将1x ACE2-Spike TR-FRET缓冲液以5uL的量添加到未添加的剩余孔中，并在室温下将孔板培养1小时。

6)然后，从Infinite M1000酶标仪(Tecan)中读取TR-FRET信号。

由此确认的ACE2和SARS-CoV-2Spike S1蛋白结合活性的药物功效评价结果如下表4、表5及图5。

表4

表5

参照上表4、表5及图5，确认到扎鲁司特及磺吡酮对ACE2和Spike S1蛋白的结合没有抑制功效。即，确认到扎鲁司特及磺吡酮并不是通过结合到ACE2和Spike S1来发挥作用效果的药物，而是可通过抑制3CL蛋白酶来表现出疾病治疗效果的药物。

实施例6.使用叙利亚仓鼠(Syrian Hamster)评价感染严重急性呼吸综合征冠状病毒2的动物模型中的药物功效

使用叙利亚仓鼠动物模型确认了对严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染的治疗效果。

实验根据下表6的条件进行。

表6

根据上述条件，通过给予严重急性呼吸综合征冠状病毒2来进行实验。对试验组的条件如下表7。

表7

根据上述条件配置了实验装置。

使用异氟烷(Isoflurane)进行了10分钟的呼吸麻醉，将100μL经准备的SARS-Cov-2病毒滴入仓鼠鼻腔来使仓鼠感染后，使用探头将准备的药物口服给予仓鼠500μL。在感染后第4天(PID4)，对通过尸检收集的肺组织进行了肉眼肺部病变率的评价。肉眼肺部病变率根据病毒组与试验组的比例通过下述式计算。

具体地，如图6所示，根据肺叶(Lung lobe)将肺部分为①至⑤，并根据每个部分的重量评价肺部病变率。该标准示于下表8。

表8

根据上述表8的标准，进行了肉眼治疗率评价，并通过下述式确认结果值，其结果示于图7。

数学式3

肉眼治疗率＝试验组肺炎发病率/病毒组肺炎发病率Х100

图7示出肉眼治疗率。可从图7中确认，与严重急性呼吸综合征冠状病毒2单独感染组(严重感染模型、肺病变率62％)相比，连续给药约5天的治疗功效如下：确认到扎鲁司特(60mg/kg/day)+磺吡酮(120mg/kg/day)的治疗率为94.3％，扎鲁司特(60mg/kg/day)的治疗率为58.7％。另一方面，作为对照药物的瑞德西韦(Remdesivir)(5mg/kg/day)表现出44.3％的治疗率。从上述中可以确认，与作为对照药物的瑞德西韦相比，本发明的扎鲁司特、扎鲁司特和磺吡酮表现出显著优异的治疗效果。并且，扎鲁司特、扎鲁司特和磺吡酮在双侧肺炎、肺水肿和肺出血方面均表现出优异的改善效果，尤其是扎鲁司特和磺吡酮在临床上表现出最优异的治疗功效，并且没有异常发现或异常临床症状。

并且，图8中具体示出通过进行上述实验来确认的肉眼肺部病变率。图8中的缩写如下：NC(阴性对照组(Negative control))、VC(病毒对照组(Virus control))、PC(阳性对照(Positive control)、Za(扎鲁司特)、Z+S(扎鲁司特和磺吡酮)。

可从上述中确认，本发明的Za(扎鲁司特)、Z+S(扎鲁司特和磺吡酮)在肉眼肺部病变率方面表现出非常优异的改善效果。尤其，确认到扎鲁司特和磺吡酮表现出直至接近正常对照组水平的非常优异的改善效果。

实施例7.使用叙利亚仓鼠评价感染严重急性呼吸综合征冠状病毒2的动物模型中的磺吡酮的药物功效

使用叙利亚仓鼠动物模型确认了磺吡酮对严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染的治疗效果。

实验根据下表9的条件进行。

表9

根据上述条件，通过给予严重急性呼吸综合征冠状病毒2来进行实验。对试验组的条件如下表10。

表10

根据上述条件配置实验装置，并评价了肺部病变率，以与实施例中进行的方法相同的方法进行肉眼治疗率评价方法，其结果示于下表11。

表11

从图11中的肉眼治疗率分析结果可知，与严重急性呼吸综合征冠状病毒2单独感染组相比，连续给药约4天的治疗功效的结果，确认到磺吡酮(50mg/kg/day)的治疗率为15.6％。

可从上述中确认，本发明的磺吡酮在肉眼治疗率方面表现出改善效果。

本说明书中省略了针对本发明所属技术领域的普通技术人员可充分认识和类推的内容的详细描述，除了本说明书中描述的具体示例之外，可以在不改变本发明的技术思想或必要结构的范围内进行更多种变形。因此，能够以与本说明书中具体描述和例示的方式不同的方式实施本发明，这是本发明所属技术领域的普通技术人员可以理解的。