敲除ACE2基因的胚胎干细胞细胞亚系、构建方法及其应用

摘要

本发明公开了一种敲除多能干细胞中ACE2基因的方法，包括采用一对核苷酸序列如SEQ ID No.5～8所示的sgRNA，分别克隆到质粒载体上后，与Cas9质粒共转染多能干细胞。本发明还公开了该敲除方法所采用的一对sgRNA、质粒与成套质粒，一种敲除ACE2基因的胚胎干细胞细胞亚系的构建方法，以及一种敲除ACE2基因的人源分化细胞模型的建立方法。本发明在多能干细胞上的双gRNA敲除方法具有敲除效率高、容易操作的优点。基于该敲除方法所构建的胚胎干细胞细胞亚系可发展为任意免于新冠病毒侵染的人源性细胞/组织/类器官模型，在研究治疗新冠病毒的药物和疫苗研发等方面具有极为重要的意义。