硝酸钙在缓解湖羊酸中毒中的应用

摘要

本发明提供了硝酸盐在缓解湖羊酸中毒中的应用。本发明在饲料中添加硝酸钙喂养湖羊提高瘤胃液乙酸/总酸比例和氨态氮的含量，且处理与时间表现出显著的交互作用；硝酸钙可使湖羊瘤胃液pH维持在较高水平，缓解湖羊的酸中毒。

说明书

技术领域

本发明属于畜牧饲养技术领域，具体涉及一种硝酸钙在缓解湖羊酸中毒中的应用。

背景技术

现有技术中，硝酸盐不仅可以用作非蛋白质氮的来源，还可以改变反刍动物胃肠道内环境和血清指标。反刍动物瘤胃内环境的稳态对其自身健康至关重要。动物在采食含有硝酸盐的饲粮后，硝酸盐在瘤胃内通过微生物的作用，将其先还原成亚硝酸盐，最终生成氨态氮。在这个过程中，硝酸盐还原需要消耗氢，由于丙酸合成中也需要氢的参与，因此氢的减少会抑制丙酸产生而促进乙酸生成。除此之外，氢的减少也有助于缓解对纤维降解菌的抑制作用。硝酸盐代谢的中间产物亚硝酸盐具有较强的氧化能力，可能降低机体内抗氧化因子和机体抗氧化能力。但目前有关硝酸盐的研究大都集中在甲烷减排方面，对湖羊瘤胃动态发酵和血清抗氧化指标影响的研究较少。因此，本发明将在饲粮中添加硝酸钙，研究其对湖羊瘤胃动态发酵和血清抗氧化能力的影响。

为提高反刍动物生产效率，牛羊育肥过程中通常会提高精饲料比例，但这也会增加瘤胃酸中毒的风险，因此，瘤胃酸中毒是目前牛场和羊场较为普遍的营养代谢病。目前较常用的做法是在牛羊饲粮中添加小苏打等碱性物质，但这不能提高饲粮营养价值。本发明在不增加饲养成本和人力物力的基础上，在湖羊饲粮中添加硝酸钙，既起到提高饲粮粗蛋白质水平的作用，又有效提高湖羊瘤胃pH，缓解酸中毒，是一种非常有效的手段。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种硝酸盐在缓解湖羊酸中毒中的应用。

为实现上述目的，本发明采用以下的技术方案为：

硝酸盐在缓解湖羊酸中毒中的应用。

如上所述的应用，优选地，所述硝酸盐的用量为在饲料中占1～3％。

如上所述的应用，优选地，所述饲料包括按质量份计的玉米秸秆15～18 份，大豆皮9～11份，葵花皮1～3份，玉米45～50份，豆粕10～12份，芝麻饼2～4份，糖蜜3～6份，石粉0.2～0.5份，NaCl 0.60～0.8份，预混料 0.5～1.50份，硝酸盐1～3.5份。

如上所述的应用，优选地，预混料为每kg饲料提供铁(Fe)25mg，锰(Mn) 40mg，锌(Zn)40mg，铜(Cu)8mg，碘(I)0.3mg，硒(Se)0.2mg，钴(Co)0.1mg，维生素A(VA)940IU，维生素D(VD)111IU，维生素E(VE)20IU。

如上所述的应用，优选地，所述饲料包括按质量份计的玉米秸秆17.76 份，大豆皮10.34份，葵花皮2.00份，玉米48.60份，豆粕11.35份，芝麻饼 3.00份，糖蜜5.00份，石粉0.25份，NaCl 0.70份，预混料1.00份，硝酸盐 3份。

如上所述的应用，优选地，所述硝酸盐为硝酸钙。

本发明的有益效果在于：

本发明提供了硝酸钙对在缓解湖羊酸中毒中的应用，在饲料中添加硝酸钙提高湖羊瘤胃液乙酸/总酸比例和氨态氮的含量，且处理与时间表现出显著的交互作用；硝酸钙既提高湖羊瘤胃微生物菌体蛋白合成的氮源供应，又通过促进纤维降解菌的增殖来提高湖羊瘤胃纤维物质的消化吸收，有效提高养分利用率，又有效地使湖羊瘤胃液pH维持在较高水平，缓解湖羊的酸中毒。

附图说明

图1为湖羊瘤胃pH值24h动态变化。

具体实施方式

以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下，对本发明所作的修饰或者替换，均属于本发明的范畴。

若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，除另有规定，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格。

实施例1

选择安有永久瘤胃瘘管湖羊6只，随机分为2组，每组3只，每只为一个重复。对照组饲喂基础饲粮，试验组饲喂添加3％硝酸钙的饲粮。试验共进行30天，分2期进行，每期15d，其中过渡期(更换饲料并让湖羊适应试验条件和饲料)10d，正试期(正式开始采集样品)5d，湖羊自由采食。试验于中国科学院寒区旱区环境与工程研究所皋兰试验站完成。在挑选试羊之前，用强力消毒灵对试验所用羊舍进行全方位消毒，消毒后的羊舍让其舍内消毒液挥发一段时间后再进羊，以免造成羊只的不适感。试验正式开始后，采用单笼饲养，每天分早上和下午各喂一次饲粮，使其自由采食，自由饮水。所用饲料组成(按质量份计)及其营养成分见表1-1，饲料由甘肃润牧生物工程有限责任公司生产加工。

表1-1饲粮组成及其营养成分表(干物质基础)

其中，预混料为每kg饲料提供：铁(Fe)25mg，锰(Mn)40mg，锌(Zn)40mg，铜(Cu)8mg，碘(I)0.3mg，硒(Se)0.2mg，钴(Co)0.1mg，维生素A(VA)940IU，维生素D(VD)111IU，维生素E(VE)20IU。

一、瘤胃液采集：正试期第4、5d采集食后0h、1h、3h、5h和7h的瘤胃液。将试羊瘤胃瘘管塞去除后用烧杯接取瘤胃食糜，然后用4层纱布过滤，过滤后的瘤胃液装入15mL离心管，随后立即在-80℃进行保存，用于挥发性脂肪酸(volatile fatty acid，VFA)和氨态氮的测定。

1、瘤胃液中VFA的测定：瘤胃液在5000rpm离心10min后取1mL上清液置于1.5mL离心管中，加入0.2mL 25％的偏磷酸溶液(含内标物2-乙基丁酸)，充分混匀后置于冰水浴30min以上，然后在10000rpm离心10min，取出离心管后用移液枪移取上清液于气相小瓶中后上机测定。使用安捷伦 6890N气相色谱仪和HP19091N-213色谱柱测定VFA。色谱分析条件为：进样口温度为220℃，分流比为40:1，氮气流量为2.0mL/min。检测器温度为 250℃，空气流量为450mL/min，氮气流量为45mL/min，氢气流量为40 mL/min。程序升温：初温为120℃3min，后以10℃/min升温至180℃，并保持1min。进样量为0.6μL。

2、瘤胃液中氨态氮的测定：参考王世琴.补饲料NDF水平对哺乳羔羊消化道发育的影响[D].兰州:甘肃农业大学,2013.中方法测定瘤胃液中氨态氮含量。瘤胃液5000rpm离心10min后移取1mL上清液转入10mL离心管中，加入4mL 0.2M盐酸后摇匀。然后吸取混合液0.2mL，置于5mL离心管内，依次加入A液(含有0.08g亚硝基铁氰化钠的100mL 14％水杨酸钠溶液)1mL 和B液(含有2mL次氯酸钠溶液的100mL 0.3M NaOH溶液)1mL，充分摇匀，静置10min。然后移取200μL混匀液置于96孔板中，使用酶标仪测定波长700nm下的吸光度值。根据氨态氮标准曲线计算瘤胃液中氨态氮含量。

测得的湖羊瘤胃液VFA和氨态氮浓度的结果见表1-2。所测的数据均用 Excel整理，并使用SPSS 22.0软件对数据进行一般线性混合模型单变量方差分析，以P≤0.05表示组间差异显著，以0.05

表1-2饲粮添加硝酸钙对湖羊瘤胃液VFA和氨态氮浓度的影响

由表1-2可以看出，饲料添加硝酸钙显著升高湖羊瘤胃液中乙酸/总酸的比例和氨态氮的浓度(P＜0.05)；显著降低丙酸/总酸的比例(P＜0.05)。湖羊食后1h瘤胃液总酸的含量显著高于0h和7h(P＜0.05)；食后丙酸/总酸的比例显著高于0h，且处理与时间产生显著的交互作用(P＜0.05)；食后乙酸/丙酸比显著低于0h，且处理与时间产生显著的交互作用(P＜0.05)。处理与时间对湖羊瘤胃液氨态氮浓度产生了显著的交互作用(P＜0.05)。此外，硝酸钙有升高湖羊瘤胃液乙酸/丙酸比的趋势(P＝0.068)。硝酸盐作为一类含氮类化合物，可给反刍动物瘤胃微生物的发酵提供氮源，由于硝酸盐在瘤胃内经亚硝酸盐生成氨态氮的过程中，可通过消耗氢而抑制丙酸生成，并有助于纤维降解菌的增殖。因此，硝酸钙既提高微生物菌体蛋白合成的氮源供应，又通过促进纤维降解菌的增殖来提高湖羊瘤胃纤维物质的消化吸收，起到提高养分利用率的效果。

3、参考胡红莲,卢德勋,刘大程,等.不同NFC/NDF比饲粮对奶山羊瘤胃pH动态变化的影响[J].中国畜牧杂志,2009,45(3):19-22.的方法测定瘤胃动态pH值。在每期试验正试期前2d，采用动态pH监测系统对试羊瘤胃pH 值进行24h动态监测。在每次进行动态pH连续监测时，用pH 4.00和pH 6.86 标准液对电极进行校准，并记录校准值。待电极校准完毕后，将电极通过瘤胃瘘管插入瘤胃内，然后塞好塞子。电极通过导线与瘘管外的pH变送器信号输入端相连，pH值变送器的信号输出端与记录仪的信号输入端相连接。

本试验用3个通道进行实时显示，每期6只试羊的pH值动态变化分2d 完成，并设定每隔1min记录1次pH值。然后将所记录的数据通过动态pH 监测系统专用U盘上传到电脑，并运用DTM数据管理软件将U盘里的数据调出，并存至Excel文档内进行分析处理。瘤胃中动态pH的测定：将每天每只羊所采集的pH数据进行汇总，计算平均值、最大值、最小值，以及pH低于5.60和5.80的持续时间及曲线面积。曲线面积是指pH阈值与低于pH阈值偏差绝对值累积之和与时间间隔的乘积，单位为pH·min/d。并计算每小时平均pH值，用于绘制24h动态pH变化图，结果见表2和图1。

表2饲粮中添加硝酸钙对湖羊瘤胃动态pH的影响

由表2可以看出，饲粮添加硝酸钙显著降低湖羊瘤胃动态pH的最小值(P ＜0.05)，但对其他动态pH值无显著影响(P＞0.05)，但平均pH值有所提升。从表2和图1可以看出，硝酸钙使湖羊瘤胃pH维持在较高水平且pH 低于5.60和5.80的时间短于对照组湖羊(P＞0.05)。瘤胃pH是反刍动物瘤胃发酵的一项重要指标，它是否处于正常范围内，会直接影响瘤胃发酵的效果，瘤胃pH过低不利于纤维分解菌的生长，影响其对养分的消化吸收，并且瘤胃长期处于较低pH环境中会破坏其上皮细胞。在本试验中，对照组湖羊食后瘤胃pH先降低后上升而硝酸钙组湖羊食后瘤胃pH先升高后降低，反刍动物瘤胃pH5.2通常被作为急性酸中毒的临界点，将5.6和5.8作为亚急性酸中毒的临界点。本发明中，硝酸钙对湖羊瘤胃液pH低于5.80和5.60的维持时间和曲线面积有降低作用，且使湖羊瘤胃pH平均值维持在较高的水平，说明硝酸钙具有缓解湖羊酸中毒的作用。