基于RNA疫苗的抗原反应性T细胞的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种基于RNA疫苗的抗原反应性T细胞的制备方法及应用，所述制备方法包括以下步骤：构建体外表达载体，并经质粒线性化、体外转录和纯化后得到RNA疫苗；基于采集的PBMC获得T细胞和RNA疫苗修饰的DC细胞；将RNA疫苗修饰的DC细胞和T细胞扩增培养，得到基于RNA疫苗的抗原反应性T细胞。本发明使用pcDNA3.1+质粒，构建哺乳动物体外表达载体，相对于传统多肽合成，制备周期短，成本低，制备成功率高；使用电转仪进行电转，相对于传统转染方式，重复性好，无试剂费用，电转率高；使用RNA疫苗电转DC细胞，相比于其他生物治疗药物，易在体外生产和纯化，生产工艺通用性强，安全性高；将电转后的DC细胞和T细胞共孵育扩增，获得的活化的疫苗比例高，免疫原性强。