基于固定化金属离子亲和色谱法富集实现血浆中D-二聚体定量的方法

摘要

本发明涉及一种基于固定化金属离子亲和色谱法(immobilized metal affinity chromatography，IMAC)富集实现对血浆中D‑二聚体质谱定量的方法。取D‑二聚体血浆样品，酶解得到血浆蛋白酶解液，使用IMAC富集酶解液中D‑二聚体蛋白特异性的交联肽段，最后使用液相色谱‑质谱联用仪进行鉴定和后续定量。由于D‑二聚体结构中特异性的交联肽段氨基酸序列中含有4个组氨酸，可以和金属离子形成强的配位相互作用，使用该方法可以有效地将其进行富集，从而降低D‑二聚体样品的复杂性，提高其在质谱检测中的灵敏度。该方法可以实现完全不依赖抗体对血浆中D‑二聚体检测定量，具有潜在的临床使用价值。