妇康栓在制备促进子宫复旧以及预防产后抑郁的药物中的应用

摘要

本发明公开了一种妇康栓在制备促进子宫复旧以及预防产后抑郁的药物中的应用。本发明采用HE染色法观察阴道子宫病理切片，来探究妇康栓对产后大鼠子宫、阴道的血流及内膜复旧的影响，与模型组相比，给药组降低上皮细胞凋亡，固有层间质致密，加强内膜连续性，减少炎症反应。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，测得产后大鼠给药后雌二醇，催乳素，孕酮等激素水平，与模型组相比，给药组产后大鼠血清中雌二醇、催乳素及孕酮水平较高。由此表明，妇康栓药物有促进内膜增生,加强子宫收缩，促进产后阴道、子宫复旧的作用，同时能够调节孕雌激素水平，有利于预防产后抑郁的发生。

说明书

技术领域

本发明涉及妇康栓的新医药用途，具体涉及妇康栓在制备促进子宫复旧以及预防产后抑郁的药物中的应用。

背景技术

阴道、子宫复旧是指在胎盘娩出后子宫恢复到非孕状态下的一个过程，大概需要6周左右的时间，期间宫体肌纤维和宫内膜会发生自生，但是有的孕妇不能如期复旧，临床的主要表现为血性恶露。

妇康栓主要成分是核桃馏油，核桃馏油是由核桃楸果仁加工制备取得。核桃楸(Juglans mandshurica Maxim)是胡桃科、胡桃属植物，落叶乔木，主要分布于我国东北、华北和河北等地区，是东北三大硬阔树种之一，是一种前景广阔的木本油料植物。含有大量的脂肪酸。含有核桃楸自古以来一直是民间常用中药，具有抗炎、抗氧化，提高机体免疫力、抗过敏、抗肿瘤等作用。临床多用于治疗淤血阻滞的各种病症，为常用的活血化瘀类中药，功效为活血祛瘀，润肠通便，止咳平喘。主要是活血化瘀抗凝血、抗血栓、预防心肌梗死和心脑血管疾病。其含有丰富的锌、锰等矿物质,可以促进大脑发育,辅助治疗神经衰弱,并能延缓记忆力衰退。核桃楸果仁还含有丰富的维生素E，具有抗衰老功能,对于预防癌症也有一定好处，还可抗结石。作用近年来，有较多研究证实桃仁蛋白能够提高机体的体液免疫功能，其能促进抗体形成细胞的产生及血清溶血素的生成，镇咳平喘，抗炎，提高免疫力。

发明内容

本发明的目的之一为提供妇康栓在制备促进子宫复旧的药物中的应用。

本发明的另一目的为提供妇康栓在制备预防产后抑郁的药物中的应用。

本发明的技术方案：

妇康栓在制备促进子宫复旧的药物中的应用。

进一步限定，促进子宫复旧的药物是指治疗产后子宫、阴道血流和内膜的复旧的药物。

妇康栓在制备预防产后抑郁的药物中的应用。

进一步限定，抑制产后抑郁的药物是指提升雌二醇、孕酮和催乳素的药物。

本发明具有以下有益效果：本发明提供妇康栓的新医药用途，具体提供了妇康栓在制备促进子宫复旧以及预防产后抑郁的药物中的应用。本发明采用HE染色法观察阴道子宫病理切片，来探究妇康栓对产后大鼠子宫、阴道的血流及内膜复旧的影响，与模型组相比，给药组降低上皮细胞凋亡，固有层间质致密，加强内膜连续性，减少炎症反应。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，测得产后大鼠给药后雌二醇estradiol(E2)，催乳素prolactin(PRL)，孕酮progesterone(PROG)等激素水平，与模型组相比，给药组产后大鼠血清中雌二醇、催乳素及孕酮水平较高。由此表明，妇康栓药物有促进内膜增生,加强子宫收缩，促进产后阴道、子宫复旧的作用，同时能够调节孕雌激素水平，有利于预防产后抑郁的发生。

附图说明

图1为空白组产后大鼠阴道HE染色切片病理结果(×100)；

图2为低剂量组产后大鼠阴道HE染色切片病理结果(×100)；

图3为模型组产后大鼠阴道HE染色切片病理结果(×100)；

图4为中剂量组产后大鼠阴道HE染色切片病理结果(×100)；

图5为高剂量组产后大鼠阴道HE染色切片病理结果(×100)；

图6为空白组产后大鼠子宫HE染色切片病理结果(×100)；

图7为低剂量组产后大鼠子宫HE染色切片病理结果(×100)；

图8为模型组产后大鼠子宫HE染色切片病理结果(×100)；

图9为中剂量组产后大鼠子宫HE染色切片病理结果(×100)；

图10为高剂量组产后大鼠子宫HE染色切片病理结果(×100)；

图11为不同组产后大鼠血清孕酮、雌二醇和催乳素含量对比图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明均为常规方法。所用材料、试剂、方法和仪器，未经特殊说明，均为本领域常规材料、试剂、方法和仪器，本领域技术人员均可通过商业渠道获得。

实施例1：结合附图和具体实验对本发明作进一步说明。

一、材料与方法

1.1实验动物

SD品系大鼠，购自黑龙江中医药大学药物安全评价动物中心。

1.2药物与试剂

妇康栓(批号：1804003)，购自黑龙江省富东制药有限公司；

新生化颗粒(批号：ZLB1813)，购自云南白药集团股份有限公司；

大鼠催乳素(PRL)酶联免疫试剂盒(批号：H095)，购自南京建成生物工程研究所；

大鼠雌二醇(E2)酶联免疫试剂盒(批号：H102)，购自南京建成生物工程研究所；

大鼠孕酮(Prog)酶联免疫试剂盒(批号：H089)，购自南京建成生物工程研究所。

1.3实验仪器

1.4分组与给药

大鼠适应性常规喂养1周后，晚20∶00将雌、雄鼠以2∶1的比例合笼，第2日清晨阴道口找阴道栓。如发现阴道栓确定妊娠第1天，若未见阴道栓，则取阴道冲洗液涂片，显微镜下找精子，明确看到精子确认为妊娠第1天。除6只雌鼠(未妊娠)分为空白组，其余30只雌鼠妊娠成功后随机分为模型组、阳性药组(新生化颗粒)、妇康栓低剂量组(1.89g/Kg)、妇康栓中剂量组(3.78g/Kg)、妇康栓高剂量组(7.56g/Kg)，每组6只。大鼠分笼饲养待其自然分娩。分娩后第7天开始各组(低剂量组、中剂量组和高剂量组)每天分别阴道给药1次，连续14天给药。模型组和空白组阴道给基质栓。

1.5标本采集与检测

在第14天末次给药后，大鼠禁食12小时后称重，10％水合氯醛麻醉、腹主动脉采血4.0mL，室温下静置1h，血样凝结后在3000r/min下离心10min，取上层血清-20℃保存，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定E2，PRL，PROG免疫组化试剂盒。颈椎脱臼处死，取子宫、阴道组织置于4％福尔马林固定液中固，常规脱水、包埋、切片、脱蜡至水、HE染色、封片、图像分析。脾脏组织称重，液氮速冻后，置于-80℃冰箱保存。脾脏是重要的免疫器官，而分娩是一种轻微的炎症反应，可能导致脾脏的增大。

1.6观察指标

对脾脏指数进行检测，子宫阴道组织HE染色病理切片图片分析。双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，测得产后大鼠给药后雌二醇estradiol(E2)，催乳素prolactin(PRL)，孕酮progesterone(PROG)等雌激素水平。

1.7统计学处理

利用统计学软件SPSS 21.0对以上结果进行分析，实验数据以均数±标准差(x±s)形式表示。数据进行正态分布检验和方差齐性检验，符合正态分布和方差齐的样本采用LSD法进一步比较，P≤0.05为差异有统计学意义。

二、结果

2.1病理切片

不同组产后大鼠阴道HE染色切片病理结果如图1-5所示。空白组见图1，阴道内膜上皮细胞糖原化，细胞肿胀，胞质疏松(红色箭头)，偶见内膜连续性部分中断。与空白组对照，模型组见图3，可见大量弥散性的上皮细胞凋亡(黑色箭头)，核碎裂或溶解(黄色箭头)，内膜连续性部分中断。模型组造模成功，上皮细胞死亡、脱落。与模型组相比，给药组见图2、4和5，降低阴道上皮细胞凋亡，少见内膜连续性部分中断，促进内膜细胞增生，药物促使阴道上皮内膜增生。模型组、给药组与空白组对照，均未见明显炎症。

不同组产后大鼠子宫HE染色切片病理结果如图6-10所示。空白组见图6，子宫粘膜上皮结构完整，上皮细胞形态结构正常、排列紧密，子宫内膜上皮细胞轻度脱落，偶见内膜连续性部分中断，少量炎细胞。与空白组对照，模型组见图8有炎性细胞浸润(黄色箭头)，固有层间质疏松水肿(黑色箭头)，部分上皮细胞胞质空泡化、坏死脱落，内膜连续性部分中断，造成炎症，细胞凋亡坏死模型。与模型组对照，给药组见图7、9和10内膜上皮损伤较轻，排列紧密，局部可见少量淋巴细胞浸润，内膜连续性较好，固有层间质较致密。药物使子宫内膜上皮细胞结构恢复，排列紧密，加强子宫收缩，促进内膜迅速增生，减少炎症反应。

2.2双抗体夹心酶联免疫试剂盒结果

表1双抗体夹心酶联免疫试剂盒测得各组大鼠血清孕酮、雌二醇、催乳素的OD值(n＝36,

与模型组相比；

由表1可知，与空白组相比，模型组血清中雌二醇、催乳素及孕酮的OD值偏高。与模型组相比，给药组血清中雌二醇、催乳素及孕酮的OD值较低，且高剂量组、中剂量组血清中雌二醇、催乳素及孕酮的OD值低于低剂量组。

表2各组大鼠血清孕酮、雌二醇、催乳素的回归线性方程

由表2可知，回归方程成负相关，与空白组相比，模型组血清中雌二醇、催乳素及孕酮的含量偏低，说明大鼠情绪状态不稳定造模成功。与模型组相比，给药组产后大鼠血清中雌二醇、催乳素及孕酮水平较高(见图11)，且高剂量组的孕酮、催乳素激素含量高于阳性药组，雌二醇激素含量低于阳性药组。药物可以明显提升孕酮、催乳素的含量，对产后抑郁大鼠情绪愉悦，抗焦虑有良好的效果。产后大鼠测得血清孕酮、雌二醇、催乳素含量见表3。

表3各组产后大鼠测得血清孕酮、雌二醇、催乳素含量(n＝36,

与模型组相比，

2.3脾脏指数

表4各组大鼠脾脏指数(n＝36,

与模型组相比，

由表4可知，脏器指数＝脏器重量(mg)/体质量(g),可以估计免疫功能的强弱。与空白组相比，模型组脾脏指数较高，模型组有炎症即造模成功。与模型组相比，给药组脾脏指数降低，说明药物可以轻微的改善免疫器官的功能。

3结论

产后阴道子宫复旧是个多因素调控的过程，大约需要6周时间，子宫收缩、内膜增生，甾体激素及其受体、血管活性物质、炎症因子等共同调控这一过程。雌二醇是由卵巢滤泡、黄体及妊娠时胎盘生成的一种天然雌激素，研究证实其具有神经调节功能，可通过直接作用和递质调节等多种方式增强其受体及神经生长因子的表达，调节神经功能，从而发挥抗抑郁效果，还能促进和调节女性性器官及副性征的正常发育，促使子宫内膜增生、增强子宫平滑肌的收缩。催乳素具有一定的抗焦虑、镇痛作用，孕酮有助于5-羟色胺的合成，而5-羟色胺是人体产生愉悦情绪的信使。血清雌二醇、孕酮及催乳素水平过低是引起产后抑郁的可能原因之一。

在妊娠期间，催乳素、孕酮处于较高水平，有助于减轻妊娠期间的紧张、焦虑情绪。在分娩后，机体激素水平发生巨大的变化，孕酮水平急剧下降，催乳素在哺乳过程中仍可保持较高水平。激素水平下降速度过快一方面会直接导致脑内分泌儿茶酚胺的作用下降，另一方面可引起脑组织中神经递质水平变化，多巴胺转运蛋白和5-羟色胺(5-HT)受体数量表达在脑部明显增加，从而引发相应的抑郁情绪和行为改变。血清孕酮及催乳素水平过低是引起产后抑郁的可能原因之一。产后抑郁症患者催乳素、孕酮水平较低，对性腺类固醇激素水平变化的敏感性较差，这可能是患者情绪状态变化极不稳定的原因。

妇康栓药物有促进内膜迅速增生，修复剥脱的子宫内膜创面止血，加强子宫收缩，促进产后子宫复旧的作用。通过调节雌、孕激素同步发展，提高激素水平，有利于适应环境刺激的改变，帮助患者展现正常的母性行为，抑制产后抑郁情绪的产生，促进产妇情志的调畅。