归芪活血制剂在制备预防或治疗糖尿病并发症药物中的应用

摘要

本发明属于中药领域，具体公开了一种归芪活血制剂在制备预防或治疗糖尿病并发症药物中的应用。所述归芪活血制剂由黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味原料药材制成，具有益气补肾、活血通络的功效。药效学试验表明，归芪活血制剂能有效加快糖尿病周围神经病变模型大鼠的坐骨神经传导速度，同时显著降低大鼠血清MDA水平，提高SOD、GSH‑Px活力水平，提高机体清除自由基的能力，增强机体和组织抗氧化能力，从而保护和修复大鼠坐骨神经损伤，对糖尿病周围神经病变有确切的治疗作用，作用全面，毒副作用低，具有广阔的市场前景。

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，涉及一种归芪活血制剂的新应用，具体涉及一种归芪活血制剂在预防或治疗糖尿病并发症药物中的应用。

背景技术

糖尿病是一种常见的慢性代谢病疾病，是全球患病率最高的疾病之一。随着社会经济的快速发展，人们生活方式的改变及人口老龄化，糖尿病的发病率逐年上升。糖尿病的并发症也逐渐增多，糖尿病的并发症达100多种，是目前已知并发症最多的一种疾病。糖尿病死亡者有一半以上是心脑血管所致，10％是周围神经病变所致。因糖尿病截肢的患者是非糖尿病的10～20倍。临床数据显示，糖尿病发病后10年左右，将有30～40％的患者至少会发生一种并发症，并发症一旦发生，药物治疗很难逆转，因此，在预防与治疗糖尿病的同时，应尽早预防与控制糖尿病并发症的发生。

糖尿病周围神经病变(diabetie peripheralneuropathy，DPN)是指在排除其他原因的情况下，糖尿病患者出现周围神经功能障碍相关的症状和/或体征。糖尿病周围神经病变是糖尿病最常见的慢性并发症之一，其临床表现较为复杂，多为感觉及自主神经受累，伴相对较轻的运动神经元受累，并以远端对称性肢体疼痛、麻木和感觉减退为主要特征，亦有痛觉过敏者，昼轻夜重。我国住院糖尿病患者中DPN的发生率约为60％，且随着神经系统检测手段的不断提高，DPN的检出率呈现逐年上升的趋势。

DPN的病因与发病机制迄今尚未完全阐明，普遍认为其发生与机体代谢紊乱所致的氧化应激自由基增多、血管性缺血缺氧、神经生长因子缺乏等密切相关，且与自身免疫紊乱、维生素缺乏、遗传及环境等因素亦有较大关系。本病的西医治疗，多在严格控制血糖的基础上对因治疗，以纠正代谢紊乱(如依帕司他)为主，辅以神经营养(如甲钴胺、B族维生素、神经生长因子)、改善微循环(如前列腺素E、尼莫地平、阿司匹林)、拮抗氧化应激(如α-硫辛酸、依达拉奉)等综合治疗措施。上述化学药物的干预和治疗措施针对DPN的不同发病机理均能起到一定的治疗效果，但对于病程较长、病情复杂的患者，疗效常不甚理想，加之部分化药价格昂贵，临床应用也受到一定限制。因此，急需研制出能够治疗DPN的中药药物。

糖尿病属于中医学上“消渴”范畴，而DPN在中医学中虽无确切病名，但从其临床症状及体征表现而言，多数学者将其归属于中医“消渴”合并“痹症”、“痿证”范畴，亦有将其归属“血痹”、“脉痹”者。金元时期，李杲在《兰室秘藏》较为详细记载了消渴病人后期可见“上下齿皆麻，舌根强硬，肿疼，四肢痿弱，前阴如冰”；明代《普济方》亦云“肾消口干，眼涩阴痿，手足烦疼”；清代《王旭高医案》则曰“消渴日久，但见手足麻木，肢凉如冰”。以上诸家对消渴病证的描述与DPN的现代临床表现大致相符，可见本病因消渴病日久致气阴两虚，气虚血滞，气滞血瘀，络脉失养，且久病入络，病久致瘀，亦致脉络失养。DPN的病机表现出气阴两虚、瘀血阻络的本虚标实特点，其虚实夹杂的病机如不能及时得到纠正，各病机间势必将相互影响，互为因果，导致病变程度不断加重。因此，基于中医学对DPN的病因病机认识，治疗上遵循“治病必求其本”的思想，从“虚者补之，实者泻之”、“通则不痛，痛则不通”、“以通为补，以通为用”治则出发，形成益气养阴、活血通络、祛瘀清热的组方立意，达到补中寓泻、标本兼治、固本善后的整体疗效。

CN1188161C公开了一种芪活血胶囊制剂，由黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根和川芎13味原料药材制成，是治疗颈椎病的三类中成药，有益气补肾，活血通络之功效，疗效确切，起效快，对颈椎病具有良好的治疗作用。主要用于颈椎病神经根型以及神经根型为主的混合型肝肾不足，气虚血瘀证，症见颈项疼痛沉重，肩背酸痛，手臂麻木，肢体萎软无力，眩晕，舌质暗红或淡有瘀斑，苔薄白，脉沉弱，或沉弦涩。

发明内容

本发明的目的在于提供一种归芪活血制剂的新应用，特别是在制备预防或治疗糖尿病慢性并发症药物中的应用，增加了糖尿病患者的用药选择性，丰富了临床应用。

一种归芪活血制剂在制备预防或治疗糖尿病并发症药物中的应用。

本发明所述的糖尿病并发症是II型糖尿病慢性并发症，优选地，所述的II型糖尿病慢性病并发症是糖尿病周围神经病症。

所述的糖尿病周围神经病变为股神经病变，坐骨神经病变，正中神经病变，桡神经病变，尺神经病变，腓肠神经或股外侧神经病变中的一种或几种。进一步优选地，所述的糖尿病周围神经病变为坐骨神经病变。

本发明所述的归芪活血制剂包含如下的中药组分：

优选地，所述的归芪活血制剂包含如下的中药组分：

进一步优选地，所述的归芪活血制剂包含如下的中药组分：

优选地，所述的何首乌为制何首乌。

基于糖尿病周围神经病变多表现为气阴两虚、瘀热互结之本虚标实、虚实夹杂的特点，归芪活血制剂中诸药相合，切中病机，相得益彰，通而不伤正，补而不留滞，共奏益气养阴，活血通络、祛瘀清热之功，用于治疗糖尿病周围神经病变，中医辨证属气阴两虚、瘀热互结者，可获良效。

本发明所述的归芪活血制剂依托于已上市品种国药准字Z20090686归芪活血胶囊(鲁南厚普制药有限公司生产)，但本发明的应用不限于该品种。下面将进一步阐述归芪活血制剂的制备方法。

本发明所述中药组分为原料，加入药学上可选择的辅料，将本发明中药组分制备成不同的归芪活血口服药物制剂。进一步优选所述的制剂为胶囊剂、颗粒剂、口服液、片剂、微丸或微囊中的一种，更近一步地，所述的归芪活血制剂为胶囊剂。

本发明归芪活血口服药物制剂的制备方法，包括下列步骤：

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加55％～65％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.16～1.24的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，每次煎煮1～2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达62％～67％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.21～1.27的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，加入鹿茸和麝香细粉，经常规工序加入药学上可接受的赋形剂制成口服药物制剂。

本发明优选的剂型是胶囊剂，所述归芪活血胶囊的制备方法包括下列步骤：

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加60％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.18的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮1小时，第二次煎煮2小时，第三次煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达65％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.22的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度57℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，经常规工序加入药学上可接受的赋形剂制成胶囊剂。

本发明优选的剂型是微丸制剂，所述归芪活血微丸的制备方法包括下列步骤：

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加58％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.22的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮1小时，第二次煎煮2小时，第三次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达64％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.24的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度59℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，备用；

E.按处方量分别称取步骤归芪活血提取物细粉、微晶纤维素、醋酸纤维素、微粉硅胶、乳糖，充分混匀，加入处方量46％的浓度为36％乙醇溶液捏合，制成软材，经挤出机孔径为1.2mm的筛板挤成条状物；

F.打开滚圆机，选择转速1240rpm，将步骤E条状物置滚圆机内，滚圆时间为6.0min，制成微丸半成品，取出微丸半成品于85℃烘干，筛分得22～25目的微丸。

本发明所述的相对密度均指相对于水的密度。

本发明现对于现有技术取得了如下的技术优势：

本发明归芪活血制剂能有效加快糖尿病周围神经病变模型大鼠的坐骨神经传导速度，同时显著降低大鼠血清MDA水平，提高SOD、GSH-Px活力水平，提高机体清除自由基的能力，增强机体和组织抗氧化能力，从而保护和修复大鼠坐骨神经损伤，改善糖尿病周围神经病变症状。

药效学实验

为验证本发明所述归芪活血制剂治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的功效，发明人开展了相关药效学试验。需要说明的是，本发明药效学试验中所选取的药品为本发明具有代表性的配方及其制得的药品，本发明所包含的其它配方及其制得药品涉及的试验和结果，由于篇幅限制，在此不穷举。

试验例1对糖尿病周围神经病变模型大鼠的坐骨神经传导速度的影响

1 材料

1.1 试验动物

8周龄SPF级雄性SD大鼠，80只，体重(200±20)g，由济南朋悦试验动物繁育有限公司提供，试验动物许可证号：SCXK(鲁)20190003。试验前在清洁级动物试验室适应性喂养1周，室温20～25℃，相对湿度50％～60％，自然光照，自由摄食、饮水。

1.2仪器、试剂及药品

UV-2401PC型紫外-可见分光光度计(日本Shimadzu公司)，DRHH-S6型数显恒温水浴锅(上海双捷试验设备有限公司)，H1650-W台式微量高速离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司)，QL-901型旋涡混匀器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)，稳豪型血糖仪及血糖试纸(上海强生医疗器材有限公司)，BL-420F型生物信号采集处理系统(成都泰盟科技有限公司)；链脲佐菌素(STZ)(美国Sigma公司)，柠檬酸钠缓冲液(美国赛默飞世尔科技有限公司)，水合氯醛(济南弘博化工有限公司)；受试药物为归芪活血胶囊(批号：008162108，鲁南厚普制药有限公司生产)，阳性对照药为甲钴胺胶囊(规格：0.5mg/粒，批号：13070102，扬子江药业集团南京海陵药业有限公司)，归芪活血汤组药物为对比实施例1制得的药物，当归+黄芪组药物为对比实施例2制得的药物。

2 方法

2.1 分组和造模

取雄性SD大鼠80只适应性喂养1周后，随机分为8组，即正常对照组、模型对照组、甲钴胺胶囊阳性对照组(简称“阳性对照组”)、归芪活血高剂量组(简称“试验高剂量组”)、归芪活血中剂量组(简称“试验中剂量组”)、归芪活血低剂量组(简称“试验低剂量组”)、归芪活血汤组和当归+黄芪组，每组10只。除正常对照组外，其余各组禁食不禁水12h后，每只按50mg/kg腹腔注射1％的链脲佐菌素(STZ)(由0.1mmol/L无菌柠檬酸钠缓冲液(pH4.5，4℃)配制而成)诱导制备糖尿病大鼠模型；72h后取尾静脉血检测空腹血糖，大鼠血糖值≥16.7mmol/L，且连续3d血糖值稳定，即判定糖尿病大鼠(简称“DM大鼠”)造模成功。将DM大鼠俯卧位固定，充分暴露其腰背部及双下肢，将冷冻好的干冰袋(规格：400ml，12×20cm)沿大鼠坐骨神经解剖位置，分别放置于腰骶部及双侧下肢进行冷敷，30min/次，1次/d，连续放置两周后，改为隔天冷敷1次，于第12周末检测大鼠坐骨神经动作电位传导速度变化，出现坐骨神经功能减退，则判定糖尿病周围神经病变大鼠(“DPN大鼠”)造模成功。正常组对照组大鼠正常喂养，同期腹腔注射等量0.1mmol/L无菌柠檬酸钠缓冲液(pH4.5，4℃)。

2.2给药

DPN大鼠造模完成后1周，各组均进行灌胃给药，根据《中药新药临床研究指导原则》中附录的不同动物的剂量折算系数进行剂量折算，其中阳性对照组灌服甲钴胺胶囊0.15mg/kg，试验高剂量组、试验中剂量组和试验低剂量组依次灌服归芪活血胶囊1.0g/kg、0.5g/kg、0.25g/kg，归芪活血汤组灌服归芪活血汤0.5g/kg，当归+黄芪组灌服当归+黄芪0.5g/kg，正常对照组、模型对照组则给予等容量生理盐水灌服。每日给药一次，连续给药8周。

2.3检测指标及方法

末次灌胃给药结束后24h，大鼠腹腔注射10％水合氯醛麻醉后俯卧位固定，选定2个刺激部位，分别为坐骨窝、踝部，经皮插入2个针电极，间距为2mm，尾部接地，保持皮温30℃。(1)运动神经传导速度的测定：采用方形波刺激神经，记录复合肌肉动作电位及潜伏期。检测3对M波潜伏期并取平均值，两个刺激电极间的传导时间为近端、远端潜伏期差，距离/潜伏期差值即为运动神经传导速度。(2)感觉神经传导速度的测定：采用方形波记录6对在坐骨窝和踝激发的H反射潜伏期，测量两个刺激部位间的距离，距离/潜伏期差值即为感觉神经传导速度。

2.4统计学处理

采用SPSS19.0统计软件进行分析。试验数据以“均数±标准差

3结果

与正常对照组相比，模型对照组大鼠坐骨神经的运动神经传导速度和感觉神经传导速度明显减慢，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，说明本次试验DPN大鼠模型建立成功；与模型对照组比较，阳性对照组、归芪活血汤组、当归+黄芪组和试验高、中、低剂量组大鼠的坐骨神经的运动神经传导速度和感觉神经传导速度明显加快，差异均具有统计学意义(P＜0.05)；与归芪活血汤组相比，试验高剂量组和试验中剂量组大鼠坐骨神经的运动神经传导速度和感觉神经传导速度明显加快，差异均具有统计学意义(P＜0.05)；与当归+黄芪组相比，试验高剂量组和试验中剂量组大鼠坐骨神经的运动神经传导速度和感觉神经传导速度明显加快，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。以上结果表明，归芪活血胶囊能有效加快DPN大鼠坐骨神经的运动神经传导速度和感觉神经传导速度，且作用效果优于归芪活血汤及当归+黄芪组方。试验结果见表1。

表1各组雄性SD大鼠坐骨神经传导速度比较

注：与正常对照组比较：P＜0.05用“Δ”表示；与模型对照组比较：P＜0.05用“*”表示；与归芪活血汤组比较：P＜0.05用“□”表示；与当归+黄芪组比较：P＜0.05用“○”表示。

试验例2对糖尿病周围神经病变模型大鼠的血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的影响

1 材料

1.1 试验动物

8周龄SPF级雄性SD大鼠，80只，体重(200±20)g，由济南朋悦试验动物繁育有限公司提供，试验动物许可证号：SCXK(鲁)20190003。试验前在清洁级动物试验室适应性喂养1周，室温20-25℃，相对湿度50％-60％，自然光照，自由摄食、饮水。

1.2仪器、试剂及药品

UV-2401PC型紫外-可见分光光度计(日本Shimadzu公司)，DRHH-S6型数显恒温水浴锅(上海双捷试验设备有限公司)，H1650-W台式微量高速离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司)，QL-901型旋涡混匀器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)，稳豪型血糖仪及血糖试纸(上海强生医疗器材有限公司)，BL-420F型生物信号采集处理系统(成都泰盟科技有限公司)；链脲佐菌素(STZ)(美国Sigma公司)，丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒(南京建成生物工程研究所)，柠檬酸钠缓冲液(美国赛默飞世尔科技有限公司)，水合氯醛(济南弘博化工有限公司)；受试药物为归芪活血胶囊(批号：008162108，鲁南厚普制药有限公司生产)，阳性对照药为甲钴胺胶囊(规格：0.5mg/粒，批号：13070102，扬子江药业集团南京海陵药业有限公司)，归芪活血汤组药物为对比实施例1制得的药物，当归+黄芪组药物为对比实施例2制得的药物。

2.方法

2.1分组和造模

同试验例1。

2.2给药

同试验例1。

2.3检测指标及方法

末次灌胃给药并禁食、禁水12小时后，经内眦于眶后静脉丛采血，分装不同试管内，3000r/min离心10min分离血清，4℃保存，严格按丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定试剂盒说明书要求，采用ELISA法分别测定血清中MDA含量及SOD、GSH-Px的活力水平。

2.4统计学处理

采用SPSS19.0统计软件进行分析。试验数据以“均数±标准差

3结果

与正常对照组相比，模型对照组大鼠的血清MDA含量明显升高，血清SOD及GSH-Px活力水平明显降低，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，说明本次试验DPN大鼠模型建立成功；与模型对照组比较，阳性对照组、归芪活血汤组、当归+黄芪组和试验高、中、低剂量组均能降低DPN模型大鼠血清MDA含量，提高血清SOD及GSH-Px的活力水平，差异均具有统计学意义(P＜0.05)；与归芪活血汤组相比，试验高剂量组和试验中剂量组大鼠的血清MDA含量明显降低，血清SOD及GSH-Px活力水平明显升高，差异均具有统计学意义(P＜0.05)；与当归+黄芪组相比，试验高剂量组和试验中剂量组大鼠的血清MDA含量明显降低，血清SOD及GSH-Px活力水平明显升高，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。以上结果表明，归芪活血胶囊能有效降低DPN大鼠的血清MDA含量，提高血清SOD及GSH-Px活力水平，且作用效果优于归芪活血汤及当归+黄芪组方。试验结果见表2。

表2各组雄性SD大鼠血清MDA、SOD和GSH-Px水平比较

注：与正常对照组比较：P＜0.05用“Δ”表示；与模型对照组比较：P＜0.05用“*”表示；与归芪活血汤组比较：P＜0.05用“□”表示；与当归+黄芪组比较：P＜0.05用“○”表示。

药效学试验表明，本发明归芪活血制剂能有效加快糖尿病周围神经病变模型大鼠的坐骨神经传导速度，同时可显著降低大鼠血清MDA水平，提高SOD、GSH-Px活力水平，说明本发明能提高机体清除自由基的能力，增强机体和组织抗氧化能力，从而保护和修复大鼠坐骨神经损伤，减轻胰岛素抵抗，改善糖尿病周围神经病变症状。

具体实施方式

为了使本领域技术人员充分了解本发明，以下通过具体的实施例进一步说明本发明，但本领域技术人员应该知晓，本发明实施例并不以任何方式限制本发明。

实施例1归芪活血胶囊的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加60％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.18的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮1小时，第二次煎煮2小时，第三次煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达65％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.22的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度57℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，加入配方量的淀粉、微粉硅胶、低取代羟丙基纤维素(重量比5：3：3)，混匀，制粒，干燥，整粒，灌装，磨光机中抛光，剔除破损胶囊，即得。

实施例2归芪活血颗粒的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加55％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.19的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮1小时，第二次和第三次各煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达62％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.25的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度58℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，加入配方量的蔗糖粉、羟丙基淀粉、甘露醇(重量比4：1：3)，混匀，制成颗粒，干燥，整粒，即得。

实施例3归芪活血片的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加61％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.21的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮2小时，第二次和第三次各煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达67％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.27的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度58℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，加入配方量的淀粉、糊精和蔗糖(重量比3：1：1)，混匀，制成粗颗粒，干燥，粉碎，过筛，制颗粒，低温干燥，整粒，加入0.6％硬脂酸镁，混匀，压片，包薄膜衣，即得。

实施例4归芪活血口服液的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加56％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.20的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1小时，第三次煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达66％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.21的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，加入鹿茸和麝香细粉，混匀。加入5倍量纯化水，冷沉72小时后，得水提液。将水提液过滤，滤液加入1％(g/ml)的活性炭，加热至80℃保温60分钟，过滤除炭，加纯化水近配制总量，调节pH值至7.0，加入配制总量1.0％(g/ml)的β-环糊精，控制包合温度40℃，搅拌包合60分钟，过滤，加纯化水至配制总量，过滤至澄清度合格后灌装，100℃流通蒸汽灭菌60分钟，包装即得。

实施例5归芪活血微丸的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加58％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.22的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮1小时，第二次煎煮2小时，第三次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达64％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.24的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度59℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，备用；

E.按处方量分别称取步骤归芪活血提取物细粉、微晶纤维素、醋酸纤维素、微粉硅胶、乳糖，充分混匀，加入处方量46％的浓度为36％乙醇溶液捏合，制成软材，经挤出机孔径为1.2mm的筛板挤成条状物；

F.打开滚圆机，选择转速1240rpm，将步骤E条状物置滚圆机内，滚圆时间为6.0min，制成微丸半成品，取出微丸半成品于85℃烘干，筛分得22～25目的微丸。

实施例6归芪活血微囊的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加62％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.23的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1小时，第三次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达63％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.23的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度58℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，备用；

E.按配方量称取步骤D归芪活血提取物细粉、囊材络蛋白酸钠：麦芽糊精＝5:2、抗粘剂十八醇：二氧化钛＝3：1和增塑剂聚乙二醇：柠檬酸＝3：1，将囊材、抗粘剂和增塑剂加入纯化水，54℃条件下加热搅拌使溶解，配置成质量分数为32％的囊材溶液，冷却至室温，搅拌状态下加入小儿消积止咳提取物细粉和3.5g大豆磷脂、7.5g蔗糖脂肪酸酯，均质乳化，得乳化液，备用；

F.步骤E乳化液在进风温度168℃、喷雾压力0.45MPa、进料速度21.5ml/min条件下进行喷雾干燥，收集微囊，冷却，即得。

实施例7归芪活血胶囊的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加57％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.17的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达65％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.26的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度56℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，加入配方量的淀粉、微粉硅胶(重量比4：1)，混匀，制粒，干燥，整粒，灌装，磨光机中抛光，剔除破损胶囊，即得。

实施例8归芪活血颗粒的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加63％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.24的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，每次煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达67％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.27的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度56℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，加入配方量的蔗糖粉、羟丙基淀粉、甘露醇(重量比3：1：2)，混匀，制成颗粒，干燥，整粒，即得。

实施例9归芪活血片的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加59％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.16的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，每次煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达62％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.23的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度58℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，加入配方量的微晶纤维、羟丙基纤维(重量比3：2)，混匀，制成粗颗粒，干燥，粉碎，过筛，制颗粒，低温干燥，整粒，加入0.5％硬脂酸镁，混匀，压片，包薄膜衣，即得。

实施例10归芪活血微丸的制备

A.称取黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、槲寄生、鹿茸、骨碎补、威灵仙、透骨草、麝香、葛根、川芎十三味药材，其中制何首乌和枸杞子净选，黄芪、当归、川芎、葛根、白芍及骨碎补净选后切片，槲寄生、威灵仙及透骨草净选后切段，鹿茸、麝香净选后粉碎成细粉，备用；

B.槲寄生、葛根、川芎3味加65％乙醇提取两次，每次提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.18的浸膏，得浸膏I，备用；

C.黄芪、当归、白芍、制何首乌、枸杞子、骨碎补、威灵仙、透骨草8味，加水煎煮三次，第一次煎煮2小时，第二次煎煮1.5小时，第三次煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达64％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.25的浸膏，得浸膏Ⅱ，备用；

D.合并浸膏I、浸膏Ⅱ，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度58℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入鹿茸和麝香细粉，混匀，即得归芪活血提取物细粉，备用；

E.按处方量分别称取步骤归芪活血提取物细粉、微晶纤维素、醋酸纤维素、微粉硅胶、乳糖，充分混匀，加入处方量45％的浓度为37％乙醇溶液捏合，制成软材，经挤出机孔径为1.2mm的筛板挤成条状物；

F.打开滚圆机，选择转速1220rpm，将步骤E条状物置滚圆机内，滚圆时间为5.5min，制成微丸半成品，取出微丸半成品于85℃烘干，筛分得22～25目的微丸。

对比实施例1归芪活血汤的制备

A.称取当归、生黄芪、葛根、鬼箭羽、鸡血藤、木瓜、丹参、玄参、生地黄、大枣、生姜十一味药材，其中制大枣净选，当归、生黄芪、葛根、木瓜、丹参、玄参及生姜净选后切片，鬼箭羽及鸡血藤净选后切段，生地黄净选后切块，备用；

B.鬼箭羽、木瓜、丹参、生地黄4味加70％乙醇提取两次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至1/2体积，得浓缩液I，备用；

C.当归、生黄芪、葛根、鸡血藤、玄参、生姜、大枣7味，加水煎煮两次，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入95％的乙醇使含醇量达70％，于﹣2℃～2℃条件下静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至2/3体积，得浓缩液Ⅱ，备用；

D.合并浓缩液I、浓缩液Ⅱ，离心后取上清液，加入上清液体积3％的辅料蔗糖，调pH至6，加净水过滤，滤液备用；

E.滤液分装，灭菌处理后灌装封口，即得归芪活血汤。

对比实施例2当归+黄芪胶囊的制备

当归0.3kg 黄芪0.6kg

称取当归、黄芪两味药材，加水煎煮两次，第一次煎煮1小时，第二次煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，加入90％的乙醇使含醇量达65％，于﹣2℃～2℃条件下静置48小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成50℃～60℃时相对密度为1.22的浸膏，真空度-0.08MPa～-0.10Mpa、干燥温度56℃条件下带式真空干燥，粉碎成细粉，过筛，加入配方量的淀粉、微晶纤维素(重量比9：1)，混匀，制粒，干燥，整粒，灌装，磨光机中抛光，剔除破损胶囊，即得。