技术领域
本发明属于分析化学领域,具体来说涉及一种测定脂肪醇聚氧乙烯醚中甲醛乙醛含量的方法。
背景技术
脂肪醇与环氧乙烷加成形成聚氧乙烯醚,其降解产物会产生甲醛和乙醛,美国药典中聚乙二醇3350中采用2,4-二硝基苯肼作为衍生剂测定醛的方法,但溶剂采用乙腈,对水溶性样品有一定的局限性。中国药典有记载利用变色酸钠与甲醛在硫酸中生成紫色化合物,测定其吸光度的方法测定甲醛含量,但此方法在浓硫酸介质中进行,不易控制,且醛类、烯类化合物及NO
脂肪醇聚氧乙烯醚系列产品以聚多卡醇为例,在医药中有广泛应用。聚多卡醇注射液适用于蜘蛛网样静脉的中心静脉、网状静脉及小静脉曲张的硬化治疗。甲醛、乙醛为已知降解杂质,对人体有明显的刺激,因此对此进行质控十分必要。
发明内容
为克服现有检测方法的空白与局限性,本发明的目的在于提供一种简便准确的方法检测脂肪醇聚氧乙烯醚系列产品如聚多卡醇中甲醛、乙醛的含量,从而保证用药安全性。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
一种脂肪醇聚氧乙烯醚中甲醛乙醛的测定方法,所述方法包括:
(1)制备对照品溶液:取甲醛、乙醛对照品适量,加水定量稀释;
(2)制备供试品溶液:取相应待测脂肪醇聚氧乙烯醚试样,精密称定0.5g,置10ml量瓶中,加水5ml使溶解,加入衍生剂2ml,用水稀释至刻度,在60℃水浴中放置60分钟,作为供试品溶液;
(3)色谱测量:分别精密量取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪进行测定;
(4)浓度计算:以峰面积与浓度按外标法计算甲醛、乙醛含量,
其中所述色谱仪使用反相色谱柱,利用保留时间进行定性,用峰面积进行定量,检测器为紫外检测器,利用外标法进行定量。
在以上方法中,所述反相色谱柱使用反相碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-水55:45为流动相进行测定,流速1.0ml/min,柱温35-36℃,检测波长350nm。
另外,所述对照品为甲醛、乙醛,所用衍生剂为2,4-二硝基苯肼。
优选地,所述待测脂肪醇聚氧乙烯醚为聚多卡醇。
本发明的分析方法灵敏度高,重复性、精密度好,快捷、高效、简便。适用于同系列水溶性产品中甲醛、乙醛含量测定。可以有效的监督生产,保证产品质量的稳定。本发明属于一项利用反相高效液相色谱方法检测脂肪醇聚氧乙烯醚中甲醛、乙醛含量的方法,适用于一系列产品。该方法可应用于药品、化妆品等领域中水溶性脂肪醇聚氧乙烯醚中甲醛、乙醛含量的分析与检测。
附图说明
图1为对照品溶液的谱图;
图2 为聚多卡醇供试品溶液的谱图。
具体实施方式
本发明公开了一种反相高效色谱测定水溶性脂肪醇聚氧乙烯醚系列产品中甲醛、乙醛含量的方法。利用紫外检测器,外标法计算进行测定。目前本发明的分析方法灵敏度高,重复性好,快捷高效,精密度好。对同类产品均可适用。
本发明的方法利用反相色谱来测定待测水溶性脂肪醇聚氧乙烯醚中甲醛和乙醛的含量,其中色谱条件为:
a、十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱;
b、以乙腈-水(55:45)为流动相;
c、流速1.0ml/min;
e、柱温35℃;
f、检测波长为350nm。
衍生剂:取2,4-二硝基苯肼24mg,加盐酸4ml溶解,加水至50ml,本品临用新制。
对照品溶液制备:取甲醛、乙醛对照品适量、加水定量稀释。精密量取5ml置10ml容量瓶中,加入衍生剂2ml,用水稀释至刻度,在60℃水浴中放置60分钟,冰浴冷却至室温。
供试品溶液的制备:取聚多卡醇0.5g,精密称定,置10ml量瓶中,加水5ml使溶解,加入衍生剂2ml,用水稀释至刻度,在60℃水浴中放置60分钟,作为供试品溶液。
测定法:分别精密量取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪进行测定。
浓度计算方法:以峰面积与浓度按外标法计算甲醛、乙醛含量。
下面进一步描述本发明的技术方案,但要求保护的范围并不局限于所述。下面结合具体实例,对本发明作进一步详细的阐述,但本发明的实施方式并不局限于表示的范围。此外,在阅读本发明的内容后,本领域的技术人员可以对本发明作各种修改,这些等价变化同样落于本发明所附权利要求书所限定的范围。
所述的液相色谱法按照中国药典2020版四部液相色谱法进行。
【实施例】
对照品溶液制备:取甲醛、乙醛对照品适量、加水定量稀释。精密量取5ml置10ml容量瓶中,加入衍生剂2ml,用水稀释至刻度,在60℃水浴中放置60分钟,冰浴冷却至室温;
供试品溶液的制备:取聚多卡醇0.5g,精密称定,置10ml量瓶中,加水5ml使溶解,加入衍生剂2ml,用水稀释至刻度,在60℃水浴中放置60分钟,作为供试品溶液;
色谱条件如下:以十八烷基硅烷键合硅胶柱为色谱柱,乙腈-水(55:45)为流动相,流速1.0ml/min,柱温35℃,紫外检测器波长350nm。分别取供试品溶液和标准曲线溶液20μl注入液相色谱仪进行测定。
岀峰顺序依次为2,4-二硝基苯肼、甲醛、乙醛。
根据以上检测方法,进行如下专属性实验。
1、专属性
操作方法:将样品进行酸、碱、氧化、高温、高湿、光照破坏后进样。
接受标准:水在甲醛、乙醛位置无干扰,各强制降解峰与甲醛、乙醛分离度良好,不干扰测定。
结果表明:酸、碱、高温、光照降解使甲醛、乙醛含量明显增加,酸降解对乙醛含量影响最大,降解杂质峰与主峰分离度较好。
2、检测限定量限
操作方法:取甲醛、乙醛溶液逐级稀释至S/N约为3作为检测限。取甲醛、乙醛溶液逐级稀释至S/N约为10作为定量限,连续进样6次。
结果表明甲醛0.0008μg/ml时可以被检出,乙醛0.001μg/ml时可以被检出,甲醛0.001μg/ml时可以被定量,乙醛0.0015μg/ml时可以被定量。六针定量限的RSD分别为7.8和8.0,属于可接受范围。
3、线性范围
操作方法:取甲醛、乙醛对照稀释成浓度分别为:甲醛:0.01μg/ml、0.05μg /ml、0.1μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml;乙醛:0.02μg/ml、0.1μg /ml、0.2μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml、4.0μg/ml作为标准曲线溶液。分别取20µl注入液相色谱仪,以浓度C(mg/ml)为横坐标,以峰面积A为纵坐标进行直线回归。
接受标准:以浓度为横坐标X,峰面积为纵坐标Y:相关系数(R)不得小于0.999,Y轴截距应在100%响应值的25%以内
结果表明甲醛浓度在0.01~2µg/ml之间、乙醛浓度在0.02~4µg/ml时,峰面积对数值与浓度对数值的线性关系良好,相关系数R值均为0.999。
4、精密度实验
操作方法:取甲醛溶液0.5μg/ml、乙醛溶液1.0μg/ml,连续进样6针作为进样精密度;取聚多卡醇供试品溶液(6份各1针)作为重复性;不同实验员不同时间再次进行重复性实验作为中间精密度。
本发明进样精密度、重复性RSD不大于6%,中间精密度RSD不大于8%,结果表明本发明精密度较好。
5、回收率
操作方法:取聚多卡醇适量,加水溶解后,按照限度的50%、100%和150%加入一定量的甲醛乙醛混合储备液,每个水平平行操作3份,计算回收量和回收率。
接受标准:回收率在80~115%之间,RSD不得过15%。
结果显示本发明回收率在80~115%之间,RSD不大于15%,本发明准确度良好。
6、耐用性
a、溶液稳定性:取100%加样的供试品溶液,室温放置,分别于不同时间,注入液相色谱仪。
结果显示溶液在10小时内稳定。
b、更改色谱柱
更换不同批号相同填料的色谱柱进行测定。
结果表明更换色谱柱含量仅有细微变化,对本发明影响较小。
c、更改流速
将流速更改为1.1ml/min进行测定。
结果表明更换流速甲醛、乙醛含量仅有细微变化,对本发明影响较小。
d、更改柱温
将柱温改为36℃进行测定。
结果表明更改柱温甲醛、乙醛含量仅有细微变化,对本发明影响较小。
e、细微调整流动相比例
结果显示细微调整流动相比例对结果几乎无影响。
以上结果表明本发明耐用性较好。
本发明可以方便、快捷、高效的检测水溶性脂肪醇聚氧乙烯醚系列产品中甲醛、乙醛含量。
上面结合具体实施例对本发明的实施方式作了详细的说明,但是本发明不限于上述实施方式,在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明宗旨的前提下做出各种变化。
机译: 一种从乙酸,乙醛和水的混合物中回收纯乙酸的甲醛分离方法
机译: 一种从乙酸,乙醛和水的混合物中回收纯乙酸的甲醛分离方法
机译: 一种从乙酸,乙醛和水的混合物中回收纯乙酸的甲醛分离方法