GHRP-6作为迟缓型心脏保护剂和心脏恢复剂的用途

摘要

本发明涉及6型生长激素促分泌肽(GHRP‑6)用于制备迟缓型心脏保护和心脏恢复药物的用途。所述迟缓型心脏保护和心脏恢复药物包含GHRP‑6和在药学上可接受的赋形剂或载料。本发明还提供了用于治疗牵涉低心排血量的疾病的方法，其中向有此需要的个体施用治疗有效量的包含GHRP‑6的迟缓型心脏保护和心脏恢复药物。所述药物使得能够迟缓地，甚至在几天后，治疗已遭受顿抑、冬眠、缺血的情景以及其后果的心肌。

说明书

技术领域

本发明涉及人类医学，特别地涉及6型生长激素释放肽(GHRP-6)用于恢复已经经历了长期缺氧的心脏细胞的正常生理学状态的用途。所述肽的该用途扩展了治疗机会窗，从而转变这样的范例，即在急性冠状动脉情景中在六个小时后立即出现致命的无法返回时间。GHRP-6有利于逆转源自心室运动障碍和舒张期功能障碍的细胞毒性事件，以便如此地重建心肌功能并且改善冠状动脉、心肌以及动物和人的其余组织和器官的灌注。

现有技术

心血管病理学状况仍然处于在普通人群中造成最高发病率和死亡率的疾病之首。在美国，心肌梗死以大约150万例/年的频率发生，并且根据国家疾病控制与预防中心(CDC)，其是在该国中死亡率的首要原因。世界卫生组织指出，2012年1750万人由于心血管疾病而死亡，这占全世界所记录的所有死亡的31％，并且这其中的740万归因于冠状动脉心脏病。超过四分之三的由于心血管疾病而引起的死亡来自中低收入国家(Arós,F.,Boraita,A.等人,Rev.Esp.Cardiol.2000,53:1063-94)。

通常，如下将心脏疾病分组：冠状动脉疾病、心绞痛、急性心肌梗死(AMI)、心机能不全、充血性心机能不全和心肌病。冠状动脉心脏疾病导致缺血性心脏病的确立，其被定义为心肌需氧量与血液供应之间的失衡(世界卫生组织.(2015).心血管疾病,http://www.who.int/en/news-room/fact-sheets/detail/cardiovascular-diseases-(cvds))。

在所有这些疾病中，AMI是达到最高急性死亡率的疾病。它在面对血流突然且持续的中断时发生，从而使得如果未快速地重建灌溉，细胞就会死亡。如果在第一次发作时幸存下来，则处于在后继的六个月中遭受另一次发作或者在相关并发症之后死亡的风险中。在该事件后难以取得完全的复原，并且应当遵从特殊的治疗和护理，因为在遭受心脏发作的10名患者中，5名在梗死后的第一年期间死亡。大多数的冠状动脉情景构成了医疗急诊和急救，以突然的方式发生，具有急性或超急性过程，患者急速衰退，并且还是出人意料的。它的前提为不可能预测或预言心肌缺氧事件。

缺氧细胞的存活取决于各种不同的因素，尤其是缺血的持续时间和所论及的代谢需求，根据细胞的类型。因此，在产生血流恢复时所处的时刻细胞已经经历的缺血的持续时间是再灌注疗法成功的主要决定因素。缺血时间越短，对于缺血组织的损伤就越小，在再灌注时刻的损伤就越小，并且因此相关的后来并发症的数目就越少。

急性冠状动脉综合征是一个操作性术语，其描述了与急性心肌缺血相容的临床症状集群。尽管进行了超过四十多年的研究，但是急性冠状动脉情景仍然是许多国家中领先的发病率和死亡率的原因。早期的药理学或机械再灌注仍然是范例，黄金规则，并且看起来是用于能够在面对缺血/再灌注时从死亡中挽救心室质量的目前的唯一选择。在最近期的文献中还是坚持在症状出现的最初12小时期间实施再灌注的重要性(欧洲心脏病学会,Guía de práctica clínica para el manejo del síndrome coronario agudo enpacientes sin elevación persistente del segmento ST,Rev Esp.Cardiol.2012,65(2):173.e1-e55)。

现有技术中重大的局限之一是完全不存在可以带有治疗特征地进行应用以便急性地重建心肌的泵功能、减少其损伤并且恢复全身血液动力学平衡的药物。这是由于大多数迄今为止所开发的候选物要求预防性的或预先调节性的使用，干预应当在无法预测的缺氧事件之前应用。抗凝药、抗血小板聚集药、抗高血压药和β受体阻滞剂旨在维持足够的血流量，以便防止阻塞和因而发生的心脏病发作，但是并不旨在重建适合于经济需求的收缩机械机构和心排血量。

因此，现有技术的另一个重大的局限是，迄今为止心肌缺氧不是在药理学上可操纵的，而目前为止唯一的可能选项局限于减少其持续时间(Antman等人,Circulation2004,110:588-636)。这意味着在具有某种类型的急性冠状动脉综合征的患者的迁移、诊断和早期干预的措施方面的革命，而AMI情景在全球范围内是最为人所知、频繁和经研究的。

在心肌缺氧期间发生功能变化，其包括：i)氧化磷酸化和腺苷三磷酸(ATP)依赖性膜泵的减少，随之发生钙、钠和水进入细胞；ii)ATP的分解代谢，其导致次黄嘌呤的积累，并且随着O

大多数的急性冠状动脉情景在非常短的时期内引起心肌损伤，因此迄今为止要求在不超过90分钟的时间段内重建冠状动脉循环(Gibsom M.Circulation.2001,104:2632-2634)。最常见的例子是与AMI相关的例子，其要求在不超过90分钟的时间内的首次血管成形术，以便获得最高的患者存活率。在这些条件下，不仅心肌收缩所必需的能量供应会失败，而且甚至无法维持心肌的生活力。仅20-30分钟的冠状动脉阻塞就会引起首先影响心内膜下层的死亡区域。当灌注不足维持时，会导致心肌的整个厚度坏死，从而引起称为透壁的梗死。已经知晓，随着6至12小时过去，情形已经是不可逆的，并且导致左心室的功能的衰退。建议尽可能紧急地进行所有再灌注干预，其中将缺血建立后六个小时确立为对于心肌的临界点(2017ESC Guidelines.European Heart Journal 2018,39:119-177)。

这就是为什么，目前现有技术的另一个局限是没有鉴定出任何这样的药物，其使得能够扩大目前狭窄的时间机会窗以便重建经历了任何类型的导致收缩异常的急性应激的心肌细胞的功能。在罹患梗死的患者中，每30分钟的治疗延迟，相对死亡率增加7.5％，而超过90分钟对于维持细胞生命来说是太长的时间。

将现有技术的局限总结为:(1)药理学候选物所要求的用于能够平衡在缺氧期间的离子碱的有限的时间；(2)不存在当缺血应激的建立花费超过120分钟时能够重建心脏细胞的足够的收缩功能的药物(2017ESC Guidelines.European Heart Journal 2018,39:119-177)；和最后，(3)在寻找迟缓型心脏保护剂或细胞保护剂中已存在了45年的一连串的失败，一般而言。

许多候选物已经在动物模型中显示出效力，但是在将其应用于人期间没有显示出任何益处。对于心脏的情况，所面临的这些局限证明了“进门至球囊扩张时间(door-to-balloon time)”、“时间就是心肌(time is myocardium)”和“时间就是结局(time isoutcome)”这些众所周知的概念是有道理的(David C Crossman.Heart 2004,90(5):576-580)。

总之，迄今为止还不存在任何这样的药物干预，其能够重建细胞功能，其中超越了致命的无法返回的临界点。这通过一长串列表的已经在多年的实验和资源投入后失败的候选物而得到证实(Heusch G.,Circulation Research,2015,1 16:674-699)。

在提早或延迟地重建心室功能和血液动力学方面现有技术的失败的最有说服力的临床证据是顿抑心肌和冬眠心肌的临床实体的鉴定。这两种实体仍然缺乏特异性的且有效的药剂。此外，两者都可能在冠状动脉情景和缺氧已经得到控制的情形下发生(de LimaPortella Rafael,Lynn Bickta Janelle和Shiva Sruti.Antioxidants&Redox Signaling2015,23(4):307-32；Zhu J等人,Transplantation 2015,99(1):48-55；Chandrika BB,Yang C等人,PLoS ONE 2015,10(10):e0140025)。

在不产生不可逆损伤的暂时缺血后，心肌可能是“顿抑的”，显示出收缩功能障碍，其可以完全复原或者走向功能性灾难。机制还未完全得到认识，但是在克服缺氧后几天可以检测到持续缺氧的组织学变化。这意味着还未了解其机制，并且尽管重建了再灌注，但是泵失败事件可能持续。现有技术并不知晓可以中止这种可以是致命的情形的药物。

另一方面，冬眠心肌是有生存力的但由于经历了慢性缺血而功能失调的心肌。机制仍然未得到认识，但是据信冠状动脉血流储备被改变，并且产生反复的缺血和心肌顿抑发生。许多研究暗示，如果冬眠是广泛的，那么就存在不可逆的心肌重塑的可能性。在代谢上，存在葡萄糖吸收的增加和脂肪酸利用的减少。

朝向心肌的血流的突然停止或减少立即产生一系列的功能改变：在8秒时，正常的需氧代谢变化为厌氧糖酵解代谢；接着，收缩性缩减，随后停止；细胞膜动作电位降低；并且出现心电图改变。之后，在缺血的可逆阶段，仅留下了20-25％的在缺血开始时刻存在的ATP。在磷酸肌酸再生后，ATP的水平变稳定，尽管血流的减少持续。乳酸盐连同H+离子一起积累，这使pH降低至大约5.8，从而有利于渗透活性颗粒的细胞内超载，其造成轻度的细胞内水肿。细胞内H+的增加引起Na+进入细胞内，通过Na+/H+交换。过量的Na+通过Na+/Ca++交换体而诱导Ca++的进入。当灌注被重建时，并且如果缺血是短暂的，那么一切返回正常。

存在这样的情形，其中尽管已重建了灌注，但是已无法产生完全的收缩功能复原。在心脏已经由于通过缺血情景所产生的影响而变得“顿抑”的这些情况下，其完全的功能复原推迟数小时至数天，或数周。也就是说，具有经重建的足够的血液灌注，但是收缩功能是不足的，这意味着在灌注与收缩性之间的不一致。心肌顿抑是在再灌注之后持续的机械功能障碍，尽管不存在不可逆损伤并且恢复了正常或接近正常的血流。该定义的要点是：1)缺血后的功能障碍是完全可逆的异常，无论其严重度或其持续时间为何；和2)功能障碍不是由灌注的首次失败引起的。在顿抑中，尽管有正常的灌注，但是仍存在收缩功能障碍(Kloner RA,Jennings RB.Circulation 2001,104:2981-89)。

专利文献WO2002053167A2公开了表皮生长因子(EGF)和GHRP-6之间的组合，其可用于预防在缺血中所引起的组织损伤。然而，该发明和所有先前所提及的候选物都应当在预先调节性预防计划方案下或者在缺血发生后立即施行，从而将其使用和效力调节至迄今是有效的狭窄的时间窗。在现有技术中还提及了机械干预(调节)，其激活导致更好的针对由延长的缺血事件和后来的再灌注所引起的损伤的心肌保护作用的内源性机制。所述调节基于动脉血管的反复的充气-放气循环。预先调节在于在延长的缺血事件之前应用短的缺血-再灌注循环。缺血后期调节的策略基于在开始再灌注时应用缺血-再灌注循环。

因此，继续有兴趣找到迟缓型心脏保护剂，其使得能够扩大狭窄的治疗机会窗以恢复和重建心脏功能内环境稳态。

发明详述

本发明通过公开GHRP-6在制备迟缓型心脏保护和心脏恢复药物中的用途而对于解决前面所提及的问题作出了贡献。首次鉴定出了这样的药理学试剂，其能够恢复细胞内环境稳态和心脏组织的功能性，在已建立了缺血过程后长的数小时或甚至数天，不依赖于目前的必须需要系统的生物学的狭窄的时间窗，从而实现重建细胞代谢。以这种方式，扩展了用于治疗的机会窗，和因此治疗成功的可能性。

本发明基于使用GHRP-6作为在急性或慢性、轻度或严重、急性或末期心室衰竭的迟缓情境下能够恢复心肌细胞的功能的活性药学成分。所述治疗确保了激活牵涉称为RISK(再灌注损伤补救激酶(Reperfusion Injury Salvage Kinase))的补救途径的一整套分子过程。此外，还重建了离子泵的功能，并且减少了炎症、壁的应激和活性氧类别的形成。

为了本发明的目的，术语“心脏保护药物”是指这样的药物，其能够在面对否则将会是致命的情境时挽救心肌细胞免于死亡，其中能够维持能量内环境稳态、离子泵的稳定性，确保传导和节律，以及维持所述类型的细胞的收缩功能。

如在本发明中所使用的，术语“心脏恢复药物”是指这样的药物，其能够逆转心肌的机械功能的衰退，而不增加心率、耗氧量、心排血量，或者以减少舒张期时间为代价。

在所有那些因冬眠或心室重塑而具有心肌的损伤或功能障碍的受试者中，带有治疗性特征地，甚至迟缓地应用GHRP-6(作为活性药学成分)。也可以应用于经历了冠状动脉血管再通干预的受试者，在其中，一个或多个器官的氧合由于完全或部分缺血而必然受损，并且然后进行再灌注。这也可应用于血栓栓塞现象的后果的控制和预防。更加重要地，该治疗可应用于未实现复原心室的收缩功能并且进展至收缩期和舒张期功能障碍的经血管再通的那些人。

因此，在本发明的一个实施方案中，向受到从由下列各项组成的组中选择的病理学状况影响的患者施用所述包含GHRP-6的心脏保护和心脏恢复药物以便从顿抑或冬眠状态、低排血量综合征和心源性休克中挽救心室质量：具有ST段抬高和压低的AMI、急性冠状动脉综合征、急性或慢性缺血性心肌疾病、心机能不全和心肌的缺血/再灌注情景。

GHRP-6的使用可能是唯一的用于控制最终可以导致心机能不全综合征和死亡的顿抑和冬眠的药理学选项。GHRP-6的同情使用已显示出可用在具有IV级心机能不全的危急患者中，和可用在已在等候用于心脏移植的合适供者的其他患者中。它以两个范例的打破为前提：(1)“时间就是心肌”的黄金规则的打破，从而在损伤建立中流逝的时间对于药物的效力已经不重要；(2)顿抑、冬眠、低排血量和严重心机能不全已经是在药理学上可操纵的。这些是本发明的明显优点。因此，在另一个实施方案中，向等候心脏移植的患者施用本发明的迟缓型心脏保护和心脏恢复药物，以便在总体上纠正和优化其全身内环境稳态和健康状态。

在一个实施方案中，所述包含GHRP-6的迟缓型心脏保护和心脏恢复药物通过外周、中央静脉内途径或者在冠状动脉树内进行施用。在一个特别的实施方案中，将所述药物作为腔内扩张程序的一部分进行施用。所述GHRP-6可以通过重复注射或连续滴注系统进行施用。它包括静脉内和动脉施用，包括在再灌注(通过球囊或“支架”)之前或期间在冠状动脉树内的滴注。该试剂的作用机制的多功能性证明了下述做法是有道理的：将其施用于宽范围的罹患冠状动脉情景、任何形式的心肌病的患者，并且不依赖于治疗开始和其延长的时间。所述治疗的优点是重建急性或顿抑形式的衰竭心脏的功能，并且甚至超过了所谓的临界时间或无法返回点。

在另一种情境下，所述治疗可以治疗性地应用于移植物受者，以允许宿主机体和所移植的器官的合适的调理。已经治疗了具有IV级功能级别和具有移植标准的患者，已经实现了提高左心室的机械功能，并且已经达到了在更好的全身组织氧合的条件下的移植。可以在进行移植后重复地进行施用，其中可以在建立在受者和所移植的器官之间的循环后在手术室中开始所述治疗。

在本发明的一个实施方案中，以推注的形式施用所述包含GHRP-6的药物，以便患者接受25至200μg的肽/kg体重。该治疗对于缺血心脏的恢复效应使得能够任选地伴随施用任何抗氧化试剂、铁螯合化合物以及牵涉抗氧化防御的酶。

在另一个方面，本发明提供了迟缓型心脏保护和心脏恢复药物，其包含GHRP-6和在药学上可接受的赋形剂或载料。由于其效应，可以在缺血情景建立后12小时之后施用所述包含GHRP-6的迟缓型心脏保护药物。在一个特别的实施方案中，在缺血情景建立后13至96小时施用所述药物。

本发明的迟缓型心脏保护和心脏恢复药物可以与血栓溶解或纤维蛋白溶解试剂(称为纤溶酶原激活物)相伴随地并且在通过机械方法(包括血管成形术)所诱导的再灌注的情况下进行施用。可以在预先调理和后期调节的操作之前或之后，共同地应用所述药物。

建议使用25至400μg/ml的浓度，在诸如下列的载料中：生理盐水溶液(0.9％的氯化钠)；林格乳酸盐溶液；血浆；白蛋白；和右旋糖；等渗剂；或其混合物。施用途径可以为深部或外周静脉内、动脉内或腹膜内。可以每天两至三次重复本发明的药物的施用。

在本发明中，向具有心肌的缺血/再灌注情景的患者施用GHRP-6(作为迟缓型心脏保护剂和心脏恢复剂)，以纠正中央和外周血液动力学，稳定中央静脉压和平均动脉压，以及消除血管麻痹和血管阻力。此外，还在具有源自低排血量、血容量减少、换气衰竭、前负荷增加的状态的乳酸性酸中毒的患者中进行施用。

在另一个方面，本发明公开了用于治疗牵涉低心排血量的疾病的方法，其特征在于，向有此需要的个体施用治疗有效量的包含GHRP-6的迟缓型心脏保护和心脏恢复药物。

在本发明一个实施方案中，将所述方法应用于受到从由下列各项组成的组中选择的病理学状况影响的患者以便从顿抑或冬眠状态、低排血量综合征和心源性休克中挽救心室质量：具有ST段抬高和压低的AMI、急性冠状动脉综合征、急性或慢性缺血性心肌疾病、心机能不全、心肌的缺血/再灌注情景。在另一个实施方案中，将所述方法应用于等候心脏移植的患者，以便在总体上纠正和优化其全身内环境稳态和健康状态。

实施方案的详细描述/实施例

实施例1.GHRP-6对于扩大用于挽救经历了冠状动脉闭塞的心肌质量的治疗机会窗的效应的证明。具有和没有再灌注的实验模型。

尽管进行了45年的不断研究，但是旨在减小梗死大小的药理学操作还未发出所期望的结果。缺血情景的突发特征促成了这一点，并且尤其地，当缺血已建立时可用于挽救心室质量免于死亡的时间不多。

本研究的目标是评价和比较GHRP-6的迟缓型施用对于左心室的功能参数的治疗性影响，相关于急性地施用的所述肽的效应而言。另一个目标是评价在其中未进行再灌注的动物组之中迟缓型治疗的效应。

AMI的实行在体重为22-27kg的约克夏(Yorkshire)品种的猪中进行。通过静脉内途径用丙泊酚、咪达唑仑和泮库溴铵来诱导麻醉。在用异氟烷/氧气和氧化亚氮的混合物所获得的全身麻醉下，引起缺血。这通过下述方式来诱导：在第五和第六肋间隙之间的胸廓切开术，直至到达左旋动脉，其通过放置30mm的动脉钳夹来闭塞一个小时。立即开始每20秒的心电图和心率的记录。在60分钟的闭塞结束时，松开钳夹，由此开始再灌注阶段，直至在缺血后10天完成。对于其中未进行再灌注并且模拟所谓的非回流状态的实验组，用手术线进行旋动脉的永久结扎。钳夹和永久结扎两者均诱导具有ST段抬高的AMI。继续心率和心电图的记录直至胸廓的表面缝合。在诱导缺血情景的第十天通过放血来处死动物。在麻醉超剂量下，通过用埃文斯(Evans)蓝计算处于风险中的面积来进行AMI面积的测定。

为了超声心动描记术评价，事先用丙泊酚/咪达唑仑的混合物使猪镇静。使用配备有3.5-7.5MHz的机械-心脏病学扇形换能器的Sigma 1AC Cardio型号的Kontron牌超声描记器。

所评价的参数为下列：

·左心室射血分数(LVEF)，其通过Teich方法来估计；

·左心室的收缩终期压和舒张终期压；

·梗死面积，其是在处于风险中的面积上所估计的(％)。

关于所使用的实验组的该研究的设计概括在表1中。每组使用7只动物。在所有组中，在缺血后10天期间，动物每12小时接受治疗。GHRP-6或安慰剂的施用通过中央导管来进行。在接受肽的组的情况下，将其稀释在10ml的生理盐水溶液中。该研究的实质是评价治疗开始的时刻对于功能参数和无生存力的心室区域大小的影响。

表1.实验设计

在表2中反映了对于在再灌注后不同的时间实施的用GHRP-6进行的治疗的应答。包括了所述治疗对于梗死大小的控制的效应的评价，以及描述左心室的功能和状态的变量。结果表明，相比于安慰剂而言，即使在动脉循环重建(再灌注)后72小时开始所述治疗，GHRP-6也能够将AMI的大小显著地减小大约13％。在与再灌注并行地用GHRP-6进行干预的效应与当在72小时后开始所述治疗时所取得的效应之间不存在统计学上显著的差异。尽管更谨慎地，但是在缺血后第5天开始的最迟的治疗仍然挽救了8％的相应于处于风险中的面积的心室区域免于死亡。在未经再灌注或非回流的组中打开治疗机会窗的结果是更加令人惊讶的。

表2.对于治疗的应答的变量

即使没有与再灌注现象相关联的挽救效应，用GHRP-6进行的治疗也将心室死亡面积减少了12％。相应于更加迟缓的抗坏死原性挽救的效应，所述治疗对于LVEF的保存的影响是明显的。在该情景后10天，AMI在安慰剂组引起LVEF的43％的降低。然而，在与在第五天用GHRP-6进行的治疗的开始相关联的最苛刻的情形下，相对于在基础生理学条件下的研究而言，心室功能的衰退仅降低了21％。换言之，在缺血事件后过去5天开始用药医治的组中挽救了22％的LVEF。类似地，在非回流组中，用GHRP-6进行的治疗的效应也是令人惊讶的。即使没有重建再灌注，所述治疗也防止了细胞死亡并且确保了左心室的泵功能，与源自基础条件的数据仅有9％的差异。

另一方面，GHRP-6以与在基础生理学条件下所测定的那些非常相似的方式支持收缩终期压和舒张终期压参数。当与安慰剂组相比较时，在所有接受GHRP-6的组中都存在舒张压的显著降低，而不依赖于治疗所述开始的时刻。相一致地，所述治疗实现了以比对于安慰剂组所测定的那种优异得多的方式维持在收缩期终末时的腔内压力。换言之，所述治疗防止急性心室泵衰竭或低排血量综合征。

可以得出结论，用GHRP-6进行的治疗显示出扩大在心脏的缺血和再灌注情景(例如与AMI相关联的那些)中的治疗机会窗的令人惊讶且不同寻常的能力。此外，用GHRP-6进行的治疗显示出恢复心脏细胞内环境稳态，以及其极其重要的功能(在最致病的情境下，即在非再灌注的状态下)的令人惊讶且不同寻常的能力。它建立了扩大功能机会窗的能力作为新的特性。此外，还证明了，所述治疗中止与缺血相关联的心室顿抑现象。另外，具有五天演化的AMI首次作为用GHRP-6在药理学上可操纵的情境而出现，其中适当地重建了功能内环境稳态。

由于梗死从心内膜下层至心外膜以“波前”形式进展，因而中止该死亡波进程是可能的，其中可以扩大用于再灌注或其他必需的药理学干预的治疗机会窗。首次显示了，当自缺血情景建立已过去几天时重建心肌的内环境稳态是可能的。该发现是医学界中前所未有的里程碑。

实施例2.在用GHRP-6进行治疗的具有急性梗死的患者中扩大用于心肌的功能恢复的治疗机会窗

下面呈现了在罹患具有ST段抬高的AMI并且用GHRP-6以急性或迟缓性方式进行治疗的患者中的临床应答的要素。

第一群组：由19名两种性别的超过30岁的患者组成，他们被诊断为患有具有ST段抬高的AMI，所有都具有前降动脉闭塞，首次情景，所述患者在心前区痛建立12小时前到达心脏病部门。平均的进门至球囊扩张时间为6小时。所有患者都接受了首次经皮腔内血管成形术，并且在重建了有问题的动脉的血流后立即接受用GHRP-6进行的治疗。在一些患者中，所述治疗在重建血流后通过冠状动脉内“冲洗”来进行。残留的损伤占小于初始闭塞面积的25％，因此按照称为TIMI的冠状动脉风险得分被认为是TIMI 3。在其他病例中，首次施用在恰好再灌注的时刻在血液动力学室中通过中央静脉途径来进行。以100μg/kg体重的剂量施用GHRP-6，每天两次，持续7天，其是在冠心病重症监护室中所待的时间。在缺血情景后30天，进行临床、超声心动描记术和灌注的伽马射线照相术的评价。

第二群组：由13名两种性别的超过30岁的患者组成，他们被诊断为患有具有抬高的ST段的AMI，并且在心前区痛建立12小时前接受了经皮腔内血管成形术。根据成像标准，所有这些患者不利地演化，并且在成功的腔内再灌注后24至96小时具有谨慎的预后，所有都被认为是TIMI 3级。假设地，该明显的与心室功能障碍(其让人想起心肌顿抑)相关联的再灌注成功可能归因于两种现象：不存在在微毛细血管系统水平上的血液循环的重建，其暗示缺血/组织缺氧的持续存在；或者存在真实顿抑(考虑到TIMI 3)，具有差的心室收缩性。

这些患者具有从低排血量综合征至心源性休克的飞速演化。这导致建立用GHRP-6的备选治疗的决定，旨在力图减少心室肌肉系统的运动障碍、减缓所推测的顿抑过程、减轻缺氧并且挽救缺血心室质量区域免于死亡。建立了再梗死的患者接受了挽救性血管成形术。这些患者中的一名在该程序期间去世。没有一名患者具备对于实践冠状动脉血管再通的标准。在表3中显示了该第二群组的患者的特征的汇总。在这些病例中，所述肽的首次施用至少在TIMI 3后缓慢演化的48小时之后进行。在治疗时间期间，每12小时通过静脉内途径施用GHRP-6。

表3.第二群组的患者的人口统计学表征和演化

PTA：经皮腔内血管成形术，LOS：低排血量综合征，CS：心源性休克，SIRS：全身性炎症应答综合征。

研究结果

在以被认为是TIMI 3的再灌注进行了成功的经皮腔内血管成形术后接受GHRP-6的第一群组的患者展示出有利的演化，而没有重大的后续并发症。在表4中显示了初始的和演化的超声心动描记术参数(源自15名患者的有用数据)。注意对于用GHRP-6进行的治疗的应答，相关于该疾病的自然演化而言，如果考虑在国际文献中被当作参考的正常值(PedroR.Moreno和Juan H.del Portillo.Rev Colomb.Cardiol.2016,23(6):500-507；2017ESCGuidelines.European Heart Journal 2018,39:119-177)。

表4.通过对于早期接受了GHRP-6的具有ST段抬高的AMI患者进行的超声心动描记术所测量的参数

PTA：经皮腔内血管成形术。SPWT：收缩期后壁厚度，参考值(9.8-11.2mm)。SST：收缩期中隔厚度，参考值(8.6-11.7mm)。LVEF：参考值(40-85％)。SSF：中隔缩短分数，参考值(28-42％)。收缩终期体积：参考值(12-60ml)。舒张终期体积：参考值(120-140ml)。

查明了用GHRP-6进行治疗的患者显示出随时间的逐渐改善。在所有这些病例中都取得了生理学功能的恢复，其在下面进行描述：不存在形态学常数例如SPWT和SST的变化。存在收缩终期体积的逐渐减小，这意味着左心室的泵功能的改善，心脏工作的改善，和腔室功能和壁应答的保持，其表示为正常的后负荷水平。观察到舒张终期体积的逐渐且稳定的增加，这暗示了舒张期功能障碍的改善，其中在左心室的壁的延展方面获益。换言之，改善了心室舒张，具有随之产生的后负荷增加。最后，两个接近的参数，LVEF和SSF，显示出持续的增加，在90天时达到正常水平。这意味着左心室功能的节段和整体动力学的完全纠正。

关于接受了迟缓地施行的用GHRP-6进行的治疗的第二群组的患者，表5收集了结局，以及超声心动描记术表征，其在演化90天时进行。

表5.第二群组的结局和演化结果。用GHRP-6进行的迟缓型治疗。

患者CSC在挽救性血管成形术程序期间去世。一旦开始用肽进行治疗，在10名经评价的患者中的8名之中取得了升压胺的悬浮，以接近96小时的间隔。在12名存活的患者中，10名患者在AMI发生的第三个月时通过超声心动描记术进行了评价。令人惊讶的是在所有这些患者中对于用GHRP-6进行的迟缓型治疗的应答。在这10名患者中的主要医学发现显示，用所述肽进行的治疗有利于存活，通过以如此全面的方式扩大药理学操纵和干预的窗口。在该技术领域中类似治疗的不存在为该治疗方法提供了无可争辩的新颖性。

在13名危重患者中，12名存活。在该研究开始时，所有这些患者都显示出非常不利的演化，对生命具有危险，尽管根据成像标准具有成功的再灌注操作。向着低排血量综合征和心源性休克的演化表明，左心室的泵功能未复原，或者建立了严重和持续的心室顿抑场景。这意味着远端的、小部分的或者常氧但具有肌节功能障碍的缺血的持续存在。用GHRP-6进行的治疗对于稳定中央和外周血液动力学以及射血功能和心排血量做出贡献，从而减少室上性心动过速和增加射血分数。另一方面，用GHRP-6进行的治疗重建了肾小球过滤和舒张功能，从而减少前负荷和静脉压。

令人惊讶地，在具有ST段抬高的AMI发生的90天时的超声心动描记术研究显示了左心室和中隔的射血分数、总体收缩性的引人注目地有利的值。如在表6中所显示的，在用GHRP-6进行的治疗的90天，迟缓地进行治疗的组展示出接近51％的LVEF，这是出人意料地有利的。据此，用GHRP-6进行的治疗有利于细胞重建，即使当非常晚地开始治疗时。在建立了血液动力学不稳定性和心外功能障碍的复杂场景后至少48小时，所有患者都用GHRP-6进行治疗。因此，显示了用GHRP-6进行的治疗显著地和出人意料地扩大了用于在具有威胁生命的并发症的梗死患者中重建心血管功能的治疗机会窗。

表6.在用GHRP-6进行治疗后90天测定的LVEF的值

实施例3.在被包括在移植库中并且用GHRP-6进行治疗的具有IV级心机能不全的患者中扩大治疗机会窗的临床证明

这是一群组的在知情同意的保护下以同情方式接受用GHRP-6进行的治疗的7名患者。所有患者都处于根据纽约心脏协会(New York Heart Association)的量表被评价为IV级功能级别的症状明显的心机能不全。这些患者都在两所医院的心脏病学专门部门住院，并且缺血性心脏病、特发性扩张型心肌病、心瓣膜病和产后扩张型心肌病被认为是关于心机能不全的基础疾病。所评价的所有患者都具有功能能力的重大限制，以45％的福勒位永久卧床，具有晚期心功能障碍，和小于25％的LVEF值。他们具有最小力气的呼吸困难，不能充分完成6分钟的测试，并且在体液平衡和肾功能方面不稳定，尽管控制饮食和用利尿药进行治疗、限制盐分并且监测体重。

所有患者都通过静脉内途径按照医学标准每天两或三次接受50至200μg的GHRP-6/kg体重。所有治疗都在患者等待用于其移植的器官的同时进行。用GHRP-6进行的治疗时间段为每个周期25天至30天。

每三个月实施一个用GHRP-6进行的治疗周期。最多三个周期。在需要时，所有患者都用基于洋地黄苷、利尿药、肾素-血管紧张素-醛固酮轴的抑制剂(神经激素)和升压胺的先前的医学治疗进行维持。表7收集了每个参数的初始的和最终(在治疗后)的值。

表7.在对具有IV级心机能不全的患者进行治疗之前和之后所评价的参数的比较

将对于被纳入移植库的患者进行的同情治疗应用于处于具有IV级心机能不全的心血管灾祸的个体。它以关于药理学应答的最苛刻的情境为前提，鉴于该过程所牵涉的不利预后。该治疗适用于由于其高度的血液动力学失调和全身缺氧而具有轻度的器官多重功能障碍的患者。

尽管存在该显著的发病率和共病现象，但是观察到不同寻常的应答。如在表7中所看到的，所述治疗能够重建心脏的、血液动力学的、换气的和临床的常数。所述治疗显示，不依赖于心血管和全身衰退的阶段，纠正内环境稳态和因此极其重要的参数和功能是可能的。该证据在医学实践中没有先例。