技术领域
本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种胆胃康胶囊的薄层色谱鉴别方法。
背景技术
民族药“胆胃康胶囊”处方来源于云南保元堂民族医药名家段洪光先生，在临床应用40多年治疗由肝胆湿热所致的肋痛、黄疸，以及胆汁反流性胃炎、胆囊炎等具有显著疗效。其处方组成药材有青叶胆、枳壳、西南黄芩、竹叶柴胡、白芍、泽泻、茯苓、茵陈、淡竹叶、灯心草共10味，其中的青叶胆、西南黄芩、竹叶柴胡等是云南特色民族药材。本品处方组成和制法等有发明专利“治疗胆胃病的药物及其制备方法”（ZL 200410022327.5）保护。
依据段氏家传的原创处方，云南保元堂在上世纪末独家研发了民族药制剂“胆胃康胶囊”，获得“国药准字Z20025134”批文。本品具有疏肝利胆，清利湿热的功效，用于肝胆湿热所致的胁痛，黄疸，以及胆汁反流性胃炎，胆囊炎见上述诸证候者。
“胆胃康胶囊”药品标准WS-10124（ZD 0124）-2002- 2012Z定性鉴别仅有以齐墩果酸、白芍苷、黄芩苷和泽泻药材为对照品的4项薄层色谱鉴别，鉴别目标分别指向组方药材青叶胆、白芍、西南黄芩和泽泻，其余6味药材没有对应鉴别方法。在现有鉴别方法中，由于齐墩果酸是青叶胆、女贞子、虎掌草等多种药材均含的共有成分，以其作为指向青叶胆的鉴别方法专属性不强。泽泻以药材为对照品，则存在斑点较多难以一一对应，结果判断困难的问题。
中药质量控制是保障药品安全的重要措施，用现代药物分析技术建立客观、多维、可靠的质量控制点是提升中药质量管理水平的重要途径。本品处方组成有10味药材，现行药品标准只有指向4味药材的定性鉴别项目，与中药质量控制的实际需求有较大差距。
根据“胆胃康胶囊”处方主要药味所含有的代表性成分，在现有药品标准的基础上选择对原料药材指向专属性较强的獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸为对照品，增加更多、更全面的薄层色谱鉴别项目，为完善和提高民族药“胆胃康胶囊”的药品质量标准提供了技术方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种胆胃康胶囊的薄层色谱鉴别方法。
本发明的目的是这样实现的：
一种胆胃康胶囊的薄层色谱鉴别方法，包括了对“胆胃康胶囊”处方主要药味所含有的代表性化学成分獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸的薄层色谱鉴别，按以下步骤进行：
(1)供试品溶液的制备：
取“胆胃康胶囊”内容物3g加甲醇45mL超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加3mL甲醇溶解作为供试品溶液；
(2)獐芽菜苦苷的薄层色谱鉴别：
獐芽菜苦苷对照品用甲醇溶解制成0.5mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液和对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇-水-甲酸溶液为展开剂上行展开，取出，晾干；薄层色谱喷以硫酸-乙醇溶液，晾干后置紫外光灯（254nm）下检视；供试品色谱在与獐芽菜苦苷对照品色谱相应的位置上显相同色调的蓝绿荧光斑点；
(3)汉黄芩素的薄层色谱鉴别：
取汉黄芩素对照品用甲醇溶解制成0.3mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液和对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以正丁醇-乙酸乙酯-水的上层溶液为展开剂上行展开，取出，晾干，薄层色谱置碘蒸气缸中熏蒸显色，置紫外光灯（254nm）下检视；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的暗棕色荧光斑点；
(4)柚皮苷和新橙皮苷的薄层色谱鉴别：分别取柚皮苷和新橙皮苷对照品，分别用甲醇溶解制成0.3mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液、柚皮苷和新橙皮苷对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂上行展开，取出，晾干；薄层色谱喷以1%三氯化铝-乙醇溶液，晾干后置紫外光灯（365nm）下检视；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的蓝紫色荧光斑点；
(5)泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B薄层色谱鉴别：分别取泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B对照品，分别用甲醇溶解制成0.3mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇溶液为展开剂上行展开，取出，晾干；薄层色谱喷以2%的香草醛-硫酸-乙醇溶液显色，晾干后在105℃烘烤至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的灰黄色斑点；
(6)茯苓酸的薄层色谱鉴别：取茯苓酸对照品用甲醇溶解制成0.5mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液和对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸溶液为展开剂上行展开，取出，晾干后薄层色谱喷以硫酸-乙醇溶液显色，在105℃烘烤至斑点清晰，日光下检视；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的灰黄色斑点。
步骤(2)中所述的展开剂三氯甲烷-甲醇-水-甲酸的体积比为40：10：1：1。
步骤(3)中所述的展开剂正丁醇-乙酸乙酯-水的体积比为4：1：1；
步骤(4)中所述的展开剂三氯甲烷-甲醇-水的体积比为6：3：1。
步骤(5)中所述的展开剂三氯甲烷-甲醇的体积比为20：1。
步骤(6)中所述的展开剂甲苯-乙酸乙酯-甲酸的体积比为30：10：1。
本发明优点：
与现有技术比较，本发明的优点在于：
（1）本发明所提供的“胆胃康胶囊”薄层色谱鉴别方法，与现行“胆胃康胶囊”药品标准比较，建立了组方主要药材的代表性化学成分獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸的7 项薄层鉴别方法，进一步完善和提高了民族药“胆胃康胶囊”的质量检测方法。
（2）样品前处理采用超声处理样品以提取各组方药材的代表性化学成分，被检测成分溶出比较充分，简化了实验操作步骤，缩短了供试溶液制备时间，排除了其它物质的干扰。
（3）筛选的展开剂系统对相应的被检测成分分离效果好，薄层色谱斑点清晰，结果判断明确，能客观、高效的鉴别民族药“胆胃康胶囊”主要组方药材中的代表性成分。
（4）增加了獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸等7项薄层色谱鉴别检测指标，能更准确的检测“胆胃康胶囊”中上述化学成分的存在情况，并能专属地对应到相应的组方药材，有利于更好的控制药品质量。
附图说明
图1：獐牙菜苦苷的鉴别
色谱图（獐牙菜苦苷的鉴别）中斑点1、2、3为三个批次的民族药“胆胃康胶囊”供试品溶液，斑点4为獐牙菜苦苷对照品溶液，斑点5为缺青叶胆的“胆胃康胶囊”制剂阴性对照溶液。
附图2：汉黄芩素的的鉴别
色谱图（汉黄芩素的的鉴别）中斑点1、2、3为三个批次的民族药“胆胃康胶囊”供试品溶液，斑点4为汉黄芩素对照品溶液，斑点5为缺西南黄芩的“胆胃康胶囊”制剂阴性对照溶液。
附图3：柚皮苷的鉴别
色谱图（柚皮苷的鉴别）中斑点1、2、3为三个批次的民族药“胆胃康胶囊”供试品溶液，斑点4为柚皮苷对照品溶液，斑点5为缺枳壳的“胆胃康胶囊”制剂阴性对照溶液。
附图4：新橙皮苷的鉴别
色谱图（新橙皮苷的鉴别）中斑点1、2、3为三个批次的民族药“胆胃康胶囊”供试品溶液，斑点4为新橙皮苷对照品溶液，斑点5为缺枳壳的“胆胃康胶囊”制剂阴性对照溶液。
附图5：泽泻醇B的鉴别
色谱图（泽泻醇B的鉴别）中斑点1、2、3为三个批次的民族药“胆胃康胶囊”供试品溶液，斑点4为泽泻醇B对照品溶液，斑点5为缺泽泻的“胆胃康胶囊”制剂阴性对照溶液。
附图6：23-乙酰泽泻醇B的鉴别
色谱图的鉴别中斑点1、2、3为三个批次的民族药“胆胃康胶囊”供试品溶液，斑点4为23-乙酰泽泻醇B对照品溶液，斑点5为缺泽泻的“胆胃康胶囊”制剂阴性对照溶液。
附图7：茯苓酸的鉴别
色谱图（茯苓酸的鉴别）中斑点1、2、3为三个批次的民族药“胆胃康胶囊”供试品溶液，斑点4为茯苓酸对照品溶液，斑点5为缺茯苓的“胆胃康胶囊”制剂阴性对照溶液。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点能够更加清晰明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。此处描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明保护内容。
一种胆胃康胶囊的薄层色谱鉴别方法，包括了对“胆胃康胶囊”处方主要药味所含有的代表性化学成分獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸的薄层色谱鉴别，按以下步骤进行：
(1)供试品溶液的制备：
取“胆胃康胶囊”内容物3g加甲醇45mL超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加3mL甲醇溶解作为供试品溶液；
(2)獐芽菜苦苷的薄层色谱鉴别：
獐芽菜苦苷对照品用甲醇溶解制成0.5mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液和对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇-水-甲酸溶液为展开剂上行展开，取出，晾干；薄层色谱喷以硫酸-乙醇溶液，晾干后置紫外光灯（254nm）下检视；供试品色谱在与獐芽菜苦苷对照品色谱相应的位置上显相同色调的蓝绿荧光斑点；
(3)汉黄芩素的薄层色谱鉴别：
取汉黄芩素对照品用甲醇溶解制成0.3mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液和对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以正丁醇-乙酸乙酯-水的上层溶液为展开剂上行展开，取出，晾干，薄层色谱置碘蒸气缸中熏蒸显色，置紫外光灯（254nm）下检视；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的暗棕色荧光斑点；
(4)柚皮苷和新橙皮苷的薄层色谱鉴别：分别取柚皮苷和新橙皮苷对照品，分别用甲醇溶解制成0.3mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液、柚皮苷和新橙皮苷对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂上行展开，取出，晾干；薄层色谱喷以1%三氯化铝-乙醇溶液，晾干后置紫外光灯（365nm）下检视；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的蓝紫色荧光斑点；
(5)泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B薄层色谱鉴别：分别取泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B对照品，分别用甲醇溶解制成0.3mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇溶液为展开剂上行展开，取出，晾干；薄层色谱喷以2%的香草醛-硫酸-乙醇溶液显色，晾干后在105℃烘烤至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的灰黄色斑点；
(6)茯苓酸的薄层色谱鉴别：取茯苓酸对照品用甲醇溶解制成0.5mg/mL的对照品溶液；分别吸取供试品溶液和对照品溶液各3μL，分别点于同一薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸溶液为展开剂上行展开，取出，晾干后薄层色谱喷以硫酸-乙醇溶液显色，在105℃烘烤至斑点清晰，日光下检视；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的灰黄色斑点。
步骤(2)中所述的展开剂三氯甲烷-甲醇-水-甲酸的体积比为40：10：1：1。
步骤(3)中所述的展开剂正丁醇-乙酸乙酯-水的体积比为4：1：1；
步骤(4)中所述的展开剂三氯甲烷-甲醇-水的体积比为6：3：1。
步骤(5)中所述的展开剂三氯甲烷-甲醇的体积比为20：1。
步骤(6)中所述的展开剂甲苯-乙酸乙酯-甲酸的体积比为30：10：1。
本发明克服了民族药“胆胃康胶囊”现行药品标准对组方药材鉴别的质量控制点偏少的技术缺点，提供一种“胆胃康胶囊”的薄层色谱鉴别方法，该方法旨在增加更全面的定性分析指标来鉴别更多的组方药材，完善和提升“胆胃康胶囊”药品质量标准。
其技术路线是以“胆胃康胶囊”处方药材含有的代表性成分为对照品研究组方药材的专属性鉴别方法，增加组方药材的可鉴别数量。提供的方法增加了以獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸为对照品的7项薄层色谱定性鉴别项目，分别指向“胆胃康胶囊”组方主要药材青叶胆、西南黄芩、枳壳、泽泻和茯苓在制剂中的存在检测。
提供的薄层色谱鉴别方法在样品前处理方面能有效排除其它物质干扰，薄层色谱分离度佳、操作简便、重现性好。与现行“胆胃康胶囊”药品标准相比增加了7个代表性成分的定性鉴别指标，鉴别方法对照更全面、专属性强，判断直观明确、结论客观可靠。
一、本发明的目的通过以下技术方案来实现
根据现行“胆胃康胶囊”药品标准（2012）国药标字ZD-0334号文（WS-10124（ZD0124）-2002-2012Z），本品处方和制法为：
青叶胆150g、西南黄芩150g、枳壳100g、竹叶柴胡150g、白芍150g、泽泻100g、茯苓100g、茵陈100g、淡竹叶50g、灯心草50g。以上10味药材饮片，青叶胆粉碎成细粉，备用；枳壳、竹叶柴胡提取挥发油备用，蒸馏所得的水溶液另器收集备用，药渣与其余的西南黄芩等7味加水浸泡12小时，煎煮三次，每次2小时，滤过，合并滤液，滤液与上述蒸馏所得的水溶液合并，浓缩至相对密度约1.20（50℃）的浸膏；浸膏与上述细粉混匀，制成颗粒，干燥，喷入上述挥发油，装入胶囊，制成1000粒，即得。
本品为胶囊剂，内容物为棕褐色颗粒，气微，味苦、涩。功能主治的彝医药描述为：色甲渴奴，嗨补且凯扎奴，达克奴，勒奴。中医药描述为：舒肝利胆，清热利湿。用于肝胆湿热所致的肋痛，黄疸，以及胆汁反流性胃炎，胆囊炎见上述症状者。
本发明技术研发涉及的“胆胃康胶囊”药品均为云南保元堂药业有限责任公司生产的“胆胃康胶囊”上市销售药品；涉及的对照品獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸均购于成都埃法生物科技公司（纯度≥98%）。
使用的薄层色谱板为青岛海洋化工集团、烟台信德科技公司、默克公司（上海）生产的硅胶G普通薄层色谱板；展开剂系统筛选使用的溶剂（试剂）均为普通化学纯或分析纯溶剂（试剂）。
本发明提供的“胆胃康胶囊”薄层色谱鉴别方法，包括了以獐牙菜苦苷（指向组方药材青叶胆）、汉黄芩素（指向组方药材西南黄芩）、柚皮苷、新橙皮苷（指向组方药材枳壳）、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B（指向组方药材泽泻）和茯苓酸（指向组方药材茯苓）为对照品的一系列薄层色谱鉴别。
1、獐牙菜苦苷的薄层色谱鉴别
獐牙菜苦苷是民族药“胆胃康胶囊”组方君药“青叶胆”的代表性成分，鉴别“胆胃康胶囊”中存在獐牙菜苦苷可比较专属的表征和判定“胆胃康胶囊”在生产过程中青叶胆药材的投料情况。
取“胆胃康胶囊”内容物，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；取獐牙菜苦苷对照品用甲醇溶解作为对照品溶液。另取除青叶胆之外的“胆胃康胶囊”组方药材，按照上述制法制成不含青叶胆的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺青叶胆的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇-水-甲酸（40：10：1：1）溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干。薄层色谱喷以10%硫酸-乙醇溶液显色，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点；缺青叶胆的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的荧光斑点。
2、汉黄芩素的薄层色谱鉴别
汉黄芩素是“胆胃康胶囊”组方药材西南黄芩的代表性成分，鉴别“胆胃康胶囊”中存在汉黄芩素对表征和判定“胆胃康胶囊”在生产过程中西南黄芩药材的投料情况有指向性意义。
取“胆胃康胶囊”内容物，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；取汉黄芩素对照品用甲醇溶解作为对照品溶液。另取除西南黄芩之外的“胆胃康胶囊”组方药材，按照上述制法制成不含西南黄芩的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺西南黄芩的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以正丁醇-乙酸乙酯-水（4：1：1）的上层溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干。薄层色谱置于碘蒸气缸中熏蒸显色，置紫外光灯（254 nm）下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；缺西南黄芩的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的荧光斑点。
3、柚皮苷和新橙皮苷的薄层色谱鉴别
柚皮苷和新橙皮苷是“胆胃康胶囊”组方药材枳壳的主要代表性成分，鉴别“胆胃康胶囊”中存在柚皮苷和新橙皮苷可以比较专属的表征和判定“胆胃康胶囊”在生产过程中枳壳药材的投料情况。
取“胆胃康胶囊”内容物，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；分别取柚皮苷和新橙皮苷对照品用甲醇溶解作为对照品溶液。另取除枳壳之外的“胆胃康胶囊”组方药材，按照上述制法制成不含枳壳的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺枳壳的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇-水（6：3：1）的下层溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干。薄层色谱喷以1%三氯化铝-乙醇溶液，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点；缺枳壳的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的荧光斑点。
4、23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B的薄层色谱鉴别
23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B是“胆胃康胶囊”组方药材泽泻的代表性化学成分，鉴别“胆胃康胶囊”中存在23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B能比较专属的表征和判定“胆胃康胶囊”在生产过程中泽泻药材的投料情况。
取“胆胃康胶囊”内容物，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；分别取23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B对照品用甲醇溶解作为对照品溶液。另取除泽泻之外的“胆胃康胶囊”组方药材，按照上述制法制成不含泽泻的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺泽泻的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇（20：1）溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干。薄层色谱喷以2%的香草醛-硫酸-乙醇溶液显色，晾干，在105℃烘烤至斑点显色清晰，日光下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；缺泽泻的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的斑点。
5、茯苓酸的的薄层色谱鉴别
茯苓酸是“胆胃康胶囊”组方药材茯苓的代表性成分，鉴别“胆胃康胶囊”中存在茯苓酸能专属的表征和判定“胆胃康胶囊”在生产过程中茯苓药材的投料情况。
取“胆胃康胶囊”内容物，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；取茯苓酸对照品用甲醇溶解作为对照品溶液。另取除茯苓之外的“胆胃康胶囊”组方药材，按照上述制法制成不含茯苓的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺茯苓的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（30：10：1）溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干，薄层色谱喷以10%硫酸-乙醇溶液显色，晾干，在105℃烘烤至斑点清晰，日光下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；缺茯苓的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的斑点。
二、本发明对提供的薄层色谱鉴别方法进行了以下研究
1、供试品溶液、阴性对照溶液的制备
取胶囊内容物，分别用水、甲醇、丙酮为溶剂，分别以回流、超声处理的方法提取试验。结果表明：水、甲醇、丙酮的提取物均能通过薄层色谱检测存在有獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸，但以甲醇提取物的斑点更为清晰且干扰较少；回流和超声处理提取无明显区别。由此确定以甲醇为溶剂超声处理的方法来制备薄层色谱鉴别供试品溶液。缺各位药材的阴性对照溶液也按照上述方法平行制备。
2、薄层色谱展开剂系统的筛选
根据目前中药质量标准薄层色谱鉴别的常规技术方法，选择最常用的硅胶G薄层色谱板为色谱固定相进行研究。
（1）獐牙菜苦苷的薄层色谱鉴别：考察了二元溶剂体系三氯甲烷-甲醇、三氯甲烷-丙酮的不同配比；三元溶剂体系的三氯甲烷-甲醇-水、正丁醇-乙酸乙酯-水的不同配比；以及在上述溶剂体系中加甲酸调节pH的改良型方法进行系统比较试验。结果表明，以改良的四元溶剂系统三氯甲烷-甲醇-水-甲酸（40：10：1：1）溶液为展开剂，上行展开的分离效果最好。
（2）汉黄芩素的薄层色谱鉴别：考察了二元溶剂体系三氯甲烷-甲醇、三氯甲烷-丙酮的不同配比；三元溶剂体系三氯甲烷-甲醇-水、正丁醇-乙酸乙酯-水的不同配比进行系统比较试验。研究结果表明以三元溶剂系统正丁醇-乙酸乙酯-水（4：1：1）的上层溶液为展开剂，上行展开的分离效果最好。
（3）柚皮苷和新橙皮苷的薄层色谱鉴别：考察了二元溶剂体系三氯甲烷-甲醇，三元溶剂体系三氯甲烷-甲醇-水、正丁醇-乙酸乙酯-水的不同配比进行系统比较试验。研究结果表明以三元溶剂系统三氯甲烷-甲醇-水（6：3：1）的下层溶液为展开剂，上行展开的分离效果最好。
（4）泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B的薄层色谱鉴别：考察了二元溶剂体系环己烷-丙酮、环己烷-乙酸乙酯、三氯甲烷-甲醇、三氯甲烷-丙酮的不同配比进行比较试验。研究结果表明以三氯甲烷-甲醇（20：1）溶液为展开剂，上行展开的分离效果最好。
（5）茯苓酸的薄层色谱鉴别：考察了二元溶剂系统三氯甲烷-甲醇、三氯甲烷-丙酮；三元溶剂系统三氯甲烷-甲醇-水、正丁醇-乙酸乙酯-水、甲苯-乙酸乙酯-甲酸、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇的不同配比进行系统比较试验。研究结果表明以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（30：10：1）溶液为展开剂，上行展开的分离效果最好。
3、硅胶G薄层色谱板的比较
根据上述确定的各种的薄层色谱条件，比较了青岛海洋化工集团干燥剂厂、烟台信德科技公司和默克公司（上海）生产的硅胶G薄层色谱板的分离效果。结果表明所有厂家的硅胶G薄层色谱板在上述薄层色谱件下均有较好的分离效果，在实际应用中可以选择不同厂家的硅胶G薄层色板。
4、展开的环境温度、湿度对薄层色谱的影响
考察了不同展开温度、湿度条件对上述獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸为对照品的薄层色谱鉴别的影响，在展开温度10℃～30℃、相对湿度35％～80％的条件下，上述薄层色谱均有较好分离效果。结果表明上述薄层色谱鉴别方法对具体的展开温度、湿度无特殊要求，在普通实验室的常规条件下即可完成薄层色谱鉴别工作。
5、展开剂蒸汽饱和时间对薄层色谱的影响
考察了展开剂在不同饱和时间条件对上述獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸为对照品的薄层色谱鉴别的影响。结果表明，展开剂不饱和、饱和10分钟、20分钟对薄层色谱无明显影响，在实际工作应用中展开剂不需进行预饱和即可进行薄层色谱鉴别的色谱展开操作。
6、上述薄层色谱鉴别方法的专属性
按照上述獐牙菜苦苷、汉黄芩素、柚皮苷、新橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇B和茯苓酸为对照品的薄层色谱鉴别方法，制备供试品溶液、对照品溶液；并平行以供试品溶液相同的方法制备不含某味药材的缺某味药材的阴性对照溶液。
按照上述确定的展开方法，分别吸取相应的供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液点于硅胶G薄层色谱板上，用确定的展开剂展开后显色。供试品薄层色谱中，在与对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；阴性対照溶液没有相应斑点，其它成分无干扰。结果表明上述薄层色谱鉴别方法对其鉴别的代表性成分具有专属性。
实施例1：“胆胃康胶囊”中獐芽菜苦苷的薄层色谱鉴别
取“胆胃康胶囊”内容物3g，加甲醇45mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加3mL甲醇溶解，作为供试品溶液。取獐芽菜苦苷对照品用甲醇溶解，制成0.5mg/mL的对照品溶液。
另取除青叶胆之外的“胆胃康胶囊”组方药材9味，按照“胆胃康胶囊”标准规定的制法制成不含青叶胆的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺青叶胆的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各3μL，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇-水-甲酸（40：10：1：1）溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干。薄层色谱喷以10%硫酸-乙醇溶液显色，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与獐芽菜苦苷对照品色谱相应的位置上，显相同色调的蓝绿荧光斑点。缺青叶胆的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱对应的位置上没有相应的荧光斑点。
根据上述薄层色谱结果，可以客观、准确的判断被检测的民族药制剂“胆胃康胶囊”中是否含有组方主要药材“青叶胆”。
实施例2：“胆胃康胶囊”中汉黄芩素的薄层色谱鉴别
取“胆胃康胶囊”内容物3g，加甲醇45mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加3mL甲醇溶解，作为供试品溶液。取汉黄芩素对照品用甲醇溶解，制成0.3mg/mL的对照品溶液。
另取除西南黄芩之外的“胆胃康胶囊”组方药材9味，按照“胆胃康胶囊”标准规定的制法制成不含西南黄芩的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺西南黄芩的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各3μL，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以正丁醇-乙酸乙酯-水（4：1：1）的上层溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干。薄层色谱置于碘蒸气缸中熏蒸显色，置紫外光灯（254 nm）下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的暗棕色荧光斑点；缺西南黄芩的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的荧光斑点。
根据上述薄层色谱结果，可以客观、准确的判断被检测的民族药制剂“胆胃康胶囊”中是否含有组方主要药材“西南黄芩”。
实施例3：“胆胃康胶囊”中柚皮苷和新橙皮苷的薄层色谱鉴别
取“胆胃康胶囊”内容物3g，加甲醇45mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3mL溶解，作为供试品溶液。分别取柚皮苷和新橙皮苷对照品，分别加甲醇分别制成每1mL含0.3mg的溶液，作为对照品溶液。
另取除枳壳之外的“胆胃康胶囊”组方药材9味，按照“胆胃康胶囊”标准规定的制法制成不含枳壳的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺枳壳的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、柚皮苷和新橙皮苷对照品溶液、阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇-水（6：3：1）的下层溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干。薄层色谱喷以1%三氯化铝-乙醇溶液，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的蓝紫色荧光斑点；缺枳壳的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的荧光斑点。
根据上述薄层色谱结果，可以客观、准确的判断被检测的民族药制剂“胆胃康胶囊”中是否含有组方主要药材“枳壳”。
实施例4：“胆胃康胶囊”中23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B的薄层色谱鉴别
取“胆胃康胶囊”内容物3g，加甲醇45mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3mL溶解，作为供试品溶液。分别取23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B对照品，分别加甲醇分别制成每1mL含0.3mg的溶液，作为对照品溶液。
另取除泽泻之外的“胆胃康胶囊”组方药材9味，按照“胆胃康胶囊”标准规定的制法制成不含泽泻的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺泽泻的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B对照品溶液、阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以三氯甲烷-甲醇（20：1）溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干。薄层色谱喷以2%的香草醛-硫酸-乙醇溶液显色，晾干，在105℃烘烤至斑点显色清晰，日光下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的灰黄色斑点；缺泽泻的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的斑点。
根据上述薄层色谱结果，可以客观、准确的判断被检测的民族药制剂“胆胃康胶囊”中是否含有组方主要药材“泽泻”。
实施例5 ：“胆胃康胶囊”中茯苓酸的薄层色谱鉴别
取“胆胃康胶囊”内容物3g，加甲醇45mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3mL溶解，作为供试品溶液。取茯苓酸对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
另取除茯苓之外的“胆胃康胶囊”组方药材9味，按照“胆胃康胶囊”标准规定的制法制成不含茯苓的阴性对照样品，并按照上述方法制成缺茯苓的阴性对照溶液。
分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层色谱板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（30：10：1）溶液为展开剂，上行展开，取出，晾干，薄层色谱喷以10%硫酸-乙醇溶液显色，晾干，在105℃烘烤至斑点清晰，日光下检视。
“胆胃康胶囊”供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的灰黄色斑点；缺茯苓的阴性对照溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上没有相应的斑点。
机译： 一种用于在薄层色谱中将具有平行面和平面的板上薄层施加的设备，用于逐步进行薄层色谱分析
机译： 包含胆甾型液晶层和数据记录介质的光学片，数据记录方法和使用它们的数据鉴别方法
机译： 包含胆甾型液晶层的光学片，使用相同层的信息记录体，信息记录方法和信息鉴别方法
