一种预防对虾白斑综合症的组合物及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种预防对虾白斑综合症的组合物及其制备方法与应用，属于对虾饲料技术领域。每100g上述组合物中含有10‑20g的灰树花、10‑20g的辣木籽以及5‑10g的α‑硫辛酸，余量为麦饭石。其中，灰树花与辣木籽、α‑硫辛酸配伍使用可起到抗对虾白斑病毒、调节免疫以及抗机体氧化损伤的作用，辣木籽与麦饭石可配伍使用去除水体中有害物质和病菌，改善水体环境，以上组分共同作用达到预防对虾白斑综合症的作用。该组合物按配比混合各原料即可得到，操作简单方便。将其用于制备对虾饲料，可使对虾饲料具有良好的预防对虾白斑综合症的效果。

说明书

技术领域

本发明涉及对虾饲料技术领域，具体而言，涉及一种预防对虾白斑综合症的组合物及其制备方法与应用。

背景技术

我国是对虾养殖产量和消费大国，国内消费仍处于不断上升阶段，但由于苗种培育、疾病防控、环境调控等技术难题的出现，限制了对虾养殖业的发展。对虾白斑综合症是对虾养殖中危害最严重的疾病之一，感染虾2-5天死亡率达80％，2-10天死亡率达100％，每年给对虾养殖业造成巨大经济损失，成为目前对虾养殖业可持续发展的主要障碍之一。

尽管各国学者自对虾白斑综合症大规模暴发以来，一直在不断寻找预防和控制该病的方法，但至今该病的防治仍是一大难题。由于该病来势快，感染率和死亡率高，因此，对该病的预防工作尤为重要。通过饲料给药预防对虾白斑综合征的发生和流行是生产中便捷可行的方法，但目前确定有效的针对对虾白斑综合征的免疫增强剂仍鲜见报道。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的之一包括提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，以解决上述技术问题。

本发明的目的之二包括提供一种上述组合物的制备方法。

本发明的目的之三包括提供一种上述组合物的应用，即用于制备对虾饲料。

本发明的目的之四包括提供一种含有上述组合物的对虾饲料。

本申请可这样实现：

第一方面，本申请提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g上述组合物中含有10-20g的灰树花、10-20g的辣木籽以及5-10g的α-硫辛酸，余量为麦饭石。

在可选的实施方式中，灰树花和辣木籽均为超微粉形式。

在可选的实施方式中，超微粉为过400-600目筛后的筛下物。

第二方面，本申请提供如前述实施方式任一项的组合物的制备方法，包括以下步骤：按配比混合灰树花、辣木籽、α-硫辛酸以及麦饭石。

在可选的实施方式中，与α-硫辛酸以及麦饭石混合前，粉碎灰树花和辣木籽。

在可选的实施方式中，粉碎包括第一次粉碎以使第一次粉碎后的粉碎物可过100-120目筛。

在可选的实施方式中，第一次粉碎于粉碎机中进行。

在可选的实施方式中，粉碎还包括第二次粉碎以使第二次粉碎后的粉碎物可过400-600目筛。

在可选的实施方式中，第二次粉碎为超微粉碎。

在可选的实施方式中，第二次粉碎于行星式球磨机中进行。

在可选的实施方式中，粉碎前，还包括干燥灰树花和所述辣木籽。

在可选的实施方式中，干燥于60-65℃的条件下进行。

第三方面，本申请提供如前述实施方式任一项的组合物的应用，即用于制备对虾饲料。

第四方面，本申请提供一种对虾饲料，其含有如前述实施方式任一项的组合物。

在可选的实施方式中，组合物在对虾饲料中的添加量为0.05-0.2wt％；

在可选的实施方式中，组合物在对虾饲料中的添加量为0.1wt％。

本申请的有益效果包括：

本申请提供的组合物高效、安全、环保、无毒副作用，通过灰树花与辣木籽、α-硫辛酸按特定配伍使用可起到抗对虾白斑病毒、调节免疫以及抗机体氧化损伤的作用。辣木籽与麦饭石可配伍使用去除水体中有害物质和病菌，改善水体环境，以上组分共同作用达到预防对虾白斑综合症的作用。

本申请提供的上述组合物的制备方法简单，易操作。将其用于制备对虾饲料，可使相应的对虾饲料具有良好的预防对虾白斑综合症的效果。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

下面对本申请提供的预防对虾白斑综合症的组合物及其制备方法与应用进行具体说明。

本申请提出一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g上述组合物中含有10-20g的灰树花、10-20g的辣木籽以及5-10g的α-硫辛酸，余量为麦饭石。

可参考地，灰树花和辣木籽的含量均可分别为10g、12g、15g、18g或20g，也可以为10-20g范围内的其它任意值。

α-硫辛酸的含量可以为5g、6g、7g、8g、9g或10g，也可以为5-10g范围内的其它任意值。

其中，灰树花原产于中国，是一种大型药食两用真菌，其化学成分种类丰富，除含有灰树花多糖外，还含有丰富的多酚、甾类物质及有机酸类物质、维生素、微量元素等活性成分，具有广泛的药理活性。本申请中，其主要起到抗病毒、抗细菌、抗氧化以及免疫调节作用，此外，其还可起到降低微生物蛋白的水解作用。

在优选的实施方式中，灰树花以超微粉形式作为本申请组合物的原料使用，该超微粉可理解为灰树花经粉碎后，过400-600目筛得到的筛下物。灰树花经超微粉碎后，粒径小，表面光滑，无完整菌丝等组织结构存在，能够更好地释放活性成分。

辣木籽为药食两用植物辣木的种子，其富含黄酮及多酚类活性物质，同时还有丰富的蛋白质、脂质和维生素、微量元素等。在本申请中，其可起到抗菌及抗氧化等生物活性。

在优选的实施方式中，辣木籽以超微粉形式作为本申请组合物的原料使用，该超微粉可理解为辣木籽经粉碎后，过400-600目筛得到的筛下物。

辣木籽和灰树花均以超微粉的形式作为原料组分，不仅可使其所含的多种活性成分更好地得以释放以充分发挥多方面的药理作用，也可使二者配伍效果更好。此外，值得说明的是，将辣木籽超微粉末作为组合物的原料之一饲喂对虾，可在对虾的水环境中作为絮凝剂，短时间内降低水体浊度，去除水体中有害物质和病菌，净化水质，从而改善对虾养殖环境，预防对虾白斑综合症。

α-硫辛酸在本申请中作为抗氧化剂，用于降低超氧离子的产生，减弱DNA的氧化损伤，抑制脂质过氧化，提高机体免疫力，改善对虾体内抗氧化防御系统，对氧化应激引起的疾病起到显著的缓解作用。

麦饭石在本申请中可在对虾消化道内选择性地吸附氨气、硫化氢、重金属离子和病原微生物等有毒物质，降低排泄物总氨氮量，同时可溶出对虾生长所必须的矿物质和微量元素，增强机体抗病力；还可以微气泡方式在水中释放氧气，改善水体环境，净化水质。此外，麦饭石主要成分为铝硅酸盐，吸附性、流动性好，有利于使本申请组合物中各组分均匀分布，自由流动。

承上，通过将本申请中的各组分搭配使用，不仅能够起到各组分本身所原有作用，而且还能够通过组分间的协调互补以及复配作用，达到预防对虾白斑综合症的作用，具有高效、安全、环保、无毒副作用的突出优势。其中，灰树花与辣木籽、α-硫辛酸配伍使用可起到抗对虾白斑病毒、调节免疫、抗机体氧化损伤的作用，辣木籽与麦饭石可配伍使用去除水体中有害物质和病菌，改善水体环境，以上组分共同作用达到预防对虾白斑综合症的作用。

此外，本申请还提供了上述组合物的制备方法，包括以下步骤：按配比混合灰树花、辣木籽、α-硫辛酸以及麦饭石。

在可选的实施方式中，与α-硫辛酸以及麦饭石混合前，粉碎灰树花和辣木籽。

在可选的实施方式中，粉碎包括第一次粉碎以使第一次粉碎后的粉碎物可过100-120目筛。可参照地，第一次粉碎于粉碎机中进行。

具体的，将待粉碎的灰树花和辣木籽分别放入普通药用粉碎机中进行粉碎15分钟，过100-120目筛，即可得到灰树花粗粉和辣木籽粗粉。

进一步地，粉碎还包括第二次粉碎以使第二次粉碎后的粉碎物可过400-600目筛。第二次粉碎为超微粉碎。可参考地，第二次粉碎于行星式球磨机中进行。

具体的，将灰树花粗粉和辣木籽粗粉分别加入行星式球磨机(如四平高斯达纳米加工有限公司)中超微粉碎2h后，过500目筛，即可得到灰树花超微粉和辣木籽超微粉。

在可选的实施方式中，粉碎前，还包括干燥灰树花和辣木籽。可参考地，干燥可于60-65℃的条件下进行，干燥可采用烘干方式。

此外，本申请还提供了上述组合物的应用，即用于制备对虾饲料。

相应地，本申请还提供了一种对虾饲料，其含有上述组合物。

在可选的实施方式中，组合物在对虾饲料中的添加量为0.05-0.2wt％，如0.05wt％、0.1wt％或0.2wt％。优选地，组合物在对虾饲料中的添加量为0.1wt％。

上述对虾饲料的应用方法可参照：在对虾白斑综合症发病季节前6周将本申请提供的组合物以0.1wt％的比例加入对虾饲料中，每隔一周进行投喂。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

本实施例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有10g灰树花、10g辣木籽、5gα-硫辛酸以及75g麦饭石。

其制备方法包括以下步骤：

将灰树花、辣木籽分别在65℃的烘箱中烘干，随后依次放入普通药用粉碎机粉碎15分钟，过100目筛得到灰树花粗粉和辣木籽粗粉。将灰树花粗粉和辣木籽粗粉分别放入行星式球磨机(四平高斯达纳米加工有限公司)中超微粉碎2h，将粉末过500目筛，得到灰树花超微粉和辣木籽超微粉。将灰树花超微粉、辣木籽超微粉、α-硫辛酸和麦饭石按配比混合。

实施例2

本实施例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有15g灰树花、15g辣木籽、8gα-硫辛酸以及62g麦饭石。

制备方法同实施例1。

实施例3

本实施例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有20g灰树花、20g辣木籽、10gα-硫辛酸以及50g麦饭石。

制备方法同实施例1。

实施例4

本实施例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，其组成同实施例2。

其制备方法包括以下步骤：

将灰树花、辣木籽分别在60℃的烘箱中烘干，随后依次放入普通药用粉碎机粉碎15分钟，过100目筛得到灰树花粗粉和辣木籽粗粉。将灰树花粗粉和辣木籽粗粉分别放入行星式球磨机(四平高斯达纳米加工有限公司)中超微粉碎2h，将粉末过400目筛，得到灰树花超微粉和辣木籽超微粉。将灰树花超微粉、辣木籽超微粉、α-硫辛酸和麦饭石按配比混合。

实施例5

本实施例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，其组成同实施例2。

其制备方法包括以下步骤：

将灰树花、辣木籽分别在62.5℃的烘箱中烘干，随后依次放入普通药用粉碎机粉碎15分钟，过120目筛得到灰树花粗粉和辣木籽粗粉。将灰树花粗粉和辣木籽粗粉分别放入行星式球磨机(四平高斯达纳米加工有限公司)中超微粉碎2h，将粉末过600目筛，得到灰树花超微粉和辣木籽超微粉。将灰树花超微粉、辣木籽超微粉、α-硫辛酸和麦饭石按配比混合。

对比例1

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有5g灰树花、5g辣木籽、3gα-硫辛酸以及87g麦饭石。

制备方法同实施例1。

对比例2

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有25g灰树花、25g辣木籽、15gα-硫辛酸以及35g麦饭石。

制备方法同实施例1。

对比例3

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有15g辣木籽、8gα-硫辛酸以及77g麦饭石。

制备方法同实施例1。

对比例4

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有15g灰树花、8gα-硫辛酸以及77g麦饭石。

制备方法同实施例1。

对比例5

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有15g灰树花、15g辣木籽以及70g麦饭石。

制备方法同实施例1。

对比例6

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有8gα-硫辛酸以及92g麦饭石。

制备方法同实施例1。

对比例7

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有15g辣木籽以及85g麦饭石。

制备方法同实施例1。

对比例8

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有15g灰树花以及85g麦饭石。

制备方法同实施例1。

对比例9

本对比例提供一种预防对虾白斑综合症的组合物，每100g该组合物中含有15g灰树花、15g辣木籽、8gα-硫辛酸以及62g麦麸。

制备方法同实施例1。

对比例10

组合物的组成和制备方法均同实施例2。差异仅在于投喂方式不同。

试验例

本试验采用单因子设计，试验鱼于42个水泥池中(2m×2m×1.5m)采用海水进行养殖，每日饱食投喂3次(11:00、16:00、21:00)。暂养1周后，挑选健康、规格整齐(均重为8±0.4g)的南美白对虾3360尾，随机分成14组，每组3个重复，每个重复80尾。

其中对照组1个，饲喂基础饲料，为南美白对虾专用饲料(购自福建傲农生物科技集团股份有限公司，粒径1mm)；试验组和对比组所有饲料用小型颗粒机加工成粒径为1mm左右的颗粒进行投喂，其中试验组1-3试验期间每隔一周饲喂基础饲料粉碎后分别添加实施例1-3提供的组合物制得的颗粒饲料，其余时间饲喂基础饲料；对比组1-9试验期间每隔一周饲喂基础饲料粉碎后分别添加对比例1-9提供的组合物制得的颗粒饲料，其余时间饲喂基础饲料；对比组10试验期间连续饲喂基础饲料粉碎后添加实施例2提供的组合物。组合物的添加量均为基础饲料的0.1wt％。

养殖期6周，6周后给每尾虾注射50μL病毒液，观察并记录第12天死亡情况及虾体质量。

病毒液配制方法为：选取感染对虾白斑综合症的南美白对虾，取肌肉组织0.1g，加入1mL PBS缓冲液，冰浴匀浆，4℃，8000rpm离心30min后，取上清液用PBS缓冲液适当稀释，经0.22μm硝酸纤维素滤膜过滤除菌备用。

按以下方式计算成活率和增重率：

成活率(％)＝100×(终末个体数/初始个体数)；

增重率(％)＝100×(终末体质量-初始体质量)/初始体质量。

其结果如表1所示。

表1不同处理组南美白对虾存活率、增重率比较

注：同列上标没有相同字母表示差异显著(P<0.05)。

由表1可知，攻毒试验后，对照组南美白对虾的存活率为0％，试验组1-3的南美白对虾的存活率均大于80％，说明本申请提供的组合物可以有效预防对虾白斑综合症。

对比组1-2的南美白对虾的存活率在30％左右，极显著低于试验组1-3的对虾的存活率，说明本申请中各组分含量过高或过低均会明显影响对虾白斑综合症的预防效果。

对比组3-8的南美白对虾的存活率为8％-20％，极显著低于试验组1-3，说明本申请中的组合物中各原料组分需组合使用，单独添加灰树花、辣木籽、α-硫辛酸或者缺少其中的任何一种均不能达到预防对虾白斑综合症的效果。对比组3-8存活率无显著差异，说明本添加剂预防对虾白斑综合症的作用并非各组分的简单叠加，组分间存在协同作用，需要将各组分配伍使用才能够达到良好的预防对虾白斑综合症的效果。

对比组9的南美白对虾的存活率显著低于试验组1-3，说明以麦饭石作为本申请的载体对白斑综合症的预防效果影响显著。

对比组10的南美白对虾的存活率显著低于试验组1-3，说明连续投喂含有本申请的组合物的对虾饲料反而会降低对虾白斑综合症的预防效果，每周间隔投喂效果好。

此外，试验组1-3的南美白对虾的增重率均显著高于对比组1-10，说明间隔投喂含有本申请组合物的对虾饲料还可在预防对虾白斑综合症的同时促进其生长。

综上所述，本申请各组分间具有协同互补作用，使药效稳定、有效，灰树花与辣木籽、α-硫辛酸配伍使用可起到抗对虾白斑病毒、调节免疫、抗机体氧化损伤的作用，辣木籽与麦饭石可配伍使用去除水体中有害物质和病菌，改善水体环境，以上组分共同作用达到预防对虾白斑综合症的作用。上述组合物在净化水质上具有高效、安全、环保、无毒副作用的突出优势，从而改善对虾养殖环境，预防对虾白斑综合症。此外，采用间隔投喂方法，可在预防对虾白斑综合症的同时，促进对虾生长、降低饲料成本，为生产实践中预防对虾白斑综合症提供了有效的新方法。

以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。