用于治疗腹泻的营养组合物、其制备和治疗方法

摘要

本发明涉及包含岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’‑岩藻糖基乳糖的组合物，其用于治疗病毒引起的腹泻。所述组合物可以是婴儿配方物。还要求保护岩藻糖基化人乳低聚糖在制备营养组合物和治疗人类受试者中病毒引起的腹泻中的用途。

说明书

技术领域

本发明涉及含有非消化性低聚糖的婴儿营养物，特别是其用于治疗病毒引起的腹泻的用途。

背景技术

病毒感染在所有年龄的人中都很常见，但似乎往往集中在婴儿和儿童身上。许多病毒感染导致发烧和身体疼痛或不适，但并不是那么严重，大多数感染病毒的儿童无需治疗就会好转。特别是在婴儿期，父母很难判断他们的婴儿是否患有潜在的严重感染，并需要立即的医疗护理。

轮状病毒(RV)是婴儿急性腹泻病的主要病原体，如果不治疗，会导致脱水或更严重的并发症，甚至死亡。由于人RV发病机制尚不清楚，RV疫苗尚未在全球范围内应用，因此通过用生物活性成分进行营养干预来调节是值得关注的。最近的研究表明，HMOS在预防RV相关的腹泻中的可能作用(Laucirica et al.J Nutr 2017；147:1709–1714；Comstock etal.J Nutr Biochem Mol Genet Mech 2017；147:1041–1047)。

人乳是婴儿的优选食物。人乳提供了几种有益于生命早期的新生儿相对不成熟的免疫系统的生物活性因子。将这些成分根据它们的保护作用或其促进成熟的能力分为两个不同的组。从这个意义上说，人乳低聚糖(HMOS)被认为在保护和成熟方面均起作用。然而，母乳喂养婴儿并不总是可能或可取的。在这种情况下，婴儿配方物或后续配方物(followon formula)是很好的选择。为了尽可能接近地模拟人乳的有益效果，这些配方物应该有最佳的组成。

迄今为止发现的并在Urashima等人(Trends in Glycoscience andGlycotechnolology,2018,30；172,SE51-SE65)中记载的162种HMOS结构显示乳糖、聚乳糖胺或乳-N-二糖芯，其可进一步结合到岩藻糖或唾液酸或两者。这种结构赋予它们高度的化学变异性和免受消化的保护。因此，大部分HMOS在近端肠道中既不被吸收，也不被代谢，并且未经消化就到达远端肠道，对某些细菌群体发挥益生元作用，加强肠屏障，并预防肠道病原体感染。HMOS在人母乳中的存在比例相对较高(5-20g/L)。最丰富的HMOS是2’-岩藻糖基乳糖(2’-FL)，占人母乳中总低聚糖的约20％。2’-FL的体外和体内研究证明了其免疫调节作用，该免疫调节作用包括促进抗炎活性(He et al.Gut 2016；65:33–46)和抑制病原体的定殖(Ruiz-Palacios et al.J Biol Chem 2003；278:14112–20)。

WO 2016/139333涉及包含岩藻糖基化低聚糖(如2’-岩藻糖基乳糖)和特定的N-乙酰化低聚糖(如乳-N-新四糖(LNnT))的营养组合物，其用于对抗婴儿或幼儿的胃肠道感染和炎症。

发明概述

发明人发现，在新生大鼠模型中，轮状病毒引起的腹泻可以通过2’-岩藻糖基乳糖的存在来改善。特别是在腹泻的严重程度和持续时间方面观察到腹泻的改善。在涉及哺乳大鼠的动物模型中，发现通过给予2’-岩藻糖基乳糖的早期营养干预使腹泻的最大严重程度显著降低了15％，并且使腹泻的平均严重程度显著降低了22％。此外，在给予2’-岩藻糖基乳糖后，腹泻的持续时间显著降低了44％。此外，当分析粪便重量时，观察到感染病毒后粪便重量增加，而在给予2’-岩藻糖基乳糖后，粪便重量的增加在统计学上显著降低。

因此，发明人发现，在RV感染期间补充2’-FL可诱导明显的保护作用，显著降低腹泻的严重程度和持续时间以及粪便重量。

发明详述

因此，本发明涉及用于治疗人类受试者中病毒引起的腹泻的方法，其通过给予包含岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖的营养组合物。

换句话说，本发明涉及包含岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖的营养组合物，其用于治疗人类受试者中病毒引起的腹泻。

在优选的实施方案中，病毒引起的腹泻是轮状病毒引起的腹泻。

对于某些管辖区，本发明还可以被表述为岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖，在制备用于治疗人类受试者中病毒引起的腹泻的营养组合物中的用途。

岩藻糖基化HMO，优选2’-岩藻糖基乳糖的量，优选是治疗人类受试者中病毒引起的腹泻的有效量和/或降低病毒引起的腹泻的严重程度的有效量和/或缩短病毒引起的腹泻的持续时间的有效量。

益生元通常是难消化的糖类化合物，如非消化性低聚糖(NDO)。这些化合物通过胃肠道的第一部分，基本上没有被消化。在肠中，这些化合物通过微生物群发酵，释放出被人体吸收的短链脂肪酸等。

NDO的来源很多，其中包括人母乳。通常这些低聚糖被称为人乳低聚糖(HMOS)。婴儿食品中使用的典型NDO是GOS和FOS。

人乳是婴儿的首选食品，也被称为黄金标准。人乳中含有的低聚糖水平特别高，约为10至15g/L，这通常远远超过家畜的乳中的NDO水平。此外，与家畜的乳中的NDO相比，HMOS在结构上是不同的。人NDO是非常复杂的，由许多含有不同糖组成的不同化合物的异源组组成。由于它们复杂且多态的结构，大规模的合成是复杂的。因此，制备含有与人乳相同的NDO组成的组合物，如婴儿配方物，在技术和经济上尚不可行。在根据本发明的方法或用途中，使用了岩藻糖基化非消化性人乳低聚糖。

岩藻糖基乳糖(FL)是存在于人乳中的岩藻糖基化非消化性低聚糖。它不存在于牛乳中。它由连接在一起的三个单糖单元(岩藻糖、半乳糖和葡萄糖)组成。乳糖是通过β1,4键连接到葡萄糖单元的半乳糖单元。岩藻糖单元通过α1,2键连接到乳糖分子的半乳糖单元(2’-岩藻糖基乳糖，2’-FL)或通过α1,3键连接到乳糖的葡萄糖单元(3-岩藻糖基乳糖，3-FL)。2’FL是人乳中最丰富的NDO。本发明中使用的HMOS是2’-FL。

2’-FL、(β-L-Fuc-(1→2)-β-D-Gal-(1→4)-D-Glc)可商购自例如Sigma-Aldrich。或者，它可从人乳中分离出来，例如如在Andersson&Donald,1981,J Chromatogr.211:170-1744中所记载的，或通过遗传修饰的微生物产生，例如Albermann et al,2001,Carbohydrate Res.334:97-103中所记载的。

优选地，本发明的组合物包含1mg至3g 2’-FL/100ml，更优选10mg至2g，甚至更优选20mg至100mg 2’-FL/100ml。基于干重计，本发明的组合物优选包含0.007重量％至20重量％2’-FL，更优选0.07重量％至10重量％，甚至更优选0.15重量％至1重量％。较低量的岩藻糖基乳糖在改善病毒引起的腹泻方面效果较差，而过高量会导致产品不必要的高成本。

在一个实施方案中，根据本发明的用于所述用途的营养组合物不包含乳-N-新四糖(LNnT)。在一个实施方案中，根据本发明的用于所述用途的营养组合物不包含除2’-FL以外的人乳低聚糖。

营养组合物优选还包含除HMOS以外的非消化性低聚糖。除HMOS以外的非消化性低聚糖可以对粪便稠度产生影响，特别是使粪便变松的影响，因此这种影响会导致明显的相反结果，即腹泻不会得到改善。然而，当纠正除HMO以外的非消化性低聚糖所提供的共同影响时，特别是当纠正除HMO以外的非消化性低聚糖对粪便稠度的内在影响时，发现它们的加入在显著降低腹泻的严重程度得分和持续时间方面具有额外的作用。

NDO优选地通过存在于人上消化道，特别是在小肠和胃中的酸或消化酶的作用在肠中不被消化或仅部分被消化，并通过人肠道微生物群发酵。例如，蔗糖、乳糖、麦芽糖和普通麦芽糊精被认为是可消化的。

优选地，本发明的组合物包含DP为2至250，更优选2至60的非消化性低聚糖。非消化性低聚糖优选是选自以下的至少一种，更优选至少两种：低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖、低聚阿拉伯糖(arabino-oligosaccharide)、阿拉伯半乳低聚糖(arabinogalacto-oligosaccharide)、低聚葡萄糖、壳低聚糖(chito-oligosaccharide)、葡甘露低聚糖(glucomanno-oligosaccharide)、半乳甘露低聚糖(galactomanno-oligosaccharide)和低聚甘露糖。低聚果糖的组包括菊粉，低聚半乳糖的组包括反式低聚半乳糖或β-低聚半乳糖。

更优选地，本发明的组合物包含低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)，优选地，低聚半乳糖包含β-低聚半乳糖和/或α-低聚半乳糖。更优选地，低聚果糖是长链低聚果糖(lcFOS)。更优选地，低聚半乳糖是短链低聚半乳糖，β-低聚半乳糖是短链β-低聚半乳糖。最优选地，组合物包含长链低聚果糖和短链低聚半乳糖。短链低聚半乳糖和长链低聚果糖的重量比优选为100:1至1:10，优选为20:1至1:1，优选为约9:1。

低聚半乳糖优选是β-低聚半乳糖。在特别优选的实施方案中，本发明的组合物包含β-低聚半乳糖([半乳糖]n-葡萄糖；其中n是从2至60的整数，即2、3、4、5、6、…、59、60；优选地，n选自2、3、4、5、6、7、8、9和10)，其中半乳糖单元大部分通过β键连接在一起。β-低聚半乳糖还被称为反式低聚半乳糖(TOS)。例如，β-低聚半乳糖可以商品名Vivinal(TM)(Borculo Domo Ingredients,Netherlands)出售。另一个合适的来源是Bi2Munno(Classado)。优选地，低聚半乳糖包含β-1,3、β-1,4和/或β-1,6键。在优选的实施方案中，低聚半乳糖包含基于总键计的至少80％的β-1,4和β-1,6键，更优选至少90％。在另一个优选的实施方案中，低聚半乳糖包含基于总键计的至少50％的β-1,3键，更优选基于总键计的至少60％。

低聚果糖是包含β连接的果糖单元链的NDO，其DP或平均DP为2至250，更优选2至100，甚至更优选10至60。低聚果糖包括菊粉、果聚糖和/或混合型的多聚果糖。特别优选的低聚果糖是菊粉。适合用于组合物的低聚果糖也是市售的，例如

在优选的实施方案中，组合物包含菊粉和短链低聚果糖的混合物。在优选的实施方案中，组合物包含低聚半乳糖和低聚果糖的混合物，其中低聚果糖选自短链低聚果糖和菊粉，更优选菊粉。至少两种不同的非消化性低聚糖的混合物在更大程度上有利地刺激肠道微生物群的有益细菌。优选地，两种不同的非消化性低聚糖，优选低聚半乳糖和低聚果糖的混合物中的重量比为25至0.05，更优选为20至1。低聚半乳糖，优选β-低聚半乳糖，更能刺激双歧杆菌。优选地，本发明的组合物包含聚合度(DP)为2至10的低聚半乳糖，优选β-低聚半乳糖，和/或DP为2至60的低聚果糖。

在优选的实施方案中，组合物包含岩藻糖基化人乳低聚糖(优选2’-岩藻糖基乳糖)、短链低聚半乳糖和长链低聚果糖的组合。在优选的实施方案中，营养组合物中包含的短链低聚半乳糖和长链低聚果糖的和与2’-岩藻糖基乳糖的重量比优选为20:1至1:100，优选为10:1至1:50，更优选为4:1至1:20，最优选为1:1至1:15。

组合物还可包含长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)。LC-PUFA是这样的脂肪酸，其中酰基链的长度为20至24个碳原子(优选20或22个碳原子)，并且其中酰基链在酰基链中的所述碳原子之间包含至少两个不饱和键。更优选地，本发明的组合物包含至少一种选自以下的LC-PUFA：二十碳五烯酸(EPA，20:5n3)、二十二碳六烯酸(DHA，22:6n3)、花生四烯酸(ARA，20:4n6)和二十二碳五烯酸(DPA，22:5n3)，优选DHA、EPA和/或ARA。此类LC-PUFA对改善肠屏障完整性有进一步的有益作用。

本发明的组合物中LC-PUFA的优选含量不超过总脂肪酸的15重量％，优选不超过10重量％，甚至更优选不超过5重量％。优选地，本发明的组合物包含总脂肪酸的至少0.2重量％，优选至少0.25重量％，更优选至少0.35重量％，甚至更优选至少0.5重量％的LC-PUFA，更优选DHA。本发明的组合物优选包含ARA和DHA，其中ARA/DHA的重量比优选在0.25以上，优选在0.5以上，更优选为0.75-2，甚至更优选为0.75-1.25。重量比优选在20以下，更优选为0.5至5。DHA的量优选在总脂肪酸的0.2重量％以上，更优选在0.3重量％以上，更优选至少0.35重量％，甚至更优选0.35-0.6重量％。

本发明有利地涉及用于指定用途的组合物，其中脂质提供总卡路里的5至50％，蛋白质提供总卡路里的5至50％，以及碳水化合物提供总卡路里的15至90％。优选地，在本发明的组合物中，脂质提供总卡路里的35至50％，蛋白质提供总卡路里的7.5至12.5％，以及碳水化合物提供总卡路里的40至55％。为了计算蛋白组分的总卡路里的百分比，需要考虑由蛋白质、肽和氨基酸提供的总能量。

本发明的组合物优选包含至少一种选自动物脂质(人类脂质除外)和植物脂质的脂质。优选地，本发明的组合物包含植物脂质和至少一种选自鱼油、动物油、藻油、真菌油和细菌油的油的组合。包含2’-FL的本发明的组合物不是人乳。

本发明的组合物优选包含蛋白质。营养制剂中使用的蛋白组分优选选自非人动物蛋白(优选乳蛋白，优选来自牛乳的蛋白质)、植物蛋白(优选大豆蛋白和/或大米蛋白)、游离氨基酸及其混合物。本发明的组合物优选含有酪蛋白、乳清、水解酪蛋白和/或水解乳清蛋白。优选地，蛋白质包括完整的蛋白质，更优选完整的牛乳清蛋白和/或完整的牛酪蛋白。

本发明的组合物优选包含可消化的碳水化合物。本发明的组合物优选包含可消化的碳水化合物组分，其中至少35重量％，更优选至少50重量％，更优选至少75重量％，甚至更优选至少90重量％，最优选至少95重量％是乳糖。本发明的组合物优选包含至少25克乳糖/100克干重的本发明的组合物，优选至少40克乳糖/100克。

当营养组合物为液体时，其热量密度优选为0.1至2.5kcal/ml，甚至更优选地热量密度为0.5至1.5kcal/ml，最优选为0.6至0.8kcal/ml。每天给予的营养组合物的量优选为50至2000ml，更优选为200至1500，最优选为400至1000ml。

在一个实施方案中，本发明涉及适用于强化人乳的补充剂，以强化用标准人乳强化剂强化的人乳或强化标准早产配方物。在本发明的上下文中，补充剂不包含早产儿所需的所有大量营养素和微量营养素，以实现与胎儿类似的生长，以及令人满意的功能发育。本文的术语“早产”是过早出生的同义词，是指在妊娠第37周之前出生的任何人类婴儿。

因此，在一个实施方案中，根据本发明的或根据本发明的用于所述用途的营养组合物包括蛋白质、脂肪和/或可消化的碳水化合物，并选自婴儿初始配方物、婴儿后续配方物、幼儿乳、早产配方物、出院后配方物和人乳强化剂。

根据本发明，病毒引起的腹泻是通过给予包含岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖的营养组合物来治疗的。在优选的实施方案中，所治疗的腹泻是由轮状病毒引起的，还称为轮状病毒引起的腹泻。

在优选的实施方案中，病毒引起的腹泻的治疗是降低病毒引起的腹泻的严重程度。在另一个优选的实施方案中，病毒引起的腹泻的治疗是缩短病毒引起的腹泻的持续时间。优选地，病毒引起的腹泻的治疗是降低病毒引起的腹泻的严重程度和缩短病毒引起的腹泻的持续时间。

在优选的实施方案中，给予或使用岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖，是为了降低病毒引起的腹泻的严重程度。在另一个优选的实施方案中，给予或使用岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖，是为了缩短病毒引起的腹泻的持续时间。优选地，给予或使用岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖，是为了降低病毒引起的腹泻的严重程度和缩短病毒引起的腹泻的持续时间。

根据本发明的用于所述用途的营养组合物用于人类受试者。优选地，人类受试者是婴儿或幼儿。婴儿是0-12月龄的人类受试者。幼儿是12-36月龄的人类受试者。在优选的实施方案中，人类受试者是早产或过早出生的婴儿。特别地，这一婴儿亚组可能受益于给予岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖，或岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖，与长链低聚果糖和短链低聚半乳糖的结合，因为与足月出生的婴儿不同，组成早产儿肠道的器官是脆弱的和不成熟的，因此需要缩短腹泻的持续时间和/或随着治疗的进行降低腹泻的严重程度。

优选地，每天给予人类受试者岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖，或包含岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖的营养组合物。此外，包含岩藻糖基化人乳低聚糖，优选2’-岩藻糖基乳糖的营养组合物的给予，或其使用，优选在病毒引起的腹泻发生之前开始，并持续受试者可被诊断为腹泻的时间段。

在优选的实施方案中，人类受试者是阴道出生的，也称为自然出生的。

在优选的实施方案中，病毒引起的腹泻的严重程度的降低和/或病毒引起的腹泻的持续时间的缩短伴随着人类受试者的病毒消除的改善或粪便中病毒颗粒计数的降低。本发明人发现，加入2’-岩藻糖基乳糖、短链低聚半乳糖和长链低聚果糖减少了人类受试者粪便中病毒颗粒的脱落。这特别有利于预防病毒传播或预防在原发病毒(如轮状病毒)感染后，通过粪便通过自污染进行第二轮病毒引起的腹泻。因此，在优选的实施方案中，病毒引起的腹泻的严重程度的降低和/或病毒引起的腹泻的持续时间的缩短伴随着人类受试者病毒消除的降低。

本发明的组合物优选肠内给予，更优选口服。本发明的组合物优选是营养配方物，优选婴儿配方物。本发明的组合物可有利地用作婴儿的完全营养物。本发明的组合物优选包含脂质、蛋白质和碳水化合物，并且优选以液体形式给予。本发明包括干的组合物(例如粉末)，其附有有关将所述干的组合物(特别是营养组合物)与合适的液体(例如水)进行混合的说明书。

具体实施方式

将新生大鼠分为5组，每组24只动物：参考(REF)组、轮状病毒感染(RV)组，和3个分别补充有以下物质的轮状病毒感染组：a)scGOS和lcFOS的混合物(RV+GOS/FOS组)；b)2’-FL(RV+2’-FL组)；和c)scGOS/lcFOS和2’-FL(RV+GOS/FOS+2’-FL组)。

从生命的第二天至第十六天(对应严格的哺乳期)，每天一次给哺乳大鼠口服给予所有产品的相同归一化体积/体重(4.5μL/g/天)。RV+GOS/FOS组补充0.8g的scGOS/lcFOS/100g体重。RV+2’-FL组补充0.2g的2’-FL/100g体重。RV+GOS/FOS+2’-FL组接受与单独给予时相同剂量的两种产品，并保持给予体积(4.5μL/g/天)。给予REF组和RV组相同体积的水。

如前所述(Pérez-Cano et al.Pediatr Res 2007；62:658–63)，获得了RV(猿猴SA-11)，除REF组外，在所有实验组中，在生命的第5天接种(4×10

在整个研究过程中，每天记录体重，以评估体重增加。将每组动物的一半(n＝12)在第8天处死，以分析与腹泻高峰期相关的变量，将另一半(n＝12/组)在第16天处死，以分析腹泻得到解决后补充剂的作用。此外，测量鼻-肛门和尾部的长度，以确定体/尾比，以体重/身长

粪便样品采集和临床指标

在整个研究过程中(从生命的第4天到第16天)，每天通过轻轻按压和按摩腹部进行一次粪便取样。将粪便样品保存在-20℃，用于RV脱落的分析。腹泻的严重程度用粪便重量表示，并根据颜色、质地和量从1到4(腹泻指数[DI])评分粪便样品，如下：正常粪便(1)；软黄绿色粪便(2)；完全松散黄绿色粪便(3)；大量水样粪便(4)。得分≥2表示腹泻粪便，而得分＜2表示没有腹泻。在第5-11天的过程中，与动物显示腹泻的时间一致，将曲线下的严重程度面积(S-AUC)，计算为严重程度的总值。将最大严重程度(MS)定义为腹泻期的最高得分。腹泻期(DP)是通过计数动物显示DI≥2的天数来计算的。

在RV+GOS/FOS组和RV+GOS/FOS+2’-FL组中，将DI、S-AUC、MS和DP归一化(nDI、nS-AUC、nMS和nDP)，同时考虑到因为GOS/FOS补充的内在粪便方面，腹泻期前后的基础值，如前所述(Rigo-Adrover et al.Eur J Nutr 2017；56:1657–70)。

统计学分析

使用用于社会科学的统计学软件包(SPSS v22.0)(IBM,Chicago,IL,USA)进行统计学分析。分别用Levene和Shapiro-Wilk检验对数据进行了方差的同质性和正态分布检验。当数据同质且行为正常时，进行常规的单向ANOVA检验，然后进行事后Bonferroni。否则，先进行非参数Kruskal-Wallis检验，然后进行事后Mann-Whitney U(MWU)检验。最后，采用chi-square检验比较腹泻发生的频率。当p＜0.05时，建立显著性差异。

结果

生长

无论是在腹泻高峰期(第8天)还是在研究结束时(第16天)，RV感染均没有产生生长的任何显著变化，如体重、体/尾比、BMI和Lee指数的结果所示(表1)。在研究结束时(第16天，p＜0.05)，补充有scGOS/lcFOS的组的体重略高，虽然这些生长变化均没有改变BMI，但在体/尾长度比和Lee指数中观察到一些差异。在某些时间点，与REF或RV相比，所有补充剂都增加了体/尾长度比。此外，与REF相比，Lee指数仅在腹泻高峰期下降。

表1.与生长相关的变量

结果表示为平均值±S.E.M.(n＝12)；与REF相比，*p＜0.05(通过MWU检验)；与RV相比，

用于评估腹泻的严重程度和持续时间的临床变量

接种RV的大鼠从生命的第6天至第11天表现出腹泻的粪便，最高得分是在第8天。如先前使用SA11 RV感染模型的研究所示，GOS/FOS引起粪便稠度的变化，从而增加了在腹泻过程之前、期间和之后被认为是腹泻(DI≥2)的粪便数量(Rigo-Adrover et al.Eur JNutr2017；56:1657–70)。然而，补充有GOS/FOS和GOS/FOS+2’-FL显示出在最大影响点降低腹泻的严重程度的趋势。当归一化补充有GOS/FOS的组的严重程度得分值时，在第7、8和9天发现显著降低(p＜0.05)。补充有2’-FL没有诱发这种基础性粪便稠度效应，并显示出降低腹泻的严重程度的趋势。

还计算了腹泻的严重程度和持续时间的其他指标(表2)。关于腹泻的最大严重程度(MS)，与RV组相比，补充2’-FL和GOS/FOS+2’-FL使得分分别降低高达15％和10％(p＜0.05)。在归一化该指标(nMS)后，观察到GOS/FOS组的得分较小，显示降低了28-30％(p＜0.05)。曲线下的严重程度面积(S-AUC)的计算显示每组的平均严重程度。关于RV组，观察到补充2’-FL有明显的降低S-AUC的趋势，降低了22％。只有在归一化面积后，补充GOS/FOS和GOS/FOS+2’-FL的动物中的nS-AUC才降低(分别为45％和58％，p＜0.05)。最后，在降低腹泻期(DP)方面也发现了改善，它由于补充剂而降低了超过50％(p＜0.05)。

表2.与腹泻的严重程度、发生率和持续时间相关的其他变量的分析

严重程度和持续时间变量的结果表示为平均值±S.E.M.(n＝12-24，取决于每天获得的粪便样品数)；与RV相比，

粪便重量还被测量为腹泻过程的客观严重程度变量。在RV接种前(对应于生命的第2-5天)，与REF和RV组相比，接受GOS/FOS和GOS/FOS+2’-FL的动物的粪便重量更高，这可能与先前报告的粪便稠度的直接变化有关。感染病毒后(对应于生命的第6-11天)，RV组显示粪便重量增加(p＜0.05)。在第6-8天观察到补充低聚糖的效果，其降低了粪便重量的增加，尽管仅在补充2’-FL时有统计学差异(p＜0.05)。在2’-FL组中观察到的较低的粪便重量，一直维持到腹泻期结束(第9-11天)。在腹泻过程结束时(腹泻后期生命的第12-16天)，RV和2’-FL的粪便重量与REF的相似，而补充GOS/FOS和GOS/FOS+2’-FL由于粪便稠度的非致病性变化而继续显示出较高的数值。

根据本发明的婴儿配方物，其每100ml(13.9干重)包含：

1.4g蛋白质(乳清和酪蛋白)

7.3g可消化的碳水化合物(包括乳糖)

3.6g脂肪(植物脂肪、鱼油)

0.6g非消化性低聚糖，其中60mg 2’-岩藻糖基乳糖和480mgβ-低聚半乳糖和60mg低聚果糖

根据指南还包含：胆碱、肌醇、牛磺酸、矿物质、微量元素和维生素。