使用了试样细菌的RNA的细菌鉴定方法及用于其的试剂盒

摘要

本发明的目的在于提供能够在不改变用于鉴定的试剂、条件的情况下对并非有限的数种细菌、而是多种细菌进行鉴定的鉴定方法。另外，本发明的目的在于提供仅通过1次PCR来高灵敏度地进行检测·鉴定、能够减轻繁杂的操作及作业人员的负担的鉴定方法。本发明中，细菌的鉴定使用具有以下的工序的方法。工序(1)，使用下述第一反应体系进行逆转录反应，得到含有合成的cDNA及逆转录用引物的反应混合物，所述第一反应体系含有：所述逆转录用引物，其用于制备包含用于对鉴定对象细菌进行鉴定的碱基序列的cDNA；从试样中的细菌中提取的RNA；及具有RNA依赖型DNA聚合酶活性的酶；工序(2)，使用下述第二反应体系实施PCR，所述第二反应体系含有：所述反应混合物；引物对，其用于合成包含所述用于对鉴定对象细菌进行鉴定的碱基序列的双链DNA；及具有DNA依赖型DNA聚合酶活性的酶，其中，第二反应体系中，由所述反应混合物供给的所述逆转录用引物的浓度为0.08nM以上且20nM以下；及工序(3)，从PCR后的所述第二反应体系中，检测包含所述用于对鉴定对象细菌进行鉴定的碱基序列的双链DNA的生成。