一种在MDCK全悬浮细胞上增殖禽流感病毒的方法及其应用

摘要

本发明涉及一种在MDCK全悬浮细胞上增殖禽流感病毒的方法及其应用。所述方法包括：将MDCK细胞全悬浮培养至7.0×106～1.0×107cells/mL时，按MOI＝0.001～0.0001接种鸡胚禽流感病毒；接毒后在pH值6.9～7.3、溶氧30～60％、温度32～37℃的环境下培养，当病毒达到足够高的滴度后分离并提纯病毒粒子。本方法由于种毒无需循环，因而缩短了生产周期，且种毒变异风险大大降低。通过本发明提供的方法培养重组禽流感病毒的HA能够达到1:1024，每1ml病毒含量≥108.0TCID50，每0.1ml病毒含量≥108.0TCID50，而种毒的接入量量减少10倍以上。