一种鉴别CCoVI和CCoVII的双重纳米PCR检测方法

摘要

本发明公开了一种鉴别CCoVⅠ和CCoVⅡ的nanoRT‑PCR检测方法。通过对nanoRT‑PCR反应体系的引物、退火温度和引物浓度进行优化，获得CCoVⅠ和CCoVⅡ各自的目的条带的高效扩增，同时避免引物间的非特异性扩增；本发明所述nanoRT‑PCR检测方法的最低核酸检测量比普通RT‑PCR高100倍，且通过nanoRT‑PCR扩增得到与预期片段大小一致且序列完全正确的产物。本发明提供的用于鉴别CCoVⅠ和CCoVⅡ的nanoRT‑PCR方法具有极高的灵敏度和特异性，是一种高效的检测手段，可应用于犬冠状病毒病的流行性调查，同时也为CCoV的鉴定和防控奠定基础，具有重大的实际意义和价值。