一种同时检测三种病原菌的三重PCR检测用引物、探针、试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种同时检测三种病原菌的三重PCR检测用引物、探针、试剂盒及检测方法。本发明针对Plo、ICEMh1、pspC的基因提供特异性引物，其DNA序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示；同时提供探针，其DNA序列如SEQ ID NO.7～SEQ ID NO.9所示。基于所述引物和探针，本发明优化了实时荧光PCR检测体系和的反应程序条件，成功建立了高通量的化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌TaqMan探针三重实时荧光定量PCR检测方法，操作简单、安全，具有更加高的灵敏度、特异性和稳定性，可以很好地满足养殖业中化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌的快速检测和鉴定，同时可以分析三种菌的三个毒力基因携带情况，可用于其流行病学溯源和毒力强弱分析。