利用自连接标签的双分子荧光互补技术成像和追踪活细胞内的蛋白质相互作用

摘要

蛋白质之间的相互作用构成细胞生命活动的基础。揭示蛋白质之间的相互作用关系并探究相互作用复合物的动态行为已成为蛋白质组学研究的热点。现存的研究蛋白质相互作用的方法无法同时具备活细胞，高时空分辨率，单分子等特点，因此需要开发新的标记和追踪蛋白质相互作用的方法。本发明公开一种基于自连接标签双分子荧光互补的新型标记蛋白质相互作用复合物的方法。在合适的位点将自连接标签分裂成两个部分，分别融合两个具有相互作用的蛋白质，这两个蛋白质相互作用可以把分裂的自连接标签在空间上拉近而形成完整的自连接标签，加入染料可以使相互作用复合物发出荧光。新型自连接标签双分子荧光互补标记方法在细胞生物学中有广泛应用，可以实现在高时空分辨率的单分子水平检测和追踪细胞内一对蛋白质的相互作用。