一种利用结晶法分离提纯超氧化物歧化酶的方法

摘要

本发明涉及一种利用结晶法分离提纯超氧化物歧化酶的方法，用盐酸调节破碎后的细菌发酵培养液pH值至酸性，静置后，离心取上清，将上清超滤浓缩后，分别加入沉淀剂和籽晶，混合均匀后放入控温箱中直至晶体析出，清洗晶体三次后，继续结晶两次以上后，冷冻干燥，得到成品。该方法不仅过程简单，成本低，而且不使用任何层析技术，避免了层析技术的缺陷。该方法在得到高纯度超氧化物歧化酶的同时，还获得了超氧化物歧化酶晶体。得到的超氧化物歧化酶纯度达到96％，比活力为4523U/mg。因此，该方法既是一种可替代层析法的新型分离纯化技术，还提供了一种制备超氧化物歧化酶晶体的方法，具有广阔的应用前景。