一种用于双末端测序的反应体系、其组成的试剂盒和应用

摘要

本发明提供了一种用于双末端测序的反应体系、其组成的试剂盒和应用，具体涉及一种提高双末端测序质量的反应体系、其组成的试剂盒和提高双末端测序质量的方法，所述反应体系包括1×Phi29 buffer、dNTP、Phi29聚合酶和PCR增强剂。本发明在生成互补链的反应体系中添加组合的PCR增强剂，通过甘油、DMSO、Triton X‑100、海藻糖和甜菜碱之间相互促进，发挥了协同增效的作用，能明显提高互补链合成的效率，提高测序的准确度，测序的平均信号值提高了1.1倍；同时采用CTAB处理生成的互补链，限制了Phi29酶的外切活性，显著降低了Lag&Runon值。