含牛樟芝美白抗皱组合物及含该组合物的精华液及精华液的制备方法

摘要

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种含牛樟芝美白祛皱组合物及其精华液的制备方法。本发明目的在于，基于人皮肤衰老机理，筛选天然植物活性成分，组成具有防晒、美白、祛皱等功效的组合物，并将其应用于精华液的制备。该组合物的成分为牛樟芝提取物、光果甘草根提取物、当归根提取物、麒麟竭提取物、姜黄根提取物、柚皮苷，具有防晒、美白、祛皱等功效。该组合物与乳酸杆菌/豆浆发酵产物滤液、透明质酸钠等组成精华液，具有抗紫外线伤害、抑制络氨酸酶、促进成纤维细胞增殖等功效，可美白肌肤，减少皮肤皱纹、增加皮肤弹性。

说明书

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种含牛樟芝美白抗皱组 合物及含该组合物的精华液及精华液的制备方法。

背景技术：

随着生理年龄的增长，人皮肤不断萎缩、松弛、皮肤皱纹增多增 深、色斑扩大及色素加深即皮肤不断衰老。造成人皮肤衰老的主要因 素为人体衰老固有的生理机制、疾病、外界UV辐射、环境污染等。 从细胞层面上来观察，人皮肤衰老的主要原因为皮肤表皮层和真皮层 的细胞活力下降。首先，表皮层细胞活力下降导致皮肤屏障功能降低、 抵抗力下降，同时在紫外线的刺激下，细胞代谢紊乱、色素也不断积 累。其次，真皮层细胞活力下降，真皮层中的成纤维细胞分泌胶原蛋 白和弹性蛋白减少；胶原蛋白具有很强的持水能力，其含量下降，会 引起皮肤松弛、皱纹增多；弹性蛋白纤维对皮肤有一定支撑作用，其 减少会导致皮肤失去弹性。此外，随着人体衰老，表皮毛细血管收缩 减少，皮肤局部血液循环不足，造成皮肤细胞营养和水分补给不足， 代谢废物也不能及时排出，皮肤细胞就慢慢失去活力。因此，要延缓 皮肤衰老、保持皮肤嫩白，须同时注意以下三个方面：1)改善表层 皮肤的血液循环，增加表层皮肤的营养和水分供给；2)减少UV辐射、 化学物质、雾霾等外界因素对皮肤的伤害；3)促进成纤维细胞增殖、 激活成纤维细胞的活力。

近几十年来研究发现，各种天然原料特别是从植物中分离出的活 性成分对皮肤具有很好的滋养保健功能，市场上95％以上的化妆品添 加有植物活性成分或宣称植物提取物为其功效成分。随着国内人口老 龄化趋势的加快，消费者对美白祛皱功效的化妆品诉求越来越强烈， 市场份额也不断增加，国外大品牌企业早已占领了该市场。我国具有 丰富的天然植物资源，利用天然植物的活性成分开发具有美白祛皱功 效的化妆品，具有一定的经济价值和社会意义。

发明内容

本发明的目的在于，基于人皮肤衰老机理，筛选合适的天然植物 功效成分，组成具有防晒、美白、祛皱等功效的组合物，并利用该组 合物制备精华液。本发明主要内容如下：

a)一种含牛樟芝美白祛皱组合物，其组成如下：

该组合物包括：

牛樟芝提取物与光果甘草根提取物、当归根提取物、麒麟竭提取 物、姜黄根提取物、柚皮苷的一种或几种组合，该组合物的成分及功 效如表1所示。

表1组合物的成分及功效

b)一种含牛樟芝美白祛皱组合物，更进一步，该组合物的配比如下：

牛樟芝提取物(4％-6％)，光果甘草根提取物(30％-50％)，当归根 提取物(20％-30％)，麒麟竭提取物(8％-12％)，姜黄根提取物(4％-6％)， 柚皮苷(10％-20％)。

c)一种含牛樟芝美白祛皱组合物，除牛樟芝提取物外，其他原料均 可通过市售购买。牛樟芝提取物可通过以下方法制备：

(1)将新鲜的牛樟芝置于鼓风干燥箱中40-100℃干燥0-48h；

(2)用中药粉碎机将干燥的牛樟芝粉碎至10-40目左右；

(3)取牛樟芝粉末置于浸提容器内，加入10-60倍20％-95％食用 酒精，于40-80℃水浴超声辅助浸提0-24h；抽滤，滤渣重复浸提一 次；收集、合并两次滤液，即浸提液；

(4)将浸提液于40-100℃、0-(-0.10)MPa条件下真空浓缩至无 酒精，即得牛樟芝提取物(浸膏)。

d)一种含有牛樟芝美白抗皱组合物的精华液，其组成如下：

该精华液由功效成分与辅助成分组成，如表2所示。其功效成分由 含牛樟芝美白抗皱组合物(牛樟芝提取物、光果甘草根提取物、当归 根提取物、麒麟竭提取物、姜黄根提取物、柚皮苷)与营养保湿成分 (乳酸杆菌/豆浆发酵产物滤液、透明质酸钠)组成；辅助成分由防 腐剂(对羟基苯乙酮、苯氧酒精)、多元醇保湿剂(甘油、丁二醇、 1,2-戊二醇)以及溶剂(水)组成。由于化妆品行业的防腐剂、多元 醇保湿剂种类繁多，无法一一列举，由该功效成分与一种或多种辅助 成分组成的化妆品配方均属本发明权利要求范围。

表2精华液的成分表及功效

e)一种含有牛樟芝美白抗皱组合物的精华液，更进一步，其具体配 比如下：

牛樟芝美白抗皱组合物(8％-10％)，乳酸杆菌/豆浆发酵产物滤液 (2％-3％)，透明质酸钠(0.4％-0.6％)，对羟基苯乙酮(0.1％-0.3％)， 苯氧乙醇(0.2％-1％)，甘油(1％-3％)，丁二醇(2％-6％)，1,2-戊二醇 (2％-6％)，水(余量)。

f)一种含有牛樟芝美白抗皱组合物的精华液，其制备方法如下：

(1)将牛樟芝美白抗皱组合物(牛樟芝提取物、光果甘草根提 取物、当归提取物、麒麟竭提取物、姜黄根提取物、柚皮苷)以及甘 油，丁二醇，1,2-戊二醇、对羟基苯乙酮、苯氧酒精加入容器中，加 热至60-90℃，保温并高速搅拌1-30分钟，使提取物充分分散溶解；

(2)将透明质酸钠、入乳酸杆菌/豆浆发酵产物滤液及水加入到 另一容器内，搅拌使物料完全溶解；

(3)待(1)降至20-60℃，倒入(2)中，并高速搅拌1-30分 钟，使溶液混合均匀；

(4)将溶液经真空抽泡后，即得精华液。

具体实施方式

实例1：牛樟芝提取物的制备

将新鲜的牛樟芝200g置于鼓风干燥箱中50℃干燥12h得干燥的 牛樟芝54.0g；用中药粉碎机将干燥的牛樟芝粉碎至20目左右，取 50.0g牛樟芝粉末置于2L玻璃烧杯内，加入1.5L 80％食用酒精，超 声波萃取仪内浸提2h(超声波功率为200W，频率为40KHz，加热温度为60℃)；浸提完成后，抽滤，滤渣重复浸提一次；合并两次滤液， 将滤液旋转蒸发仪于60℃、-0.08MPa条件下真空浓缩至无酒精，即 得牛樟芝提取物(浸膏)12.0g。

实例2：含有牛樟芝美白抗皱组合物的制备方法

将牛樟芝提取物8.0g、光果甘草根提取物160g、当归提取物 60g、麒麟竭提取物40g、姜黄根提取物20g、柚皮苷20g加入500mL 的烧杯内；将烧杯置于85℃水浴锅水浴，加入100mL食用酒精并不 断搅拌促进提取物分散混合、融化溶解，混合均匀后，继续搅拌保温 1小时，使酒精挥去；待无酒味，取出自然冷却，即得组合物310g。

实例3：含有牛樟芝美白抗皱组合物的精华液的制备方法

(1)将组合物60.0g(牛樟芝提取物2.0g、光果甘草根提取物 30.0g、当归提取物10.0g、麒麟竭提取物8.0g、姜黄根提取物5.0g、 柚皮苷5.0g)、甘油16.0g、丁二醇40.0g、1,2-戊二醇25.0g、对羟 基苯乙酮1.60g、苯氧酒精4.0g加入容器中，75℃保温并高速搅拌 15分钟，使物料充分分散溶解；

(2)将透明质酸钠4.0、入乳酸杆菌/豆浆发酵产物滤液16.0g 及水650g加入到另一容器内，搅拌使物料完全溶解；

(3)待(1)降至40℃，倒入(2)中，并高速搅拌1-30分钟， 使溶液混合均匀；

(4)将溶液经真空抽泡后，即得精华液800g。

实例4：功效测评及试用效果评估

1)防晒功效评价

防晒可分物理防晒和化学防晒，化学防晒的原理是利用某些化合 物分子具有强烈的紫外吸收，将光中的有害紫外线吸收并转为分子动 能(即热能)。因此，可采用紫外吸收光谱法初步评估样品的效果。 实验选取某知名品牌的防晒乳液作对比，具体操作方法如下。

精确称取本发明实例2所制组合物10.0mg、本发明实例3所制 备精华液150mg及国外某品牌防晒乳液(SPF 15)150mg分别置于 100mL容量瓶内，分别用60％酒精定容至刻度，摇匀；所得溶液用紫 外可见分光光度计扫描其250nm-500nm波段的吸收光谱。检测结果如图1所示。国外某品牌产品在275nm-320nm(UVB)的吸光度大于1.3， 但当波长超过320nm之后，吸光度迅速下降，即该品牌产品对UVB有 很好的防护效果，但对UVA的防护效果较差，不能有效减少UVA对皮 肤的伤害，易造成晒黑。而实例3所制精华液在275nm-375nm波段的 吸光度均大于1，实例2所制的组合物在275nm-375nm波段的吸光度 也均大于0.8，，即本发明的产品能同时有效吸收UVA及UVB，属于全 谱防晒。

2)美白功效评价

酪氨酸酶是一种含有铜离子的多酚氧化酶，可将酪氨酸催化氧化 成多醌，再经过一系列的代谢过程最终生成黑色素，沉积于皮肤，形 成雀斑、黄褐斑等。酪氨酸酶在黑色素形成的反应前期起着非常重要 的作用，是人体黑色素合成的限速酶。因此，可用某一浓度的试样对 酪氨酶活性的抑制率这一指标来评价样品的美白功效。具体实验方法 如下。

(1)试剂与仪器

配制以下试剂：pH6.8磷酸缓冲液、2mmol/L L-酪氨酸溶液、 不同浓度梯度的样品溶液(实例2所制组合物、实例3所制精华液)、 不同溶度梯度的α-熊果苷溶液(阳性对照)、约50U/mL酪氨酸酶 (Tyrosinase from mushroom，SIGMA，酶活≥500U/mg)溶液。

水浴锅、紫外分光光度计。

(2)检测

a.酶活力测定(阴性对照)

取pH6.8磷酸缓冲液1.5mL、酪氨酸酶溶液0.5mL，混匀，将试 管置于37℃水中预热2min分钟；加入3mL L-酪氨酸溶液，混匀，37℃ 水浴反应10min后，立即取出测定溶液在475nm的吸光度A1。

取pH6.8磷酸缓冲液1.5mL、酪氨酸酶溶液0.5mL，混匀，将试 管置于37℃水中预热2min分钟；加入3mL pH6.8磷酸缓冲液，混匀， 37℃水浴反应10min后，立即取出测定溶液在475nm的吸光度A0。

以上实验平行三次。

b.阳性对照

取pH6.8磷酸缓冲液1.0mL、酪氨酸酶溶液0.5mL、α-熊果苷溶 液0.5ml，混匀，将试管置于37℃水中预热2min分钟；加入3mL L- 酪氨酸溶液，混匀，37℃水浴反应10min后，立即取出测定溶液在 475nm的吸光度B1。

取pH6.8磷酸缓冲液1.5mL、酪氨酸酶溶液0.5mL、α-熊果苷溶 液0.5ml，混匀，将试管置于37℃水中预热2min分钟；加入3mL pH6.8 磷酸缓冲液，混匀，37℃水浴反应10min后，立即取出测定溶液在 475nm的吸光度B0。

以上实验平行三次。

c.样品溶液

取pH6.8磷酸缓冲液1.0mL、酪氨酸酶溶液0.5mL、样品溶液0.5ml，混匀，将试管置于37℃水中预热2min分钟；加入3mL L-酪 氨酸溶液，混匀，37℃水浴反应10min后，立即取出测定溶液在475nm 的吸光度C1。

取pH6.8磷酸缓冲液1.5mL、酪氨酸酶溶液0.5mL、样品溶液 0.5ml，混匀，将试管置于37℃水中预热2min分钟；加入3mL pH6.8 磷酸缓冲液，混匀，37℃水浴反应10min后，立即取出测定溶液在 475nm的吸光度C0。

以上实验平行三次。

(3)计算

抑制率(％)＝[(C1-C0)/(A1-A0)]× l00％..........................(式1)

其中，A1为阴性对照酶催化反应后的吸光值；A0阴性对照空白； C1(或B1)为添加样品(α-熊果苷)后酶催化反应后的吸光值；C0(或 B0)为相应的空白；

(4)结果分析

表3不同试样对酪氨酶活性的抑制率

从表3可以看出，实例2所制组合物对酪氨酸酶有较好的抑制效 果，其抑制能力大约为α-熊果苷的抑制效果的五分之一；实例3所 制精华液，其对酪氨酸酶亦有一定的抑制能力，即体外实验表明本发 明产品具有潜在的美白功效。

3)祛皱功效评价

如背景技术所述，皮肤老化起皱的深层原因是成纤维细胞活力下 降，所分泌的胶原蛋白和弹性纤维蛋白减少。评价化妆品对成纤维细 胞增殖的影响可从某种程度上评价其祛皱能力。而成纤维细胞的增殖 情况可用MTT法检测。实验操作方法如下。

取皮肤成纤维细胞(RAB-iCell-s010，赛百慷)，用0.25％的胰 酶消化并调整细胞悬液密度为105个/mL，均匀接种于96孔培养板 中，每孔滴加100μl，边缘孔用无菌磷酸盐缓冲液填充。置于CO2 培养箱中培养24h后，吸出培养上清液，每孔加入含不同浓度样品 的培养基(牛血清)稀释液100μl，每种样品设5个浓度，每个浓 度设6个复孔，同时设不加样品的空白对照组。分别培养48h后， 吸出培养上清液，每孔加入100μl DMEM培养液，并加入20μl浓 度为5mg/ml的MTT溶液，在CO2培养箱中孵育4h后，小心吸出培 养上清液，每孔加入150μl DMSO，摇床上振荡10min，使结晶充 分溶解，用酶标仪于490nm处测吸光度(A)值。实验结果如表4所 示。

表4牛樟芝提取物等对皮肤成纤维细胞生长的影响

从表中可以看出，在浓度为0.01mg/mL至0.5mg/mL范围内，牛 樟芝提取物、实例2所制组合物均能促进皮肤成纤维细胞的增殖，且 呈浓度依耐性，即随着浓度的增加其促进增殖的效果越明显；本发明 所制的精华液同样也具有促进皮肤成纤维细胞增殖的效果，即具有祛 皱功能。

4)临床试验

为验证本发明的组合物/精华液具有美白祛皱方面的效果,选择 30名志愿者进行了有效性实验、对比实验考察。30名志愿者为年龄 在40～50岁之间,随机分成A、B、C三组。其中，A组使用蒸馏水； B组使用实施案例3所制作的精华液；C组使用国外某知牌的美白祛皱精华液。实验要求为：要求参加实验的志愿者每人每天晚上洁面后， 用1-2ml组合物(A组为0.5％透明质酸钠)涂抹面部皮肤，并轻轻按 摩10分钟使组合物完全吸收。实验一共进行4周。实验期间，每周 对参与实验的自愿者进行皮肤粗糙度和皱纹深度进行跟踪测试。测试采用的仪器为多探头皮肤检测仪(MPA10，德国CK)，由专业技术人 员操作。临床试验结果如表5所示。

表5本发明组合物的临床试用效果调查表

注1：美白效果评价(△E，L*a*b*值)：

显著：△E≥10且△L＞0，皮肤美白效果明显，可用肉眼识别；

一般：10＞△E≥5且△L≥0皮肤美白效果轻微，肉眼较难直 接识别；

其他：△E＜5或△L＜0，无美白效果或者皮肤变暗或无效数 据或志愿者不满意(过敏等)。

注2：祛皱效果评价(△SER，皮肤粗糙度变化率SER)：

显著：△SER≤-5％，祛皱效果明显，可用肉眼识别；

一般：0＞△SER＞-5％，祛皱效果轻微，肉眼较难直接识别；

其他：△SER≥0，无祛皱或者无效数据或志愿者不满意(过敏 等)。

从表5的临床数据可以，本发明所制备的组合物具有很好的美白 效果，比某知名品牌(对照)的美白效果更显著；同时，试验数据也 表明，本发明所制备的组合物具有一定的祛皱效果。

另外，本次临床试验中均无发现过敏或其他毒副反应。

5)结论

本发明所制备的含有牛樟芝的美白祛皱组合物，具有全谱防晒、 美白、抗皱等功效。利用该组合物所开发的精华液，经试用评估表明 具有显著的美白、嫩肤效果。

上述说明示出并描述了本发明的优选实施例，如前所述，应当理 解本发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的 排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明 构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本 领域人员所进行的改动和变化不脱离本发明的精神和范围，则都应在 本发明所附权利要求的保护范围内。