一种检测人类TERT基因启动子热点突变的荧光定量PCR方法及其用途

摘要

本发明属于分子生物学领域，涉及医学和生物技术，具体涉及一种检测人类TERT基因启动子热点突变的荧光定量PCR方法及其用途。本发明使用荧光定量PCR的方法，设计了两组检测TERT基因启动子处的两个热点突变C228T和C250T的ARMS‑PCR引物，并在正向引物序列的3’端引入了锁核酸，提高了检测的特异性；通过巢式PCR的方式，减少了对样本量的要求，也提高了检测的灵敏性。相比较传统的Sanger测序，本发明提供的方法突变率检测下限更低(5000拷贝的质粒测试结果1％)，灵敏度更高(5000拷贝的质粒测试结果Cp<30)。本发明的检测方法用于检测多种肿瘤样本DNA中TERT基因启动子处C228T和C250T的突变情况。