cTnI‑cTnC‑cTnT三聚体蛋白及其制备方法和cTnI检测试剂盒

摘要

本发明公开了cTnI‑cTnC‑cTnT三聚体蛋白及其制备方法和cTnI检测试剂盒。该三聚体蛋白由cTnI蛋白、cTnC蛋白和cTnT蛋白依次连接形成。其制备方法是人工合成三聚体蛋白的编码基因，克隆到表达载体得到表达质粒，再将其转化到大肠杆菌，IPTG诱导表达；培养结束后培养液用Tris‑盐酸缓冲液搅拌振荡使细菌沉淀重悬，超声波破壁，离心取上清，依次过镍柱、强阴离子交换柱Q柱和Sephedex G200分子筛层析柱，得到纯化的活性蛋白。以该蛋白作为阳性标准品，制备了以稀土荧光微球为载体的时间分辨荧光定量检测试剂盒，用于检测样本中的cTnI，具有稳定、敏感、定量、简便、快速、结果可靠的特点。