酶促聚合的凝胶化右旋糖酐

摘要

本文披露的是包含右旋糖酐的组合物，该组合物包含(i)87wt％‑93wt％在位置1和6处连接的葡萄糖；(ii)0.1wt％‑1.2wt％在位置1和3处连接的葡萄糖；(iii)0.1wt％‑0.7wt％在位置1和4处连接的葡萄糖；(iv)7.7wt％‑8.6wt％在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及(v)约0.4wt％‑1.7wt％在以下位置处连接的葡萄糖：(a)位置1、2和6，或(b)位置1、4和6。该组合物的水性形式具有增强的粘度特征。进一步披露的是使用包含右旋糖酐的组合物的方法，例如增加水性组合物的粘度的方法。还披露了用于生产右旋糖酐的酶促反应。

说明书

本申请要求(2014年11月5日提交的)美国临时申请号62/075,460的权益，该申请通过引用以其全文结合在此。

发明领域

本披露属于多糖领域。例如，本披露涉及某些右旋糖酐聚合物、包含合成这些聚合物的葡萄糖基转移酶的反应、以及这些聚合物在各种应用中的用途。

以电子方式提交的序列表的引用

该序列表的官方副本经由EFS-Web作为ASCII格式的序列表以电子方式提交，文件名为“20151105_CL6294USNP_SequenceListing.txt”，创建于2015年11月5日，且具有164千字节大小，并与本说明书同时提交。包括在该ASCII格式的文件中的序列表是本说明书的一部分并且以其全文通过引用结合在此。

背景

由使用酶促合成或微生物遗传工程寻找新的结构多糖的愿望驱使，研究人员已经发现了可生物降解的多糖，并且所述多糖可以从可再生来源的原料经济地制得。一个这样的多糖类家族是α-葡聚糖，该α-葡聚糖是包含通过α-配糖键连接的葡萄糖单体的聚合物。

右旋糖酐代表一系列复杂的支链α-葡聚糖，所述α-葡聚糖通常包含α-1，6-连接的葡萄糖单体的链，具有通过α-1，3-键与直链连接的周期性侧链(分支)(约安(Ioan)等人，大分子(Macromolecules)33：5730-5739)。典型地，右旋糖酐的生产通过使用细菌(例如明串珠菌属(Leuconostoc)或链球菌属(Streptococcus)物种)的蔗糖发酵来进行，其中蔗糖用作右旋糖酐聚合的葡萄糖来源(内森斯(Naessens)等人，化学技术与生物技术杂志(J.Chem.Technol.Biotechnol.)80：845-860；萨尔瓦特(Sarwat)等人，国际生物科学杂志(Int.J.Biol.Sci.)4：379-386；Onilude等人，国际食品研究杂志(Int.Food Res.J.)20：1645-1651)。尽管鉴于在水中的高溶解度右旋糖酐在几种应用中被使用(例如，佐剂、稳定剂)，但是这种高溶解度可以负面地影响右旋糖酐在水状胶质应用中作为增稠剂的一般用途。

因此，研发更适合于高粘度应用的新的、更高粘度的右旋糖酐聚合物意义重大。进而，鉴定可以合成这种右旋糖酐聚合物的葡萄糖基转移酶也有重大意义。

发明概述

在一个实施例中，本披露涉及包含右旋糖酐的组合物，该组合物包含：

(i)约87wt％-93wt％在位置1和6处连接的葡萄糖；

(ii)约0.1wt％-1.2wt％在位置1和3处连接的葡萄糖；

(iii)约0.1wt％-0.7wt％在位置1和4处连接的葡萄糖；

(iv)约7.7wt％-8.6wt％在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及

(v)约0.4wt％-1.7wt％在以下位置处连接的葡萄糖：

(a)位置1、2和6，或

(b)位置1、4和6；

其中该右旋糖酐的重均分子量(Mw)为约5000万至2亿道尔顿，该右旋糖酐的z-平均回转半径为约200-280nm，并且该右旋糖酐任选地不是肠膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)葡萄糖基转移酶的产物。

在另一个实施例中，该右旋糖酐包含：(i)约89.5wt％-90.5wt％在位置1和6处连接的葡萄糖；(ii)约0.4wt％-0.9wt％在位置1和3处连接的葡萄糖；(iii)约0.3wt％-0.5wt％在位置1和4处连接的葡萄糖；(iv)约8.0wt％-8.3wt％在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及(v)约0.7wt％-1.4wt％在以下位置处连接的葡萄糖：(a)位置1、2和6，或(b)位置1、4和6。

在另一个实施例中，该右旋糖酐包含在分支结构内连接在一起的链(长链)，其中所述链在长度上相似并且包含大量α-1，6-糖苷键。在另一个实施例中，链的平均长度为约10-50个单体单元。

在另一个实施例中，该右旋糖酐是葡萄糖基转移酶的产物，该葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列。

在另一个实施例中，该组合物是具有至少约25cPs粘度的水性组合物。

在另一个实施例中，该右旋糖酐的Mw为约8000万至1.2亿道尔顿。

在另一个实施例中，该右旋糖酐的z-平均回转半径为约230-250nm。

在另一个实施例中，该组合物呈食物产品、个人护理产品、药物产品、家用产品或工业产品的形式。在另一个实施例中，该组合物呈糕点糖果的形式。

在另一个实施例中，本披露涉及用于增加水性组合物的粘度的方法。该方法包括使本文披露的至少一种右旋糖酐化合物与水性组合物接触。与接触步骤之前的水性组合物的粘度相比，该方法中的接触步骤导致水性组合物的粘度增加。

在另一个实施例中，本披露涉及一种处理材料的方法。该方法包括使材料与包含本文披露的至少一种右旋糖酐化合物的水性组合物接触。

在另一个实施例中，本披露涉及包含水、蔗糖和葡萄糖基转移酶的酶促反应，该葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列，其中该葡萄糖基转移酶合成如本文披露的右旋糖酐化合物。

在另一个实施例中，本披露涉及一种生产右旋糖酐的方法，该方法包括使至少水、蔗糖、和葡萄糖基转移酶接触的步骤，由此产生如本文披露的右旋糖酐，所述葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13或SEQ IDNO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列。该右旋糖酐可以任选地被分离。

在另一个实施例中，通过减少步骤(a)中的蔗糖的量，增加在该方法中生产的右旋糖酐的粘度。

附图和序列的简述

图1：通过包含100g/L蔗糖和0768 gtf(SEQ ID NO：1)的葡萄糖基转移酶反应对蔗糖消耗进行的HPLC分析。参考实例2。

图2A：用于在枯草芽孢杆菌(B.subtilis)中表达2919 gtf(SEQ ID NO：5)的质粒pZZHB583的图谱。参考实例3。

图2B：用于在枯草芽孢杆菌中表达2918 gtf(SEQ ID NO：9)的质粒pZZHB582的图谱。参考实例4。

图2C：用于在枯草芽孢杆菌中表达2920 gtf(SEQ ID NO：13)的质粒pZZHB584的图谱。参考实例5。

图2D：用于在枯草芽孢杆菌中表达2921 gtf(SEQ ID NO：17)的质粒pZZHB585的图谱。参考实例6。

图3：通过包括可商购的右旋糖酐蔗糖酶的反应对蔗糖消耗进行的HPLC分析。参考实例7。

表1.核酸和蛋白质SEQ ID号的总结

详细说明

所有引用的专利和非专利文献的披露内容通过引用以其全文结合在此。

除非另有披露，否则本文所使用的术语“一个/一种”(a和an)旨在涵盖引用特征的一个/种或多个/种(即至少一个/种)。

本文中术语“葡聚糖”是指通过糖苷键(glucosidic linkage)连接的D-葡萄糖单体的多糖，糖苷键是配糖键(glycosidic linkage)的一种类型。本文中“α-葡聚糖”是指成分D-葡萄糖单体为α-D-葡萄糖单体的葡聚糖。

术语“右旋糖酐”、“右旋糖酐聚合物”、“右旋糖酐化合物”等在本文中可互换地使用，并且是指通常包含大量(多半的)α-1，6-连接的葡萄糖单体的链的复杂的、支链α-葡聚糖，其中侧链(分支)主要由α-1，3-键连接。本文中术语“凝胶化右旋糖酐”是指本文披露的一种或多种右旋糖酐(i)在酶促右旋糖酐合成过程中以及任选地(ii)当这种合成的右旋糖酐被分离(例如，＞90％纯度)然后被置于水性组合物中时形成粘稠溶液或凝胶样组合物的能力。

本文中右旋糖酐“长链”可以包含“大量[或多半的]α-1，6-糖苷键”，这意味着所述长链在一些方面可以具有至少约98.0％的α-1，6-糖苷键。本文中右旋糖酐可以在一些方面包含“分支结构”(支链结构)。预期在这种结构中，长链可能以迭代的方式从其他长链分支出(例如，长链可以是来自另一个长链的分支，其反过来可以本身是来自另一个长链的分支，等等)。预期在这种结构中的长链可以是“长度相似”，这意味着分支结构中所有长链的至少70％的长度(DP[聚合度])是在分支结构的所有长链的平均长度的正/负30％内。

在一些实施例中，右旋糖酐还可以包含从长链分支出的“短链”，典型地长度为一至三个葡萄糖单体，并且包含少于右旋糖酐聚合物的所有葡萄糖单体的约10％。典型地，这样的短链包含α-1，2-、α-1，3-和/或α-1，4-糖苷键(据信，在一些方面，也可以在长链中存在小百分比的这种非α-1，6键)。

术语“配糖键”(glycosidic linkage和glycosidic bond)在本文中可互换地使用，并且是指将碳水化合物分子彼此连接的共价键。术语“糖苷键”(glucosidic linkage和glucosidic bond)在本文中可互换地使用，并且是指在两个葡萄糖分子之间的配糖键。如本文中所使用，术语“α-1，6-糖苷键”是指通过在相邻α-D-葡萄糖环上的碳1和碳6将α-D-葡萄糖分子彼此连接的共价键。如本文中所使用，术语“α-1，3-糖苷键”是指通过在相邻α-D-葡萄糖环上的碳1和碳3将α-D-葡萄糖分子彼此连接的共价键。如本文中所使用，术语“α-1，2-糖苷键”是指通过在相邻α-D-葡萄糖环上的碳1和碳2将α-D-葡萄糖分子彼此连接的共价键。如本文中所使用，术语“α-1，4-糖苷键”是指通过在相邻α-D-葡萄糖环上的碳1和碳4将α-D-葡萄糖分子彼此连接的共价键。本文中，“α-D-葡萄糖”将被称为“葡萄糖”。本文披露的所有糖苷键都是α-糖苷键，除了另有说明的情况。

本文中，“在位置1和6处连接的葡萄糖(葡萄糖单体)”是指其中只有葡萄糖单体的碳1和碳6涉及各自与两个相邻葡萄糖单体的糖苷键的右旋糖酐的葡萄糖单体。该定义同样适用于(i)“在位置1和3处连接的”、和(ii)“在位置1和4处连接的”葡萄糖，相应地，将在每个各自的键中涉及的不同碳位置考虑在内。

本文中，“在位置1、3和6处连接的葡萄糖(葡萄糖单体)”是指其中葡萄糖单体的碳1、碳3和碳6涉及各自与三个相邻葡萄糖单体的糖苷键的右旋糖酐的葡萄糖单体。仅在位置1、3和6处连接的葡萄糖是分支点。该定义同样适用于(i)在位置1、2和6处、和(ii)在位置1、4和6处连接的葡萄糖，但因此将在每个各自的键中涉及的不同碳位置考虑在内。

本文中葡萄糖位置(葡萄糖碳位置)1、2、3、4和6在本领域中是已知的(在以下结构中描述)：

本文中右旋糖酐的配糖键谱图可以使用本领域已知的任何方法确定。例如，可以使用采用核磁共振(NMR)光谱(例如¹³C>1H>食品碳水化合物：化学、物理性质和应用(崔(S.W.Cui)，编辑，第3章，崔(S.W.Cui)，多糖的结构分析(Structural>

本文中，术语“蔗糖”是指由α-1，2-配糖键连接的α-D-葡萄糖分子和β-D-果糖分子构成的非还原性二糖。通常，蔗糖被称为食用糖。

本文中右旋糖酐的“分子量”可以表示为数均分子量(Mn)或重均分子量(Mw)，其单位为道尔顿或克/摩尔。可替代地，分子量可以表示为DPw(重均聚合度)或DPn(数均聚合度)。用于计算这些分子量测量的各种方法在本领域中是已知的，例如采用高压液相色谱法(HPLC)、尺寸排阻色谱法(SEC)或凝胶渗透色谱法(GPC)。

本文中，术语“回转半径”(Rg)是指右旋糖酐的平均半径，并且将其计算为右旋糖酐分子的组分(原子)与分子重心的均方根距离。例如，Rg能以埃或纳米(nm)为单位提供。本文中，右旋糖酐的“z-平均回转半径”是指如使用光散射(例如MALS)测量的右旋糖酐的Rg。用于测量z-平均Rg的方法是已知的，并且相应地可以在本文中使用。例如，z-平均Rg可以如在以下文献中所披露的进行测量：美国专利号7531073、美国专利申请公开号2010/0003515和2009/0046274，怀亚特(Wyatt)(分析化学学报(Anal.Chim.Acta)272：1-40)，以及莫里(Mori)和巴斯(Barth)(尺寸排阻色谱法(Size Exclusion Chromatography)，施普林格出版社(Springer-Verlag)，柏林(Berlin)，1999)，其全部通过引用结合在此。

术语“葡萄糖基转移酶”、“gtf酶”、“gtf酶催化剂”、“gtf”、“葡聚糖蔗糖酶”等在本文中可互换地使用。本文中gtf酶的活性催化底物蔗糖的反应以制得产物葡聚糖和果糖。产生右旋糖酐(葡聚糖的一种类型)的gtf酶也可以称为右旋糖酐蔗糖酶。Gtf反应的其他产物(副产物)可以包括葡萄糖(其中葡萄糖从葡糖基-gtf酶中间体复合物水解)，并且各种可溶性寡糖(例如DP2-DP7)例如明串珠菌二糖、葡萄糖基转移酶的野生型形式通常含有(在N-末端至C-末端方向上)信号肽、可变结构域、催化结构域和葡聚糖结合结构域。根据CAZy(碳水化合物活性酶)数据库(康塔雷尔(Cantarel)等人，核酸研究(Nucleic Acids Res.)37：D233-238，2009)，将本文的gtf分类在糖苷水解酶家族70(GH70)下。

术语“葡萄糖基转移酶催化结构域”和“催化结构域”在本文中可互换地使用，并且是指向葡萄糖基转移酶提供葡聚糖生产活性的葡萄糖基转移酶的结构域。

术语“gtf反应”、“gtf反应溶液”、“葡萄糖基转移酶反应”、“酶促反应”、“右旋糖酐合成反应”、“右旋糖酐反应”等在本文可互换地使用，并且是指由葡萄糖基转移酶进行的反应。如本文中所使用，gtf反应通常是指最初包含至少一种活性葡萄糖基转移酶(在含蔗糖和水的溶液中)、以及任选地其他组分的反应。在其已经开始后可以存在于gtf反应中的其他组分包括果糖、葡萄糖、可溶性寡糖(例如DP2-DP7)例如明串珠菌二糖和右旋糖酐产物。在gtf反应中，进行了使水、蔗糖和葡萄糖基转移酶接触的步骤。如本文中所使用，术语“在合适的gtf反应条件下”是指支持经由葡萄糖基转移酶活性将蔗糖转化为右旋糖酐的gtf反应条件。本文的gtf反应不是天然发生的。

如本文中所使用，“对照”gtf反应可以是指使用葡萄糖基转移酶的反应，所述葡萄糖基转移酶不包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列。对照反应溶液的所有其他特征(例如，蔗糖浓度、温度、pH、时间)可以其与之进行比较的反应的那些相同。

gtf反应的“干固体百分比”是指gtf反应中所有糖的wt％。例如，可以基于用于制备反应物的蔗糖的量来计算gtf反应的干固体百分比。

由本文的gtf反应产生的右旋糖酐的“产率”表示在反应中转化的被表达为蔗糖底物的重量百分比的右旋糖酐产物的重量。例如，如果将反应溶液中的100g蔗糖转化成产物，并且10g产物是右旋糖酐，那么右旋糖酐的产率为10％。该产率计算可以被认为是反应对右旋糖酐的选择性的量度。

术语“体积百分比”(percent by volume和volume percent)、“vol％”、“v/v％”等在本文可互换地使用。在溶液中溶质的体积百分比可以使用以下公式确定：[(溶质体积)/(溶液体积)]×100％。

术语“重量百分比”、“重量百分数(weight percentage，wt％)”、“重量-重量百分数(weight-weight percentage，％w/w)”等在本文可互换地使用。重量百分比是指当包含在组合物、混合物或溶液中时，材料在质量基础上的百分数。

如本文中所使用，术语“增加”可以是指比该增加的量或活性与之进行比较的量或活性多至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、50％、100％、或200％的量或活性。术语“增加的”、“提高的”、“增强的”、“大于”、“改进的”等在本文可互换地使用。

术语“多核苷酸”、“多核苷酸序列”和“核酸序列”在本文可互换地使用。这些术语涵盖核苷酸序列等。多核苷酸可以是单链或双链的DNA或RNA的聚合物，其任选地包含合成的、非天然的或改变的核苷酸碱基。多核苷酸可以由cDNA、基因组DNA、合成DNA或其混合物的一个或多个区段组成。

如本文中所使用，术语“基因”是指从编码区(编码序列)表达RNA(RNA从DNA多核苷酸序列转录)的DNA多核苷酸序列，该RNA可以是信使RNA(编码蛋白质)或非蛋白质编码RNA。基因可以是指单独的编码区，或者可以包括编码区上游和/或下游的调控序列(例如启动子、5′-非翻译区、3′-转录终止子区)。可替代地，编码蛋白质的编码区可以在本文中被称为“开放阅读框”(ORF)。“天然”或“内源”的基因是指自然界中发现的具有其自身调节序列的基因；这样的基因位于宿主细胞基因组的天然位置。“嵌合”基因是指不是天然基因的任何基因，该基因包括在自然界中未一起发现的调节序列和编码序列(即，调节区和编码区彼此是异源的)。因此，嵌合基因可包括源于不同来源的调控序列和编码序列，或者包括源于同一来源但以不同于天然存在的方式排列的调控序列和编码序列。“外来”或“异源”的基因是指通过基因转移导入宿主生物体的基因。外来基因可包括插入到非天然生物内的天然基因、导入到天然宿主内的新位置的天然基因，或嵌合基因。在某些实施例中，本文披露的多核苷酸序列是异源的。“转基因”是通过转化程序引入基因组中的一种基因。“密码子优化的”开放阅读框的密码子使用频率被设计为模拟宿主细胞优选密码子使用的频率。

如本文中所使用，术语“重组”或“异源”是指例如通过化学合成或者通过用基因工程技术操纵分离的核酸区段来将两个原本分离的序列区段进行人工组合。术语“重组”、“转基因”、“转化”、“工程化”或“外源基因表达修饰”在本文可互换地使用。

天然氨基酸序列或多核苷酸序列是天然存在的，而非天然氨基酸序列或多核苷酸序列在自然界中不存在。

如本文中所使用，“调节序列”是指位于基因转录起始位点(例如启动子)上游的核苷酸序列、5′非翻译区和3′非编码区，并且该调节序列可以影响转录、加工或稳定性、或从该基因转录的RNA的翻译。本文中，调节序列可以包括启动子、增强子、沉默子、5′非翻译前导序列、内含子、聚腺苷酸化识别序列、RNA加工位点、效应子结合位点、茎环结构以及涉及调节基因表达的其他元件。本文中一个或多个调节元件可以与本文的编码区异源。

本文中用于制备重组构建体/载体的方法可以遵循标准的重组DNA和分子克隆技术，如由萨姆布鲁克(J.Sambrook)和拉塞尔(D.Raroell)所描述的(分子克隆：实验手册(Molecular>，第3版，纽约冷泉港冷泉港实验室出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY)，2001)；希尔豪维(T.J.Silhavy)等人(使用基因融合的实验(Experiments>，纽约冷泉港冷泉港实验室出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY)，1984)；以及奥苏贝尔(F.M.Ausubel)等人(简明分子生物学试验方案(ShortProtocols in Molecular Biology)，第5版，当前试验方案(Current Protocols)，纽约州约翰威利父子公司(John Wiley and Sons，Inc.，NY)，2002)描述的。

如本文中所使用，关于多核苷酸或多肽序列的术语“序列同一性”或“同一性”是指在两个序列中的核酸碱基或氨基酸残基当在指定的比较窗口上比对最大对应度时是相同的。如本文中所使用，“序列同一性百分比”或“百分比同一性”是指通过在比较窗口上比较两个最佳比对的序列所确定的值，其中与参比序列(其不包含添加或缺失)比较两个序列的最佳比对时，该多核苷酸或多肽序列在比较窗口中的部分可以包含添加或缺失(即空位)。通过以下方式计算该百分比：确定在两个序列中出现相同核酸碱基或氨基酸残基的位置的数目以产生匹配位置的数目，将匹配位置的数目除以比较窗口中的位置的总数目，然后将该结果乘以100以产生序列同一性百分比。应当理解的是，当计算DNA序列和RNA序列之间的序列同一性时，DNA序列的T残基与RNA序列的U残基比对，并且可以被认为与其“一致”。出于确定第一和第二多核苷酸的百分比互补性的目的，可以通过确定(i)第一多核苷酸和第二多核苷酸的补体序列之间的百分比同一性(或反之亦然)，例如和/或(ii)将产生规范的沃森和克里克碱基对的第一和第二多核苷酸之间的碱基百分比来获得。

可以使用在美国国家生物技术信息中心(NCBI)网站上在线获得的基本局部比对搜索工具(BLAST)，例如，来测量在两个或更多个多核苷酸序列(BLASTN算法)或多肽序列(BLASTP算法)之间的百分比同一性。可替代地，使用Clustal算法(例如，ClustalW、ClustalV或Clustal-欧米加)可以进行序列之间的百分比同一性比对。对于使用Clustal比对方法的多重比对，默认值可以对应于空位罚分(GAP PENALTY)＝10和空位长度罚分(GAPLENGTH PENALTY)＝10。使用Clustal方法进行逐对比对和蛋白质序列的百分比同一性计算的默认参数可以是KTUPLE＝1、空位罚分＝3、窗口(WINDOW)＝5、以及存储的对话框(DIAGONALS SAVED)＝5。对于核酸，这些参数可以是KTUPLE＝2、空位罚分＝5、窗口＝4、以及存储的对话框＝4。仍可替代地，序列之间的百分比同一性可以使用BLOSUM矩阵(例如，BLOSUM62)，使用具有参数例如空位开始(GAP OPEN)＝10、空位延伸(GAP EXTEND)＝0.5、最终空位罚分(END GAP PENALTY)＝错误(false)、最终空位开始(END GAP OPEN)＝10、最终空位延伸(END GAP EXTEND)＝0.5的EMBOSS算法(例如，needle)来执行。

作为某些实施例的特征，本文披露了各种多肽氨基酸序列和多核苷酸序列。可以使用与本文披露的序列具有至少约70％-85％、85％-90％、或90％-95％同一性的这些序列的变体。可替代地，变体氨基酸序列或多核苷酸序列可以与本文披露的序列具有至少70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性。变体氨基酸序列或多核苷酸序列可以具有与所披露的序列的相同的功能/活性，或具有所披露的序列的功能/活性的至少约85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％的功能/活性。典型地，本文披露的不以甲硫氨酸开始的任何多肽氨基酸序列可以在氨基酸序列的N-末端进一步包含至少一个起始甲硫氨酸。本文披露的以甲硫氨酸开始的任何多肽氨基酸序列可以任选地被考虑为不具有该甲硫氨酸残基(即，多肽序列可以是指关于该序列的位置-2残基至C-末端残基)。

如本文中所使用，术语“分离的”是指已经从其天然来源(例如分离的多核苷酸或多肽分子)中完全或部分纯化的任何细胞组分。在一些情况下，分离的多核苷酸或多肽分子是更大组合物、缓冲系统或试剂混合物的一部分。例如，分离的多核苷酸或多肽分子能以异源方式包含在细胞或生物体内。另一个实例是分离的葡萄糖基转移酶或反应。本文中“分离的”还可以表征右旋糖酐化合物。因此，本披露的右旋糖酐化合物是合成的、人造的化合物，和/或表现出不被认为是天然存在的性质。

本文中“水性组合物”具有例如包含至少约10wt％的水的液体组分。水性组合物的实例包括例如混合物、溶液、分散体(例如胶体分散体)、悬浮液和乳液。在某些实施例中的水性组合物包含溶解于水性组合物中的右旋糖酐(即在溶液中，并且典型地具有粘度)。

如本文中所使用，术语“胶体分散体”是指具有分散相和分散介质的异相系统，即微观上分散的不溶性颗粒悬浮在另一种物质(例如水性组合物例如水或水性溶液)中。本文中胶体分散体的实例是水状胶体。胶体分散体例如水状胶体的全部或一部分微粒可以包含本披露的某些右旋糖酐化合物。术语“分散剂(dispersant)”和“分散药剂(dispersionagent)”在本文可互换地使用，是指促进分散体的形成和/或稳定的材料。

术语“水状胶体(hydrocolloid)”和“水凝胶(hydrogel)”在本文可互换地使用。水状胶体是指水是分散介质的胶体系统。

本文中，术语“水性溶液”是指其中溶剂包含水的溶液。在本文某些方面，水性溶液可以用作分散剂。在某些实施例中，右旋糖酐化合物可以溶解、分散或混合在水性溶液中。

术语“分散剂(dispersant)”、“分散药剂(dispersion agent)”等在本文可互换地使用，是指促进一种物质在另一种物质中的分散体的形成和稳定的材料。本文中，“分散体”是指包含分散或均匀地分散在水性组合物中的一种或多种微粒(例如，本文披露的个人护理产品、药物产品、食物产品、家用产品或工业产品的任何成分)的水性组合物。

如本文中所使用，术语“粘度”是指流体或水性组合物例如水状胶体抵抗趋于导致其流动的力的程度的量度。本文中可以使用的各种粘度单位包括厘泊(cPs)和帕斯卡秒(Pa·s)。一厘泊是一泊的百分之一；一泊等于0.100kg·m^-1·s^-1。因此，如本文中所使用，术语“粘度调节剂”、“粘度改性剂”等是指可以改变/改性流体或水性组合物的粘度的任何物质。

如本文中所使用，术语“剪切稀化行为”是指随着剪切速率增加水性组合物的粘度降低。如本文中所使用，术语“剪切增稠行为”是指随着剪切速率增加水性组合物的粘度增加。本文中“剪切速率”是指对水性组合物应用渐进剪切变形的速率。可以旋转地应用剪切变形。

如本文中所使用，关于增加水性组合物的粘度的方法，术语“接触”是指导致水性组合物与右旋糖酐在一起的任何作用。可以通过本领域已知的任何方式进行接触，例如像溶解、混合、振动或均质化。

术语“糕点糖果”、“蜜饯”、“甜食”、“甜品”、“糖果”等在本文可互换地使用。糕点糖果是指具有甜味的任何风味食物产品，其稠度可以是硬的或软的，其典型地通过在口腔内吸吮和/或咀嚼来食用。糕点糖果可以含糖或者相反不含糖。

术语“织物”、“纺织品”、“布”等在本文可互换地使用，是指具有天然和/或人造纤维网络的编织材料。这样的纤维例如可以是线或纱线。

本文中“织物护理组合物”是适合用于以某种方式处理织物的任何组合物。这种组合物的实例包括衣物洗涤剂和织物柔软剂。

术语“重垢洗涤剂”、“通用洗涤剂”等在本文可互换地使用，是指可用于在任何温度下常规洗涤白色和有色纺织品的洗涤剂。术语“轻垢洗涤剂”或“细薄织物洗涤剂”在本文可互换地使用，是指可用于护理精细织物例如粘胶、羊毛、丝绸、超细纤维或需要特别护理的其他织物的洗涤剂。“特别护理”可以包括例如使用过量水、低搅拌和/或不漂白的条件。

典型地，本文“洗涤剂组合物”包含至少一种表面活性剂(洗涤剂化合物)和/或至少一种助洗剂。本文中“表面活性剂”是指倾向于降低物质溶解的液体的表面张力的物质。表面活性剂可以用作例如洗涤剂、润湿剂、乳化剂、发泡剂和/或分散剂。

术语“抗再沉积剂”、“抗污垢再沉积剂”、“抗变灰剂”等是指在这些污垢被去除之后有助于阻止污垢重新沉积到在衣物洗涤水中的衣物上的试剂，因此防止衣物变灰/变色。抗再沉积剂可以通过帮助将污垢分散在洗涤水中和/或通过阻止污垢粘附在织物表面上起作用。

本文中“口腔护理组合物”是适合用于处理口腔中的软或硬表面(例如牙齿(dental或teeth)和/或牙龈表面)的任何组合物。

本文中术语“吸附”是指化合物(例如，本文的右旋糖酐)粘附到材料的表面上。

术语“纤维酶(cellulase)”、“纤维素酶(cellulase enzyme)”等在本文可互换地使用，是指水解纤维素中的β-1，4-D-糖苷键的酶，从而部分或完全降解纤维素。可替代地，纤维素酶可以是指例如“β-1，4-葡聚糖酶”，并且可以具有内切纤维素酶活性(EC3.2.1.4)、外切纤维素酶活性(EC 3.2.1.91)或纤维二糖酶活性(EC 3.2.1.21)。“纤维素”是指具有β-1，4-连接的D-葡萄糖单体单元的直链的不溶性多糖。

研发更适合凝胶化应用的新的、高粘度右旋糖酐聚合物意义重大。进而，鉴定可以合成这种右旋糖酐聚合物的葡萄糖基转移酶也有重大意义。

本披露的实施例涉及包含右旋糖酐的组合物，该右旋糖酐包含：

(i)约87wt％-93wt％在位置1和6处连接的葡萄糖；

(ii)约0.1wt％-1.2wt％在位置1和3处连接的葡萄糖；

(iii)约0.1wt％-0.7wt％在位置1和4处连接的葡萄糖；

(iv)约7.7wt％-8.6wt％在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及

(v)约0.4wt％-1.7wt％在以下位置处连接的葡萄糖：(a)位置1、2和6，或(b)位置1、4和6。

这样的右旋糖酐的重均分子量(Mw)和z-平均回转半径分别为约5000万至2亿道尔顿和约200-280nm。而且，这样的右旋糖酐任选地不是肠膜明串珠菌葡萄糖基转移酶的产物。

该组合物的实例是合成具有上述键、重量和尺寸特征的右旋糖酐的葡萄糖基转移酶反应。值得注意的是，即使在右旋糖酐浓度相对较低的情况下，该右旋糖酐在水性组合物中表现出高粘度。据信，与先前披露的右旋糖酐聚合物的粘度特征相比，这种高粘度特征是独特的。

本文中，右旋糖酐可以包含(i)约87wt％-93wt％仅在位置1和6处连接的葡萄糖；(ii)约0.1wt％-1.2wt％仅在位置1和3处连接的葡萄糖；(iii)约0.1wt％-0.7wt％仅在位置1和4处连接的葡萄糖；(iv)约7.7wt％-8.6wt％仅在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及(v)约0.4wt％-1.7wt％仅在以下位置处连接的葡萄糖：(a)位置1、2和6，或(b)位置1、4和6。在某些实施例中，右旋糖酐可以包含(i)约89.5wt％-90.5wt％仅在位置1和6处连接的葡萄糖；(ii)约0.4wt％-0.9wt％仅在位置1和3处连接的葡萄糖；(iii)约0.3wt％-0.5wt％仅在位置1和4处连接的葡萄糖；(iv)约8.0wt％-8.3wt％仅在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及(v)约0.7wt％-1.4wt％仅在以下位置处连接的葡萄糖：(a)位置1、2和6，或(b)位置1、4和6。

在本披露的一些方面，右旋糖酐可以包含约87wt％、87.5wt％、88wt％、88.5wt％、89wt％、89.5wt％、90wt％、90.5wt％、91wt％、91.5wt％、92wt％、92.5wt％、或93wt％仅在位置1和6处连接的葡萄糖。在一些情况下，可以具有约87wt％-92.5wt％、87wt％-92wt％、87wt％-91.5wt％、87wt％-91wt％、87wt％-90.5wt％、87wt％-90wt％、87.5wt％-92.5wt％、87.5wt％-92wt％、87.5wt％-91.5wt％、87.5wt％-91wt％、87.5wt％-90.5wt％、87.5wt％-90wt％、88wt％-92.5wt％、88wt％-92wt％、88wt％-91.5wt％、88wt％-91wt％、88wt％-90.5wt％、88wt％-90wt％、88.5wt％-92.5wt％、88.5wt％-92wt％、88.5wt％-91.5wt％、88.5wt％-91wt％、88.5wt％-90.5wt％、88.5wt％-90wt％、89wt％-92.5wt％、89wt％-92wt％、89wt％-91.5wt％、89wt％-91wt％、89wt％-90.5wt％、89wt％-90wt％、89.5wt％-92.5wt％、89.5wt％-92wt％、89.5wt％-91.5wt％、89.5wt％-91wt％、或89.5wt％-90.5wt％仅在位置1和6处连接的葡萄糖。

在一些方面，右旋糖酐可以包含约0.1wt％、0.2wt％、0.3wt％、0.4wt％、0.5wt％、0.6wt％、0.7wt％、0.8wt％、0.9wt％、1.0wt％、1.1wt％、或1.2wt％仅在位置1和3处连接的葡萄糖。在一些情况下，可以具有约0.1wt％-1.2wt％、0.1wt％-1.0wt％、0.1wt％-0.8wt％、0.3wt％-1.2wt％、0.3wt％-1.0wt％、0.3wt％-0.8wt％、0.4wt％-1.2wt％、0.4wt％-1.0wt％、0.4wt％-0.8wt％、0.5wt％-1.2wt％、0.5wt％-1.0wt％、0.5wt％-0.8wt％、0.6wt％-1.2wt％、0.6wt％-1.0wt％、或0.6wt％-0.8wt％仅在位置1和3处连接的葡萄糖。

在一些方面，右旋糖酐可以包含约0.1wt％、0.2wt％、0.3wt％、0.4wt％、0.5wt％、0.6wt％、或0.7wt％仅在位置1和4处连接的葡萄糖。在一些情况下，可以具有约0.1wt％-0.7wt％、0.1wt％-0.6wt％、0.1wt％-0.5wt％、0.1wt％-0.4wt％、0.2wt％-0.7wt％、0.2wt％-0.6wt％、0.2wt％-0.5wt％、0.2wt％-0.4wt％、0.3wt％-0.7wt％、0.3wt％-0.6wt％、0.3wt％-0.5wt％、或0.3wt％-0.4wt％仅在位置1和4处连接的葡萄糖。

在一些方面，右旋糖酐可以包含约7.7wt％、7.8wt％、7.9wt％、8.0wt％、8.1wt％、8.2wt％、8.3wt％、8.4wt％、8.5wt％、或8.6wt％仅在位置1、3和6处连接的葡萄糖。在一些情况下，可以具有约7.7wt％-8.6wt％、7.7wt％-8.5wt％、7.7wt％-8.4wt％、7.7wt％-8.3wt％、7.7wt％-8.2wt％、7.8wt％-8.6wt％、7.8wt％-8.5wt％、7.8wt％-8.4wt％、7.8wt％-8.3wt％、7.8wt％-8.2wt％、7.9wt％-8.6wt％、7.9wt％-8.5wt％、7.9wt％-8.4wt％、7.9wt％-8.3wt％、7.9wt％-8.2wt％、8.0wt％-8.6wt％、8.0wt％-8.5wt％、8.0wt％-8.4wt％、8.0wt％-8.3wt％、8.0wt％-8.2wt％、8.1wt％-8.6wt％、8.1wt％-8.5wt％、8.1wt％-8.1wt％、8.1wt％-8.3wt％、或8.1wt％-8.2wt％的仅在位置1、3和6处连接葡萄糖。

在一些方面，右旋糖酐可以包含约0.4wt％、0.5wt％、0.6wt％、0.7wt％、0.8wt％、0.9wt％、1.0wt％、1.1wt％、1.2wt％、1.3wt％、1.4wt％、1.5wt％、1.6wt％、或1.7wt％仅在(a)位置1、2和6，或(b)位置1、4和6处连接的葡萄糖。在一些情况下，可以具有约0.4wt％-1.7wt％、0.4wt％-1.6wt％、0.4wt％-1.5wt％、0.4wt％-1.4wt％、0.4wt％-1.3wt％、0.5wt％-1.7wt％、0.5wt％-1.6wt％、0.5wt％-1.5wt％、0.5wt％-1.4wt％、0.5wt％-1.3wt％、0.6wt％-1.7wt％、0.6wt％-1.6wt％、0.6wt％-1.5wt％、0.6wt％-1.4wt％、0.6wt％-1.3wt％、0.7wt％-1.7wt％、0.7wt％-1.6wt％、0.7wt％-1.5wt％、0.7wt％-1.4wt％、0.7wt％-1.3wt％、0.8wt％-1.7wt％、0.8wt％-1.6wt％、0.8wt％-1.5wt％、0.8wt％-1.4wt％、0.8wt％-1.3wt％仅在(a)位置1、2和6，或(b)位置1、4和6处连接的葡萄糖。

可以使用按照本文披露的任何试验方案产生的右旋糖酐来确定右旋糖酐的糖苷键谱图。合适的键确定方案的实例可以与实例9中披露的方案类似或相同：例如，将已经通过在约70℃-90℃(例如80℃)下将反应加热约5-30分钟(例如10分钟)而失活的0768 gtf酶反应放入具有12-14kDa的MWCO的透析管(例如，用再生纤维素制成)(例如，4透析管，料号132706，光谱实验室公司(Spectrum Laboratories，Inc.))。然后，经过约4-10天(例如7天)，在约20℃-25℃(室温)下将失活的反应相对于大量的水(例如3-5L)透析；在透析过程中这种水可以每天更换。然后，该右旋糖酐产物(i)通过将透析的失活反应与约1-2x(1.5x)反应体积的100％甲醇混合来沉淀，(ii)使用相同体积的100％甲醇洗涤至少两次，并且(iii)在约40℃-50℃(例如45℃)(任选地在真空下)干燥。将可溶解量的干右旋糖酐溶解在二甲亚砜(DMSO)或DMSO/5％LiCl中，其后所有游离羟基基团被甲基化(例如通过依次添加NaOH/DMSO浆液，随后是碘甲烷)。然后将甲基化右旋糖酐萃取出(例如，在二氯甲烷中)，并在约110℃-125℃(例如120℃)下用三氟乙酸(TFA)水溶液水解成单体单元。然后蒸发TFA，并且使用硼氘化钠进行还原性开环。然后，通过水解配糖键产生的羟基基团在约40℃-60℃(例如50℃)的温度下通过用乙酰氯和TFA处理来乙酰化。接下来，将衍生化试剂蒸发，得到的甲基化/乙酰化单体在乙腈中重构；然后通过GC/MS使用合适的柱(例如，双氰基丙基氰基丙基苯基聚硅氧烷)分析该制备物。甲基和乙酰基官能团的相对位置使得物质具有不同的保留时间指数和可与公开的数据库进行比较的质谱。以这种方式，单体单元的衍生物表明每个单体最初如何连接在右旋糖酐聚合物中。

据信，本文中右旋糖酐可以是分支结构，其中存在彼此迭代分支的长链(主要包括或全部为α-1，6-键)(例如，长链可以是来自另一个长链的分支，其反过来可以本身是来自另一个长链的分支，等等)。支链结构还可以包含来自长链的短分枝；这些短链被认为主要包括例如α-1，3键和-1，4键。右旋糖酐中的分支点，无论是来自从长链分支的另一个长链还是从长链分支的短链，似乎包含没有α-1，3键、-1，4键或-1，2键而涉及α-1，6键的葡萄糖。在一些实施例中，平均来说，右旋糖酐的所有分支点的约20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、15％-35％、15％-30％、15％-25％、15％-20％、20％-35％、20％-30％、20％-25％、25％-35％、或25％-30％分支成长链。大多数(＞98％或99％)或所有其他分支点分支成短链。

在一些方面，右旋糖酐分支结构的长链的长度可以相似。长度相似，这意味着分支结构中所有长链的至少70％、75％、80％、85％、或90％的长度(DP)是在分支结构的所有长链的平均长度的正/负15％(或10％、5％)之内。在一些方面，长链的平均长度(平均长度)为约10-50DP(即，10-50个葡萄糖单体)。例如，长链的平均个体长度可以是约10、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、10-50、10-40、10-30、10-25、10-20、15-50、15-40、15-30、15-25、15-20、20-50、20-40、20-30、或20-25DP。

在某些实施例中，右旋糖酐长链可以包含大量α-1，6-糖苷键和少量(少于2.0％)α-1，3-糖苷键和/或α-1，4-糖苷键。例如，右旋糖酐长链可以包含约或至少约98％、98.25％、98.5％、98.75％、99％、99.25％、99.5％、99.75％、或99.9％的α-1，6-糖苷键。在某些实施例中，右旋糖酐长链不包含α-1，4-糖苷键(即，这样的长链主要具有α-1，6键和少量的α-1，3键)。相反，在一些实施例中，右旋糖酐长链不包含α-1，3-糖苷键(即，这样的长链主要具有α-1，6键和少量的α-1，4键)。上述实施例的任何右旋糖酐长链可以进一步不包括例如α-1，2-糖苷键。仍然在一些方面，右旋糖酐长链可以包含100％的α-1，6-糖苷键(除了被这样的长链用于从另一个链分支的键)。

在一些方面，右旋糖酐分子的短链是一至三个长度的葡萄糖单体，并且包含少于右旋糖酐聚合物的所有葡萄糖单体的约5％-10％。本文中至少约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或全部的短链的长度为1-3个葡萄糖单体。右旋糖酐分子的短链可以包含例如少于约10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、或1％的右旋糖酐分子的全部葡萄糖单体。

在一些方面，右旋糖酐分子的短链可以包含α-1，2-糖苷键、α-1，3-糖苷键和/或α-1，4-糖苷键。短链，当全部一起(不是单独)被考虑时，可以包括例如(i)这些键中的全部三个，或(ii)α-1，3-糖苷键和α-1，4-糖苷键。据信，本文的右旋糖酐分子的短链相对于右旋糖酐的其他短链可以是异质的(即，显示键谱图的一些变化)或同质的(即共享相似或相同的键谱图)。

在某些实施例中，右旋糖酐可以具有约或至少约50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、或200百万(或在5000万至2亿之间的任何整数)(或在这些值中的两个之间的任何范围)的Mw。右旋糖酐的Mw可以为例如约50-200、60-200、70-200、80-200、90-200、100-200、110-200、120-200、50-180、60-180、70-180、80-180、90-180、100-180、110-180、120-180、50-160、60-160、70-160、80-160、90-160、100-160、110-160、120-160、50-140、60-140、70-140、80-140、90-140、100-140、110-140、120-140、50-120、60-120、70-120、80-120、90-120、100-120、110-120、50-110、60-110、70-110、80-110、90-110、100-110、50-100、60-100、70-100、80-100、90-100、或95-105百万。如果需要，通过将Mw除以162.14，可以将任何这些Mw表示为DPw。

本文的右旋糖酐的z-平均回转半径可以是约200-280nm。例如，z-平均Rg可以是约200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、或280nm(或在200-280nm之间的任何整数)。作为其他实例，z-平均Rg可以为约200-280、200-270、200-260、200-250、200-240、200-230、220-280、220-270、220-260、220-250、220-240、220-230、230-280、230-270、230-260、230-250、230-240、240-280、240-270、240-260、240-250、250-280、250-270、或250-260nm。

在一些方面，右旋糖酐的Mw和/或z-平均Rg可以按照与实例9中披露的方案类似或相同的方案来测量。例如，本文的Mw和/或z-平均Rg可以通过首先将由0768 gtf产生的右旋糖酐以0.4-0.6mg/mL(例如约0.5mg/mL)溶解在具有150-250ppm(例如约200ppm)NaN₃的0.05-1.0M(例如约0.075M)的三(羟甲基)氨基甲烷缓冲液中。干右旋糖酐的溶解可以通过在45℃-55℃(例如约50℃)下振摇12-18小时来实现。所得到的右旋糖酐溶液可以进入合适的流动注射色谱装置，该装置包括与三台在线检测器相联接的分离模块(例如，来自马萨诸塞州米尔福德的沃特斯公司(Waters>TM2695分离模块)，该在线检测器为：差示折光计(例如沃特斯2414折射率检测器)、配备有准弹性光散射(QELS)检测器(例如，来自加利福尼亚州圣巴巴拉市的怀亚特技术公司(WyattTechnologies，Santa>TM-2>TM差示毛细管粘度计)。两种合适的尺寸排阻柱(例如，来自加利福尼亚州圣克拉拉市的安捷伦科技公司(Agilent>TM版本3软件)和用于多重检测器数据缩减(来自怀亚特的Astra^TM版本6软件)。MALS数据可以提供重均分子量(Mw)和z-平均回转半径(Rg)，并且QELS数据可以提供例如z-平均流体动力学半径。

本文的右旋糖酐可以是葡萄糖基转移酶的产物，该葡萄糖基转移酶包含与SEQ IDNO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13、或SEQ ID NO：17具有100％同一性或至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％同一性的氨基酸序列或由其组成(并且具有gtf活性)。包含SEQ ID NO：1(或相关序列)的葡萄糖基转移酶的非限制性实例包括含有与SEQ ID NO：2具有100％同一性或至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％同一性的氨基酸序列或由其组成(并且具有gtf活性)的葡萄糖基转移酶。例如，如本文所披露的，可以使用gtf反应来实现右旋糖酐的生产。可以任选地将在马上详细描述的说明书中披露的右旋糖酐(例如分子量、键和分支谱图)表征为包含SEQ ID NO：1或2(或其具有至少90％同一性的相关序列[上文])或由其组成的葡萄糖基转移酶的产物。在一些其他实施例中，葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：6、10、14、或18编码的氨基酸序列的分泌部分(即去除的信号肽)具有100％同一性或具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％同一性的氨基酸序列或由其组成。

本文的葡萄糖基转移酶可以来自各种微生物来源，例如细菌或真菌。细菌葡萄糖基转移酶的实例是衍生自链球菌属物种、明串珠菌属物种、乳杆菌属物种或魏斯氏菌属(Weissella)物种的那些。链球菌属物种的实例包括表兄链球菌、汗毛链球菌、唾液链球菌(S.salivarius)、牙链球菌(S.dentirousetti)、变异链球菌(S.mutans)、口腔链球菌(S.oralis)、解没食子酸链球菌(S.gallolyticus)、和血链球菌(S.sanguinis)。明串珠菌属物种的实例包括假肠膜明串珠菌(L.pseudomesenteroides)、肠膜明串珠菌(L.mesenteroides)、阿米巴氏明串珠菌(L.amelibiosum)、阿根廷明串珠菌(L.argentinum)、肉明串珠菌(L.Carnosum)、柠檬明串珠菌(L.citreum)、乳脂明串珠菌(L.cremoris)、葡聚糖明串珠菌(L.dextranicum)和果糖明串珠菌(L.fructosum)。乳杆菌属物种的实例包括发酵乳杆菌、嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌(L.delbrueckii)、瑞士乳杆菌(L.helveticus)、唾液乳杆菌(L.salivarius)、干酪乳杆菌(L.casei)、弯曲乳杆菌(L.curvatus)、植物乳杆菌(L.plantarum)、清酒乳杆菌(L.sakei)、短乳杆菌(L.brevis)、布赫内氏乳杆菌(L.buchneri)和罗伊乳杆菌(L.reuteri)。魏斯氏菌属物种的实例包括食窦魏斯氏菌(W.cibaria)、融合魏斯氏菌(W.confusa)、耐盐魏斯氏菌(W.halotolerans)、赫伦魏斯氏菌(W.hellenica)、坎氏魏斯氏菌(W.kandleri)、泡菜魏斯氏菌(W.Kimchii)、高丽魏斯氏菌(W.Koreensis)、微小魏斯氏菌(W.minor)、类肠膜魏斯氏菌(W.paramesenteroides)、土壤魏斯氏菌(W.soli)和泰国魏斯氏菌(W.thailandensis)。在一些方面，葡萄糖基转移酶不是来自肠膜明串珠菌。

本文的葡萄糖基转移酶的实例可以是本文披露的任何氨基酸序列，并且进一步包括在N-末端和/或C-末端的1-300个(或其在[例如，10个、15个、20个、25个、30个、35个、40个、45个、或50个]之间的任何整数个)残基。这样的另外的残基可以来自衍生出葡萄糖基转移酶的相应的野生型序列，或可以是异源序列例如像表位标签(在N-或C-末端)或异源信号肽(在N-末端)。

典型地，用于生产本文的右旋糖酐的葡萄糖基转移酶是缺乏N-末端信号肽的成熟形式。用于生产本文的成熟的葡萄糖基转移酶的表达系统可以使用编码酶的多核苷酸，该多核苷酸进一步包含编码N-末端信号肽的序列以指导细胞外分泌。在这样的实施例中，将信号肽在分泌过程中从酶上切割。信号肽可以是天然或异源的葡萄糖基转移酶。可用于本文的信号肽的实例是来自细菌(例如芽孢杆菌属物种例如枯草芽孢杆菌)或真菌物种的信号肽。细菌信号肽的实例是aprE信号肽，例如来自芽孢杆菌属(例如枯草芽孢杆菌，参见Vogtentanz等人，蛋白质表达与纯化(Protein Expr.Purif.)55：40-52，其通过引用结合在此)的信号肽。

SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：17是缺乏N-末端信号肽的成熟葡萄糖基转移酶的实例。由于这些和相关的氨基酸序列不以甲硫氨酸残基开始，所以应当理解，如果不使用信号肽表达任何这些酶(例如使用其中酶在细胞内表达并从细胞裂解物中获得的表达系统)，N-末端起始的甲硫氨酸优选添加被到序列中(直接或经由插入的异源氨基酸序列例如表位)。

在某些实施例中，葡萄糖基转移酶可以通过本领域已知的任何方法生产。例如，可以在异源表达系统例如微生物异源表达系统中重组生产葡萄糖基转移酶。异源表达系统的实例包括细菌(例如大肠杆菌例如TOP10、MG1655或BL21DE3；芽孢杆菌属物种例如枯草芽孢杆菌)和真核生物(例如，酵母，例如毕赤酵母属物种和酵母属物种)表达系统。

本文披露的葡萄糖基转移酶能以任何纯化状态(例如，纯的或非纯的)使用。例如，葡萄糖基转移酶可以在其使用之前被纯化和/或分离。不纯的葡萄糖基转移酶的实例包括处于细胞裂解物形式的那些。可以从用于异源表达酶的细菌(例如，大肠杆菌)制备细胞裂解物或提取物。例如，可以使用弗氏压碎器使细菌经受破裂。在可替代的实施例中，细菌可以用均化器(例如APV、兰尼(Rannie)、戈兰(Gaulin))均化。典型地，葡萄糖基转移酶可溶于这些类型的制剂。本文的细菌细胞裂解物、提取物或匀浆物能以约0.15％-0.3％(v/v)用于从蔗糖生产右旋糖酐的反应中。

用于表达本文的葡萄糖基转移酶的异源基因表达系统可以被设计用于例如蛋白质分泌。在这样的实施例中，葡萄糖基转移酶典型地包含信号肽。在一些实施例中，葡萄糖基转移酶在自然界中不存在；例如，本文的酶不被认为是从微生物(可能从其衍生出本文的葡萄糖基转移酶)中天然分泌的(即，成熟形式)。

本文的葡萄糖基转移酶的活性可以使用本领域已知的任何方法确定。例如，葡萄糖基转移酶活性可以通过测量在包含蔗糖(约50g/L)、右旋糖酐T10(约1mg/mL)和磷酸钾缓冲液(约pH 6.5，50mM)的反应中还原糖(果糖和葡萄糖)的产生来测定，其中溶液在约22℃-25℃下保持约24-30小时。可以通过向含有约1N NaOH和约0.1％三苯基四氮唑氯化物的混合物中添加0.01mL的反应物，然后监测在OD_480nm下持续约5分钟吸光度的增加来测量还原糖。而且，例如，本文的酶例如gtf>

本文披露的右旋糖酐可以是包含在葡萄糖基转移酶反应中的葡萄糖基转移酶的产物。

如果需要，可以控制本文的葡萄糖基转移酶反应的温度。在某些实施例中，温度在约5℃至约50℃之间。在某些其他实施例中，温度在约20℃至约40℃之间。可替代地，温度可以是约20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、或40℃。本文中可以使用本领域已知的各种方法来维持本文的葡萄糖基转移酶反应的温度。例如，可以通过将含有反应物的容器放置在设定在所希望的温度的空气或水浴培养箱中来维持温度。

蔗糖在本文的葡萄糖基转移酶反应中的初始浓度可以为约20g/L至900g/L、20g/L至400g/L、75g/L至175g/L、或50g/L至150g/L。例如，蔗糖的初始浓度可以为约20g/L、30g/L、40g/L、50g/L、60g/L、70g/L、80g/L、90g/L、100g/L、110g/L、120g/L、130g/L、140g/L、150g/L、160g/L、200g/L、300g/L、400g/L、500g/L、600g/L、700g/L、800g/L、900g/L、50-150g/L、75-125g/L、90-110g/L、50-500g/L、100-500g/L、200-500g/L、300-500g/L、400-500g/L、50-400g/L、100-400g/L、200-400g/L、300-400g/L、50-300g/L、100-300g/L、200-300g/L、50-200g/L、100-200g/L、或50-100g/L(或在20g/L和900g/L之间的任何整数)。“蔗糖的初始浓度”是指刚刚在已经添加所有反应组分(至少水、蔗糖、葡萄糖基转移酶)之后在gtf反应中的蔗糖浓度。

用于本文的葡萄糖基转移酶反应的蔗糖可以是高纯度的(≥99.5％)或具有任何其他纯度或等级。例如，蔗糖可以具有至少99.0％的纯度，或者可以是试剂级蔗糖。作为另一个实例，可以使用不完全精制的蔗糖。本文的不完全精制的蔗糖是指还未加工成白色精制蔗糖的蔗糖。因此，不完全精制的蔗糖可以是完全未精制的或部分精制的。未精制的蔗糖的实例是“未加工的蔗糖”(“原糖”)及其溶液。部分精制的蔗糖的实例还没有经历一个、两个、三个或更多个结晶步骤。例如，本文的不完全精制的蔗糖的ICUMSA(国际食糖统一分析法委员会(International Commission for Uniform Methods of Sugar Analysis))可以大于150。本文的蔗糖可以衍生自任何可再生糖源，例如甘蔗、甜菜、木薯、甜高粱或玉米。用于本文的蔗糖的合适的形式是结晶形式或非结晶形式(例如，糖浆、甘蔗汁、甜菜汁)。不完全精制的蔗糖的另外的合适的形式披露于美国申请公开号2015/0275256中，其通过引用结合在此。

确定蔗糖的ICUMSA值的方法是本领域中熟知的，并且由国际食糖统一分析法委员会披露于：例如，食糖分析的ICUMSA方法：由国际食糖统一分析法委员会(ICUMSA)推荐的官方和暂行方法(ICUMSA>Recommended>Analysis>(德惠利(H.C.S.de Whalley)编，爱思唯尔出版公司(ElsevierPub.Co.)，1964)，其通过引用结合在此。ICUMSA可以例如通过ICUMSA方法GS1/3-7测量，如由麦考威(R.J.McCowage)、厄克特(R.M.Urquhart)和伯奇(M.L.Burge)(原糖、红糖和彩色糖浆在pH>Sugars，Brown>，艾伯特·巴滕施(Albert Bartens)博士出版社，2011年版)描述的，该文献通过引用结合在此。

在某些实施例中，葡萄糖基转移酶反应的pH可以在约4.0至约8.0之间。可替代地，pH可以为约4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、或8.0。可以通过添加或掺入合适的缓冲液来调节或控制pH，包括但不限于：磷酸盐、Tris、柠檬酸盐或其组合。gtf反应中的缓冲液浓度可以为例如从0mM至约100mM、或约10mM、20mM或50mM。

葡萄糖基转移酶反应可以包含在任何适合用于应用本文披露的一种或多种反应条件的容器中。例如，本文的葡萄糖基转移酶反应可以是在具有适合于包含特定反应的尺寸的不锈钢、塑料或玻璃器皿(vessel)或容器(container)中。这样的容器可以任选地配备有搅拌装置。

任选地，可以经由例如搅拌或轨道振摇来搅拌本文的葡萄糖基转移酶反应。这样的搅拌可以为例如约50rpm、60rpm、70rpm、80rpm、90rpm、100rpm、110rpm、120rpm、130rpm、140rpm、150rpm、50-150rpm、60-140rpm、70-130rpm、80-120rpm、或90-110rpm。

葡萄糖基转移酶在反应中的浓度可以为例如至少约15U/L、20U/L、25U/L、30U/L、35U/L、或40U/L。在一些实施例中，可以使用15-35U/L、15-30U/L、15-25U/L、20-35U/L、20-30U/L、20-25U/L、25-35U/L、25-30U/L、或30-35U/L的葡萄糖基转移酶。

本文的葡萄糖基转移酶反应可花费约2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、18、24、30、36、48、60、72、84、96、18-30、20-28、或22-26小时来完成。反应时间可以取决于例如某些参数，如反应中使用的蔗糖和葡萄糖基转移酶的量。

因此，可以组合所有本文中限定葡萄糖基转移酶反应的特征。仅作为实例，使用0768葡萄糖基转移酶(包含SEQ ID NO：1或其相关序列)的反应最初可以包含90-110g/L(例如约100g/L)蔗糖、10-30mM(例如约20mM)磷酸钠缓冲液(pH 6.0-7.0(例如约pH 6.5))、以及20-30U/L(例如约25U/L)酶。这样的反应可以在24℃-28℃(例如约26℃)下以50-150rpm(例如约100rpm)振摇保持约20-28小时(例如约24小时)。

在一些实施例中，包含gtf 0768酶(SEQ ID NO：1或相关序列)和本文披露的任何量的蔗糖的葡萄糖基转移酶反应可以在开始反应之后少约24、22、20、18、或16小时完成(例如，消耗了95％或更多的初始提供的蔗糖)。在这样的反应中蔗糖的消耗可以比相同或类似的反应(但是这些反应包括肠膜明串珠菌右旋糖酐蔗糖酶而不是gtf 0768酶)快约或至少快约3、4、5、6、7、8、9或10倍。

包含本文的右旋糖酐的组合物可以是非水性的(例如干组合物)。这样的实施例的实例包括粉末、颗粒、微胶囊、薄片或任何其他形式的颗粒物质。其他实例包括更大的组合物，例如靶丸、棒、核、珠粒、片剂、条棍或其他附聚物。本文的非水性组合物或干组合物典型地在其中包含有少于3wt％、2wt％、1wt％、0.5wt％、或0.1wt％的水。例如，非水性组合物或干组合物中的本文的右旋糖酐的量可以是约或至少约1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％、10wt％、11wt％、12wt％、13wt％、14wt％、15wt％、16wt％、17wt％、18wt％、19wt％、20wt％、21wt％、22wt％、23wt％、24wt％、25wt％、26wt％、27wt％、28wt％、29wt％、30wt％、31wt％、32wt％、33wt％、34wt％、35wt％、36wt％、37wt％、38wt％、39wt％、40wt％、41wt％、42wt％、43wt％、44wt％、45wt％、46wt％、47wt％、48wt％、49wt％、50wt％、51wt％、52wt％、53wt％、55wt％、56wt％、57wt％、58wt％、59wt％、60wt％、61wt％、62wt％、63wt％、64wt％、65wt％、66wt％、67wt％、68wt％、69wt％、70wt％、71wt％、72wt％、73wt％、74wt％、75wt％、76wt％、77wt％、78wt％、79wt％、80wt％、81wt％、82wt％、83wt％、84wt％、85wt％、86wt％、87wt％、88wt％、89wt％、90wt％、91wt％、92wt％、93wt％、94wt％、95wt％、96wt％、97wt％、98wt％、99wt％、99.5wt％、或99.9wt％。例如，本文的非水性组合物可以呈家用产品、个人护理产品、药物产品、工业产品或食物产品的形式。

在本披露的某些实施例中，包含右旋糖酐的组合物可以是粘度为约或至少约25cPs的水性组合物。可替代地，例如，本文的水性组合物可以具有约或至少约25cPs、50cPs、75cPs、100cPs、250cPs、500cPs、750cPs、1000cPs、2000cPs、3000cPs、4000cPs、5000cPs、6000cPs、7000cPs、8000cPs、9000cPs、10000cPs、11000cPs、12000cPs、13000cPs、14000cPs、15000cPs、16000cPs、17000cPs、18000cPs、19000cPs、20000cPs、25000cPs、30000cPs、35000cPs、40000cPs、45000cPs、或50000cPs(或在25cPs和50000cPs之间的任何整数)。水性组合物的实例包括水状胶体和水性溶液。

粘度可以用本文的水性组合物在约3℃至约110℃之间(或在3℃和110℃之间的任何整数)的任何温度下测量。可替代地，粘度可以在例如在约4℃至30℃、或约20℃至25℃之间的温度下测量。粘度可以在大气压(约760托)或任何其他更高或更低的压力下测量。

本文披露的水性组合物的粘度可以使用粘度计或流变仪或使用本领域已知的任何其他方法来测量。本领域技术人员应当理解，粘度计或流变仪可以用于测量本文的表现出流变行为(即具有随着流动条件变化的粘度)的水性组合物的粘度。这样的实施例的粘度可以例如以约0.1rpm至1000rpm(每分钟转数)的旋转剪切速率测量。可替代地，可以在约10rpm、60rpm、150rpm、250rpm或600rpm的旋转剪切速率下测量粘度。

在某些实施例中，可以使用合成成分右旋糖酐的水性组合物测量粘度。例如，可以测量本文中处于完成或接近完成的gtf反应的粘度。因此可以使用成分右旋糖酐是未纯化的水性组合物(例如，除了水之外，组合物中的其他组分以大于1wt％、5wt％、或10wt％存在)测量粘度；这样的组合物可以含有一种或多种盐、缓冲液、蛋白质(例如，gtf酶)、糖(例如果糖、葡萄糖、明串珠菌二糖、寡糖)。

本文披露的水性组合物的pH可以例如在约2.0至约12.0之间。可替代地，pH可以为例如约2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0；或在5.0至约12.0之间；或在约4.0和8.0之间；或在约5.0和8.0之间。

本文的水性组合物例如水状胶体或水性溶液可以包含具有约或至少约10wt％的水的溶剂。在其他实施例中，例如，溶剂为约或至少约20wt％、30wt％、40wt％、50wt％、60wt％、70wt％、80wt％、90wt％、或100wt％的水(或在10wt％和100wt％之间的任何整数)。

例如，本文的右旋糖酐能以约或至少约0.01wt％、0.05wt％、0.1wt％、0.2wt％、0.3wt％、0.4wt％、0.5wt％、0.6wt％、0.7wt％、0.8wt％、0.9wt％、1.0wt％、1.2wt％、1.4wt％、1.6wt％、1.8wt％、2.0wt％、2.5wt％、3.0wt％、3.5wt％、4.0wt％、4.5wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％、10wt％、11wt％、12wt％、13wt％、14wt％、15wt％、16wt％、17wt％、18wt％、19wt％、20wt％、21wt％、22wt％、23wt％、24wt％、25wt％、26wt％、27wt％、28wt％、29wt％、30wt％、31wt％、32wt％、33wt％、34wt％、35wt％、36wt％、37wt％、38wt％、39wt％、40wt％、41wt％、42wt％、43wt％、44wt％、45wt％、46wt％、47wt％、48wt％、49wt％、50wt％、51wt％、52wt％、53wt％、55wt％、56wt％、57wt％、58wt％、59wt％、60wt％、61wt％、62wt％、63wt％、64wt％、65wt％、66wt％、67wt％、68wt％、69wt％、70wt％、71wt％、72wt％、73wt％、74wt％、75wt％、76wt％、77wt％、78wt％、79wt％、80wt％、81wt％、82wt％、83wt％、84wt％、85wt％、86wt％、87wt％、88wt％、89wt％、或90wt％的wt％存在于水性组合物中。下面的实例8表明，在某些方面，右旋糖酐在相对低的浓度的右旋糖酐下为水性溶液提供高粘度。因此，本披露的某些实施例涉及具有少于约30wt％、29wt％、28wt％、27wt％、26wt％、25wt％、24wt％、23wt％、22wt％、21wt％、20wt％、19wt％、18wt％、17wt％、16wt％、15wt％、14wt％、13wt％、12wt％、11wt％、10wt％、9wt％、8wt％、7wt％、6wt％、5wt％、4wt％、3wt％、2wt％、1wt％、或0.5wt％的本文的右旋糖酐的水性组合物。

除了右旋糖酐之外，本文的水性组合物可以包含其他组分。例如，水性组合物可以包含一种或多种盐，例如钠盐(例如NaCl、Na₂SO₄)。盐的其他非限制性实例包括具有(i)铝、铵、钡、钙、铬(II或III)、铜(I或II)、铁(II或III)、氢、铅(II)、锂、镁、锰(II或III)、汞(I或II)、钾、银、钠、锶、锡(II或IV)或锌阳离子，和(ii)乙酸盐、硼酸盐、溴酸盐、溴化物、碳酸盐、氯酸盐、氯化物、亚氯酸盐、铬酸盐、氨腈(cyanamide)、氰化物、重铬酸盐、磷酸二氢盐、铁氰化物、亚铁氰化物、氟化物、碳酸氢盐、磷酸氢盐、硫酸氢盐、硫化氢、亚硫酸氢盐、氢化物、氢氧化物、次氯酸盐、碘酸盐、碘化物、硝酸盐、氮化物、亚硝酸盐、草酸盐、氧化物、高氯酸盐、高锰酸盐、过氧化物、磷酸盐、磷化物、亚磷酸盐、硅酸盐、锡酸盐、亚锡酸盐、硫酸盐、硫化物、亚硫酸盐、酒石酸盐或硫氰酸盐阴离子的那些。因此，例如，具有上述(i)中的阳离子和上述(ii)中的阴离子的任何盐可以处于水性组合物中。例如，盐能以约0.01至约10.00(或在0.01至10.00之间的任何百分之一增量)的wt％存在于本文的水性组合物中。

本文的组合物可以任选地含有一种或多种活性酶。合适的酶的非限制性实例包括蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶、过氧化物酶、脂肪分解酶(例如金属脂肪分解酶)、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶(例如芳基酯酶、聚酯酶)、过氧水解酶、角质酶、果胶酶、果胶裂解酶、甘露聚糖酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶(例如胆碱氧化酶)、酚氧化酶、脂氧合酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、苹果酸酶(malanase)、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、金属蛋白酶、阿马多里酶(amadoriase)、葡糖淀粉酶、阿拉伯呋喃糖酶、肌醇六磷酸酶、异构酶、转移酶和淀粉酶。如果包括一种或多种酶，则其能以例如约0.0001wt％-0.1wt％(例如0.01wt％-0.03wt％)的活性酶(例如，以纯酶蛋白计算)包含在本文的组合物中。

本文的纤维素酶可以具有内切纤维素酶活性(EC 3.2.1.4)、外切纤维素酶活性(EC 3.2.1.91)或纤维二糖酶活性(EC 3.2.1.21)。本文的纤维素酶是在合适的条件下具有维持纤维素酶活性的活性的“活性纤维素酶”；确定这样的合适的条件在本领域技术范围内。

本文的纤维素酶可以衍生自任何微生物来源，例如细菌或真菌。包括化学修饰的纤维素酶或蛋白质工程化的突变纤维素酶。合适的纤维素酶包括但不限于来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、链霉菌属、木霉属、腐质霉属、镰胞菌属、梭孢壳属(Thielavia)和支顶孢属的纤维素酶。作为其他实例，纤维素酶可以衍生自特异腐质霉(Humicola insolens)、嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)或尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)；这些和其他纤维素酶被披露在美国专利号4435307、5648263、5691178、5776757和7604974中，其全部均通过引用结合在此。示例性里氏木霉(Trichoderma reesei)纤维素酶披露于美国专利号4689297、5814501、5324649和国际专利申请公开号WO 92/06221和WO 92/06165中，其全部通过引用结合在此。示例性芽孢杆菌属(Bacillus)纤维素酶披露于美国专利号6562612中，其通过引用结合在此。纤维素酶，例如前述任何一种，优选为缺乏N-末端信号肽的成熟形式。可用于本文的可商购的纤维素酶包括纤维素酶和护理酶(诺维信公司(Novozymes A/S))；和HA(杜邦工业生物科学公司(DuPont Industrial Biosciences))和(花王公司(Kao Corporation))。

可替代地，本文的纤维素酶可以通过本领域已知的任何方法生产，例如在美国专利号4435307、5776757和7604974中所述的，其通过引用结合在此。例如，纤维素酶可以在异源表达系统例如微生物或真菌异源表达系统中重组生产。异源表达系统的实例包括细菌(例如大肠杆菌、芽孢杆菌属物种)和真核系统。真核系统可以使用例如酵母(例如，毕赤酵母属物种、酵母属物种)或真菌(例如木霉属物种例如里氏木霉、曲霉属物种例如黑曲霉(A.niger))表达系统。

当制备本文披露的组合物时，可以直接添加一种或多种纤维素酶作为成分。可替代地，可以在所披露的组合物中间接地(非故意地)提供一种或多种纤维素酶。例如，可以通过存在于用于制备组合物的非纤维素酶制剂中而在本文的组合物中提供纤维素酶。间接地向其中提供纤维素酶的组合物中的纤维素酶能以例如约0.1-10ppb(例如，少于1ppm)存在。本文的组合物通过使用右旋糖酐化合物的预期益处是可以使用可能具有背景纤维素酶活性的非纤维素酶制剂，而不用担心右旋糖酐的希望的作用将被背景纤维素酶活性抵消。

在某些实施例中，纤维素酶可以是热稳定的。纤维素酶热稳定性是指酶在暴露于高温(例如约60℃-70℃)持续一段时间(例如约30-60分钟)后保留活性的能力。纤维素酶的热稳定性可以通过其以几分钟、几小时或几天给出的半衰期(t1/2)来测量，在该半衰期期间纤维素酶活性的一半在限定的条件下丧失。

在某些实施例中纤维素酶可以在宽范围的pH值(例如中性或碱性pH，例如约7.0至约11.0的pH)下稳定。这样的酶可以在这样的pH条件下保持稳定一段预定的时间(例如至少约15min、30min或1小时)。

至少一种、两种或更多种纤维素酶可以包括在组合物中。典型地，本文的组合物中纤维素酶的总量是适合于在组合物中使用纤维素酶的目的的量(“有效量”)。例如，旨在用于改善包含纤维素的织物的手感和/或外观的组合物中的纤维素酶的有效量是产生织物手感的可测量改善的量(例如，改善织物平滑度和/或外观，去除倾向于降低织物的外观清晰度的药物和原纤维)。作为另一个实例，本文的织物打磨组合物中的纤维素酶的有效量是将提供所希望的作用的量(例如，在接缝处和在织物面板上产生磨损和褪色的外观)。例如，本文组合物中的纤维素酶的量也可以取决于使用的组合物的工艺参数(例如，设备、温度、时间等)和纤维素酶活性。纤维素酶在处理织物的水性组合物中的有效浓度可以由本领域技术人员容易地确定。在织物护理过程中，例如，纤维素酶可以以最小约0.01-0.1ppm的总纤维素酶蛋白质的浓度、或约0.1-10ppb的总纤维素酶蛋白质的浓度(少于1ppm)至最大约100ppm、200ppm、500ppm、1000ppm、2000ppm、3000ppm、4000ppm、或5000ppm的总纤维素酶蛋白质的浓度存在于处理织物的水性组合物(例如洗涤液)中。

据信本文提供的右旋糖酐聚合物通常或完全对纤维素酶的降解稳定(具有抗性)。例如，一种或多种纤维素酶对本文的右旋糖酐的降解百分比被认为少于10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、或1％，或是0％。例如，通过比较使用纤维素酶处理一段时间(例如约24小时)前后的右旋糖酐聚合物的分子量可以确定这样的降解百分比。

在某些实施例中，认为水性组合物具有剪切稀化行为或剪切增稠行为。剪切稀化行为被观测为随着剪切速率增加水性组合物的粘度降低，而剪切增稠行为被观测为随着剪切速率增加水性组合物的粘度增加。本文的水性组合物的剪切稀化行为或剪切增稠行为的改性可归因于右旋糖酐与水性组合物的混合。因此，本披露的一种或多种右旋糖酐化合物可以添加到水性组合物中以改变其流变特征(即，水性液体、溶液或混合物的流动特性被改变)。而且，可以将一种或多种右旋糖酐化合物添加到水性组合物中以改性其粘度。

通过在增加的旋转剪切速率(例如，从约0.1rpm至约1000rpm)下测量粘度可以观测到本文的水性组合物的流变特性。例如，本文披露的水性组合物的剪切稀化行为可以被观测为随着旋转剪切速率从约10rpm增加至60rpm、从10rpm增加至150rpm、从10rpm增加至250rpm、从60rpm增加至150rpm、从60rpm增加至250rpm、或从150rpm增加至250rpm，粘度(cPs)降低约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、或95％(或在5％至95％之间的任何整数)。作为另一个实例，本文披露的水性组合物的剪切增稠行为可以被观测为随着旋转剪切速率从约10rpm增加至60rpm、从10rpm增加至150rpm、从10rpm增加至250rpm、从60rpm增加至150rpm、从60rpm增加至250rpm、或从150rpm增加至250rpm，粘度(cPs)增加约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％、125％、150％、175％、或200％(或在5％至200％之间的任何整数)。

本文披露的水性组合物可以呈食物产品、个人护理产品、药物产品、家用产品或工业产品(例如下面描述的那些产品中的任何一种)的形式和/或包含在其中。本文的右旋糖酐化合物可以用作这些产品的每一种中的增稠剂。如果需要，这样的增稠剂可以与一种或多种其他类型的增稠剂结合使用，例如在美国专利号8541041中披露的那些增稠剂，其披露内容通过引用以其全文结合在此。

据信，本文披露的右旋糖酐化合物可用于向个人护理产品、药物产品、家用产品、工业产品或食物产品提供一种或多种以下物理特性：例如增稠、冷冻/解冻稳定性、润滑性、湿度保持和释放、质地、稠度、形状保持、乳化、粘合、悬浮、分散、凝胶化、矿物硬度降低。产物中右旋糖酐的浓度或量的实例可以是例如本文提供的任何重量百分比。

本文的个人护理产品没有特别限制，并且包括例如皮肤护理组合物、化妆品组合物、抗真菌组合物和抗细菌组合物。本文的个人护理产品可以呈例如洗剂、霜剂、糊剂、香脂、软膏、润发油、凝胶剂、液体、这些的组合等的形式。如果需要，本文披露的个人护理产品可以包括至少一种活性成分。活性成分通常被认为是引起预期的药理作用的成分。

在某些实施例中，可以将皮肤护理产品应用于皮肤以解决与缺乏水分有关的皮肤损伤。也可以使用皮肤护理产品来解决皮肤的视觉外观(例如，减少片状，龟裂和/或红色皮肤的外观)和/或皮肤的触感(例如，减少皮肤的粗糙度和/或干燥度，同时改善皮肤的柔软度和微观细化)。典型地，皮肤护理产品可以包括用于治疗或预防皮肤疾病、提供美容效果、或为皮肤提供保湿益处的至少一种活性成分，例如氧化锌、凡士林、白凡士林、矿物油、鱼肝油、羊毛脂、二甲聚硅氧烷、硬脂、维生素A、尿囊素、炉甘石、高岭土、甘油或胶体燕麦片、以及这些的组合。皮肤护理产品可以包括一种或多种天然保湿因子，例如像神经酰胺、透明质酸、甘油、角鲨烷、氨基酸、胆固醇、脂肪酸、三酸甘油酯、磷脂质、鞘糖脂、尿素、亚油酸、葡糖氨基葡聚糖、黏多糖、乳酸钠、或吡咯烷酮羧酸钠。可以包括在皮肤护理产品中的其他成分包括但不限于甘油酯、杏仁油、卡诺拉油、角鲨烷、角鲨烯、椰子油、玉米油、荷荷芭油、荷荷芭蜡、卵磷脂、橄榄油、红花油、芝麻油、乳木果油、大豆油、甜杏仁油、向日葵油、茶树油、乳木果油、棕榈油、胆固醇、胆固醇酯、蜡酯、脂肪酸和橙皮油。

本文的个人护理产品也可以呈例如化妆品、唇膏、睫毛膏、胭脂、粉底、腮红、眼线膏、唇线笔、唇彩、其他化妆品、防晒霜、防晒乳、指甲油、指甲调理剂、沐浴露(bath gel)、淋浴凝胶(shower gel)、沐浴乳(body wash)、洗面奶、润唇膏、护肤霜、冷霜、润肤膏、身体喷雾剂、皂、身体磨砂膏、去角质剂(exfoliant)、收敛剂、颈背爽肤水(scruffing lotion)、脱毛剂、烫发溶液(permanent waving solution)、去头皮屑配制品、止汗组合物、除臭剂、剃须产品、剃须前产品、剃须后产品、清洁剂、皮肤凝胶、染发剂、洁牙剂组合物、牙膏、或漱口剂。个人护理产品(例如，清洁剂、皂、磨砂膏、化妆品)的实例包括载体或去角质剂(例如，荷荷巴珠[荷荷巴酯珠])(例如，约1wt％-10wt％、3wt％-7wt％、4wt％-6wt％、或5wt％)；这样的试剂可以任选地分散在产品内。

在某些方面，个人护理产品可以是头发护理产品。本文的头发护理产品的实例包括洗发精、护发素(免洗或漂洗型)、营养发水、染发剂、染发产品、头发光亮产品、护发精华、头发防毛躁产品、头发分叉修复产品、摩丝、喷发剂和发型啫哩。在一些实施例中，头发护理产品可以呈液体、糊剂、凝胶、固体或粉末的形式。典型地，如本文披露的头发护理产品包含一种或多种以下通常用于配制头发护理产品的成分：阴离子表面活性剂，例如聚氧乙烯月桂醚硫酸钠；阳离子表面活性剂，例如硬脂酰基三甲基氯化铵和/或二硬脂酰基二甲基氯化铵；非离子表面活性剂，例如单硬脂酸甘油酯、山梨糖醇酐单棕榈酸酯和/或聚氧乙烯鲸蜡醚；润湿剂，例如丙二醇、1，3-丁二醇、甘油、山梨糖醇、焦谷氨酸盐、氨基酸和/或三甲基甘氨酸；烃类，例如液体石蜡、凡士林油、固体石蜡、角鲨烷和/或烯烃低聚物；高级醇，例如硬脂醇和/或鲸蜡醇；富脂剂；去头皮屑剂；消毒剂；消炎剂；生药；水溶性聚合物，例如甲基纤维素、羟基纤维素和/或部分脱乙酰甲壳素(除本文披露的一种或多种右旋糖酐之外)；防腐剂，例如对羟基苯甲酸酯；紫外光吸收剂；珠光剂；pH调节剂；香料；以及颜料。

本文的药物产品可以呈例如乳剂、液体、酏剂、凝胶、悬浮液、溶液、霜剂或软膏剂的形式。而且，本文的药物产品可以呈本文披露的任何个人护理产品的形式，例如抗细菌或抗真菌组合物。药物产品可以进一步包含一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂和/或药学上可接受的盐。本文披露的右旋糖酐化合物也可以用于胶囊、封装剂、片剂包衣以及作为药剂和药物的赋形剂。

本文的食物产品的非限制性实例包括蔬菜、肉和大豆馅饼；改良海鲜；改良奶酪棒；奶油汤；肉汁和酱汁；沙拉酱；蛋黄酱；洋葱圈；果酱、果冻和糖浆；饼馅；马铃薯产品，例如炸薯条和膨化薯条；用于油炸食品、薄煎饼/华夫饼干和蛋糕的面糊；宠物食品；糕点糖果(糖果)；饮料；冷冻甜点；冰淇淋；培养的奶制品(cultured dairy products)，例如松软干酪、酸奶、奶酪和酸奶油；蛋糕糖霜和釉料；人造稠黄油；发酵和未发酵的烘焙食品；等等。

在某些实施例中，本文的右旋糖酐能以提供所希望的程度的增稠和/或分散的量包含在食品或任何其他可吸收的材料(例如肠内药物制剂)中。例如，产品中的右旋糖酐的浓度或量可以为约0.1wt％-3wt％、0.1wt％-4wt％、0.1wt％-5wt％、或0.1wt％-10wt％。

本文的家用和/或工业产品可以呈以下形式：例如，干壁胶带接合化合物；砂浆；水泥浆；石膏水泥灰浆(cement plaster)；喷雾灰泥；水泥灰泥(cement stucco)；粘合剂；糊剂；墙壁/天花板调质剂；用于带式浇注、挤压成型、喷射模塑和陶瓷的粘合剂和加工助剂；用于杀有害生物剂、除草剂和化肥的喷洒附着物和悬浮/分散助剂；织物护理产品，例如织物柔软剂和衣物洗涤剂；硬表面清洁剂：空气清新剂；聚合物乳液；凝胶例如水性凝胶；表面活性剂溶液；涂料如水性涂料；保护涂层；粘合剂；密封剂和填缝剂；油墨例如水性油墨；金属加工液；或用于电镀、磷化、镀锌和/或一般金属清洗操作中的乳液型金属清洗液。

本文披露的右旋糖酐化合物可以例如以提供所希望的程度的增稠和/或分散的量包含在个人护理产品、药物产品、家用产品或工业产品中。产物中右旋糖酐化合物的浓度或量的实例可以是例如上文提供的任何重量百分比。

在一些方面，水性组合物可以包含约0.5-2.0wt％本文的右旋糖酐(例如约1.0wt％)、约15-25wt％(例如约20wt％)的保湿剂例如油(例如矿物油)、约4-6wt％(约5wt％)表面活性剂/乳化剂(例如脱水山梨糖醇单油酸酯或聚山梨醇酯80之一或两者，例如约2.6wt％脱水山梨糖醇单油酸酯和约2.4wt％聚山梨醇酯80)，任选地0.25-1.0wt％(例如，0.5wt％)防腐剂(例如，包含丙二醇、重氮烷基脲、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯[例如，II]中的一种或多种的防腐剂)，以及任选地一种或多种其他成分。例如，这样的组合物可以呈乳剂的形式。在这些和一些其他相关方面，如本文披露的右旋糖酐可以用作典型地用于为某些消费产品(例如个人护理(例如洗液))、食物和/或药物产品提供粘度的化合物的替代物(例如，黄原胶、交联的聚丙烯酸聚合物例如卡波普Ultrez 10)。仍然在一些方面，如通过ASTM E1490-3(“用于面霜和洗液的描述性皮肤感觉分析的标准实践”(Standard Practice for Descriptive Skinfeel Analysis of Creamsand Lotions)，ASTM国际集团，宾夕法尼亚州西康舍霍肯(West Conshohocken，PA)，2003，DOI：10.1520/E1490-03，通过引用结合在此)测量的，水性组合物(例如，个人护理物品例如洗液)的感官经验评级可以小于约8、7或6，其中在评估中对擦拭物粘性(rub-outsliminess)、后感粘性(afterfeel stickiness)、拾取纤维性(pick-up stringiness)和拾取粘性(pick-up stickiness)中的每一个进行了测量。

本文的食物产品可以呈例如糕点糖果的形式。本文的糕点糖果可以含有一种或多种糖(例如蔗糖、果糖、葡萄糖)用于甜化，或相反不含糖。

糕点糖果的实例包括煮糖(硬煮糖[即，硬糖])、糖衣糖、果冻糖果、口香糖(gums)、甘草糖、求斯糖、焦糖、太妃糖、软糖、口香糖(chewing gums)、泡泡糖、牛轧糖、耐嚼膏、哈拉瓦(halawa)、片剂、糖锭、糖霜、霜状白糖、布丁和凝胶(例如、水果凝胶、明胶甜点)。糕点糖果的其他实例包括充气糖果，例如棉花糖和烘焙糖果。

本文的糕点糖果可以任选地使用巧克力，以任何形式(例如棒状、糖果、糖块、松露、扁豆)制备。例如，糕点糖果可以用巧克力、糖衣、糖果、釉面和/或薄膜包衣来进行包衣。薄膜包衣方法典型地包括向糖果的表面应用成膜液体组合物，该组合物在干燥后变成保护膜。例如，这种薄膜包衣用于保护糕点糖果中包含的有效成分；保护糕点糖果本身免于潮湿、冲击和/或易碎；和/或赋予糕点糖果有吸引力的视觉特性(例如，光泽、均匀的颜色、光滑的表面)。

在某些实施例中，糕点糖果可以用液体、糊状、固体或粉末状的填料进行填充。本文的右旋糖酐可以包含在这样的填料中，在这种情况下，在填充的糕点糖果组分中任选地还包含右旋糖酐。

本文的糕点糖果任选地是无糖的、不包含糖，并且典型地相反具有一种或多种人造糖和/或非糖甜味剂(任选非热量型)(例如，阿斯巴甜、糖精、甜叶菊(STEVIA)、蔗糖素(SUCRALOSE))。在某些实施例中，无糖糕点糖果可以包含一种或多种多元醇(例如赤藓糖醇、甘油、乳糖醇、甘露糖醇、麦芽糖醇、木糖醇)、可溶性纤维和/或代替糖的蛋白质。

本文的食物产品可以例如处于宠物食物的形式。本文的宠物食物可以是驯养动物例如狗或猫(或任何其他陪伴动物)的食物。在某些实施例中，宠物食物向家畜提供以下中的一种或多种：必需的饮食必需品、零食(例如狗饼干)、食品补充剂。宠物食物的实例包括干宠物食物(例如，核、粗粒食物)、半湿润组合物、湿宠物食物(例如罐头宠物食物)或其任何组合。湿宠物食物典型地具有超过65％的水分含量。半湿润宠物食物典型地具有20％-65％的水分含量，并且可以包括湿润剂例如丙二醇、山梨酸钾和防止微生物(细菌和霉菌)生长的成分。干宠物食物典型地具有低于20％的水分含量，并且其加工通常包括挤压、干燥和/或烘焙。宠物食物可以任选地处于肉汁、酸奶、粉末、悬浮液、咀嚼或零食(例如饼干)的形式；如果需要，所有这些组合物也可以用作宠物食品补充剂。宠物零食可以是例如半湿可咀嚼的零食；干燥零食；可咀嚼的骨头；烘焙的、挤压的或冲压的零食；或糖果零食。可以添加本文的右旋糖酐的宠物食物组合物/配制品的实例包括美国专利申请公开号2013/0280352和2010/0159103和美国专利号6977084中披露的那些，其全部通过引用结合在此。

本文披露的组合物可以呈织物护理组合物的形式。例如，本文的织物护理组合物可用于手洗、机洗和/或其他目的，例如织物的浸泡和/或预处理。织物护理组合物可以采取例如衣物洗涤剂；织物调理剂；任何洗涤产品、漂洗产品或烘干机添加的产品；单位剂量或喷雾的形式。处于液体形式的织物护理组合物可以呈如本文披露的水性组合物的形式。在其他方面，织物护理组合物可以呈干燥形式，例如颗粒洗涤剂或烘干机添加的织物柔软剂片。本文的织物护理组合物的其他非限制性实例包括：颗粒或粉末形式的通用或重垢洗涤剂；液体、凝胶或糊状形式的通用或重垢洗涤剂；液体或干燥精细织物(例如精致衣物)洗涤剂；清洁助剂例如漂白添加剂、“去污棒”或预处理；含基底的产品，例如干和湿的抹布、衬垫或海绵；喷雾和雾。

本文的洗涤剂组合物可以呈任何有用的形式，例如粉末、颗粒、糊剂、棒、单位剂量或液体。液体洗涤剂可以是水性的，典型地包含多达约70wt％的水和0wt％至约30wt％的有机溶剂。它也可以呈仅含有约30wt％水的紧密凝胶类型的形式。

典型地本文的洗涤剂组合物包含一种或多种表面活性剂，其中该表面活性剂选自非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、两性表面活性剂、兼性离子表面活性剂、半极性非离子表面活性剂及其混合物。在一些实施例中，表面活性剂以从约0.1％至约60％的水平存在，而在可替代的实施例中，该水平为从约1％至约50％，而在又进一步的实施例中，该水平为从约5％至约40％，以洗涤剂组合物的重量计。通常，洗涤剂将含有0wt％至约50wt％的阴离子表面活性剂，例如直链烷基苯磺酸盐(LAS)、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烷基硫酸盐(脂肪醇硫酸盐)(AS)、醇乙氧基硫酸盐(AEOS或AES)、仲型链烷磺酸盐(SAS)、α-磺基脂肪酸甲酯、烷基-或烯基琥珀酸或皂。另外，洗涤剂组合物可任选地含有0wt％至约40wt％的非离子表面活性剂，例如醇乙氧基化物(AEO或AE)、羧化醇乙氧基化物、壬基苯酚乙氧基化物、烷基多糖苷、烷基二甲基胺氧化物、乙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺、脂肪酸单乙醇酰胺、或多羟基烷基脂肪酸酰胺(如在WO 92/06154中所描述，其通过引用结合在此)。

本文的洗涤剂组合物典型地包含一种或多种洗涤剂助洗剂或助洗剂系统。例如，可以包括一种或多种氧化的聚α-1，3-葡聚糖化合物作为助洗剂。在一些方面，可以包括氧化的聚α-1，3-葡聚糖作为共助洗剂，其中它与一种或多种另外的助洗剂(例如本文披露的任何一种)一起使用。用于本文的氧化的聚α-1，3-葡聚糖化合物披露在美国专利申请公开号2015/0259439中。在掺入至少一种助洗剂的一些实施例中，清洁组合物包含以组合物的重量计至少约1％、从约3％至约60％、或甚至从约5％至约40％的助洗剂。助洗剂(除了氧化的聚α-1，3-葡聚糖之外)包括但不限于，聚磷酸盐的碱金属、铵和链烷醇铵盐；碱金属硅酸盐、碱土金属和碱金属碳酸盐；铝硅酸盐；聚羧酸化合物；醚羟基聚羧酸酯；马来酸酐与乙烯或乙烯基甲基醚、1，3，5-三羟基苯-2，4，6-三磺酸、和羧基甲基氧基琥珀酸的共聚物；聚乙酸的各种碱金属、铵和取代的铵盐，例如乙二胺四乙酸和次氮基三乙酸；连同聚羧酸酯，例如苯六甲酸、琥珀酸、柠檬酸、氧代二琥珀酸(oxydisuccinic acid)、聚马来酸、苯1，3，5-三羧酸、羧基甲基氧基琥珀酸及其可溶性盐。实际上，预期任何适合的助洗剂将可用于本披露的各种实施例中。洗涤剂助洗剂或络合剂的另外的实例包含沸石、二磷酸盐、三磷酸盐、膦酸盐、柠檬酸盐、次氮基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTMPA)、烷基或烯基琥珀酸、可溶性硅酸盐或层状桂酸盐(如，来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)。

在一些实施例中，助洗剂形成水溶性硬离子络合物(例如螯合助洗剂)，例如柠檬酸盐和多磷酸盐(例如三聚磷酸钠和三聚磷酸钠六水合物、三聚磷酸钾、以及混合的三聚磷酸钠和三聚磷酸钾等)。预期任何适合的助洗剂将可用于本披露，包括本领域已知的那些(参见例如EP 2100949)。

在一些实施例中，适合的助洗剂可以包括磷酸盐助洗剂和非磷酸盐助洗剂。在一些实施例中，助洗剂是磷酸盐助洗剂。在一些实施例中，助洗剂是非磷酸盐助洗剂。助洗剂以按组合物的重量计从0.1％至80％、或从5％至60％、或从10％至50％的水平使用。在一些实施例中，产品包括磷酸盐和非磷酸盐助洗剂的混合物。适合的磷酸盐助洗剂包括单磷酸盐、二磷酸盐、三聚磷酸盐或低聚多磷酸盐，包括这些化合物的碱金属盐，包括钠盐。在一些实施例中，助洗剂可以是三聚磷酸钠(STPP)。另外，组合物可以包含有助于实现中性pH组合物的碳酸盐和/或柠檬酸盐，优选柠檬酸盐。其他适合的非磷酸盐助洗剂包括多羧酸及其部分或完全中和盐、单体型多羧酸和羟基羧酸及其盐的均聚物和共聚物。在一些实施例中，上述化合物的盐包括铵盐和/或碱金属盐，即锂盐、钠盐和钾盐，包括钠盐。适合的多元羧酸包括无环的、脂环族的、杂环的和芳香族的羧酸，其中在一些实施例中，它们可以包含至少两个羧基基团，这些羧基基团在每种情况下彼此分离，在某些情况下被不超过两个碳原子分离。

本文的洗涤剂组合物可包含至少一种螯合剂。适合的螯合剂包括但不限于铜、铁和/或锰螯合剂及其混合物。在使用至少一种螯合剂的实施例中，该组合物包含以该组合物的重量计从约0.1％至约15％或甚至从约3.0％至约10％的螯合剂。

本文的洗涤剂组合物可以包含至少一种沉积助剂。合适的沉积助剂包括但不限于聚乙二醇、聚丙二醇、聚羧酸盐、去污聚合物(例如聚对苯二甲酸)、粘土例如高岭土、蒙脱石、绿坡缕石、伊利石、膨润土、多水高岭土及其混合物。

本文的洗涤剂组合物可以包含一种或多种染料转移抑制剂。适合的聚合物染料转移抑制剂包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯基吡咯烷酮与N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯基噁唑烷酮以及聚乙烯基咪唑或其混合物。另外的染料转移抑制剂包括锰酞菁、过氧化物酶、聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯基噁唑烷酮和聚乙烯基咪唑和/或其混合物；螯合剂，其实例包括乙二胺四乙酸(EDTA)；二亚乙基三胺五亚甲基膦酸(DTPMP)；羟基-乙烷二膦酸(HEDP)；乙二胺N，N′-二琥珀酸(EDDS)；甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)；二乙三胺五乙酸(DTPA)；丙二胺四乙酸(PDTA)；2-羟基吡啶-N-氧化物(HPNO)；或甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)；谷氨酸N，N-二乙酸(N，N-二羧基甲基谷氨酸四钠盐(GLDA)；次氮基三乙酸(NTA)；4，5-二羟基间苯二磺酸；柠檬酸及其任何盐；N-羟基乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、三亚乙基四胺六乙酸(TTHA)、N-羟基乙基亚氨基二乙酸(HEIDA)、二羟基乙基甘氨酸(DHEG)、乙二胺四丙酸(EDTP)及其衍生物，其可以单独使用或与以上任何一种组合使用。在使用至少一种染料转移抑制剂的实施例中，本文的组合物可以包含以该组合物的重量计从约0.0001％至约10％、从约0.01％至约5％、或甚至从约0.1％至约3％的该至少一种染料转移抑制剂。

本文的洗涤剂组合物可以包含硅酸盐。在这些实施例中的一些，可使用硅酸钠(例如，二硅酸钠、偏硅酸钠和/或晶体硅酸盐)。在一些实施例中，硅酸盐以按该组合物的重量计从约1％至约20％的水平存在。在一些实施例中，硅酸盐以按该组合物的重量计从约5％至约15％的水平存在。

本文的洗涤剂组合物可以包含分散剂。适合的水溶性有机材料包括但不限于均聚合或共聚合的酸或其盐，其中聚羧酸包括至少两个被不超过两个碳原子彼此分开的羧基自由基。

本文的洗涤剂组合物可以另外包含一种或多种酶。酶的实例包括处于任意组合的蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶、过氧化物酶、脂肪分解酶(例如金属脂肪分解酶)、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶(例如芳基酯酶、聚酯酶)、过氧水解酶、角质酶、果胶酶、果胶酸裂合酶、甘露聚糖酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶(例如胆碱氧化酶、酚氧化酶)、酚氧化酶、脂肪氧合酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、苹果酸酶(malanase)、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、金属蛋白酶、阿马多里酶、葡糖淀粉酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、半乳糖苷酶、半乳聚糖酶、过氧化氢酶、角叉菜胶酶、透明质酸酶、角蛋白酶、乳糖酶、木质酶、过氧化物酶、磷酸酶、聚半乳糖醛酸酶、支链淀粉酶、鼠李糖半乳糖醛酸酶、鞣酸酶、转谷氨酰胺酶、木葡聚糖酶、木糖苷酶、金属蛋白酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、植酸酶、异构酶、转移酶和/或淀粉酶。

上文披露的任何纤维素酶都被考虑用于所披露的洗涤剂组合物中。适合的纤维素酶包括但不限于特异腐质霉(Humicola insolens)纤维素酶(参见例如美国专利号4435307)。预期用于本文的示例性纤维素酶是对纺织品具有颜色护理益处的那些。提供颜色护理益处的纤维素酶的实例披露在EP 0495257、EP 0531372、EP 531315、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 94/07998；WO 98/12307；WO 95/24471、WO 98/08940和美国专利号5457046、5686593和5763254中，其全部均通过引用结合在此。可用于洗涤剂的可商购的纤维素酶的实例包括纤柔酶纤维素清洁酶纤维素酶和护理酶(诺和诺德公司(NovoNordisk A/S)和诺维信公司(Novozymes A/S))；PURADAX和REVITALENZ^TM(杜邦工业生物科学(DuPont>(AB酶公司(AB Enzymes))；和KAC-500(B)^TM(花王公司(KaoCorporation))。另外的纤维素酶披露在例如US>

在一些实施例中，洗涤剂组合物可以包含一种或多种酶(例如，本文披露的任何一种)，其每一种处于按该组合物的重量计从约0.00001％至约10％的水平，以及按该组合物的重量计的余量的清洁辅助材料。在一些其他实施例中，洗涤剂组合物还可以包含以按该组合物的重量计约0.0001％至约10％、约0.001％至约5％、约0.001％至约2％、或约0.005％至约0.5％的水平的每一种酶。

合适的蛋白酶包括动物、植物或微生物起源的蛋白酶。在一些实施例中，使用微生物蛋白酶。在一些实施例中，包括化学或遗传修饰的突变体。在一些实施例中，蛋白酶是丝氨酸蛋白酶，优选碱性微生物蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶。碱性蛋白酶的实例包括枯草杆菌蛋白酶，特别是衍生自芽孢杆菌属的那些(例如，枯草杆菌蛋白酶迟缓、枯草杆菌蛋白酶解淀粉、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯(Carlsberg)、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168)。另外的实例包括在US专利号RE 34606、5955340、5700676、6312936和6482628中描述的那些突变体蛋白酶，其全部通过引用结合在此。另外的蛋白酶实例包括但不限于胰蛋白酶(例如猪或牛起源的)和在WO 89/06270中描述镰孢菌属(Fusarium)蛋白酶。在一些实施例中，可商购的蛋白酶包括但不限于：MAXACAL^TM、MAXAPEM^TM、OXP、PURAMAX^TM、EXCELLASE^TM、PREFERENZ^TM蛋白酶(例如P100、P110、P280)、EFFECTENZ^TM蛋白酶(例如P1000、P1050、P2000)、EXCELLENZ^TM蛋白酶(例如P1000)、和PURAFAST^TM(杰能科公司(Genencor))；赛威蛋白酶引发酶DURAZYM^TM、波力酶液体蛋白酶中性蛋白酶和益瑞蛋白酶(诺维信公司(Novozymes))；BLAP^TM和BLAP^TM变体(德国杜塞尔多夫市汉高股份有限公司(Henkel>

适合的甘露聚糖酶包括但不限于细菌或真菌起源的那些。化学或遗传修饰的突变体包括在一些实施例中。已知各种甘露聚糖酶可用于本披露(参见例如美国专利号6566114、6602842和6440991中，其全部通过引用结合在此)。可用于本披露的可商购的甘露聚糖酶包括但不限于PURABRITE^TM、和

合适的脂肪酶包括细菌或真菌起源的那些。包括化学修饰的、蛋白水解修饰的或蛋白工程化的突变体。有用的脂肪酶的实例包括来自以下属的那些：腐质霉属(例如，绵毛状腐质菌(H.lanuginosa)、EP 258068和EP 305216；特异腐质霉(H.insolens)，WO 96/13580)，假单胞菌属(例如产碱假单胞菌(P.alcaligenes)或假产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)，EP 218272；洋葱假单胞菌(P.cepacia)，EP 331376；施氏假单胞菌(P.stutzeri)，GB 1372034；荧光假单胞菌和假单胞菌属菌株SD 705，WO 95/06720和WO96/27002；威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)，WO 96/12012)；和芽孢杆菌属(例如枯草芽孢杆菌，达尔图瓦(Dartois)等人，生物化学与生物物理学报(Biochemica etBiophysica Acta)1131：253-360；嗜热脂肪芽孢杆菌，JP 64/744992；短小芽胞杆菌，WO91/16422)。此外，许多克隆的脂肪酶可用于本发明的一些实施例中，包括但不限于沙门柏干酪青霉(Penicillium camembertii)脂肪酶(参见Yamaguchi等人，基因(Gene)103：61-67[1991])；白地霉(Geotricum candidum)脂肪酶(参见Schimada等人，生物化学杂志(J.Biochem.)，106：383-388[1989])；以及各种根霉属脂肪酶例如德氏根霉(R.delemar)脂肪酶(参见哈斯(Hass)等人，基因(Gene)109：117-113[1991])；雪白根霉脂肪酶(Kugimiya等人，生物科学、生物技术与生物化学(Biosci.Biotech.Biochem.)56：716-719[1992])和米根霉(R.oryzae)脂肪酶。可用于本文的另外的脂肪酶包括例如在WO 92/05249、WO 94/01541、WO 95/35381、WO 96/00292、WO 95/30744、WO 94/25578、WO 95/14783、WO 95/22615、WO 97/04079、WO 97/07202、EP 407225和EP 260105中披露的那些。其他类型的脂肪酶多肽酶例如角质酶还可用于本披露的一些实施例中，包括但不限于源自门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)(参见WO 88/09367)的角质酶和源自豌豆根腐镰孢菌(Fusariumsolani pisi)的角质酶(参见，WO 90/09446)。可用于本文的某些可商购脂肪酶的实例包括M1 LIPASE^TM、LUMA>TM、和LIPOMAX^TM(杰能科公司(Genencor))；和ULTRA(诺维信公司)；和LIPASE p^TM“Amano”(日本天野药业有限公司(Amano>

合适的聚酯酶包括例如在WO 01/34899、WO 01/14629和美国专利号6933140中披露的那些。

本文的洗涤剂组合物还可以包含2，6-β-D-果聚糖水解酶，其对于去除/清洁存在于家用和/或工业纺织品/衣物中的某些生物膜是有效的。

适合的淀粉酶包括但不限于细菌或真菌起源的那些。化学或遗传修饰的突变体包括在一些实施例中。可用于本披露的淀粉酶包括但不限于从地衣芽孢杆菌获得的α-淀粉酶(参见例如GB 1296839)。另外合适的淀粉酶包括在W0 9510603、WO 9526397、WO 9623874、WO 9623873、WO 9741213、WO 9919467、WO 0060060、WO 0029560、WO 9923211、WO 9946399、WO 0060058、WO 0060059、WO 9942567、WO 0114532、WO 02092797、WO 0166712、WO0188107、WO 0196537、WO 0210355、WO 9402597、WO 0231124、WO 9943793、WO 9943794、WO2004113551、WO 2005001064、WO 2005003311、WO 0164852、WO 2006063594、WO2006066594、WO 2006066596、WO 2006012899、WO 2008092919、WO 2008000825、WO2005018336、WO 2005066338、WO 2009140504、WO 2005019443、WO 2010091221、WO2010088447、WO 0134784、WO 2006012902、WO 2006031554、WO 2006136161、WO2008101894、WO 2010059413、WO 2011098531、WO 2011080352、WO 2011080353、WO2011080354、WO 2011082425、WO 2011082429、WO 2011076123、WO 2011087836、WO2011076897、WO 94183314、WO 9535382、WO 9909183、WO 9826078、WO 9902702、WO9743424、WO 9929876、WO 9100353、WO 9605295、WO 9630481、WO 9710342、WO 2008088493、WO 2009149419、WO 2009061381、WO 2009100102、WO 2010104675、WO 2010117511、和WO2010115021中披露的那些，其全部通过引用结合在此。

合适的淀粉酶包括例如可商购的淀粉酶，例如污渍酶污渍酶加超级污渍酶拖麦米尔超级拖麦米尔真菌淀粉酶和BAN^TM(诺和诺德公司(Novo>强力酶和PREFERENZ^TM(杜邦工业生物科学(DuPont>

预期用于组合物中的适合的过氧化物酶/氧化酶包括植物、细菌或真菌起源的那些。包括化学修饰的或蛋白工程化的突变体。可用于本文的过氧化物酶的实例包括来自鬼伞属(Coprinus)(例如灰盖鬼伞(C.cinereus)，WO 93/24618、WO 95/10602和WO 98/15257)的那些，以及在WO 2005056782、WO 2007106293、WO 2008063400、WO 2008106214、和WO2008106215中引用的那些。可用于本文的可商购的过氧化物酶包括例如GUARDZYME^TM(诺和诺德公司(Novo>

在一些实施例中，过氧化物酶与过氧化氢或其来源(例如过碳酸盐、过硼酸盐或过硫酸盐)组合用于本披露的组合物中。在一些可替代的实施例中，氧化酶与氧组合使用。两种类型的酶都用于“溶液漂白”，即当织物在洗涤液中一起洗涤时防止纺织染料从一种染色的织物转移到另一种织物上)，优选与增效剂一起使用(参见例如WO 94/12621和WO 95/01426)。适合的过氧化物酶/氧化酶包括但不限于植物、细菌或真菌起源的那些。化学或遗传修饰的突变体包括在一些实施例中。

可以包含在本文的洗涤剂组合物中的酶可以使用常规的稳定剂例如多元醇例如丙二醇或甘油；糖或糖醇；乳酸；硼酸或硼酸衍生物(例如芳香族硼酸酯)来稳定。

在某些实施例中的洗涤剂组合物除了本文披露的右旋糖酐之外还可以包含一种或多种其他类型的聚合物。可用于本文的其他类型聚合物的实例包括羧基甲基纤维素(CMC)、聚(乙烯基吡咯烷酮)(PVP)、聚乙二醇(PEG)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚羧酸酯例如聚丙烯酸酯、马来酸/丙烯酸共聚物、和月桂酰甲基丙烯酸酯/丙烯酸共聚物。

本文的洗涤剂组合物可以包含漂白系统。例如，漂白系统可以包含H₂O₂源例如过硼酸或过碳酸，其可以与形成过酸的漂白活化剂(例如四乙酰基乙二胺(TAED)或壬酰基氧基苯磺酸酯(NOBS))组合。可替代地，漂白系统可以包含过氧酸(例如，酰胺、酰亚胺或砜类过氧酸等)。还可替代地，漂白系统可以是包含过水解酶的酶促漂白系统，例如向在WO>

本文的洗涤剂组合物还可以包含常规的洗涤剂成分，例如织物调理剂、粘土、泡沫促进剂、泡沫抑制剂、抗腐蚀剂、污垢悬浮剂、抗污垢再沉积剂、染料、杀细菌剂、变色抑制剂、荧光增白剂或香料。本文的洗涤剂组合物的pH(在使用浓度的水溶液中测量)通常为中性或碱性(例如，pH为约7.0至约11.0)。

据信，如果需要，本文的右旋糖酐可以作为抗再沉积剂和/或粘土污垢去除剂包含在洗涤剂组合物例如织物护理组合物中(在某些方面，可以任选地将这样的试剂表征为白度维持剂)。其他合适的抗再沉积和/或粘土污垢去除剂的实例包括聚乙氧基兼性离子表面活性剂、丙烯酸或甲基丙烯酸与丙烯酸或甲基丙烯酸-环氧乙烷缩合物的水溶性共聚物(例如，美国专利号3719647)、纤维素衍生物例如羧基甲基纤维素和羟基丙基纤维素(例如美国专利号3597416和3523088)、以及包含非离子烷基聚乙氧基表面活性剂、聚乙氧基烷基季阳离子表面活性剂和脂肪酰胺表面活性剂的混合物(例如美国专利号4228044)。其他适合的抗再沉积和粘土污垢去除剂的非限制性实例披露在美国专利号4597898和4891160，以及国际专利申请公开号WO 95/32272中，其全部通过引用结合在此。

可以适用于本文披露的目的的洗涤剂组合物的特定形式披露在例如US20090209445 A1、US 20100081598 A1、US 7001878 B2、EP 1504994 B1、WO 2001085888A2、WO 2003089562 A1、WO 2009098659 A1、WO 2009098660 A1、WO 2009112992 A1、WO2009124160 A1、WO 2009152031 A1、WO 2010059483 A1、WO 2010088112 A1、WO2010090915 A1、WO 2010135238 A1、WO 2011094687 A1、WO 2011094690 A1、WO2011127102 A1、WO 2011163428 A1、WO 2008000567 A1、WO 2006045391 A1、WO2006007911 A1、WO 2012027404 A1、EP 1740690 B1、WO 2012059336 A1、US 6730646 B1、WO 2008087426 A1、WO 2010116139 A1、和WO 2012104613 A1中，其全部通过引用结合在此。

本文的衣物洗涤剂组合物可以任选地是重垢(通用)衣物洗涤剂组合物。示例性重垢衣物洗涤剂组合物包含清洁表面活性剂(10％-40％wt/wt)，包括阴离子清洁表面活性剂(选自以下组：直链或支链或无规链、取代或未取代的烷基硫酸盐、烷基磺酸盐、烷基烷氧基化硫酸盐、烷基磷酸盐、烷基膦酸盐、烷基羧酸盐和/或其混合物)和任选地非离子表面活性剂(选自以下组：直链或支链或无规链、取代或未取代的烷基烷氧基化醇，例如C8-C18烷基乙氧基化醇和/或C6-C12烷基苯酚烷氧基化物)，其中阴离子清洁表面活性剂(具有从6.0至9的亲水指数(HIc))与非离子清洁表面活性剂的重量比大于1∶1。适合的清洁表面活性剂还包括阳离子清洁表面活性剂(选自以下组：烷基吡啶化合物、烷基季铵化合物、烷基季鏻化合物、烷基三元锍化合物和/或其混合物)；兼性离子和/或两性清洁表面活性剂(选自一组链烷醇胺磺基甜菜碱)；两性表面活性剂；半极性非离子表面活性剂；及其混合物。

本文的洗涤剂例如重垢衣物洗涤剂组合物可以任选地包含表面活性增强聚合物，该表面活性增强聚合物由以下各项组成：两亲烷氧基化油脂清洁聚合物(选自以下组：具有支链亲水和疏水特性的烷氧基化聚合物，例如在0.05wt％-10wt％范围内的烷氧基化聚亚烷基亚胺)和/或无规接枝聚合物(典型地由亲水主链和一个或多个疏水侧链构成，该亲水主链包含选自下组的单体，该组由以下各项组成：不饱和的C1-C6羧酸、醚、醇、醛、酮、酯、糖单元、烷氧基单元、马来酸酐、饱和的多元醇(例如甘油)及其混合物；该一个或多个疏水侧链选自下组，该组由以下各项组成：C4-C25烷基基团、聚丙烯、聚丁烯、饱和的C2-C6单羧酸的乙烯酯，丙烯酸或甲基丙烯酸的C1-C6烷基酯及其混合物)。

本文的洗涤剂例如重垢衣物洗涤剂组合物可以任选地包括另外的聚合物，例如去污聚合物(包括阴离子封端的聚酯(例如SRP1)；包含至少一种选自糖、二羧酸、多元醇及其组合的单体单元的处于无规或嵌段构型的聚合物；基于乙二醇对苯二甲酸酯的聚合物及其处于无规或嵌段构型的共聚物，例如REPEL-O-TEX SF、SF-2AND SRP6、TEXCARE SRA100、SRA300、SRN100、SRN170、SRN240、SRN300AND SRN325、MARLOQUEST SL)；本文的一种或多种抗再沉积剂(0.1wt％至10wt％)，包括羧酸酯聚合物，例如包含至少一种选自丙烯酸、马来酸(或马来酸酐)、富马酸、衣康酸、乌头酸、中康酸、柠康酸、亚甲基丙二酸及其任何混合物的聚合物；乙烯基吡咯烷酮均聚物；和/或聚乙二醇，分子量范围为从500至100,000Da)；以及聚合羧酸酯(例如，马来酸酯/丙烯酸酯无规共聚物或聚丙烯酸酯均聚物)。

本文的洗涤剂例如重垢衣物洗涤剂组合物可以任选地进一步包括饱和或不饱和脂肪酸，优选饱和或不饱和的C12-C24脂肪酸(0wt％至10wt％)；除了本文披露的右旋糖酐化合物外的沉积助剂(其实例包括多糖；纤维素聚合物；聚联丙烯二甲基卤化铵(DADMAC))；和DAD MAC与乙烯基吡咯烷酮、丙烯酰胺、咪唑、咪唑啉卤化物及其混合物的共聚物(处于无规或嵌段构型)；阳离子瓜尔胶、阳离子淀粉、阳离子聚丙烯酰胺及其混合物)。

本文的洗涤剂例如重型衣物洗涤剂组合物可以任选地进一步包括染料转移抑制剂，其实例包括锰酞菁、过氧化物酶、聚乙烯基吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯基噁唑烷酮和聚乙烯基咪唑和/或其混合物；螯合剂，其实例包括乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五亚甲基膦酸(DTPMP)、羟基乙烷二膦酸(HEDP)、乙二胺N，N′-二琥珀酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、丙二胺四乙酸(PDTA)、2-羟基吡啶-N-氧化物(HPNO)、或甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸N，N-二乙酸酸(N，N-二羧基甲基谷氨酸四钠盐(GLDA)、次氮基三乙酸(NTA)、4，5-二羟基间苯二磺酸、柠檬酸及其任何盐、N-羟基乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、三亚乙基四胺六乙酸(TTHA)、N-羟基乙基亚氨基二乙酸(HEIDA)、二羟基乙基甘氨酸(DHEG)、乙二胺四丙酸(EDTP)及其衍生物。

本文的洗涤剂例如重垢衣物洗涤剂组合物可以任选地包括基于硅酮或脂肪酸的泡沫抑制剂；调色染料、钙和镁阳离子、视觉信号传导成分、止泡剂(0.001wt％至约4.0wt％)、和/或结构剂/增稠剂(0.01wt％至5wt％)，该结构剂/增稠剂选自下组，该组由以下各项组成：甘油二酸酯和甘油三酸酯、乙烯乙二醇二硬脂酸酯、微晶纤维素、超细纤维素、生物聚合物、黄原胶、结冷胶及其混合物)。在某些实施例中，除了一种或多种右旋糖酐化合物之外，这样的结构剂/增稠剂将包含在洗涤剂中。结构剂(structurant)也可以称为结构试剂(structural agent)。

例如，本文的洗涤剂可以呈重垢干/固体衣物洗涤剂组合物的形式。这样的洗涤剂可以包括：(i)清洁表面活性剂，例如本文披露的任何阴离子清洁表面活性剂、本文披露的任何非离子清洁表面活性剂、本文披露的任何阳离子清洁表面活性剂、本文披露的任何兼性离子和/或两性清洁表面活性剂、任何两性表面活性剂、任何半极性非离子表面活性剂及其混合物；(ii)助洗剂，例如任何无磷酸盐助洗剂(例如，在0wt％至小于10wt％范围内的沸石助洗剂)、任何磷酸盐助洗剂(例如，在0wt％至小于10wt％范围内的三聚磷酸钠)、柠檬酸、柠檬酸盐和次氮基三乙酸、任何硅酸盐(例如，在0wt％至小于10wt％的范围内的硅酸钠或硅酸钾或偏硅酸钠)；任何碳酸盐(例如，在0wt％至小于80wt％的范围内的碳酸钠和/或碳酸氢钠)及其混合物；(iii)漂白剂，例如任何光漂白剂(例如磺化锌酞菁、磺化铝酞菁、呫吨染料及其混合物)；任何疏水或亲水性漂白活化剂(例如十二烷酰氧基苯磺酸盐、癸酰基氧基苯磺酸盐、癸酰基氧基苯甲酸或其盐、3，5，5-三甲基己酰基氧基苯磺酸盐、四乙酰基乙二胺-TAED、壬酰基氧基苯磺酸盐-NOBS、腈季铵盐及其混合物)；任何过氧化氢源(例如，无机过氧水合物盐，其实例包括过硼酸盐、过碳酸盐、过硫酸盐、过磷酸盐或过硅酸盐的单或四水合钠盐)；任何预先形成的亲水和/或疏水过酸(例如过羧酸和盐、过碳酸和盐、过碘酸和盐，过氧单硫酸和盐、及其混合物)；和/或(iv)任何其他组分例如漂白催化剂(例如，亚胺漂白促进剂，其实例包括亚铵阳离子和聚阴离子、亚胺兼性离子、改性胺、改性氧化胺、N-磺酰基亚胺、N-膦酰基亚胺、N-酰基亚胺、噻二唑二氧化物、全氟亚胺、环状糖酮及其混合物)和含金属的漂白催化剂(例如铜、铁、钛、钌、钨、钼或锰阳离子以及辅助金属阳离子(例如锌或铝)和螯合(例如EDTA、乙二胺四(亚甲基膦酸))。

本文披露的组合物可以是例如处于餐具洗涤剂组合物的形式。餐具洗涤剂的实例包括自动餐具洗涤剂(典型地用于餐具洗涤机中)和洗手餐具洗涤剂。餐具洗涤剂组合物可以是例如处于本文披露的任何干或液体/水性形式。可以包括在餐具洗涤剂组合物的某些实施例中的组分包括例如一种或多种磷酸盐；基于氧或氯的漂白剂；非离子表面活性剂；碱性盐(例如偏硅酸盐、碱金属氢氧化物、碳酸钠)；本文披露的任何活性酶；抗腐蚀剂(如硅酸钠)；消泡剂；减缓陶瓷中釉和图案的脱去的添加剂；香料；抗结块剂(在颗粒洗涤剂中)；淀粉(在基于片剂的洗涤剂中)；凝胶化剂(在基于液体/凝胶洗涤剂中)；和/或砂(粉末洗涤剂)。

餐具洗涤剂例如自动餐具洗涤机洗涤剂或液体餐具洗涤剂可以包括(i)非离子表面活性剂，包括任何乙氧基化非离子表面活性剂、醇烷氧基化表面活性剂、环氧封端的聚(氧基烷基化)醇、或以0wt％至10wt％的量存在的氧化胺表面活性剂；(ii)约5wt％-60wt％范围内的助洗剂，包括任何磷酸盐助洗剂(例如单磷酸盐、二磷酸盐、三聚磷酸盐、其他低聚多磷酸盐、三聚磷酸钠-STPP)、任何无磷酸盐助洗剂(例如基于氨基酸的化合物，包括甲基-甘氨酸-二乙酸[MGDA]及其盐或衍生物、谷氨酸-N，N-二乙酸[GLDA]及其盐或衍生物、亚氨基二琥珀酸(IDS)及其盐或衍生物、羧基甲基菊粉及其盐或其衍生物、次氮基三乙酸[NTA]、二亚乙基三胺五乙酸[DTPA]、B-丙氨酸二乙酸[B-ADA]及其盐)、多元羧酸的均聚物和共聚物及其部分或完全中和的盐、在0.5wt％至50wt％范围内的单体多元羧酸和羟基羧酸及其盐、或在约0.1wt％至约50wt％范围内的磺化/羧化聚合物；(iii)在约0.1wt％至约10wt％范围内的干燥助剂(例如，聚酯，特别是阴离子聚酯(任选地与具有有利于缩聚的3至6个官能团-典型地酸、醇或酯官能团的另外的单体一起)，聚碳酸酯-、聚氨酯-和/或聚脲-聚有机硅氧烷化合物或其前体化合物，特别是反应性环状碳酸酯和尿素类型)；(iv)从约1wt％至约20wt％范围内的硅酸盐(例如硅酸钠或硅酸钾，例如二硅酸钠、偏硅酸钠和结晶页硅酸盐)；(v)无机漂白剂(例如，过氧水合物盐例如过硼酸盐、过碳酸盐、过磷酸盐、过硫酸盐和过硅酸盐)和/或有机漂白剂(例如有机过氧酸例如二酰基-和四酰基过氧化物，特别是二过氧十二烷二酸、二过氧十四烷二酸和二过氧十六烷二酸)；(vi)漂白活化剂(例如，在从约0.1wt％至约10wt％范围内的有机过酸前体)和/或漂白催化剂(例如，锰三氮环壬烷及相关络合物；Co、Cu、Mn和Fe双吡啶胺及相关络合物；以及五胺乙酸钴(III)及相关络合物)；(vii)在从约0.1wt％至5wt％范围内的金属护理剂(例如苯并三唑、金属盐和络合物、和/或硅酸盐)；和/或(viii)本文披露的任何活性酶(范围为从约0.01mg至5.0mg活性酶/克自动餐具洗涤剂组合物)、和酶稳定剂组分(例如，寡糖、多糖和无机二价金属盐)。

下面(1-19)披露了包含至少一种本文的右旋糖酐的洗涤剂配制品的各种实例：

1)配制成体积密度为至少600g/L的颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约7wt％-12wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约1wt％-4wt％的醇乙氧基硫酸盐(例如C12-18醇、1-2环氧乙烷[EO])或烷基硫酸盐(例如C16-18)；约5wt％-9wt％的醇乙氧基化物(例如C14-15醇)；约14wt％-20wt％的碳酸钠；约2-6wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O2SiO₂)；约15-22wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约0-6wt％的硫酸钠；约0-15wt％的柠檬酸钠/柠檬酸；约11-18wt％的过硼酸钠；约2-6wt％的TAED；多达约2wt％的右旋糖酐；约0-3wt％的其他聚合物(例如马来酸/丙烯酸共聚物、PVP、PEG)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如泡沫抑制剂、香料、荧光增白剂、光漂白剂)。

2)配制成体积密度为至少600g/L的颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约6wt％-11wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约1-3wt％的醇乙氧基硫酸盐(例如C12-18醇、1-2EO)或烷基硫酸盐(例如C16-18)；约5-9wt％的醇乙氧基化物(例如C14-15醇)；约15-21wt％的碳酸钠；约1-4wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O2SiO₂)；约24-34wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约4-10wt％的硫酸钠；约0-15wt％的柠檬酸钠/柠檬酸；约11-18wt％的过硼酸钠；约2-6wt％的TAED；多达约2wt％的右旋糖酐；约1-6wt％的其他聚合物(例如马来酸/丙烯酸共聚物、PVP、PEG)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如泡沫抑制剂、香料、荧光增白剂、光漂白剂)。

3)配制成体积密度为至少600g/L的颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约5-9wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约7wt％-14wt％的醇乙氧基硫酸盐(例如，C12-18醇、7EO)；约1-3wt％的、为脂肪酸(例如C16-22脂肪酸)的皂；约10-17wt％的碳酸钠；约3-9wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O2SiO₂)；约23-33wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约0-4wt％的硫酸钠；约8-16wt％的过硼酸钠；约2-8wt％的TAED；约0-1wt％的膦酸酯(例如，EDTMPA)；多达约2wt％的右旋糖酐；约0-3wt％的其他聚合物(例如马来酸/丙烯酸共聚物、PVP、PEG)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如泡沫抑制剂、香料、荧光增白剂)。

4)配制成体积密度为至少600g/L的颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约8-12wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约10-25wt％的醇乙氧基化物(例如，C12-18醇、7EO)；约14-22wt％的碳酸钠；约1-5wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O2SiO₂)；约25-35wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约0-10wt％的硫酸钠；约8-16wt％的过硼酸钠；约2-8wt％的TAED；约0-1wt％的膦酸酯(例如，EDTMPA)；多达约2wt％的右旋糖酐；约1-3wt％的其他聚合物(例如马来酸/丙烯酸共聚物、PVP、PEG)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如泡沫抑制剂、香料)。

5)一种水性液体洗涤剂组合物，该组合物包含：约15-21wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约12-18wt％的醇乙氧基化物(例如，C12-18醇、7EO；或C12-15醇、5EO)；约3-13wt％、为脂肪酸(例如十八烯酸)的皂；约0-13wt％的链烯基琥珀酸(C12-14)；约8-18wt％的氨基乙醇；约2-8wt％的柠檬酸；约0-3wt％的膦酸酯；多达约2wt％的右旋糖酐；约0-3wt％的其他聚合物(例如，PVP、PEG)；约0-2wt％的硼酸盐；约0-3wt％的乙醇；约8-14wt％的丙二醇；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如分散剂、泡沫抑制剂、香料、荧光增白剂)。

6)一种水性结构化液体洗涤剂组合物，该组合物包含：约15-21wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约3-9wt％的醇乙氧基化物(例如，C12-18醇、7EO；或C12-15醇、5EO)；约3-10wt％、为脂肪酸(例如十八烯酸)的皂；约14-22wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约9-18wt％的柠檬酸钾；约0-2wt％的硼酸盐；多达约2wt％的右旋糖酐；约0-3wt％的其他聚合物(例如，PVP、PEG)；约0-3wt％的乙醇；约0-3wt％的锚定聚合物(例如月桂酰甲基丙烯酸/丙烯酸共聚物，摩尔比25∶1，MW>

7)配制成体积密度为至少600g/L的颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约5-10wt％的脂肪醇硫酸盐；约3-9wt％的乙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺；约0-3wt％、为脂肪酸的皂；约5-10wt％的碳酸钠；约1-4wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O>2)；约20-40wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约2-8wt％的硫酸钠；约12-18wt％的过硼酸钠；约2-7wt％的TAED；多达约2wt％的右旋糖酐；约1-5wt％的其他聚合物(例如马来酸/丙烯酸共聚物、PEG)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如荧光增白剂、泡沫抑制剂、香料)。

8)配制成颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约8-14wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约5-11wt％的乙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺；约0-3wt％、为脂肪酸的皂；约4-10wt％的碳酸钠；约1-4wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O>2)；约30-50wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约3-11wt％的硫酸钠；约5-12wt％的柠檬酸钠；多达约2wt％的右旋糖酐；约1-5wt％的其他聚合物(例如，PVP、马来酸/丙烯酸共聚物、PEG)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如泡沫抑制剂、香料)。

9)配制成颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约6-12wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约1-4wt％的非离子表面活性剂；约2-6wt％、为脂肪酸的皂；约14-22wt％的碳酸钠；约18-32wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约5-20wt％的硫酸钠；约3-8wt％的柠檬酸钠；约4-9wt％的过硼酸钠；约1-5wt％的漂白活化剂(例如，NOBS或TAED)；多达约2wt％的右旋糖酐；约1-5wt％的其他聚合物(例如，聚羧酸酯或PEG)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如荧光增白剂、香料)。

10)一种水性液体洗涤剂组合物，该组合物包含：约15-23wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约8-15wt％的醇乙氧基硫酸盐(例如，C12-15醇、2-3EO)；约3-9wt％的醇乙氧基化物(例如，C12-15醇、7EO；或C12-15醇、5EO)；约0-3wt％、为脂肪酸(例如十二烷酸)的皂；约1-5wt％的氨基乙醇；约5-10wt％的柠檬酸钠；约2-6wt％助水溶物(如甲苯磺酸钠)；约0-2wt％的硼酸盐；多达约1wt％的右旋糖酐；约1-3wt％的乙醇；约2-5wt％的丙二醇；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如分散剂、香料、荧光增白剂)。

11)一种水性液体洗涤剂组合物，该组合物包含：约20-32wt％的直链烷基苯磺酸盐(以酸计算)；约6-12wt％的醇乙氧基化物(例如，C12-15醇、7EO；或C12-15醇、5EO)；约2-6wt％的氨基乙醇；约8-14wt％的柠檬酸；约1-3wt％的硼酸盐；多达约2wt％的右旋糖酐；约1-3wt％的乙醇；约2-5wt％的丙二醇；约0-3wt％的其他聚合物(例如马来酸/丙烯酸共聚物、锚定聚合物例如月桂酰甲基丙烯酸/丙烯酸共聚物)；约3-8wt％的甘油；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如，助水溶物、分散剂、香料、荧光增白剂)。

12)配制成体积密度为至少600g/L的颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约25-40wt％的阴离子表面活性剂(例如，直链烷基苯磺酸盐、烷基硫酸盐、α-烯烃磺酸盐、α-磺基脂肪酸甲酯、烷烃磺酸盐、皂)；约1-10wt％的非离子表面活性剂(例如，醇乙氧基化物)；约8-25wt％的碳酸钠；约5-15wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O>2)；约0-5wt％的硫酸钠；约15-28wt％的沸石(NaAlSiO₄)；约0-20wt％的过硼酸钠；约0-5wt％的漂白活化剂(例如，TAED或NOBS)；多达约2wt％的右旋糖酐；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-3wt％的次要成分(例如香料、荧光增白剂)。

13)如上述(1)-(12)所述的洗涤剂组合物，但是其中全部或部分直链烷基苯磺酸盐被C12-C18烷基硫酸盐代替。

14)配制成体积密度为至少600g/L的颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约9-15wt％的C12-C18烷基硫酸盐；约3-6wt％的醇乙氧基化物；约1-5wt％的多羟基烷基脂肪酸酰胺；约10-20wt％的沸石(例如NaAlSiO₄)；约10-20wt％的层状二硅酸盐(例如来自赫斯特公司(Hoechst)的SK56)；约3-12wt％的碳酸钠；0-6wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O>2)；约4-8wt％的柠檬酸钠；约13-22wt％的过碳酸钠；约3-8wt％的TAED；多达约2wt％的右旋糖酐；约0-5wt％的其他聚合物(例如，聚羧酸酯和PVP)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-5wt％的次要成分(例如，荧光增白剂、光漂白剂、香料、泡沫抑制剂)。

15)配制成体积密度为至少600g/L的颗粒的洗涤剂组合物，该组合物包含：约4-8wt％的C12-C18烷基硫酸盐；约11-15wt％的醇乙氧基化物；约1-4wt％的皂；约35-45wt％的沸石MAP或沸石A；约2-8wt％的碳酸钠；0-4wt％的可溶性硅酸盐(例如Na₂O>2)；约13-22wt％的过碳酸钠；约1-8wt％的TAED；多达约3wt％的右旋糖酐；约0-3wt％的其他聚合物(例如，聚羧酸酯和PVP)；任选地约0.0001-0.1wt％的一种或多种酶(以纯酶蛋白质计算)；以及约0-3wt％的次要成分(例如荧光增白剂、膦酸酯、香料)。

16)如上述(1)-(15)所述的洗涤剂配制品，但是含有稳定的或包封的过酸，该过酸作为附加的组分或作为已经指定的一个或多个漂白系统的替代物。

17)如上述(1)、(3)、(7)、(9)和(12)所述的洗涤剂组合物，但是其中过硼酸盐被过碳酸盐代替。

18)如上述(1)、(3)、(7)、(9)、(12)、(14)和(15)所述的洗涤剂组合物，但另外含有锰催化剂。例如，锰催化剂是哈格(Hage)等人(1994，自然(Nature)369：637-639)描述的化合物之一，其通过引用结合在此。

19)配制成非水性洗涤剂液体的洗涤剂组合物，该组合物包含液体非离子表面活性剂(例如，直链烷氧基化伯醇)、助洗剂系统(例如磷酸盐)、本文的右旋糖酐、任选地一种或多种酶、和碱。洗涤剂还可以包含阴离子表面活性剂和/或漂白剂系统。

据信，许多可商购的洗涤剂配制品可以适合于包括本文披露的右旋糖酐化合物。实例包括ULTRAPACKS(汉高公司(Henkel))、QUANTUM(利洁时公司(Reckitt Benckiser))、CLOROX^TM>STAIN RELEASE、ACTIONPACS、和PODS^TM(宝洁公司(Procter&Gamble))。

本文披露的组合物可以是例如处于口腔护理组合物的形式。口腔护理组合物的实例包括提供某种形式的口腔护理(例如，治疗或预防空洞[龋齿]、牙龈炎、斑块、牙垢和/或牙周病)的洁牙剂、牙膏、漱口水、口腔清洗剂、口香糖和可食用条带(edible strip)。口腔护理组合物还可以用于治疗“口腔表面”，其涵盖口腔内的任何软或硬表面，包括以下表面：舌头、硬和软腭、颊粘膜、牙龈和牙齿表面的表面。本文的“牙齿表面”是天然牙齿的表面或人造牙列(包括例如牙冠、盖、填料、桥、义齿或牙科植入物)的硬表面。

本文的口腔护理组合物可以包含例如约0.01-15.0wt％(例如，约0.1wt％-10wt％或约0.1wt％-5.0wt％、约0.1wt％-2.0wt％)的一种或多种本文披露的右旋糖酐醚化合物。包含在口腔护理组合物中的一种或多种右旋糖酐醚化合物有时可以作为可用于赋予该组合物所希望的稠度和/或口感的增稠剂和/或分散剂在其中提供。还可以在本文的口腔护理组合物中提供一种或多种其他增稠剂或分散剂，例如像羧基乙烯聚合物、角叉菜胶(例如，L-角叉菜胶)、天然树胶(例如，梧桐树胶(karaya)、黄原胶、阿拉伯胶、黄芪胶)、胶体硅酸镁铝、或胶体二氧化硅。

本文的口腔护理组合物可以是例如牙膏或其他洁牙剂。此类组合物以及本文的任何其他口腔护理组合物可以另外包含但不限于一种或多种防龋剂、抗微生物剂或抗细菌剂、抗结石或牙垢控制剂、表面活性剂、研磨料、pH调节剂、泡沫调节剂、湿润剂、食用香料、甜味剂、颜料/着色剂、增白剂和/或其他合适的组分。可以添加一种或多种右旋糖酐化合物的口腔护理组合物的实例披露于美国专利申请公开号2006/0134025、2002/0022006和2008/0057007中，其通过引用结合在此。

本文的防龋剂可以是口服可接受的氟离子源。氟离子的合适来源包括例如氟化物、单氟磷酸盐和氟硅酸盐以及胺氟化物，包括奥拉氟(N’-十八烷基三亚甲基二胺-N，N，N’-三(2-乙醇)-二氢氟化物)。例如，防龋剂能以向组合物提供总共约100-20000ppm、约200-5000ppm或约500-2500ppm氟离子的量存在。在氟化钠是氟离子的唯一来源的口腔护理组合物中，例如约0.01-5.0wt％、约0.05-1.0wt％或约0.1wt％-0.5wt％氟化钠的量可以存在于组合物中。

适合用于本文的口腔护理组合物的抗微生物剂或抗细菌剂包括例如酚类化合物(例如4-烯丙基儿茶酚；对羟基苯甲酸酯，例如对羟基苯甲酸苄酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯；2-苄基苯酚；丁基化羟基苯甲醚；丁基化羟基甲苯；辣椒素；香芹酚；木焦油醇；丁子香酚；愈创木酚；卤代双酚例如六氯苯酚(hexachlorophene)和溴氯苯酚(bromochlorophene)；4-己基间苯二酚；8-羟基喹啉及其盐；水杨酸酯例如水杨酸薄荷酯、水杨酸甲酯和水杨酸苯酯；苯酚；焦儿茶酚；N-水杨酰苯胺；百里酚；卤代二苯醚化合物，例如三氯生和三氯生单磷酸盐)；铜(II)化合物(例如铜(II)氯化物、氟化物、硫酸盐和氢氧化物)；锌离子源(例如锌乙酸盐、柠檬酸盐、葡糖酸盐、甘氨酸盐、氧化物和硫酸盐)；邻苯二甲酸及其盐(例如邻苯二甲酸镁单钾)；双辛氢啶；奥替尼淀；血根碱；苯扎氯铵；溴化度灭芬；烷基吡啶氯化物(例如十六烷基吡啶氯化物、十四烷基吡啶氯化物、N-十四烷基-4-乙基吡啶氯化物)；碘；磺酰胺类；二双胍类(例如，阿立西定、氯己定、氯己定二葡糖酸盐)；氮杂环己烷衍生物(例如，地莫匹醇、辛哌醇)；木兰提取物、葡萄籽提取物、迷迭香提取物、薄荷醇、香叶醇、柠檬醛、桉油精；抗生素(例如，沃格孟汀、阿莫西林、四环素、多西环素、米诺环素、甲硝哒唑、新霉素、卡那霉素、克林霉素)和/或美国专利5776435中披露的任何抗细菌剂，其为通过引用结合在此。一种或多种抗微生物剂可以任选地以约0.01-10wt％(例如，0.1wt％-3wt％)存在，例如在所披露的口腔护理组合物中。

适合用于本文的口腔护理组合物的抗结石或牙垢控制剂包括例如磷酸盐和多磷酸盐(例如焦磷酸盐)、聚氨基丙磺酸(AMPS)、柠檬酸锌三水合物、多肽(例如聚天冬氨酸和聚谷氨酸)、聚烯烃磺酸盐、聚烯烃磷酸盐、二膦酸盐(例如氮杂环烷-2，2-二膦酸盐，例如氮杂环庚烷-2，2-二膦酸)、N-甲基氮杂环戊烷-2，3-二膦酸、乙烷-1-羟基-1，1-二膦酸(EHDP)、乙烷-1-氨基-1，1-二膦酸盐和/或膦酰基链烷羧酸及其盐(例如，它们的碱金属盐和铵盐)。有用的无机磷酸盐和多磷酸盐包括例如一元、二元和三元磷酸钠；三聚磷酸钠；四聚磷酸盐；焦磷酸单钠、二钠、三钠和四钠；焦磷酸二氢二钠；三偏磷酸钠；六偏磷酸钠；或钠被钾或铵代替的这些中的任何一种。在某些实施例中，其他有用的抗结石剂包括阴离子多羧酸盐聚合物(例如丙烯酸、甲基丙烯酸和马来酸酐的聚合物或共聚物，例如聚乙烯基甲基醚/马来酸酐共聚物)。其他有用的抗结石剂包括螯合剂，例如羟基羧酸(例如，柠檬酸、富马酸、苹果酸、戊二酸、和草酸及其盐)和氨基多羧酸(例如，EDTA)。一种或多种抗结石或牙垢控制剂可以任选地以约0.01-50wt％(例如，约0.05-25wt％或约0.1wt％-15wt％)存在，例如在所披露的口腔护理组合物中。

适合用于本文的口腔护理组合物的表面活性剂可以是例如阴离子、非离子或两性的。适合的阴离子表面活性剂包括但不限于C_8-20烷基硫酸盐的水溶性盐、C_8-20脂肪酸磺化单酸甘油酯、肌氨酸盐和牛磺酸盐。阴离子表面活性剂的实例包括月桂基硫酸钠、椰子单甘油酯磺酸钠、月桂基肌氨酸钠、月桂基羟乙基磺酸钠、聚乙二醇单十二醚羧酸钠和十二烷基苯磺酸钠。适合的非离子表面活性剂包括但不限于泊洛沙姆、聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯、脂肪醇乙氧基化物、烷基酚乙氧基化物、叔胺氧化物、叔膦氧化物和二烷基亚砜。适合的两性表面活性剂包括但不限于具有阴离子基团例如羧酸根、硫酸根、磺酸根、磷酸根或膦酸根的C_8-20脂肪族仲胺和叔胺的衍生物。适合的两性表面活性剂的实例是椰油酰胺丙基甜菜碱。一种或多种表面活性剂任选地以约0.01-10wt％(例如，约0.05-5.0wt％或约0.1wt％-2.0wt％)的总量存在于例如所披露的口腔护理组合物中。

适合用于本文的口腔护理组合物的研磨料可以包括例如二氧化硅(例如硅胶、水合二氧化硅、沉淀二氧化硅)、氧化铝、不溶性磷酸盐、碳酸钙和树脂研磨料(例如，脲-甲醛缩合物产品)。可用作研磨料的不溶性磷酸酯的实例是正磷酸盐、聚偏磷酸盐和焦磷酸盐，并且包括正磷酸二钙二水合物、焦磷酸钙、焦磷酸β-钙、磷酸三钙、聚偏磷酸钙和不溶性聚偏磷酸钠。一种或多种研磨料任选地以约5-70wt％(例如，约10-56wt％或约15-30wt％)的总量存在于例如所披露的口腔护理组合物中。在某些实施例中，研磨料的平均粒径为约0.1-30微米(例如约1-20微米或约5-15微米)。

在某些实施例中，口腔护理组合物可以包含至少一种pH调节剂。可以选择这样的试剂将组合物的pH酸化、制成更碱性或缓冲至约2-10的pH范围(例如，pH范围为约2-8、3-9、4-8、5-7、6-10或7-9)。可用于本文的pH调节剂的实例包括但不限于羧酸、磷酸和磺酸；酸性盐(例如柠檬酸一钠、柠檬酸二钠、苹果酸一钠)；碱金属氢氧化物(例如氢氧化钠、碳酸盐例如碳酸钠、碳酸氢盐、倍半碳酸钠)；硼酸盐；硅酸盐；磷酸盐(例如，磷酸一钠、磷酸三钠、焦磷酸盐)；以及咪唑。

适合用于本文的口腔护理组合物的泡沫调节剂可以是例如聚乙二醇(PEG)。高分子量PEG是适合的，包括例如平均分子量为约200000-7000000(例如约500000-5000000或约1000000-2500000)的那些。一种或多种PEG任选地以约0.1wt％-10wt％(例如，约0.2wt％-5.0wt％或约0.25wt％-2.0wt％)的总量存在于例如所披露的口腔护理组合物中。

在某些实施例中，口腔护理组合物可以包含至少一种湿润剂。在某些实施例中，湿润剂可以是多元醇，例如甘油、山梨糖醇、木糖醇或低分子量PEG。最适合的湿润剂也可以用作本文的甜味剂。一种或多种湿润剂任选地以约1.0-70wt％(例如，约1.0-50wt％、约2-25wt％、或约5-15wt％)的总量存在于例如所披露的口腔护理组合物中。

天然的或人造的甜味剂可以任选地包含在本文的口腔护理组合物中。适合的甜味剂的实例包括右旋糖、蔗糖、麦芽糖、糊精、转化糖、甘露糖、木糖、核糖、果糖、左旋糖、半乳糖、玉米糖浆(例如高果糖玉米糖浆或玉米糖浆固体)、部分水解的淀粉、氢化淀粉水解产物、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、异麦芽糖醇、阿斯巴甜、纽甜、糖精及其盐、基于二肽的强甜味剂和环磺酸盐。一种或多种甜味剂任选地以约0.005-5.0wt％的总量存在于例如所披露的口腔护理组合物中。

天然的或人造的食用香料可以任选地包含在本文的口腔护理组合物中。适合的食用香料的实例包括香草醛；鼠尾草；马郁兰；欧芹油；留兰香油；肉桂油；冬青油(水杨酸甲酯)；胡椒薄荷油；丁香油；月桂油；茴香油；桉树油；柑橘油；水果油；香精，例如源自于柠檬、橙子、酸橙、葡萄柚、杏、香蕉、葡萄、苹果、草莓、樱桃或菠萝的那些；源自于豆类和坚果的香料，如咖啡、可可豆、可乐、花生或杏仁；以及吸附和包封的食用香料。还涵盖在本文的食用香料中的是在口中提供香味和/或其他感官效果的成分，包括冷却或加温效果。此类成分包括但不限于薄荷醇、乙酸薄荷酯、乳酸薄荷酯、樟脑、桉树油、桉油精、茴香脑、丁子香酚、肉桂、噁烷酮(oxanone)、紫罗兰酮羟甲基茴香脑、麝香草酚、芳樟醇、苯甲醛、肉桂醛、N-乙基-对薄荷烷-甲酰胺、N，2，3-三甲基-2-异丙基丁酰胺、3-(1-薄荷氧基)-丙烷-1，2-二醇、肉桂醛甘油缩醛(CGA)和薄荷酮甘油缩醛(MGA)。一种或多种食用香料任选地以约0.01-5.0wt％(例如，约0.1wt％-2.5wt％)的总量存在于例如所披露的口腔护理组合物中。

在某些实施例中，口腔护理组合物可以包含至少一种碳酸氢盐。可以使用任何口服可接受的碳酸氢盐，包括例如碱金属碳酸氢盐例如碳酸氢钠或碳酸氢钾、和碳酸氢铵。例如，一种或多种碳酸氢盐任选地以约0.1wt％-50wt％(例如，约1-20wt％)的总量存在于所披露的口腔护理组合物中。

在某些实施例中，口腔护理组合物可以包含至少一种增白剂和/或着色剂。适合的增白剂是过氧化物化合物，例如在美国专利号8540971中披露的任何一种，其通过引用结合在此。本文中，适合的着色剂包括例如赋予特定光泽或反射率的颜料、染料、色淀和试剂，例如珠光剂。用于本文的着色剂的具体实例包括滑石；云母；碳酸镁；碳酸钙；硅酸镁；硅酸铝镁；二氧化硅；二氧化钛；氧化锌；红色、黄色、棕色、黑色铁氧化物；亚铁氰化铁铵；锰紫；深蓝色；钛云母；以及氯氧化铋。例如，一种或多种着色剂任选地以约0.001-20wt％(例如，约0.01-10wt％或约0.1wt％-5.0wt％)的总量存在于所披露的口腔护理组合物中。

可任选地包括在本文的口腔组合物中的另外的组分包括例如一种或多种酶(上文)、维生素和抗粘结剂。可用于本文的维生素的实例包括维生素C、维生素E、维生素B5和叶酸。适合的抗粘结剂的实例包括对羟基苯甲酸甲酯(solbrol)、无花果蛋白酶和群体感应抑制剂。

本披露还涉及增加水性组合物的粘度的方法。该方法包括使本文披露的至少一种右旋糖酐化合物与水性组合物接触。

与接触步骤之前的水性组合物的粘度相比，该方法中的接触步骤导致水性组合物的粘度增加。

本文的水性组合物可以是例如水(例如去离子水)、水性溶液或水状胶体。在约20℃-25℃下测量的在接触步骤之前的水性组合物的粘度可以为例如约0-10000cPs(或在0-10000cPs之间的任何整数)。由于在某些实施例中水性组合物可以是水状胶体及类似物，因此应当显而易见的是，该方法可以用于增加已经粘稠的水性组合物的粘度。

在某些实施例中，将本文的右旋糖酐与水性组合物接触增加了水性组合物的粘度。粘度的这种增加可以是与接触步骤之前的水性组合物的粘度相比，例如，增加至少约1％、10％、100％、1000％、100000％、或1000000％(或在1％和1000000％之间的任何整数)。应当显而易见的是，当在接触步骤之前水性组合物具有很少至没有粘度时，可以使用所披露的方法获得非常大百分比的粘度增加。可以例如通过比较经该方法(即，在接触步骤之后)获得的水性组合物的粘度与在方法之前(即，在接触步骤之前)存在的水性组合物的粘度来确定粘度的增加。

在某些实施例中，将本文的右旋糖酐与水性组合物接触增加了水性组合物的剪切稀化行为或剪切增稠行为。因此，在这些实施例中，右旋糖酐在流变学上改变了水性组合物。剪切稀化行为或剪切增稠行为的增加可以是，与在接触步骤之前的水性组合物的剪切稀化行为或剪切增稠行为相比，例如，至少约1％、10％、100％、1000％、100000％或1000000％(或在1％和1000000％之间的任何整数)的增加。应当显而易见的是，当在接触步骤之前水性组合物具有很少至没有流变行为时，可以使用所披露的方法获得非常大百分比的流变改性。

增加水性组合物粘度的方法中的接触步骤可以通过本领域已知的任何方法在水性组合物中混合或溶解本文披露的任何右旋糖酐来进行。例如，可以手动或用机器(例如，工业混合器或搅拌器、轨道振摇器、搅拌金属板、均化器、超音波样品震碎机、珠磨机)进行混合或溶解。在某些实施例中，混合或溶解可以包括均化步骤。如果需要，均化(以及任何其他类型的混合)可以进行约5至60秒、5至30秒、10至60秒、10至30秒、5至15秒、或10至15秒(或在5秒和60秒之间的任何整数)或更长的时间段，以将右旋糖酐与水性组合物混合。例如，可以在约5000至30000rpm、10000至30000rpm、15000至30000rpm、15000至25000rpm、或20000rpm(或在5000rpm和30000rpm之间的任何整数)下使用均化器。

将本文的右旋糖酐与水性组合物混合或溶解于其中后，可以将所得水性组合物过滤、或不将其过滤。例如，可以将用均化步骤制备的水性组合物过滤或不过滤。

上述方法的某些实施例可以用于制备本文所披露的水性组合物，例如食物产品(例如，糕点糖果例如糖果填料)、药物产品(例如赋形剂)、家用产品(例如，衣物洗涤剂、织物柔软剂、餐具洗涤剂)、个人护理产品(例如，含水洁牙剂例如牙膏)、或工业产品。

本披露还涉及一种处理材料的方法。该方法包括使材料与包含本文所披露的至少一种右旋糖酐化合物的水性组合物接触。

在某些实施例中，在本文的接触方法中与水性组合物接触的材料可以包含织物。本文的织物可以包含天然纤维、合成纤维、半合成纤维或其任何组合。本文的半合成纤维使用已经化学衍生化的天然存在的材料生产，该材料的实例是人造丝。本文的织物类型的非限制性实例包括由以下制成的织物：(i)纤维质纤维例如棉花(例如、绒面呢、帆布、有条纹或格子花纹的布、雪尼尔、印花棉布、灯芯绒、大花帘布、锦缎、牛仔布、法兰绒、条纹棉布、提花织物、编织物、马特拉斯织物、牛津布、高级密织棉布、府绸、褶裥(plissé)、棉缎、泡泡纱、透明薄织物、毛巾布、斜纹织物、天鹅绒)、人造丝(例如粘胶、莫代尔、莱赛尔纤维)、亚麻布和(ii)蛋白质纤维例如丝、羊毛和相关的哺乳动物纤维；(iii)合成纤维例如聚酯、丙烯酸、尼龙等；(iv)黄麻、亚麻、苎麻、椰壳纤维、木棉、剑麻、赫纳昆纤维、马尼拉麻、大麻和柽麻的长植物纤维；以及(v)(i)-(iv)的织物的任意组合。包含纤维类型(例如天然和合成)的组合的织物包括例如具有棉纤维和聚酯的那些。包含一种或多种本文的织物的材料/物品包括例如服装、窗帘、帷帘、室内装饰品、地毯、床上用品、浴室用单巾类织物、桌布、睡袋、帐篷、汽车内饰等。包括天然和/或合成纤维的其他材料包括例如无纺布、垫料、纸和泡沫。

与织物接触的水性组合物可以是例如织物护理组合物(例如衣物洗涤剂、织物柔软剂)。因此，如果在处理方法中使用织物护理组合物，则在某些实施例中该处理方法可以被认为是织物护理方法或洗衣方法。预期本文的织物护理组合物将影响以下织物护理益处(即，表面实质性效果)中的一种或多种：去皱、减皱、抗皱、织物磨损降低、织物耐磨性、织物起球减少、延长织物寿命、织物颜色维护、织物褪色减少、染料转移减少、织物颜色恢复、织物污渍减少、织物污垢释放、织物形状保持、织物光滑度增强、织物上污渍抗再沉积、衣物抗变灰、改进的织物手感(fabric hand)/质感(handle)和/或织物收缩减少。

本文中用于进行织物护理方法或洗衣方法的条件(例如，时间、温度、洗涤/漂洗体积)的实例披露于WO 1997/003161和美国专利号4794661、4580421和5945394中，其通过引用结合在此。在其他实例中，包含织物的材料可以与本文的水性组合物接触：(i)持续至少约5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、或120分钟；(ii)在至少约10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃、或95℃的温度下(例如，对于衣物洗涤或漂洗：约15℃-30℃的“冷”温度、约30℃-50℃的“温”温度、约50℃-95℃的“热”温度)；(iii)在约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、或12(例如约2-12或约3-11的pH范围)的pH下；(iv)在至少约0.5wt％、1.0wt％、1.5wt％、2.0wt％、2.5wt％、3.0wt％、3.5wt％、或4.0wt％的盐(例如NaCl)浓度下；或(i)-(iv)的任意组合。

例如，织物护理方法或洗衣方法中的接触步骤可以包括任何洗涤、浸泡和/或漂洗步骤。在又进一步的实施例中与材料或织物接触可以通过本领域已知的任何方法进行，例如溶解、混合、振摇、喷雾、处理、浸渍、冲洗、浇注或浇入、结合、涂色、涂覆、施加、粘贴和/或将本文的有效量的右旋糖酐化合物与织物或材料进行连通。在又进一步的实施例中，接触可以用于处理织物以提供表面实质性效果。如本文所使用的，术语“织物手感”(fabrichand)或“质感”(handle)是指个人对于织物的可能是身体、生理、心理、社会或其任何组合的触觉感觉反应。在一个实施例中，织物手感可以使用用于测量相对手感值的系统来测量(获自加利福尼亚州戴维斯的Nu Cybertek有限公司(NuCybertek，Inc.Davis，CA))(美国纺织化学家和染色家协会(American Association ofTextile Chemists and Colorists)(AATCC测试方法“202-2012，纺织品的相对手感值：仪器方法(202-2012，Relative Hand Value of Textiles：Instrumental Method)”))。

在处理包含织物的材料的某些实施例中，水性组合物的一种或多种右旋糖酐化合物组分吸附到织物上。据信这种特征使得本文的右旋糖酐化合物可用作所披露的织物护理组合物中的抗再沉积剂和/或抗变灰剂(除了它们的粘度改性作用)。本文的抗再沉积剂或抗变灰剂有助于防止污渍被去除后该污渍再沉积在洗涤水中的衣物上。进一步预期将一种或多种本文的右旋糖酐化合物吸附到织物上增强了织物的机械性能。

将右旋糖酐化合物吸附到本文的织物上可以使用例如比色技术(例如，杜布瓦(Dubois)等人，1956，分析化学(Anal.Chem.)28：350-356；等人，2006，兰精报道(Lenzinger Berichte)85：68-76；两者都通过引用结合在此)，或本领域已知的任何其他方法来测量。

可以在上述处理方法中接触的其他材料包括可以用餐具洗涤剂(例如自动餐具洗涤剂或手洗餐具洗涤剂)处理的表面。此类材料的实例包括由陶瓷材料、瓷器、金属、玻璃、塑料(例如聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯等)和木材制成的餐具、玻璃制品、盆、盘状器皿、烘烤盘、炊具和扁平的餐具(这里统称为“食具”(tableware))。因此，在某些实施例中，处理方法可以被认为是例如餐具洗涤方法或食具洗涤方法。在美国专利号8575083中披露了用于进行餐具洗涤或食具洗涤方法的条件(例如，时间、温度、洗涤体积)的实例，其通过引用结合在此。在其他实例中，食具物品可以在适当的一组条件下与本文的水性组合物接触，例如以上披露的关于与含织物材料接触的任何一种。

可以在上述处理方法中接触的其他材料包括口腔表面，例如在口腔内的任何软或硬表面，包括以下各项的表面：舌头、硬和软腭、颊粘膜、牙龈和牙齿表面(例如，天然牙齿或人造牙列(例如牙冠、盖、填料、桥、义齿或牙科植入物)的硬表面)。因此，在某些实施例中，处理方法可以被认为是例如口腔护理方法或牙齿护理方法。用于使口腔表面与本文的水性组合物接触的条件(例如时间、温度)应当适合于进行此类接触的预期目的。在处理方法中接触的其他表面还包括皮肤、毛发或指甲等皮肤系统的表面。

因此，本披露的某些实施例涉及包含本文的右旋糖酐化合物的材料(例如织物)。这样的材料可以按照例如本文披露的材料处理方法来制备。在某些实施例中，如果化合物被吸附到材料的表面或以其他方式与材料的表面接触，则材料可以包含右旋糖酐化合物。

本文处理材料的方法的某些实施例进一步包括干燥步骤，其中材料在与水性组合物接触后被干燥。干燥步骤可以在接触步骤之后直接进行，或者在可以紧跟在接触步骤之后的一个或多个附加步骤之后进行(例如，在本文的水性组合物中洗涤后，例如在水中漂洗之后干燥织物)。可以通过本领域已知的几种方法中的任何一种，例如空气干燥(例如约20℃-25℃)，或例如在至少约30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃、120℃、140℃、160℃、170℃、175℃、180℃、或200℃的温度下进行干燥。本文中已经干燥的材料典型地含有包含在其中的少于3wt％、2wt％、1wt％、0.5wt％、或0.1wt％的水。织物是用于进行任选的干燥步骤的优选材料。

在本文的处理方法中使用的水性组合物可以是本文(例如在上述实施例中或以下实例中)披露的任何水性组合物。因此，水性组合物的一种或多种右旋糖酐组分可以是本文披露的任何一种或多种。水性组合物的实例包括洗涤剂(例如衣物洗涤剂或餐具洗涤剂)和含水的洁牙剂例如牙膏。

本披露还涉及包含水、蔗糖和葡萄糖基转移酶的酶促反应，该葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13、或SEQ ID NO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列或由其组成。葡萄糖基转移酶合成本文披露的右旋糖酐。值得注目地，在该gtf反应中合成的右旋糖酐在水性组合物中表现出高粘度，即使在相对较低浓度的右旋糖酐下也是如此。据信，与先前披露的右旋糖酐聚合物的粘度特征相比，这种高粘度特征是独特的。

在本文的酶促反应中合成的右旋糖酐可以如在上述关于由葡萄糖基转移酶产生的右旋糖酐的披露内容中进行表征(例如分子量、键和分支谱图)。在本文的酶促反应中的葡萄糖基转移酶可以如在上述关于由葡萄糖基转移酶产生的右旋糖酐的披露内容中进行表征。

一种或多种不同的葡萄糖基转移酶可用于本文的酶促反应中。与可能存在多种酶的情况(例如，细菌或酵母发酵)相反，在某些情况下使用单一的葡萄糖基转移酶(例如，gtf0768)。酶促反应可以如在上述关于由葡萄糖基转移酶产生的右旋糖酐的披露内容中进行表征(例如初始蔗糖浓度和蔗糖类型、pH、温度、时间)。而且，本文披露的生产右旋糖酐的方法的任何特征都可以应用于葡萄糖基转移酶反应。

本披露还涉及一种生产右旋糖酐的方法，该方法包括使至少水、蔗糖和葡萄糖基转移酶接触的步骤，所述葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13、或SEQ ID NO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列。该接触步骤导致本文披露的右旋糖酐的生产。在接触步骤中产生的右旋糖酐可任选地被分离。

在本文的合成方法中合成的右旋糖酐可以如在上述关于由葡萄糖基转移酶产生的右旋糖酐的披露内容中进行表征(例如分子量、键和分支谱图)。在本文的合成方法中的葡萄糖基转移酶可以如在上述关于由葡萄糖基转移酶产生的右旋糖酐的披露内容中进行表征。如上文披露的酶促反应的任何特征可以应用于即时合成方法中。

本文生产右旋糖酐的方法中的接触步骤包括提供包含水、蔗糖和本文披露的任何葡萄糖基转移酶的酶促反应。所披露的方法的接触步骤能以任何数量的方式进行。例如，可以首先将所希望的量的蔗糖溶解在水中(任选地，也可以在这个制备阶段添加其他组分，例如缓冲液组分)，接着添加一种或多种葡萄糖基转移酶。溶液可以保持静止，或经由例如搅拌或轨道振摇而搅动。

反应可以是，并且典型地是无细胞的。因此，在一些方面，本文的右旋糖酐不是从细胞，例如细菌(例如肠膜明串珠菌)中分离的。

在某些实施例中，可以例如通过确定反应粘度是否不再增加和/或通过测量残留在反应中的蔗糖的量(残余蔗糖)来估计葡萄糖基转移酶反应的完成，其中蔗糖消耗百分比超过约90％可以表示反应完成。典型地，所披露的方法的反应可花费约2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、18、24、30、36、48、60、72、84、或96小时来完成。反应时间可以取决于例如某些参数，如反应中使用的蔗糖和葡萄糖基转移酶的量。

在某些实施例中，在葡萄糖基转移酶反应中生产的右旋糖酐的产率可以为基于在反应中使用的蔗糖的重量，约或至少约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％或45％。

在所披露的方法中生产的右旋糖酐可以任选地被分离。例如，右旋糖酐可以用醇(例如，90％-100％甲醇、乙醇或异丙醇)沉淀，然后从上清液中分离出，其可以包含水、果糖和任选地一种或多种残留的蔗糖和副产物(例如，葡萄糖；明串珠菌二糖和其他可溶性寡糖)。这样的分离可以通过例如离心或过滤进行。沉淀的右旋糖酐可以任选地用醇(例如，70％-100％，或至少70％、80％、90％、95％或100％的甲醇、乙醇或异丙醇)洗涤一次或多次(例如2-4次；2次，3次，4次或更多次)。在其他实例中，葡聚糖分离可以包括使用超滤和/或透析技术(即分子量截止技术)，例如美国专利申请公开号2014/0142294和美国专利号6977249(其通过引用并入本文)中披露的技术。如果需要，可以使用如上所述分离的右旋糖酐来进行本文中某些右旋糖酐特征(例如，键谱图、分子量)的测量。

认为本文的右旋糖酐合成方法可用于生产具有增加或降低的粘度的右旋糖酐，这取决于在方法中使用的蔗糖的量。通常，在葡萄糖基转移酶反应中使用的蔗糖浓度越低，右旋糖酐产物的粘度越高，反之亦然。本文披露的任何蔗糖浓度可以用于葡萄糖基转移酶反应，其中反应的右旋糖酐产物的粘度大于在包含更高蔗糖浓度的反应中产生的右旋糖酐产物的粘度，反之亦然。在某些方面，本文披露的任何粘度可以用于表征该方法的实施例，并且粘度的增加可以是至少约2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、20倍、50倍、100倍、150倍、200倍、或250倍或更高倍数。在该方法的某些实施例中，葡萄糖基转移酶可以是gtf0768(包含SEQ ID NO：1或相关序列)。

本文披露的组合物和方法的非限制性实例包括：

1.一种包含右旋糖酐的组合物，其中该右旋糖酐包含：

(i)约87wt％-93wt％在位置1和6处连接的葡萄糖；

(ii)约0.1wt％-1.2wt％在位置1和3处连接的葡萄糖；

(iii)约0.1wt％-0.7wt％在位置1和4处连接的葡萄糖；

(iv)约7.7wt％-8.6wt％在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及

(v)约0.4wt％-1.7wt％在以下位置处连接的葡萄糖：

(a)位置1、2和6，或

(b)位置1、4和6；

其中该右旋糖酐的重均分子量(Mw)为约5000万至2亿道尔顿，该右旋糖酐的z-平均回转半径为约200nm-280nm，并且该右旋糖酐任选地不是肠膜明串珠菌葡萄糖基转移酶的产物。

2.如实施例1所述的组合物，其中该右旋糖酐包含：

(i)约89.5wt％-90.5wt％在位置1和6处连接的葡萄糖；

(ii)约0.4wt％-0.9wt％在位置1和3处连接的葡萄糖；

(iii)约0.3wt％-0.5wt％在位置1和4处连接的葡萄糖；

(iv)约8.0wt％-8.3wt％在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及

(v)约0.7wt％-1.4wt％在以下位置处连接的葡萄糖：

(a)位置1、2和6，或

(b)位置1、4和6。

3.如实施例1或2所述的组合物，其中该右旋糖酐包含在分支结构内连接在一起的链，其中这些链长度相似并且包含大量α-1，6-糖苷键。

4.如实施例1、2或3所述的组合物，其中这些链的平均长度为约10-50个单体单元。

5.如实施例1、2、3或4所述的组合物，其中该右旋糖酐是葡萄糖基转移酶的产物，该葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ IDNO：13、或SEQ ID NO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列。

6.如实施例1、2、3、4或5所述的组合物，其中该组合物是具有至少约25cPs粘度的水性组合物。

7.如实施例1、2、3、4、5或6所述的组合物，其中该右旋糖酐的Mw为约8000万至1.2亿道尔顿。

8.如实施例1、2、3、4、5、6或7所述的组合物，其中该右旋糖酐的z-平均回转半径为约230nm-250nm。

9.如实施例1、2、3、4、5、6、7或8所述的组合物，其中该组合物处于食物产品、个人护理产品、药物产品、家用产品或工业产品的形式。

10.如实施例9所述的组合物，其中该组合物处于糕点糖果的形式。

11.一种增加水性组合物的粘度的方法，该方法包括：使根据实施例1-8中任一项所述的右旋糖酐与水性组合物接触，其中该水性组合物的粘度与在该接触步骤之前的该水性组合物的粘度相比，被右旋糖酐增加。

12.一种处理材料的方法，该方法包括：使材料与包含根据实施例1-8中任一项所述的右旋糖酐的水性组合物接触。

13.一种包含水、蔗糖、和葡萄糖基转移酶的酶促反应，该葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13、或SEQ ID NO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列，其中该葡萄糖基转移酶合成根据实施例1-8中任一项所述的右旋糖酐。

14.一种用于生产右旋糖酐的方法，该方法包括：

a)使至少水、蔗糖、和葡萄糖基转移酶接触，该葡萄糖基转移酶包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：13、或SEQ ID NO：17具有至少90％同一性的氨基酸序列，由此生产了根据实施例1-8中任一项所述的右旋糖酐；以及

b)任选地，分离在步骤(a)中生产的右旋糖酐。

15.如实施例14所述的方法，其中通过在步骤(a)中减少蔗糖的量来增加在该方法中生产的右旋糖酐的粘度。

实例

本披露在实例1-6和8-11中进一步定义。应该理解，这些实例尽管说明了本披露的某些优选方面，但仅是以例证的方式给出的。从上述论述和这些实例中，本领域的技术人员可确定本披露的必要特征，并且在不脱离其精神和范围的前提下，可对本披露进行各种变化和修改以适应多种用途和条件。

一般方法

在枯草芽孢杆菌中克隆和表达葡萄糖基转移酶

在实例3-6中使用的每种葡萄糖基转移酶如下进行制备。

编码gtf酶的质粒(pZZHB582、pZZHB583、pZZHB584、或pZZHB585，其允许gtf从枯草芽孢杆菌表达和分泌；参见图2A-D)使用Illustra100扩增试剂盒(GE医疗集团生命科学部(GE Healthcare Life Sciences)，新泽西州)进行扩增。用扩增产物转化感受态枯草芽孢杆菌细胞(ΔspoIIE、ΔaprE、ΔnprE、degUHy32、ΔscoC、ΔnprB、Δvpr、Δepr、ΔwprA、Δmpr、ΔispA、Δbpr)。将细胞涂板在补充有5ppm氯霉素的卢里亚琼脂(LuriaAgar)平板上。将来自转化板的菌落接种到5mL LB培养基中，并在37℃下孵育过夜。然后将来自每个培养物的等分试样(25-50μL)转移到含有30mL补充有5ppm氯霉素的格兰特氏(Grant′s)II培养基的250mL摇瓶中，并在30℃下振摇(280rpm)孵育24小时。通过以14000rpm离心1小时收获细胞。通过SDS-PAGE针对分泌的gtf产物对上清液进行分析，并进一步对含有20mM Tris(pH 7.5)的溶液进行三次透析，持续共20小时。将透析的样品等分为25mL/50mL锥形离心管，并将这些管成一个角度在-80℃下放置约1小时。一旦样品被冷冻，移开管盖并且用封口膜(PARAFILM)代替，该封口膜用高规格针(high-gauge needle)刺穿5-10次。根据制造商的说明，在冷冻干燥系统(拉布康科公司(LabconcoCorp.)，密苏里州堪萨斯市(Kansas City，MO))中冻干封口膜覆盖的冷冻样品。

葡萄糖基转移酶的储备溶液

通过将10mL的分子级H₂O添加到各自含有冻干酶粉末的50mL锥形离心管中针对每种gtf制得酶储备溶液。

实例1

葡萄糖基转移酶(0768)在大肠杆菌中的表达和活性粗酶裂解物的生产

该实例描述了成熟的葡萄糖基转移酶(gtf)酶在大肠杆菌中的表达。产生大肠杆菌表达菌株的粗细胞裂解物，并且在蔗糖存在下显示凝胶产物形成活性。

通过全基因组鸟枪法测序，从假肠膜明串珠菌菌株KCTC3652中鉴定出具有1484个氨基酸的推定的含YG重复的水解酶(在基因库中归类于GI编号339480768，但现在具有GI编号497964659)。该推定的葡萄糖基转移酶(本文中称为gtf 0768)属于含有葡聚糖结合结构域的糖基水解酶的GH70家族。通过SIGNALP 4.0程序将gtf 0768的N-末端37个氨基酸区段推导为酶的信号肽(彼得森(Petersen)等人，自然方法(Nature Methods)8：785-786)。gtf0768的成熟形式由SEQ ID NO：1表示。

为了构建用于gtf 0768的细菌表达的质粒，由美国金斯瑞有限公司(GenScriptUSA Inc.)(新泽西州皮斯卡塔韦(Piscataway，NJ))合成编码gtf的没有信号肽的成熟形式的DNA序列。将合成的序列亚克隆到pET23D+载体的NheI和HindIII位点(默克集团(Merck KGaA)，达姆施塔特，德国)。与野生型成熟(预测)形式的gtf 0768(SEQ IDNO：1)相比，由该构建体编码的0768 gtf(SEQ ID NO：2)包括N-末端处的起始甲硫氨酸和3个另外的氨基酸(Ala-Ser-Ala)和C-末端处的6个组氨酸残基(即，SEQ ID NO：1包含在SEQID NO：2中)。质粒构建体被测序确认，并且转化到含有氨苄青霉素选择的大肠杆菌BL21DE3宿主细胞中，得到表达菌株EC0052。

将EC0052的细胞和仅含有空的pET23D+载体的对照菌株在含有100g/mL氨苄青霉素的LB培养基中生长至OD₆₀₀约0.5，然后在37℃下用1mM>

通过与蔗糖反应来检查来自EC0052细胞的粗细胞裂解物的活性。使用从含有空载体的细胞制备的细胞裂解物类似地建立对照反应。使用10％(v/v)细胞裂解物，与100g/L蔗糖、10mM柠檬酸钠(pH 5)和1mM CaCl₂一起建立每个蔗糖反应。在37℃下孵育反应数小时后，在已经添加了EC0052细胞裂解物的管中形成一种被认为是右旋糖酐的凝胶样产物。在对照反应中不形成凝胶样产物。HPLC分析证实了在含有EC0052细胞裂解物的反应中消耗了蔗糖，而在对照反应中没有。该结果表明EC0052粗细胞裂解物表达了活性gtf>

因此，包含水、蔗糖和含有SEQ ID NO：1的酶的反应合成了被认为是右旋糖酐的凝胶化产物。该结果表明，gtf 0768可能具有葡萄糖基转移酶活性。

实例2

蔗糖与Gtf>

该实例描述了包含水、蔗糖和gtf 0768的另外的反应，补充了实例1中提供的结果。而且，该实例提供了由gtf 0768合成的凝胶化产物的配糖键分析，显示该产物是右旋糖酐的一种类型。

制备gtf反应的试剂：

-蔗糖(西格玛(Sigma)产品号S-9378)。

-磷酸钠缓冲液储备液(200mM)(pH 5.5)：相应地，使用磷酸二氢钠一水合物(西格玛(Sigma)产品号S9638)和磷酸氢二钠七水合物(西格玛(Sigma)产品号S9390)，在水中制备250mL。

-Gtf 0768酶溶液(如在实例1中制备的细胞裂解物)。

三种gtf反应条件：

制备含有2.72g磷酸钠缓冲液储备液(pH 5.5)、100g/L蔗糖和2mL的gtf 0768酶溶液的1000mL反应。将反应在26℃下搅拌持续20小时，并使其变成粘性的。通过在80℃下加热该反应10分钟使gtf酶失活。然后将失活的粘性反应与3升的100％甲醇混合以沉淀粘性产物。形成白色沉淀，然后将其过滤，随后用120ml的100％甲醇洗涤4次。在烘箱中，将固体产物在室温下、真空中干燥72小时。

制备含有1.97g磷酸钠缓冲液、300g/L蔗糖和1.45mL的gtf 0768酶溶液的725mL反应物。将反应在26℃下搅拌持续20小时，并使其变成粘性的。通过向反应混合物中添加甲醇使gtf酶失活。然后将失活的反应物与3升的100％甲醇混合以沉淀粘性产物。形成白色沉淀，然后将其过滤，随后用120mL的100％甲醇洗涤4次。在烘箱中，将固体产物在室温下、真空中干燥72小时。

制备含有0.544g磷酸钠缓冲液、400g/L蔗糖和0.4mL的gtf 0768酶溶液的200mL反应物。将反应在26℃下搅拌持续20小时，并使其变成粘性的。通过向反应混合物中添加甲醇使gtf酶失活。然后将失活的反应物与3升的100％甲醇混合以沉淀粘性产物。形成白色沉淀，然后将其过滤，随后用120mL的100％甲醇洗涤4次。在烘箱中，将固体产物在室温下、真空中干燥72小时。

制备含有0.544g磷酸钠缓冲液、800g/L蔗糖和0.4mL的gtf 0768酶溶液的200mL反应物。将反应在26℃下搅拌持续20小时，并使其变成粘性的。通过向反应混合物中添加甲醇使gtf酶失活。然后将失活的反应物与3升的100％甲醇混合以沉淀粘性产物。形成白色沉淀，然后将其过滤，随后用120ml的100％甲醇洗涤4次。在烘箱中，将固体产物在室温下、真空中干燥72小时。

每个反应的样品(100μL)分别在0、2、4和18小时采集。通过在80℃下加热10分钟，在每个样品中使gtf酶失活。然后将每个样品用水稀释10倍，并以14,000rpm离心5分钟，其后将200μl上清液用于HPLC分析以测量反应期间的蔗糖消耗。应用以下HPLC条件分析每个样品：柱(AMINEX HPX-87C碳水化合物柱，300x7.8mm，伯乐公司(Bio-Rad)，No.125-0095)；洗脱液(水)；流速(0.6mL/min)；温度(85℃)；折光率检测器。样品的HPLC分析显示在0768gtf反应期间大量的蔗糖消耗(图1，包含100g/L蔗糖的反应)(这个蔗糖消耗发生比使用从商业来源获得的右旋糖酐蔗糖酶在反应中观察到的蔗糖消耗显著更快-参考实例7)。

还使用HPLC来分析包含100g/L蔗糖的反应的其他产物。通过从起始蔗糖的量中减去反应中剩余的所有其他糖的量来反算聚合物产率。反算的数值与粘性产物干重分析一致。通过使用HPX-87C柱的HPLC(如上所述的HPLC条件)定量蔗糖、明串珠菌二糖、葡萄糖和果糖。DP2-7二糖通过以下条件的HPLC定量：柱(AMINEX HPX-42A碳水化合物柱，300x7.8mm，伯乐公司(Bio-Rad)，No.125-0097)；洗脱液(水)；流速(0.6mL/min)；温度(85℃)；折光率检测器。这些HPLC分析表明，0768 gtf反应的含葡糖基的糖产物由91％聚合物产物、1％葡萄糖、6.5％明串珠菌二糖和1.5％DP2-7寡糖组成。

通过¹³C>13C>

NMR结果表明，凝胶化聚合物产物包含约90％的α-1，6-糖苷键、约4％-5％的α-1，3-糖苷键、以及约5％-6％的α-1，4-糖苷键和α-1，2-糖苷键。聚合物产物的一个或多个主链似乎主要包含α-1，6-糖苷键，而且还包含非常少量的α-1，3-糖苷键和α-1，4-糖苷键。其他α-1，3-糖苷键和α-1，4-糖苷键以及所有α-1，2-糖苷键都似乎处于一个或多个主链的分支中。因此，凝胶化产物似乎是凝胶化右旋糖酐。

目前本文推荐不同的方案(不是上述¹³C>

通过尺寸排阻色谱法(SEC)确定包含100g/L蔗糖的反应的凝胶化右旋糖酐产物的数均分子量(Mn)和重均分子量(Mw)。将如上述制备的干聚合物在100℃下振摇过夜以溶解于DMAc和5％LiCl(0.5mg/mL)中。所使用的色谱系统是来自沃特斯(Waters)公司(马萨诸塞州米尔福德(Milford，MA))的厄莱恩斯(Alliance)^TM>TM>TM差示毛细管粘度计。用于SEC的柱是来自昭和公司(Shodex)(日本)的四个苯乙烯-二乙烯基苯柱和两个线性KD-806M、KD-802和KD-801柱，以改善聚合物分布在低分子量区域的分辨率。流动相为具有0.11％LiCl的DMAc。所使用的色谱条件为：在柱和检测器室中为50℃，样品和注射器室中为40℃，流速为0.5mL/min，注射体积为100μL。用于数据还原的软件包为来自沃特斯公司的因普奥尔(Empower)^TM版本3(使用广泛的葡聚糖聚合物标准进行校准)和来自怀亚特公司的阿斯特拉版本6(具有柱校准的三重检测方法)。从该程序确定凝胶化右旋糖酐产物的Mn为2229400，Mw为5365700。

目前本文推荐不同的方案(不是上述SEC程序)来确定由gtf 0768生产的右旋糖酐的分子量。该方案在下面的实例9中披露，表明分子量比本实例中披露的分子量大超过一个数量级。

因此，包含水、蔗糖和含有含SEQ ID NO：1的酶的反应合成凝胶化右旋糖酐产物，如通过产物的主要的α-1，6-糖苷键谱图确定的。下面的实例8披露了该产物的粘度与某些可商购的右旋糖酐的粘度的比较。实例9进一步披露了用包含SEQ ID NO：1的gtf酶生产右旋糖酐、以及右旋糖酐的产率、分子量和键分析。

实例3

葡萄糖基转移酶(2919)的表达及其生产凝胶化右旋糖酐产物的用途

本实例描述了在枯草芽孢杆菌中成熟的食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)葡萄糖基转移酶(gtf)的表达。而且，该实例显示，当使用的是含有水和蔗糖的反应时，该酶生产可能是右旋糖酐的凝胶化产物。

从食窦魏斯氏菌KACC 11862鉴定出葡萄糖基转移酶基因WciGtf1。该基因的核酸序列(基因库登录号NZ_AEKT01000035.1的位置23315至27661)在SEQ ID NO：3中列出，并且编码SEQ ID NO：4的蛋白质序列(基因库登录号ZP_08417432)。WciGtf1蛋白质(SEQ ID NO：4)的N-末端是26个氨基酸的信号肽，如通过SIGNALP 4.0程序(彼得森(Petersen)等人，自然方法(Nature Methods)8：785-786)预测的。这表明WciGtf1(SEQ ID NO：4)是分泌的蛋白质。WciGtf1蛋白质的成熟的分泌的形式在本文中被称为2919gtf，并且在SEQ ID NO：5中列出。

将编码2919 gtf的核苷酸序列优化，以用于在枯草芽孢杆菌中表达。优化的序列(SEQ ID NO：6)由捷瑞公司(Generay)(中国上海)合成，并且插入到质粒p2JM103BBI中(Vogtentanz等人，蛋白质表达与纯化(Protein Expr.Purif.)55：40-52)，得到质粒pZZHB583(图2A)。质粒pZZHB583含有可操作地连接于编码以下各项的序列上的aprE启动子：(i)用于在枯草芽孢杆菌中引导异源蛋白(在这种情况下为2919 gtf)分泌的aprE信号序列、(ii)促进分泌的Ala-Gly-Lys、和(iii)2919 gtf(SEQ ID NO：5)(i-iii以氨基至羧基的方向融合)。

将质粒pZZHB583转化到枯草芽孢杆菌细胞中进行2919 gtf表达和纯化(参见通用方法)。

在室温下在包含100g/L蔗糖、20mM磷酸钠缓冲液(pH 5.5)和6.25mL的酶储备液的250mL反应中确定2919 gtf(SEQ ID NO：5)的活性。将反应在室温、振摇(150rpm)下进行48小时。

分别在0、1、3、5、24和48小时时间点从反应中取出样品(100μL)。通过在80℃下加热每个样品10分钟使酶失活。将样品用水稀释10倍，并以14000rpm离心5分钟。将上清液(200μL)用于HPLC分析。

使用HPLC确定在gtf反应中的明串珠菌二糖、葡萄糖和果糖的浓度，该HPLC使用配备有置于85℃的恒温柱室中的AMINEX HPX-87C柱(300x7.8mm)的安捷伦公司(Agilent)1260色谱系统和折光率检测器进行。HPLC用水以0.6mL/min进行洗脱。通过与相应的标准进行比较，鉴定出蔗糖、明串珠菌二糖、葡萄糖和果糖。基于峰面积标准曲线计算它们的浓度。蔗糖在反应结束时几乎完全消耗。除了粘的右旋糖酐产物外，2919 gtf(SEQ IDNO：5)主要生产果糖(约50％)和少量的明串珠菌二糖(约5％)和葡萄糖(约1％)。

通过HPLC分析确定gtf反应中的寡糖(DP2-DP7)的浓度，该HPLC分析使用配备有置于85℃的恒温柱室中的AMINEX HPX-42A柱(300x7.8mm)的安捷伦公司(Agilent)1260色谱系统和折光率检测器进行。HPLC用水以0.6mL/min进行洗脱。通过与相应的标准比较鉴定出寡糖的形成。基于标准曲线从峰面积计算寡糖的浓度。2919 gtf(SEQ ID NO：5)在反应结束时生产少量的DP2-DP7寡糖(约3％)。

因此，包含水、蔗糖和含有SEQ ID NO：5的酶的反应合成了被认为是右旋糖酐聚合物的凝胶化产物。实验结果表明，gtf 2919可能具有葡萄糖基转移酶活性。

实例4

葡萄糖基转移酶(2918)的表达及其生产凝胶化右旋糖酐产物的用途

本施例描述了在枯草芽孢杆菌中成熟的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)葡萄糖基转移酶(gtf)的表达。而且，该实例显示，当使用的是含有水和蔗糖的反应时，该酶生产可能是右旋糖酐的凝胶化产物。

从发酵乳杆菌鉴定出葡萄糖基转移酶基因LfeGtf1。该基因的核酸序列(基因库登录号AY697433.1的位置618至5009)在SEQ ID NO：7中列出，并且编码SEQ ID NO：8的蛋白质序列(基因库登录号AAU08008)。在LfeGtf1蛋白质(SEQ ID NO：8)的N-末端是37个氨基酸的信号肽，如通过SIGNALP 4.0程序预测的。这表明LfeGtf1(SEQ ID NO：8)是分泌的蛋白质。LfeGtf1蛋白质的成熟的分泌的形式在本文中被称为2918 gtf，并且在SEQ ID NO：9中列出。

将编码2918 gtf的核苷酸序列优化，以用于在枯草芽孢杆菌中表达。优化的序列(SEQ ID NO：10)由捷瑞公司(Generay)(中国上海)合成，并且插入到质粒p2JM103BBI中，得到质粒pZZHB582(图2B)。质粒pZZHB582含有可操作地连接于编码以下各项的序列上的aprE启动子：编码(i)用于在枯草芽孢杆菌中引导异源蛋白(在这种情况下为2918 gtf)分泌的aprE信号序列、(ii)促进分泌的Ala-Gly-Lys、和(iii)2918 gtf(SEQ ID NO：9)(i-iii以氨基至羧基的方向融合)。

将质粒pZZHB582转化到枯草芽孢杆菌细胞中进行2918 gtf表达和纯化(参见通用方法)。

在室温下在包含100g/L蔗糖、20mM磷酸钠缓冲液(pH 5.5)和6.25mL的酶储备液的250mL反应中确定2918 gtf(SEQ ID NO：9)的活性。将反应在室温、振摇(150rpm)下进行6天。

分别在0、1、3、5、24、48和144小时时间点从反应中取出样品(100μL)。通过在80℃下加热每个样品10分钟使酶失活。将样品用水稀释10倍，并以14000rpm离心5分钟。将上清液(200μL)用于HPLC分析。

使用如实例3中所述的HPLC程序确定gtf反应中蔗糖、明串珠菌二糖、葡萄糖、果糖和寡糖(DP2-DP7)的浓度。蔗糖在反应结束时几乎完全消耗。除了粘的右旋糖酐产物外，2918 gtf(SEQ ID NO：9)主要生产果糖(约50％)和少量的明串珠菌二糖(约5％)和葡萄糖(约1％)。2918 gtf(SEQ ID NO：9)生产少量的DP2-DP7寡糖(约1％)。

因此，包含水、蔗糖和包含SEQ ID NO：9的酶的反应合成了被认为是右旋糖酐聚合物的凝胶化产物。实验结果表明，gtf 2920可能具有葡萄糖基转移酶活性。

实例5

葡萄糖基转移酶(2920)的表达及其生产凝胶化右旋糖酐产物的用途

本施例描述了在枯草芽孢杆菌中成熟的表兄链球菌(Streptococcus sobrinus)葡萄糖基转移酶(gtf)的表达。而且，该实例显示，当使用的是含有水和蔗糖的反应时，该酶生产可能是右旋糖酐的凝胶化产物。

从表兄链球菌B13N鉴定出葡萄糖基转移酶基因SsoGtf4。该基因的核酸序列(基因库登录号AY966490的位置198至4718)在SEQ ID NO：11中列出，并且编码SEQ ID NO：12的蛋白质序列(基因库登录号AAX76986)。在SsoGtf4蛋白质(SEQ ID NO：12)的N-末端是41个氨基酸的信号肽，如通过SIGNALP 4.0程序预测的。这表明SsoGtf4(SEQ ID NO：12)是分泌的蛋白质。SsoGtf4蛋白质的成熟的分泌的形式在本文中被称为2920 gtf，并且在SEQ ID NO：13中列出。

将编码2920 gtf的核苷酸序列优化，以用于在枯草芽孢杆菌中表达。优化的序列(SEQ ID NO：14)由捷瑞公司(Generay)(中国上海)合成，并且插入到质粒p2JM103BBI中，得到质粒pZZHB584(图2C)。质粒pZZHB584含有可操作地连接于编码以下各项的序列上的aprE启动子：编码(i)用于在枯草芽孢杆菌中引导异源蛋白(在这种情况下为2920 gtf)分泌的aprE信号序列、(ii)促进分泌的Ala-Gly-Lys、和(iii)2920 gtf(SEQ ID NO：13)(i-iii以氨基至羧基的方向融合)。

将质粒pZZHB584转化到枯草芽孢杆菌细胞中进行2920 gtf表达和纯化(参见通用方法)。

在室温下在包含100g/L蔗糖、20mM磷酸钠缓冲液(pH 5.5)和6.25mL的酶储备液的250mL反应中确定2920 gtf(SEQ ID NO：13)的活性。将反应在室温、振摇(150rpm)下进行6天。

分别在0、1、3、5、24、48、72和144小时时间点从反应中取出样品(100μL)。通过在80℃下加热每个样品10分钟使酶失活。将样品用水稀释10倍，并以14000rpm离心5分钟。将上清液(200μL)用于HPLC分析。

使用如实例3中所述的HPLC程序确定gtf反应中蔗糖、明串珠菌二糖、葡萄糖、果糖和寡糖(DP2-DP7)的浓度。蔗糖在反应结束时几乎完全消耗。除了粘的右旋糖酐产物外，2920 gtf(SEQ ID NO：13)主要生产果糖(约50％)、明串珠菌二糖(约20％)和少量的葡萄糖(约3％)。2920 gtf(SEQ ID NO：13)生产少量的DP2-DP7寡糖(约1％)。

因此，包含水、蔗糖和包含SEQ ID NO：13的酶的反应合成了被认为是右旋糖酐聚合物的凝胶化产物。实验结果表明，gtf 2920可能具有葡萄糖基转移酶活性。

实例6

葡萄糖基转移酶(2921)的表达及其生产凝胶化右旋糖酐产物的用途

本施例描述了在枯草芽孢杆菌中成熟的汗毛链球菌(Streptococcus downei)葡萄糖基转移酶(gtf)的表达。而且，该实例显示，当使用的是含有水和蔗糖的反应时，该酶生产可能是右旋糖酐的凝胶化产物。

从汗毛链球菌MFe28鉴定出葡萄糖基转移酶基因SdoGtf7。该基因的核酸序列(基因库登录号AB476746的位置16至2375)在SEQ ID NO：15中列出，并且编码SEQ ID NO：16的蛋白质序列(基因库登录号ZP_08549987.1)。在SdoGtf7蛋白质(SEQ ID NO：16)的N-末端是44个氨基酸的信号肽，如通过SIGNALP 4.0程序预测的。这表明SdoGtf7蛋白质(SEQ ID NO：16)是分泌的蛋白质。SdoGtf7蛋白质的成熟的分泌的形式在本文中被称为2921 gtf，并且在SEQ ID NO：17中列出。

将编码2921 gtf的核苷酸序列优化，以用于在枯草芽孢杆菌中表达。优化的序列(SEQ ID NO：18)由捷瑞公司(Generay)(中国上海)合成，并且插入到质粒p2JM103BBI中，得到质粒pZZHB585(图2D)。质粒pZZHB585含有可操作地连接于编码以下各项的序列上的aprE启动子：编码(i)用于在枯草芽孢杆菌中引导异源蛋白(在这种情况下为2921 gtf)分泌的aprE信号序列、(ii)促进分泌的Ala-Gly-Lys、和(iii)2921 gtf(SEQ ID NO：17)(i-iii以氨基至羧基的方向融合)。

将质粒pZZHB585转化到枯草芽孢杆菌细胞中进行2921 gtf表达和纯化(参见通用方法)。

在室温下在包含100g/L蔗糖、20mM磷酸钠缓冲液(pH 5.5)和6.25mL的酶储备液的250mL反应中确定2921 gtf(SEQ ID NO：17)的活性。将反应在室温、振摇(150rpm)下进行8天。

在反应开始时和分别在1、2、3、6、7和8天时间点从反应中取出样品(100μL)。通过在80℃下加热每个样品10分钟使酶失活。将样品用水稀释10倍，并以14000rpm离心5分钟。将上清液(200μL)用于HPLC分析。

使用如实例3中所述的HPLC程序确定gtf反应中蔗糖、明串珠菌二糖、葡萄糖、果糖和寡糖(DP2-DP7)的浓度。第8天，约43％蔗糖残留在反应中。除了粘的右旋糖酐产物外，2921 gtf(SEQ ID NO：17)主要生产果糖(约31％)、明串珠菌二糖(约6％)和葡萄糖(约3％)。没有观测到DP2-DP7寡糖的明显生产。

因此，包含水、蔗糖和包含SEQ ID NO：17的酶的反应合成了被认为是右旋糖酐聚合物的凝胶化产物。实验结果表明，gtf 2921可能具有葡萄糖基转移酶活性。

实例7(比较例)

使用可商购的右旋糖酐蔗糖酶生产右旋糖酐

该实例描述了在包含水和蔗糖的反应中使用可商购的右旋糖酐蔗糖酶合成右旋糖酐。与实例1-6中合成的凝胶化右旋糖酐产物相比，在实例8中分析了在此生产的右旋糖酐。

制备右旋糖酐蔗糖酶反应的试剂：

-蔗糖(西格玛(Sigma)产品号S-9378)。制备了400g/L储备溶液。

-磷酸钠缓冲液储备液(200mM)(pH 5.5)：相应地，使用磷酸二氢钠一水合物(西格玛(Sigma)产品号S9638)和磷酸氢二钠七水合物(西格玛(Sigma)产品号S9390)，在水中制备250mL。

-右旋糖酐蔗糖酶，冻干粉末，≥100单位/mg蛋白质，来自肠膜明串珠菌(西格玛(Sigma)产品号D9909)。

制备了含有20mM磷酸钠(pH 5.5)、110g/L蔗糖和来自西格玛-奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)的10个单位的右旋糖酐蔗糖酶的50mL反应物。当制备反应物时最后添加右旋糖酐蔗糖酶。将该反应在125-mL加盖的摇瓶中在26℃、振摇(100rpm)下进行7天。反应的样品(100μL)分别在0、3、6、24、48和168小时采集。通过在80℃下加热10分钟，在每个样品中使右旋糖酐蔗糖酶失活。然后将每个样品用水稀释10倍，并以14,000rpm离心5分钟，其后将200μl上清液用于HPLC分析以测量反应期间的蔗糖消耗。

应用以下HPLC条件分析每个样品：柱(AMINEX HPX-87C碳水化合物柱，300x7.8mm，伯乐公司(Bio-Rad)，No.125-0095)；洗脱液(水)；流速(0.6mL/min)；温度(85℃)；折光率检测器。样品的HPLC分析表明在右旋糖酐蔗糖酶反应期间的蔗糖消耗(图3)。值得注意的是，商业右旋糖酐蔗糖酶的蔗糖消耗速率比gtf 0768的蔗糖消耗速率慢得多(实例2)。具体地说，尽管在约17-18小时的反应时间之后gtf 0768消耗大多数蔗糖(图1)，但是商业右旋糖酐蔗糖酶在这相同的时间段内仅消耗约20％的蔗糖，并且需要约168小时来消耗所有或大多数蔗糖。

还使用HPLC来分析反应的其他产物。通过从起始蔗糖的量中减去反应中剩余的所有其他糖的量来反算右旋糖酐产率。反算的数值与右旋糖酐干重分析一致。如在实例2中所述，通过HPLC定量蔗糖、明串珠菌二糖、葡萄糖、果糖和DP2-7二糖。这些HPLC分析表明，商业右旋糖酐蔗糖酶反应的糖产物由49％右旋糖酐、0.3％蔗糖、44％果糖、1％葡萄糖、5％明串珠菌二糖和1％DP2-7寡糖组成。

与实例1-6中合成的凝胶化右旋糖酐产物相比，在实例8中分析了在这个实例中生产的右旋糖酐。

实例8

右旋糖酐样品的粘度

该实例描述了对在实例1-7中生产的右旋糖酐聚合物的粘度以及从商业来源获得的右旋糖酐的粘度进行测量。在各种剪切速率下进行粘度测量。

如在实例1-7中所述制备右旋糖酐聚合物样品。具体地，进行酶促反应，其后将聚合物用甲醇沉淀并且用甲醇(100％)洗涤四次，然后干燥。通过向去离子(DI)水中添加适量的聚合物来制备每个样品的溶液(2wt％和/或3wt％)。然后，使用台式涡旋器将每种制剂混合直到聚合物完全在溶解状态。这些样品中的每一个在表2和表3(下文)中称为“在PPT之后”(在沉淀之后)。类似地制备从美国TCI(奥勒冈州波特兰(Portland，OR)；目录号D0061)获得的右旋糖酐(Mw＝956978)的2wt％溶液；该右旋糖酐在下文中称为“商业右旋糖酐”。

为了确定每一种聚合物溶液在各种剪切速率下的粘度，使用粘度计使每一种溶液经受各种剪切速率，同时将温度在20℃下保持恒定。而且，使从实例1-7中所述的每个酶促反应中直接获得的没有沉淀的聚合物样品经受各种剪切速率(在表2和表3中称为“在PPT之前”)。使用从0-10rpm增加的梯度程序增加剪切速率，并且剪切速率每30秒增加0.17(1/s)。本实验的这些结果在表2中列出。

表2

某些右旋糖酐溶液在各种剪切速率下的粘度

^a根据用于合成样品的各自的酶列出聚合物样品。

^b测量值超出了粘度计的规格界限。

还使用粘度计使聚合物样品经受各种更高的剪切速率，同时使温度在20℃下保持恒定。使用从10-250rpm增加的梯度程序增加剪切速率，并且剪切速率每20秒增加7.36(1/s)。本实验的这些结果在表3中列出。

表3

某些右旋糖酐溶液在各种剪切速率下的粘度

^a根据用于合成样品的各自的酶列出聚合物样品。可替代地，分析从商业来源获得的右旋糖酐(“商业右旋糖酐”)。

^b测量值超出了粘度计的规格界限。

这些数据表明，与商业获得的右旋糖酐和商业获得的右旋糖酐蔗糖酶的右旋糖酐产物的粘度相比，包含SEQ ID NO：1的葡萄糖基转移酶的右旋糖酐产物的溶液在大多数情况下甚至在沉淀和重溶后表现出增加的粘度。该观察似乎也适用于包含SEQ ID NO：5、9、13或17的葡萄糖基转移酶的各自的聚合物产物。

还值得注意的是，基于表2-3，随着在gtf 0768反应中的蔗糖的量从800g/L降低至100g/L，右旋糖酐产物的粘度似乎增加。具体地，表3显示包含800g/L和400g/L蔗糖的反应的右旋糖酐产物的粘度分别为5.44cPs和49.89cPs(在14.11rpm/2wt％负载下)，并且表2(gtf 0768，2wt％负载)可能显示包含100g/L蔗糖的反应的右旋糖酐产物的粘度为约957cPs(在14.11rpm的旋转下外推的指数)。该结果表明右旋糖酐产物的粘度可以通过改变最初提供给反应的蔗糖水平来控制。

实例9

由Gtf>

除了实例2之外，该实例描述了包含水、蔗糖和gtf 0768的另一个反应。而且，该实例提供了通过gtf 0768合成的凝胶化产物的另外的键和分子量分析，显示该产物是右旋糖酐的一种类型。

制备gtf反应的试剂：

-蔗糖(西格玛(Sigma)产品号S-9378)。

-磷酸钠缓冲液储备液(1M，pH 6.5，泰克诺瓦(Teknova)目录号：S0276)。

-Gtf 0768酶溶液(如在实例1中制备的细胞裂解物)。

Gtf反应条件：

制备含有20mM磷酸钠缓冲液(缓冲液从1M储备液(pH 6.5)用ddH2O稀释50倍)、100g/L蔗糖和0.1mL的gtf 0768酶溶液的50mL反应。将反应在26℃下在培养箱振摇器(英诺华公司(Innova)，型号4000)中以100rpm振摇43小时；在约24小时后反应变成粘的。

通过在80℃下加热该反应10分钟使gtf酶失活。然后将失活的粘性反应与75mL的100％甲醇混合以沉淀粘性产物。形成一份白色沉淀。在小心地倾析上清液后，将白色沉淀用75mL的100％甲醇洗涤两次。将固体产物在45℃下在真空中在烘箱中干燥48小时。

反应的样品(1mL)分别在0、0.5、1、2和24小时采集。通过在80℃下加热10分钟，在每个样品中使gtf酶失活。然后将每个样品用无菌水稀释10倍。将500μL的稀释样品转移到离心管过滤器(SPIN-X，0.45-μm尼龙，2.0mL聚丙烯管，科斯塔(Costar)#8170)中，并以12,000rpm在台式离心机中离心60分钟，其后将200μL的溢流液用于HPLC分析以测量反应期间的蔗糖消耗。应用以下HPLC条件分析每个样品：柱(AMINEX HPX-87C碳水化合物柱，300x7.8mm，伯乐公司(Bio-Rad)，No.125-0095)；洗脱液(水)；流速(0.6mL/min)；温度(85℃)；折光率检测器。样品的HPLC分析显示在0768 gtf反应期间显著的蔗糖消耗。

还使用HPLC来分析反应的其他产物。通过从起始蔗糖的量中减去反应中剩余的所有其他糖的量来反算聚合物产率。反算的数值与粘性产物干重分析一致。通过使用HPX-87C柱的HPLC(如上所述的HPLC条件)定量蔗糖、明串珠菌二糖、葡萄糖和果糖。DP2-7寡糖通过以下条件的HPLC定量：柱(AMINEX HPX-42A碳水化合物柱，300x7.8mm，伯乐公司(Bio-Rad)，No.125-0097)；洗脱液(水)；流速(0.6mL/min)；温度(85℃)；折光率检测器。这些HPLC分析表明，0768 gtf反应的含葡糖基的糖产物由92.3％聚合物产物、1.3％葡萄糖、5.0％明串珠菌二糖和1.4％DP2-7寡糖组成。

将上述反应的干右旋糖酐粉末产物(约0.2g)的样品用于分子量分析。分子量通过流动注射色谱法使用来自沃特斯(Waters)公司(马萨诸塞州米尔福德(Milford，MA))的厄莱恩斯(Alliance)^TM>TM-2>TM差示毛细管粘度计。将干的右旋糖酐粉末以0.5mg/mL溶解于含有200ppm>3的水性Tris(三[羟基甲基]氨基甲烷)缓冲液(0.075M)中。通过在50℃下振摇过夜来实现右旋糖酐的溶解。使用来自安捷伦科技公司(Agilent>TM版本3软件用于数据收集，并且将来自怀亚特公司(Wyatt)的阿斯特拉(Astra)^TM版本6软件用于多检测器数据缩减。从该工作确定，右旋糖酐聚合物产物的重均分子量(Mw)为1.022(+/-0.025)x10⁸g/mol(即概略地1亿道尔顿)(来自MALS分析)，z-平均回转半径为243.33(+/-0.42)nm(来自MALS分析)，并且z平均流体动力学半径为215nm(来自QELS分析)。从QELS分析还确定，右旋糖酐具有约0.259的粒度分布(PSD)的标准偏差，表明右旋糖酐在流体动力学尺寸方面可能是多分散的。

出于配糖键分析目的，除了反应时间为24小时(反应物变粘)之外，如本实例中所述制备50-mL gtf反应物。通过在80℃下加热该反应10分钟使gtf酶失活。然后，将失活的粘性反应置于具有12-14kDa分子量截留值(MWCO)的再生纤维素坚固的透析管(4透析管，零件号132706，光谱实验室公司(Spectrum Laboratories，Inc.))中并且在室温下经4L过滤水透析一周以上。在此透析期间每天更换水。然后，如在本实例中所述将透析的粘性反应物沉淀并干燥。提交约0.2g的干燥粉末用于GC/MS键分析。

根据Pettolino等人(自然试验方案(Nature Protocols)7：1590-1607，其通过引用结合在此)描述的方法进行键分析。简言之，将干燥的右旋糖酐样品溶解于二甲亚砜(DMSO)或在DMSO中的5％氯化锂中，然后通过依次添加氢氧化钠/DMSO浆液，随后添加碘甲烷将所有游离的羟基甲基化。然后将甲基化聚合物萃取到二氯甲烷中，并在120℃下用水性三氟乙酸(TFA)水解成单体单元。然后从样品中蒸发出TFA，并使用硼氘化钠(其还用氘原子标记还原端)进行还原性开环。然后，通过水解配糖键产生的羟基基团在50℃的温度下通过用乙酰氯和TFA处理来乙酰化。最后，蒸发衍生试剂，将所得的甲基化/乙酰化单体重构在乙腈中，并且使用双氰基丙基氰基丙基苯基聚硅氧烷柱通过质谱气相色谱(GC/MS)进行分析。甲基和乙酰基官能团的相对位置、以及氘标记产生了具有可与已公开的数据库进行比较的独特的保留时间指数和质谱的物质。以这种方式，单体单元的衍生物表明每个单体最初如何连接在右旋糖酐聚合物中以及单体是否是分支点。将分析这些样品(最初溶解于DMSO或DMSO/5％LiCl中的右旋糖酐)的结果提供在表4中。

表4

Gtf>

^a在碳位置1和3处连接的葡萄糖单体。

^b在碳位置1和6处连接的葡萄糖单体。

^c在碳位置1和4处连接的葡萄糖单体。

^d在碳位置1、3和6处连接的葡萄糖单体。

^e在碳位置1、2和6，或1、4和6处连接的葡萄糖单体。

一般来说，表4中的结果表明，上述分析的右旋糖酐产物包括：

(i)仅约87wt％-93wt％在位置1和6处连接的葡萄糖；

(ii)仅约0.1wt％-1.2wt％在位置1和3处连接的葡萄糖；

(iii)仅约0.1wt％-0.7wt％在位置1和4处连接的葡萄糖；

(iv)仅约7.7wt％-8.6wt％在位置1、3和6处连接的葡萄糖；以及

(v)仅约0.4wt％-1.7wt％在以下位置处连接的葡萄糖：(a)位置1、2和6，或(b)位置1、4和6。

基于该信息和一些其他研究(数据未显示)，预期该产物是支链结构，其中长度为约20DP(平均值)的长链(主要或全部包含α-1，6-键)彼此迭代分支(例如，一个长链可以是来自另一个长链的分支，该另一个长链反过来可以本身是来自另一个长链的分支，等等)。支链结构也似乎包含来自长链的短分支；这些短链被认为长度为1-3DP，并且主要包括例如α-1，3-键和α-1，4-键。右旋糖酐中的分支点，无论是来自从长链分支的另一个长链还是从长链分支的短链，似乎包含没有α-1，3键、-1，4键或-1，2键而涉及α-1，6键的葡萄糖。概略地，右旋糖酐的所有分支点中25％分支成长链。

因此，包含水、蔗糖和含有SEQ ID NO：1的酶的反应合成了非常大的凝胶化右旋糖酐产物，如通过产物的高Mw和主要的α-1，6-糖苷键谱图确定的。

实例10

包含由Gtf>

本实例披露了包含gtf 0768的右旋糖酐产物的配制品。与包含通常用于向某些消费产品(例如，个人护理组合物例如洗液)提供粘度的某些化合物(黄原胶、)的配制品相比，该配制品显示具有更好的感官特性(或“感觉”)。

制备三种不同的乳剂并在皮肤感觉研究中彼此比较如下。

基于右旋糖酐的乳剂：在与实例9中披露的反应类似的反应中，使用gtf 0768(包含SEQ ID NO：1)生产右旋糖酐。在室温下，将聚山梨醇酯80、脱水山梨糖醇单油酸酯和矿物油(B相，表5)在小容器中合并，并手动混合直到均匀。在中等螺旋桨混合下，将B相缓慢添加到水(A相，表5)中。将混合物在5000-9000rpm下均化大约5-10分钟。然后在中等螺旋桨混合下添加右旋糖酐(C相，表5)。然后，在中等螺旋桨混合下将II(D相，表5)作为防腐剂添加。可以任选地使用来自A相的一部分水将右旋糖酐进行预水合。

表5

基于右旋糖酐的乳剂

基于黄原胶的乳剂(对照1)：在室温下，在中等螺旋桨混合下将黄原胶和水(A相，表6)合并直到均匀。将聚山梨醇酯80、脱水山梨糖醇单油酸酯和矿物油(B相，表6)在小容器中合并，并手动混合直到均匀。在中等螺旋桨混合下将B相缓慢添加到A相。将混合物在5000-9000rpm下均化大约5-10分钟。然后，在中等螺旋桨混合下将II(C相，表6)作为防腐剂添加。

表6

基于黄原胶的乳剂

基于Ultrez 10的乳剂(对照2)：在室温下，在中等螺旋桨混合下将Ultrez 10和水(A相，表7)合并直到均匀。将聚山梨醇酯80、脱水山梨糖醇单油酸酯和矿物油(B相，表7)在小容器中合并，并手动混合直到均匀。在中等螺旋桨混合下将B相缓慢添加到A相。将混合物在5000-9000rpm下均化大约5-10分钟。然后，在中等螺旋桨混合下将II(C相，表7)作为防腐剂添加。使用20-wt％的氢氧化钠溶液将乳剂中和至pH 5.5。

表7

基于Ultrez>

皮肤感觉分析和结果：根据ASTM E1490-3(“用于面霜和洗液的描述性皮肤感觉分析的标准实践”(Creaming and Skinction for Descriptive Skinfeel Analysis ofCreams and Lotions)，ASTM国际集团，宾西法尼亚州西康舍霍肯(West Conshohocken，PA)，2003，DOI：10.1520/E1490-03，通过引用结合在此))进行双盲的、皮肤感觉分析以比较每种上述乳剂。本研究中评估的主要属性是擦拭物粘性、后感粘性、拾取纤维性和拾取粘性。小组成员按从1-5的级别进行属性评估，其中1展示最小的属性，5展示最大的属性。结果在下表8中报告为小组成员针对每个属性的评级的平均值。这些值的总平均值(∑，表8)表明，本文披露的用右旋糖酐生产的乳剂(如洗液)的整体感官体验超过了用黄原胶或Ultrez 10生产的类似的乳剂的结果。

表8

基于Ultrez>

值得注意的是，在皮肤感觉分析中，含右旋糖酐的乳剂得分比对照乳剂更好，特别是因为与对照乳剂中的黄原胶(0.5wt％)或Ultrez 10(0.5wt％)的量相比，该乳剂中存在2倍的右旋糖酐(1wt％)的量。

因此，通过gtf 0768(包含SEQ ID NO：1)生产的右旋糖酐可以适合用于所希望的增强的感官特性的组合物中，例如在个人护理和食物产品中。

实例11

具有悬浮颗粒的包含右旋糖酐的清洁剂

本实例披露了包含gtf 0768的右旋糖酐产物的清洁剂。荷荷巴酯珠可以悬浮在该组合物中，表明右旋糖酐可以用作分散剂。

在与实例9中披露的反应类似的反应中，使用gtf 0768(包含SEQ ID NO：1)生产右旋糖酐。在室温下，根据表9中的配制品，将水、右旋糖酐、甘油、聚山梨醇酯20、椰油酰胺丙基甜菜碱、PPG-2羟基乙基椰油酰胺和EDTA二钠合并，并且手动混合直到均匀。然后添加荷荷巴珠，并继续混合直到珠粒均匀地分散。可以任选地使用一部分水组分将右旋糖酐进行预水合。

表9

基于右旋糖酐的荷荷巴珠悬浮液

因此，通过gtf 0768(包含SEQ ID NO：1)生产的右旋糖酐可以用作水性组合物例如某些个人护理产品中的分散剂。

序列表

<110>E.I.内穆尔杜邦公司（E. I. du Pont de Nemours and Company）

南比亚尔，拉凯什（Nambiar, Rakesh）

<120>酶促聚合的凝胶化右旋糖酐

<130>CL6294

<150>US 62/075,460

<151>2014-11-05

<160>18

<170>PatentIn版本3.5

<210>1

<211>1447

<212>PRT

<213>假肠膜明串珠菌（Leuconostoc pseudomesenteroides）

<220>

<221>尚未归类的特征

<222>(1)..(1447)

<223>成熟的0768 gtf

<400>1

Asp Gln Asn Val Asn Asp Pro Ser Val Ala Thr Thr Thr Gln Asn Val

1 5 1015

Val Thr Asp Gln Asp Thr Ser Ile Asp Ala Ser Val Ala Thr Thr Val

202530

Asn Pro Asn Leu Asp Asp Thr Gln Ala Asp Asn Thr Asn Ile Gln Thr

354045

Pro Thr Asp Gln Asn Asp Glu Ser Lys Asp Thr Thr Pro Lys Val Glu

505560

Thr Gly Asp Thr Thr Asn Ser Gln Ser Thr Glu Ala Gln Glu Thr Thr

65707580

Ala Gln Thr Asn Asn Asp Val Glu Thr Pro Gln Asn Ser Asp Ala Ala

859095

Ile Glu Thr Gly Leu Leu Thr Thr Asn Asn Gln Ile Arg Tyr Val Asn

100 105 110

Pro Asp Gly Thr Val Leu Thr Gly Ala Tyr Lys Thr Ile Asn Gly Asn

115 120 125

Thr Tyr Tyr Phe Asp Asp Asp Ser Gly Val Ala Leu Val Gly Leu His

130 135 140

Lys Ile Gly Asp Thr Leu Lys Gly Phe Ser Leu Asn Gly Val Gln Val

145 150 155 160

Lys Gly Asp Tyr Leu Thr Ala Ala Asn Gly Asp Lys Tyr Tyr Phe Asp

165 170 175

Ser Asn Gly Asn Ala Val Ser Gly Val Gln Gln Ile Asn Gly Lys Thr

180 185 190

Tyr Tyr Phe Asp Ser Thr Gly Lys Leu Met Lys Gly Tyr Thr Ala Val

195 200 205

Leu Asn Gly Val Val Thr Phe Phe Asn Ser Thr Thr Gly Glu Ala Asp

210 215 220

Asn Thr Asp Ala Ser Thr Ile Lys Thr Gly Val Thr Ile Asp Asn Ser

225 230 235 240

Asp Tyr Thr Val His Asn Ala Ala Tyr Asp Asn Thr Ala Ala Ser Phe

245 250 255

Asp Asn Ile Asn Gly Tyr Leu Thr Ala Glu Ser Trp Tyr Arg Pro Lys

260 265 270

Glu Ile Leu Glu Asn Gly Glu Ser Trp Arg Pro Ser Thr Ala Glu Asp

275 280 285

Lys Arg Pro Ile Leu Ile Thr Trp Gln Pro Asp Ile Val Thr Glu Val

290 295 300

Asn Tyr Leu Asn Met Met Ala Ala Asn Gly Leu Leu Ser Ile Asn Ala

305 310 315 320

Pro Phe Thr Thr Ala Ser Asp Leu Ala Ile Met Asn Asp Ala Val Arg

325 330 335

Ala Val Gln Lys Asn Ile Glu Met Arg Ile Ser Gln Glu Lys Ser Thr

340 345 350

Asp Trp Leu Lys Ala Leu Met Thr Gln Phe Ile Asn Thr Gln Pro Gln

355 360 365

Trp Asn Glu Val Ser Glu Ser Pro Ser Asn Asp His Leu Gln Gly Gly

370 375 380

Ala Leu Thr Tyr Val Asn Ser Pro Leu Thr Pro Asp Ala Asn Ser Asn

385 390 395 400

Phe Arg Leu Leu Asn Arg Thr Pro Thr Asn Gln Ser Gly Thr Thr Arg

405 410 415

Tyr Asp Thr Asp Lys Ser Lys Gly Gly Phe Glu Leu Leu Leu Ala Asn

420 425 430

Asp Val Asp Asn Ser Asn Pro Val Val Gln Ala Glu Gln Leu Asn Trp

435 440 445

Leu Tyr Tyr Leu Met Asn Phe Gly Ser Ile Thr Ala Asn Asp Pro Thr

450 455 460

Ala Asn Phe Asp Gly Ile Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asp Ala

465 470 475 480

Asp Leu Leu Gln Ile Ala Ser Asp Tyr Phe Lys Leu Ala Tyr Gly Thr

485 490 495

Ser Leu Ser Asp Thr Asn Ala Asn Gln His Leu Ser Ile Leu Glu Asp

500 505 510

Trp Ser Ala Asn Asp Ala Glu Tyr Met Ser Lys Thr Gly Ser Asn Gln

515 520 525

Leu Thr Met Asp Thr Tyr Thr Gln Gln Gln Leu Leu Phe Ser Leu Thr

530 535 540

Lys Gln Val Gly Asn Arg Ala Asp Met Arg Arg Phe Leu Glu Tyr Phe

545 550 555 560

Met Ile Asn Arg Ala Asn Asp Ser Thr Glu Asn Val Ala Thr Pro Asn

565 570 575

Tyr Ser Phe Val Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln Thr Val Ile Ala

580 585 590

Thr Ile Ile Lys Asp Leu His Pro Asp Val Val Asn Ser Leu Ala Pro

595 600 605

Thr Gln Ala Gln Leu Glu Glu Ala Phe Ala Val Tyr Asn Ala Asp Met

610 615 620

Asn Arg Val Asp Lys Gln Tyr Thr Gln Tyr Asn Met Pro Ser Ala Tyr

625 630 635 640

Ala Met Leu Leu Thr Asn Lys Asp Thr Ile Pro Arg Val Tyr Tyr Gly

645 650 655

Asp Leu Tyr Thr Asp Asp Gly Glu Tyr Met Gly Thr Gln Thr Pro Tyr

660 665 670

Tyr Asp Ala Ile Val Asn Leu Leu Gln Ser Arg Val Lys Tyr Val Ala

675 680 685

Gly Gly Gln Ser Met Ala Val Asp Gln His Asp Ile Leu Thr Ser Val

690 695 700

Arg Tyr Gly Lys Asn Leu Ala Asp Ala Asn Ala Thr Ser Asp Asp Leu

705 710 715 720

Thr Ser Ile Asn Ser Gly Ile Gly Val Ile Val Ser Asn Asn Pro Asn

725 730 735

Leu Ser Leu Ala Ser Gly Glu Thr Val Val Leu His Met Gly Ile Ala

740 745 750

His Ala Asn Gln Val Tyr Arg Glu Ile Leu Glu Thr Thr Asp Asn Gly

755 760 765

Ile Ala Asn Asn Thr Asp Ile Phe Lys Thr Thr Asp Ser Asn Gly Asp

770 775 780

Leu Ile Phe Thr Ala Ser Glu Ile His Gly Tyr Ser Asn Val Gln Val

785 790 795 800

Ser Gly Phe Leu Ser Val Trp Ala Pro Lys Asp Ala Thr Asp Asp Gln

805 810 815

Asp Val Arg Thr Ala Ala Ser Glu Ser Thr Ser Asn Asp Gly Asn Thr

820 825 830

Leu His Ser Asn Ala Ala Leu Asp Ser Asn Leu Ile Tyr Glu Gly Phe

835 840 845

Ser Asn Phe Gln Ser Thr Pro Gln Ser Glu Ser Glu Phe Ala Asn Val

850 855 860

Lys Ile Ala Ala Asn Val Asn Leu Phe Lys Ser Trp Gly Val Thr Ser

865 870 875 880

Phe Gln Met Ala Pro Gln Tyr Arg Ser Ser Thr Asp Thr Ser Phe Leu

885 890 895

Asp Ser Ile Ile Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Thr Asp Arg Tyr Asp Leu

900 905 910

Gly Phe Glu Thr Pro Thr Lys Tyr Gly Thr Asp Gln Gln Leu Arg Asp

915 920 925

Ala Ile Lys Ala Leu His Ala Asn Gly Ile Gln Ala Met Ala Asp Phe

930 935 940

Val Pro Asp Gln Ile Tyr Asn Leu Pro Gln Thr Glu Leu Val Ser Val

945 950 955 960

Ser Arg Thr Asp Ser Leu Gly Asn Gln Ser Ala Asn Ser Asn Ala Ala

965 970 975

Asn Val Leu Tyr Val Ser His Thr Val Gly Gly Gly Glu Tyr Gln Ser

980 985 990

Lys Tyr Gly Gly Glu Phe Leu Ala Ile Ile Lys Ser Lys Tyr Pro Ser

995 10001005

Leu Phe Lys Thr Ile Gln Val Ser Thr Gly Leu Pro Ile Asp Asp

101010151020

Ser Thr Lys Ile Lys Glu Trp Ser Ala Lys Tyr Phe Asn Gly Ser

102510301035

Asn Ile Gln Gly Arg Gly Phe Gly Tyr Val Leu Ser Asp Gly Gly

104010451050

Thr Gln Asn Tyr Phe Lys Val Ile Ser Asn Ser Thr Asp Asp Asp

105510601065

Phe Leu Pro Asn Gln Leu Thr Gly Lys Pro Thr Met Thr Gly Phe

107010751080

Glu Gln Thr Ser Lys Gly Ile Val Tyr Tyr Ser Lys Ser Gly Ile

108510901095

Gln Ala Lys Asn Gln Phe Val Lys Asp Asp Val Ser Gly Asn Tyr

110011051110

Tyr Tyr Phe Asn Lys Asn Gly Leu Met Thr Val Gly Ser Lys Thr

111511201125

Ile Asn Gly Lys Asn Tyr Met Phe Leu Pro Asn Gly Val Glu Leu

113011351140

Arg Gly Ser Phe Leu Gln Thr Ala Asp Gly Thr Val Asn Tyr Tyr

114511501155

Ala Thr Asn Gly Ala Gln Val Gln Asp Ser Tyr Val Thr Asp Thr

116011651170

Glu Gly Asn Ser Tyr Tyr Phe Asp Gly Asp Gly Glu Met Val Thr

117511801185

Gly Thr Tyr Thr Val Asp Gly His Ala Gln Tyr Phe Asp Val Asn

119011951200

Gly Val Gln Thr Lys Gly Ala Ile Ile Thr Leu Gly Gly Val Gln

120512101215

Arg Tyr Tyr Gln Ala Gly Asn Gly Asn Leu Ala Thr Asn Gln Tyr

122012251230

Val Ser Tyr Asn Asn Ser Trp Tyr Tyr Ala Asn Thr Lys Gly Glu

123512401245

Leu Val Thr Gly Val Gln Ser Ile Asn Gly Asn Val Gln Tyr Phe

125012551260

Ala Ser Asn Gly Gln Gln Ile Lys Gly Gln Ile Val Val Thr Gly

126512701275

Asn Gln Lys Ser Tyr Tyr Asp Ala Asn Thr Gly Asn Leu Ile Lys

128012851290

Asn Asp Phe Leu Thr Pro Asp Gln Gly Lys Thr Trp Tyr Tyr Ala

129513001305

Asp Gln Asp Gly Asn Leu Val Val Gly Ala Gln Glu Val Asn Gly

131013151320

His Lys Leu Tyr Phe Asp Asp Asn Gly Ile Gln Ile Lys Asp Gln

132513301335

Ile Ile Ser Asn Asp Gly Gln Gln Tyr Tyr Tyr Gln Gly Gly Asn

134013451350

Gly Asp Leu Val Thr Asn Arg Tyr Ile Ser Tyr Asn Asp Ser Trp

135513601365

Tyr Tyr Ala Asp Ala Thr Gly Val Leu Val Thr Gly Gln Gln Ile

137013751380

Ile Asn Gly Glu Thr Gln Tyr Phe Arg Thr Asp Gly Arg Gln Val

138513901395

Lys Gly Gln Ile Ile Ala Asp Gly Asp Lys Gln His Tyr Tyr Asp

140014051410

Ala Asp Ser Gly Asn Leu Val Lys Asn Asn Phe Val Thr Val Asp

141514201425

Gln Gly Lys Thr Trp Tyr Tyr Ala Asp Gln Asp Gly Asn Leu Ser

143014351440

Leu ValAsp Arg

1445

<210>2

<211>1457

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>具有起始密码子和其他添加的序列的0768 gtf成熟蛋白质

<400>2

Met Ala Ser Ala Asp Gln Asn Val Asn Asp Pro Ser Val Ala Thr Thr

1 5 1015

Thr Gln Asn Val Val Thr Asp Gln Asp Thr Ser Ile Asp Ala Ser Val

202530

Ala Thr Thr Val Asn Pro Asn Leu Asp Asp Thr Gln Ala Asp Asn Thr

354045

Asn Ile Gln Thr Pro Thr Asp Gln Asn Asp Glu Ser Lys Asp Thr Thr

505560

Pro Lys Val Glu Thr Gly Asp Thr Thr Asn Ser Gln Ser Thr Glu Ala

65707580

Gln Glu Thr Thr Ala Gln Thr Asn Asn Asp Val Glu Thr Pro Gln Asn

859095

Ser Asp Ala Ala Ile Glu Thr Gly Leu Leu Thr Thr Asn Asn Gln Ile

100 105 110

Arg Tyr Val Asn Pro Asp Gly Thr Val Leu Thr Gly Ala Tyr Lys Thr

115 120 125

Ile Asn Gly Asn Thr Tyr Tyr Phe Asp Asp Asp Ser Gly Val Ala Leu

130 135 140

Val Gly Leu His Lys Ile Gly Asp Thr Leu Lys Gly Phe Ser Leu Asn

145 150 155 160

Gly Val Gln Val Lys Gly Asp Tyr Leu Thr Ala Ala Asn Gly Asp Lys

165 170 175

Tyr Tyr Phe Asp Ser Asn Gly Asn Ala Val Ser Gly Val Gln Gln Ile

180 185 190

Asn Gly Lys Thr Tyr Tyr Phe Asp Ser Thr Gly Lys Leu Met Lys Gly

195 200 205

Tyr Thr Ala Val Leu Asn Gly Val Val Thr Phe Phe Asn Ser Thr Thr

210 215 220

Gly Glu Ala Asp Asn Thr Asp Ala Ser Thr Ile Lys Thr Gly Val Thr

225 230 235 240

Ile Asp Asn Ser Asp Tyr Thr Val His Asn Ala Ala Tyr Asp Asn Thr

245 250 255

Ala Ala Ser Phe Asp Asn Ile Asn Gly Tyr Leu Thr Ala Glu Ser Trp

260 265 270

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275 280 285

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325 330 335

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340 345 350

Glu Lys Ser Thr Asp Trp Leu Lys Ala Leu Met Thr Gln Phe Ile Asn

355 360 365

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370 375 380

Leu Gln Gly Gly Ala Leu Thr Tyr Val Asn Ser Pro Leu Thr Pro Asp

385 390 395 400

Ala Asn Ser Asn Phe Arg Leu Leu Asn Arg Thr Pro Thr Asn Gln Ser

405 410 415

Gly Thr Thr Arg Tyr Asp Thr Asp Lys Ser Lys Gly Gly Phe Glu Leu

420 425 430

Leu Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn Ser Asn Pro Val Val Gln Ala Glu

435 440 445

Gln Leu Asn Trp Leu Tyr Tyr Leu Met Asn Phe Gly Ser Ile Thr Ala

450 455 460

Asn Asp Pro Thr Ala Asn Phe Asp Gly Ile Arg Val Asp Ala Val Asp

465 470 475 480

Asn Val Asp Ala Asp Leu Leu Gln Ile Ala Ser Asp Tyr Phe Lys Leu

485 490 495

Ala Tyr Gly Thr Ser Leu Ser Asp Thr Asn Ala Asn Gln His Leu Ser

500 505 510

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515 520 525

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Phe Ser Leu Thr Lys Gln Val Gly Asn Arg Ala Asp Met Arg Arg Phe

545 550 555 560

Leu Glu Tyr Phe Met Ile Asn Arg Ala Asn Asp Ser Thr Glu Asn Val

565 570 575

Ala Thr Pro Asn Tyr Ser Phe Val Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln

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595 600 605

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610 615 620

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625 630 635 640

Pro Ser Ala Tyr Ala Met Leu Leu Thr Asn Lys Asp Thr Ile Pro Arg

645 650 655

Val Tyr Tyr Gly Asp Leu Tyr Thr Asp Asp Gly Glu Tyr Met Gly Thr

660 665 670

Gln Thr Pro Tyr Tyr Asp Ala Ile Val Asn Leu Leu Gln Ser Arg Val

675 680 685

Lys Tyr Val Ala Gly Gly Gln Ser Met Ala Val Asp Gln His Asp Ile

690 695 700

Leu Thr Ser Val Arg Tyr Gly Lys Asn Leu Ala Asp Ala Asn Ala Thr

705 710 715 720

Ser Asp Asp Leu Thr Ser Ile Asn Ser Gly Ile Gly Val Ile Val Ser

725 730 735

Asn Asn Pro Asn Leu Ser Leu Ala Ser Gly Glu Thr Val Val Leu His

740 745 750

Met Gly Ile Ala His Ala Asn Gln Val Tyr Arg Glu Ile Leu Glu Thr

755 760 765

Thr Asp Asn Gly Ile Ala Asn Asn Thr Asp Ile Phe Lys Thr Thr Asp

770 775 780

Ser Asn Gly Asp Leu Ile Phe Thr Ala Ser Glu Ile His Gly Tyr Ser

785 790 795 800

Asn Val Gln Val Ser Gly Phe Leu Ser Val Trp Ala Pro Lys Asp Ala

805 810 815

Thr Asp Asp Gln Asp Val Arg Thr Ala Ala Ser Glu Ser Thr Ser Asn

820 825 830

Asp Gly Asn Thr Leu His Ser Asn Ala Ala Leu Asp Ser Asn Leu Ile

835 840 845

Tyr Glu Gly Phe Ser Asn Phe Gln Ser Thr Pro Gln Ser Glu Ser Glu

850 855 860

Phe Ala Asn Val Lys Ile Ala Ala Asn Val Asn Leu Phe Lys Ser Trp

865 870 875 880

Gly Val Thr Ser Phe Gln Met Ala Pro Gln Tyr Arg Ser Ser Thr Asp

885 890 895

Thr Ser Phe Leu Asp Ser Ile Ile Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Thr Asp

900 905 910

Arg Tyr Asp Leu Gly Phe Glu Thr Pro Thr Lys Tyr Gly Thr Asp Gln

915 920 925

Gln Leu Arg Asp Ala Ile Lys Ala Leu His Ala Asn Gly Ile Gln Ala

930 935 940

Met Ala Asp Phe Val Pro Asp Gln Ile Tyr Asn Leu Pro Gln Thr Glu

945 950 955 960

Leu Val Ser Val Ser Arg Thr Asp Ser Leu Gly Asn Gln Ser Ala Asn

965 970 975

Ser Asn Ala Ala Asn Val Leu Tyr Val Ser His Thr Val Gly Gly Gly

980 985 990

Glu Tyr Gln Ser Lys Tyr Gly Gly Glu Phe Leu Ala Ile Ile Lys Ser

995 10001005

Lys Tyr Pro Ser Leu Phe Lys Thr Ile Gln Val Ser Thr Gly Leu

101010151020

Pro Ile Asp Asp Ser Thr Lys Ile Lys Glu Trp Ser Ala Lys Tyr

102510301035

Phe Asn Gly Ser Asn Ile Gln Gly Arg Gly Phe Gly Tyr Val Leu

104010451050

Ser Asp Gly Gly Thr Gln Asn Tyr Phe Lys Val Ile Ser Asn Ser

105510601065

Thr Asp Asp Asp Phe Leu Pro Asn Gln Leu Thr Gly Lys Pro Thr

107010751080

Met Thr Gly Phe Glu Gln Thr Ser Lys Gly Ile Val Tyr Tyr Ser

108510901095

Lys Ser Gly Ile Gln Ala Lys Asn Gln Phe Val Lys Asp Asp Val

110011051110

Ser Gly Asn Tyr Tyr Tyr Phe Asn Lys Asn Gly Leu Met Thr Val

111511201125

Gly Ser Lys Thr Ile Asn Gly Lys Asn Tyr Met Phe Leu Pro Asn

113011351140

Gly Val Glu Leu Arg Gly Ser Phe Leu Gln Thr Ala Asp Gly Thr

114511501155

Val Asn Tyr Tyr Ala Thr Asn Gly Ala Gln Val Gln Asp Ser Tyr

116011651170

Val Thr Asp Thr Glu Gly Asn Ser Tyr Tyr Phe Asp Gly Asp Gly

117511801185

Glu Met Val Thr Gly Thr Tyr Thr Val Asp Gly His Ala Gln Tyr

119011951200

Phe Asp Val Asn Gly Val Gln Thr Lys Gly Ala Ile Ile Thr Leu

120512101215

Gly Gly Val Gln Arg Tyr Tyr Gln Ala Gly Asn Gly Asn Leu Ala

122012251230

Thr Asn Gln Tyr Val Ser Tyr Asn Asn Ser Trp Tyr Tyr Ala Asn

123512401245

Thr Lys Gly Glu Leu Val Thr Gly Val Gln Ser Ile Asn Gly Asn

125012551260

Val Gln Tyr Phe Ala Ser Asn Gly Gln Gln Ile Lys Gly Gln Ile

126512701275

Val Val Thr Gly Asn Gln Lys Ser Tyr Tyr Asp Ala Asn Thr Gly

128012851290

Asn Leu Ile Lys Asn Asp Phe Leu Thr Pro Asp Gln Gly Lys Thr

129513001305

Trp Tyr Tyr Ala Asp Gln Asp Gly Asn Leu Val Val Gly Ala Gln

131013151320

Glu Val Asn Gly His Lys Leu Tyr Phe Asp Asp Asn Gly Ile Gln

132513301335

Ile Lys Asp Gln Ile Ile Ser Asn Asp Gly Gln Gln Tyr Tyr Tyr

134013451350

Gln Gly Gly Asn Gly Asp Leu Val Thr Asn Arg Tyr Ile Ser Tyr

135513601365

Asn Asp Ser Trp Tyr Tyr Ala Asp Ala Thr Gly Val Leu Val Thr

137013751380

Gly Gln Gln Ile Ile Asn Gly Glu Thr Gln Tyr Phe Arg Thr Asp

138513901395

Gly Arg Gln Val Lys Gly Gln Ile Ile Ala Asp Gly Asp Lys Gln

140014051410

His Tyr Tyr Asp Ala Asp Ser Gly Asn Leu Val Lys Asn Asn Phe

141514201425

Val Thr Val Asp Gln Gly Lys Thr Trp Tyr Tyr Ala Asp Gln Asp

143014351440

Gly Asn Leu Ser Leu Val Asp Arg His His His His His His

144514501455

<210>3

<211>4347

<212>DNA

<213>食窦魏斯氏菌（Weissella cibaria）

<400>3

atgtacaagt ccggaaagtt ttgggtagct gccggtgctt tgtttgttgg gctggcattc60

gctggtaaca cgcaggctga tactgtatta ccaagtgaac aacgtgcaac ggagacgaca 120

cagacgacac agaccagtga agacacgtcc gccactaaga cgccggcatc ggcgtcgact 180

tcaagctcag tcaatgttga cacgagtgac ctgcctgaca gttcaagtac ggtagttgat 240

agtacaagtg caagtgcaag cgtagtgagt gatagcgtcg ctgtgccaga tactggatca 300

caatttacga gttcgtcagg gtcaatgtca tcatcatttg ttaagtcatc actagcggca 360

acaactagtg atgcttctgg cagtcagtcg gcggcggtga ctagcgcaac cgttagttcg 420

gtggccacga gtagttcagc atcttcagtg acaacagcca caagcgaatc agcagtgata 480

agcagcgccg tgtcagatgg ttaccatgat gaaggtggtg attgggtcta ttatcgagct 540

ggaaaaaagt tagtcggtcg acaaacgatt gatacgtttg cggtttactt tgacgccgat 600

ggcaaacaag tcaagggtga ttggcgtgaa agtgatggta accgtgcgta ttatgatgga 660

caagaaggac gagcattaac gcaaacgcaa gcagtcaatg gcgttatcta cggttttaat 720

caaagcggct atcaaatcaa gaatgatttc ggccaaacag cgaatcgaga tacgtattat 780

ttcgacgcac aaggtcatgt tgtcacggga atccaaacaa ttgcaaacaa ggtttatgat 840

tttgatgagc aaggtcgaat gctgaaaggc attgccacgt cagttgatga caagatgatg 900

tattttgatg atcaaacagg tgttggacaa ccggctgatc atcctgaatt caaccctgaa 960

acggaaccgg ttcctgacga caatatcaaa cataatgcag cacatggtac gacaccagca1020

gattttgatt cgatggctgg ctacctgacg gctgatactt ggtatcgccc aaccgatatt1080

ttggaaaatg gtgagacgtg gcgcgaatcg caaccaactg aatttcgacc actgttagca1140

acttggtggc caacaaaaca aactcaggcc gattacgtga actacatgaa tcacgcatta1200

gatatgtcaa atgcaagtgt gtcagctgcc gattcagaag ccacgctaac tgcggcaacc1260

gatgctattc aagcggccgt tgagcaccaa attacggtgc gccaatcaac ggcctggtta1320

cgtgaattaa tggccgcgtt tgttgtgaca cagccacagt ggaataaaac cagtgaagat1380

gttaatgatg atcatttgca aggtggggcg ctaacatttg agaataacgg cgacacagac1440

gctaattcgg attatcgcct catgaatcgc acgccaacaa atcagactgg tgaacgcttg1500

tatcacattg atgactcgct tggcggttac gaattattgc tggcaaatga cgttgacaat1560

tcaaatccac aagttcaggc agaacaattg aattggttgt actacttgat gcattttggg1620

gatattacag ctgatgatcc ggatgcaaat tttgatgcca tacggattga tgcggtcgat1680

aatgtcgatg ctgatttact tcaactagca gctcagtatt tccgtgatgc ctatggcatg1740

gccacgactg acgcgacatc aaataagcat ctttcaatac ttgaggattg gagccataac1800

gatccggcgt atatgcaagc acacggcaat gatcaattaa cgatggatga ttatatgcac1860

acacagttga tttggtcatt aaccaagcca gaggcacaac gtggcaccat ggcacgcttt1920

atggacttct atctcaccaa ccgtgctaat gatgatacag aaaacacggc gcaacctagt1980

tactcgtttg tgcgtgccca tgatagcgaa gtgcaaacag tcattgctga aatcgtgacg2040

aagctacatc cagaagcagg aaacgggtta atgcctacgg aagaacaaat ggcagaagcg2100

tttaagattt acaatgcgga ccaaaagaag gccgttaaaa cttacacgca ctacaatatg2160

ccatctgcat acgccatgct gttaacgaac aaggatgtta ttccacgaat ttactatggt2220

gacttgtaca ctgacgatgg gcaattcatg gcgacaaaat caccctattt tgatgcgatt2280

tcggctatgt tacaagcgcg cacgaagtat gtagctggtg gacaaacgat ggcggttgac2340

cagcacgacg tcttgactag cgttcggttt ggtaagggtg ccatgacggc cagtgattta2400

ggaaatgctg agactcggac tgagggtgtg ggattaatta ttagcaacaa cccaaagttg2460

caattgggac aacaagataa cgtggtgtta cacatgggac ttgcgcacgc gaatcaagca2520

ttccgagcag ttgtactaac gaccgcgacc ggattaacca tttataatga cgatgatgct2580

ccaattcgtt ataccgataa taagggtgat ttaattttca ataaccatga cgtatatggc2640

gtgttgaatc cacaagtgtc aggcttcttg gcaatgtggg tgccaactgg tgcaccagcg2700

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gattggggaa taacttcggt acagttagcg ccacaatacc ggtcttcaac cgacggaacc2940

tttttggatg cgattattca aaatggctat gccttcactg accgttatga tttagggttt3000

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atttcaaccg gacaaaccat tgatgattca gtaaaaatta aagaatggtc agctaagtat3360

ttgaatggta ccgcaattca aggccgtgga gctggctatg tgctacgtga taatggtaca3420

aatgcttatt acaaggtgac ggcaaatgac ggtaatgtga acttaccaaa gcaattactc3480

ggacaaccag tgatgaccgg attctatcac gaggcagatg gttatcattt tgaaacattg3540

agtggtacgt cggccaaaga tgccttcatt atgggtgacg atggggcgct gtattatttt3600

gatgatcagg gcgtcatggt aacgggtaag caacgtgtgc accaagacca gtatttcttc3660

ctaccaaacg gtattgctct gacggatgcg tttgtacaaa gtgcggatgg tcaacgtcag3720

tactatgata aaacaggtcg cctggtcatt aatcaatatg tgactgacca ccaagcaaat3780

gcgttccggg ttgatgcaga cggtaacgtt gttcgtaacc aagctttgac tgttgacggc3840

catgaacaat atttcggcac aaacggtgtc caagcgaaag cagtgctcat tcgaactgac3900

gataatcagg cacggtacta cgaagccaat agtggtaatc tcgtgaagca acagtttatt3960

cttgatacag atggacattg gttgtacgcc gatgctgcag gagacttggc acgcggacaa4020

attacggttg gccaagacac gttgtatttt gatgataata atcatcaggt aaaagatgat4080

tttgtctatg atactaacgg tgtgcattat tttaatggca caacaggcgc tgaaatcaaa4140

caagattacg cgtttcatga tggcaaatgg tactattttg atgatttggg acgaatggta4200

accggtttgc agcgtattaa tggtgagtat cgctattttg atgctaatgg tgtgcaacta4260

aagggtggta ccgtgaccga tccactaacg caccaaacgt acacttttga tgcgcaaact4320

ggtgttggta cgttggtgac gttttaa4347

<210>4

<211>1448

<212>PRT

<213>食窦魏斯氏菌

<400>4

Met Tyr Lys Ser Gly Lys Phe Trp Val Ala Ala Gly Ala Leu Phe Val

1 5 1015

Gly Leu Ala Phe Ala Gly Asn Thr Gln Ala Asp Thr Val Leu Pro Ser

202530

Glu Gln Arg Ala Thr Glu Thr Thr Gln Thr Thr Gln Thr Ser Glu Asp

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Thr Ser Ala Thr Lys Thr Pro Ala Ser Ala Ser Thr Ser Ser Ser Val

505560

Asn Val Asp Thr Ser Asp Leu Pro Asp Ser Ser Ser Thr Val Val Asp

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Ser Thr Ser Ala Ser Ala Ser Val Val Ser Asp Ser Val Ala Val Pro

859095

Asp Thr Gly Ser Gln Phe Thr Ser Ser Ser Gly Ser Met Ser Ser Ser

100 105 110

Phe Val Lys Ser Ser Leu Ala Ala Thr Thr Ser Asp Ala Ser Gly Ser

115 120 125

Gln Ser Ala Ala Val Thr Ser Ala Thr Val Ser Ser Val Ala Thr Ser

130 135 140

Ser Ser Ala Ser Ser Val Thr Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Val Ile

145 150 155 160

Ser Ser Ala Val Ser Asp Gly Tyr His Asp Glu Gly Gly Asp Trp Val

165 170 175

Tyr Tyr Arg Ala Gly Lys Lys Leu Val Gly Arg Gln Thr Ile Asp Thr

180 185 190

Phe Ala Val Tyr Phe Asp Ala Asp Gly Lys Gln Val Lys Gly Asp Trp

195 200 205

Arg Glu Ser Asp Gly Asn Arg Ala Tyr Tyr Asp Gly Gln Glu Gly Arg

210 215 220

Ala Leu Thr Gln Thr Gln Ala Val Asn Gly Val Ile Tyr Gly Phe Asn

225 230 235 240

Gln Ser Gly Tyr Gln Ile Lys Asn Asp Phe Gly Gln Thr Ala Asn Arg

245 250 255

Asp Thr Tyr Tyr Phe Asp Ala Gln Gly His Val Val Thr Gly Ile Gln

260 265 270

Thr Ile Ala Asn Lys Val Tyr Asp Phe Asp Glu Gln Gly Arg Met Leu

275 280 285

Lys Gly Ile Ala Thr Ser Val Asp Asp Lys Met Met Tyr Phe Asp Asp

290 295 300

Gln Thr Gly Val Gly Gln Pro Ala Asp His Pro Glu Phe Asn Pro Glu

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325 330 335

Thr Thr Pro Ala Asp Phe Asp Ser Met Ala Gly Tyr Leu Thr Ala Asp

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Asp Met Ser Asn Ala Ser Val Ser Ala Ala Asp Ser Glu Ala Thr Leu

405 410 415

Thr Ala Ala Thr Asp Ala Ile Gln Ala Ala Val Glu His Gln Ile Thr

420 425 430

Val Arg Gln Ser Thr Ala Trp Leu Arg Glu Leu Met Ala Ala Phe Val

435 440 445

Val Thr Gln Pro Gln Trp Asn Lys Thr Ser Glu Asp Val Asn Asp Asp

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His Leu Gln Gly Gly Ala Leu Thr Phe Glu Asn Asn Gly Asp Thr Asp

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Ala Asn Ser Asp Tyr Arg Leu Met Asn Arg Thr Pro Thr Asn Gln Thr

485 490 495

Gly Glu Arg Leu Tyr His Ile Asp Asp Ser Leu Gly Gly Tyr Glu Leu

500 505 510

Leu Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn Ser Asn Pro Gln Val Gln Ala Glu

515 520 525

Gln Leu Asn Trp Leu Tyr Tyr Leu Met His Phe Gly Asp Ile Thr Ala

530 535 540

Asp Asp Pro Asp Ala Asn Phe Asp Ala Ile Arg Ile Asp Ala Val Asp

545 550 555 560

Asn Val Asp Ala Asp Leu Leu Gln Leu Ala Ala Gln Tyr Phe Arg Asp

565 570 575

Ala Tyr Gly Met Ala Thr Thr Asp Ala Thr Ser Asn Lys His Leu Ser

580 585 590

Ile Leu Glu Asp Trp Ser His Asn Asp Pro Ala Tyr Met Gln Ala His

595 600 605

Gly Asn Asp Gln Leu Thr Met Asp Asp Tyr Met His Thr Gln Leu Ile

610 615 620

Trp Ser Leu Thr Lys Pro Glu Ala Gln Arg Gly Thr Met Ala Arg Phe

625 630 635 640

Met Asp Phe Tyr Leu Thr Asn Arg Ala Asn Asp Asp Thr Glu Asn Thr

645 650 655

Ala Gln Pro Ser Tyr Ser Phe Val Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln

660 665 670

Thr Val Ile Ala Glu Ile Val Thr Lys Leu His Pro Glu Ala Gly Asn

675 680 685

Gly Leu Met Pro Thr Glu Glu Gln Met Ala Glu Ala Phe Lys Ile Tyr

690 695 700

Asn Ala Asp Gln Lys Lys Ala Val Lys Thr Tyr Thr His Tyr Asn Met

705 710 715 720

Pro Ser Ala Tyr Ala Met Leu Leu Thr Asn Lys Asp Val Ile Pro Arg

725 730 735

Ile Tyr Tyr Gly Asp Leu Tyr Thr Asp Asp Gly Gln Phe Met Ala Thr

740 745 750

Lys Ser Pro Tyr Phe Asp Ala Ile Ser Ala Met Leu Gln Ala Arg Thr

755 760 765

Lys Tyr Val Ala Gly Gly Gln Thr Met Ala Val Asp Gln His Asp Val

770 775 780

Leu Thr Ser Val Arg Phe Gly Lys Gly Ala Met Thr Ala Ser Asp Leu

785 790 795 800

Gly Asn Ala Glu Thr Arg Thr Glu Gly Val Gly Leu Ile Ile Ser Asn

805 810 815

Asn Pro Lys Leu Gln Leu Gly Gln Gln Asp Asn Val Val Leu His Met

820 825 830

Gly Leu Ala His Ala Asn Gln Ala Phe Arg Ala Val Val Leu Thr Thr

835 840 845

Ala Thr Gly Leu Thr Ile Tyr Asn Asp Asp Asp Ala Pro Ile Arg Tyr

850 855 860

Thr Asp Asn Lys Gly Asp Leu Ile Phe Asn Asn His Asp Val Tyr Gly

865 870 875 880

Val Leu Asn Pro Gln Val Ser Gly Phe Leu Ala Met Trp Val Pro Thr

885 890 895

Gly Ala Pro Ala Asn Gln Asp Ala Arg Ser Thr Ala Ser Thr Asn Ser

900 905 910

Ser Thr Asp Gly Ser Ala Tyr His Ser Asn Ala Ala Leu Asp Ser Gln

915 920 925

Val Ile Phe Glu Ser Phe Ser Asn Phe Gln Ala Met Pro Thr Ser His

930 935 940

Asp Thr Tyr Thr Asn Val Val Leu Ala Asn His Ala Asp Gln Leu His

945 950 955 960

Asp Trp Gly Ile Thr Ser Val Gln Leu Ala Pro Gln Tyr Arg Ser Ser

965 970 975

Thr Asp Gly Thr Phe Leu Asp Ala Ile Ile Gln Asn Gly Tyr Ala Phe

980 985 990

Thr Asp Arg Tyr Asp Leu Gly Phe Gly Thr Pro Thr Lys Tyr Gly Asp

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Asp Thr Asp Leu Arg Asn Val Ile Lys Ala Leu His Ala Asn Gly

101010151020

Met Gln Val Met Ala Asp Phe Val Pro Asp Gln Leu Tyr Thr Leu

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Pro Gly Lys Glu Leu Val Gln Val Thr Arg Thr Asn Asn Met Gly

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Glu Pro Asp Thr His Ser Asp Ile Gln His Ile Leu Tyr Val Thr

105510601065

Ser Thr Arg Gly Gly Gly Glu Tyr Gln Lys Gln Tyr Gly Gly Glu

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Phe Leu Glu Arg Leu Arg Ala Leu Tyr Pro Asp Leu Phe Thr Thr

108510901095

Arg Gln Ile Ser Thr Gly Gln Thr Ile Asp Asp Ser Val Lys Ile

110011051110

Lys Glu Trp Ser Ala Lys Tyr Leu Asn Gly Thr Ala Ile Gln Gly

111511201125

Arg Gly Ala Gly Tyr Val Leu Arg Asp Asn Gly Thr Asn Ala Tyr

113011351140

Tyr Lys Val Thr Ala Asn Asp Gly Asn Val Asn Leu Pro Lys Gln

114511501155

Leu Leu Gly Gln Pro Val Met Thr Gly Phe Tyr His Glu Ala Asp

116011651170

Gly Tyr His Phe Glu Thr Leu Ser Gly Thr Ser Ala Lys Asp Ala

117511801185

Phe Ile Met Gly Asp Asp Gly Ala Leu Tyr Tyr Phe Asp Asp Gln

119011951200

Gly Val Met Val Thr Gly Lys Gln Arg Val His Gln Asp Gln Tyr

120512101215

Phe Phe Leu Pro Asn Gly Ile Ala Leu Thr Asp Ala Phe Val Gln

122012251230

Ser Ala Asp Gly Gln Arg Gln Tyr Tyr Asp Lys Thr Gly Arg Leu

123512401245

Val Ile Asn Gln Tyr Val Thr Asp His Gln Ala Asn Ala Phe Arg

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Val Asp Ala Asp Gly Asn Val Val Arg Asn Gln Ala Leu Thr Val

126512701275

Asp Gly His Glu Gln Tyr Phe Gly Thr Asn Gly Val Gln Ala Lys

128012851290

Ala Val Leu Ile Arg Thr Asp Asp Asn Gln Ala Arg Tyr Tyr Glu

129513001305

Ala Asn Ser Gly Asn Leu Val Lys Gln Gln Phe Ile Leu Asp Thr

131013151320

Asp Gly His Trp Leu Tyr Ala Asp Ala Ala Gly Asp Leu Ala Arg

132513301335

Gly Gln Ile Thr Val Gly Gln Asp Thr Leu Tyr Phe Asp Asp Asn

134013451350

Asn His Gln Val Lys Asp Asp Phe Val Tyr Asp Thr Asn Gly Val

135513601365

His Tyr Phe Asn Gly Thr Thr Gly Ala Glu Ile Lys Gln Asp Tyr

137013751380

Ala Phe His Asp Gly Lys Trp Tyr Tyr Phe Asp Asp Leu Gly Arg

138513901395

Met Val Thr Gly Leu Gln Arg Ile Asn Gly Glu Tyr Arg Tyr Phe

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Asp Ala Asn Gly Val Gln Leu Lys Gly Gly Thr Val Thr Asp Pro

141514201425

Leu Thr His Gln Thr Tyr Thr Phe Asp Ala Gln Thr Gly Val Gly

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Thr Leu Val Thr Phe

1445

<210>5

<211>1422

<212>PRT

<213>食窦魏斯氏菌

<220>

<221>尚未归类的特征

<222>(1)..(1422)

<223>成熟的2919 gtf

<400>5

Asp Thr Val Leu Pro Ser Glu Gln Arg Ala Thr Glu Thr Thr Gln Thr

1 5 1015

Thr Gln Thr Ser Glu Asp Thr Ser Ala Thr Lys Thr Pro Ala Ser Ala

202530

Ser Thr Ser Ser Ser Val Asn Val Asp Thr Ser Asp Leu Pro Asp Ser

354045

Ser Ser Thr Val Val Asp Ser Thr Ser Ala Ser Ala Ser Val Val Ser

505560

Asp Ser Val Ala Val Pro Asp Thr Gly Ser Gln Phe Thr Ser Ser Ser

65707580

Gly Ser Met Ser Ser Ser Phe Val Lys Ser Ser Leu Ala Ala Thr Thr

859095

Ser Asp Ala Ser Gly Ser Gln Ser Ala Ala Val Thr Ser Ala Thr Val

100 105 110

Ser Ser Val Ala Thr Ser Ser Ser Ala Ser Ser Val Thr Thr Ala Thr

115 120 125

Ser Glu Ser Ala Val Ile Ser Ser Ala Val Ser Asp Gly Tyr His Asp

130 135 140

Glu Gly Gly Asp Trp Val Tyr Tyr Arg Ala Gly Lys Lys Leu Val Gly

145 150 155 160

Arg Gln Thr Ile Asp Thr Phe Ala Val Tyr Phe Asp Ala Asp Gly Lys

165 170 175

Gln Val Lys Gly Asp Trp Arg Glu Ser Asp Gly Asn Arg Ala Tyr Tyr

180 185 190

Asp Gly Gln Glu Gly Arg Ala Leu Thr Gln Thr Gln Ala Val Asn Gly

195 200 205

Val Ile Tyr Gly Phe Asn Gln Ser Gly Tyr Gln Ile Lys Asn Asp Phe

210 215 220

Gly Gln Thr Ala Asn Arg Asp Thr Tyr Tyr Phe Asp Ala Gln Gly His

225 230 235 240

Val Val Thr Gly Ile Gln Thr Ile Ala Asn Lys Val Tyr Asp Phe Asp

245 250 255

Glu Gln Gly Arg Met Leu Lys Gly Ile Ala Thr Ser Val Asp Asp Lys

260 265 270

Met Met Tyr Phe Asp Asp Gln Thr Gly Val Gly Gln Pro Ala Asp His

275 280 285

Pro Glu Phe Asn Pro Glu Thr Glu Pro Val Pro Asp Asp Asn Ile Lys

290 295 300

His Asn Ala Ala His Gly Thr Thr Pro Ala Asp Phe Asp Ser Met Ala

305 310 315 320

Gly Tyr Leu Thr Ala Asp Thr Trp Tyr Arg Pro Thr Asp Ile Leu Glu

325 330 335

Asn Gly Glu Thr Trp Arg Glu Ser Gln Pro Thr Glu Phe Arg Pro Leu

340 345 350

Leu Ala Thr Trp Trp Pro Thr Lys Gln Thr Gln Ala Asp Tyr Val Asn

355 360 365

Tyr Met Asn His Ala Leu Asp Met Ser Asn Ala Ser Val Ser Ala Ala

370 375 380

Asp Ser Glu Ala Thr Leu Thr Ala Ala Thr Asp Ala Ile Gln Ala Ala

385 390 395 400

Val Glu His Gln Ile Thr Val Arg Gln Ser Thr Ala Trp Leu Arg Glu

405 410 415

Leu Met Ala Ala Phe Val Val Thr Gln Pro Gln Trp Asn Lys Thr Ser

420 425 430

Glu Asp Val Asn Asp Asp His Leu Gln Gly Gly Ala Leu Thr Phe Glu

435 440 445

Asn Asn Gly Asp Thr Asp Ala Asn Ser Asp Tyr Arg Leu Met Asn Arg

450 455 460

Thr Pro Thr Asn Gln Thr Gly Glu Arg Leu Tyr His Ile Asp Asp Ser

465 470 475 480

Leu Gly Gly Tyr Glu Leu Leu Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn Ser Asn

485 490 495

Pro Gln Val Gln Ala Glu Gln Leu Asn Trp Leu Tyr Tyr Leu Met His

500 505 510

Phe Gly Asp Ile Thr Ala Asp Asp Pro Asp Ala Asn Phe Asp Ala Ile

515 520 525

Arg Ile Asp Ala Val Asp Asn Val Asp Ala Asp Leu Leu Gln Leu Ala

530 535 540

Ala Gln Tyr Phe Arg Asp Ala Tyr Gly Met Ala Thr Thr Asp Ala Thr

545 550 555 560

Ser Asn Lys His Leu Ser Ile Leu Glu Asp Trp Ser His Asn Asp Pro

565 570 575

Ala Tyr Met Gln Ala His Gly Asn Asp Gln Leu Thr Met Asp Asp Tyr

580 585 590

Met His Thr Gln Leu Ile Trp Ser Leu Thr Lys Pro Glu Ala Gln Arg

595 600 605

Gly Thr Met Ala Arg Phe Met Asp Phe Tyr Leu Thr Asn Arg Ala Asn

610 615 620

Asp Asp Thr Glu Asn Thr Ala Gln Pro Ser Tyr Ser Phe Val Arg Ala

625 630 635 640

His Asp Ser Glu Val Gln Thr Val Ile Ala Glu Ile Val Thr Lys Leu

645 650 655

His Pro Glu Ala Gly Asn Gly Leu Met Pro Thr Glu Glu Gln Met Ala

660 665 670

Glu Ala Phe Lys Ile Tyr Asn Ala Asp Gln Lys Lys Ala Val Lys Thr

675 680 685

Tyr Thr His Tyr Asn Met Pro Ser Ala Tyr Ala Met Leu Leu Thr Asn

690 695 700

Lys Asp Val Ile Pro Arg Ile Tyr Tyr Gly Asp Leu Tyr Thr Asp Asp

705 710 715 720

Gly Gln Phe Met Ala Thr Lys Ser Pro Tyr Phe Asp Ala Ile Ser Ala

725 730 735

Met Leu Gln Ala Arg Thr Lys Tyr Val Ala Gly Gly Gln Thr Met Ala

740 745 750

Val Asp Gln His Asp Val Leu Thr Ser Val Arg Phe Gly Lys Gly Ala

755 760 765

Met Thr Ala Ser Asp Leu Gly Asn Ala Glu Thr Arg Thr Glu Gly Val

770 775 780

Gly Leu Ile Ile Ser Asn Asn Pro Lys Leu Gln Leu Gly Gln Gln Asp

785 790 795 800

Asn Val Val Leu His Met Gly Leu Ala His Ala Asn Gln Ala Phe Arg

805 810 815

Ala Val Val Leu Thr Thr Ala Thr Gly Leu Thr Ile Tyr Asn Asp Asp

820 825 830

Asp Ala Pro Ile Arg Tyr Thr Asp Asn Lys Gly Asp Leu Ile Phe Asn

835 840 845

Asn His Asp Val Tyr Gly Val Leu Asn Pro Gln Val Ser Gly Phe Leu

850 855 860

Ala Met Trp Val Pro Thr Gly Ala Pro Ala Asn Gln Asp Ala Arg Ser

865 870 875 880

Thr Ala Ser Thr Asn Ser Ser Thr Asp Gly Ser Ala Tyr His Ser Asn

885 890 895

Ala Ala Leu Asp Ser Gln Val Ile Phe Glu Ser Phe Ser Asn Phe Gln

900 905 910

Ala Met Pro Thr Ser His Asp Thr Tyr Thr Asn Val Val Leu Ala Asn

915 920 925

His Ala Asp Gln Leu His Asp Trp Gly Ile Thr Ser Val Gln Leu Ala

930 935 940

Pro Gln Tyr Arg Ser Ser Thr Asp Gly Thr Phe Leu Asp Ala Ile Ile

945 950 955 960

Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Thr Asp Arg Tyr Asp Leu Gly Phe Gly Thr

965 970 975

Pro Thr Lys Tyr Gly Asp Asp Thr Asp Leu Arg Asn Val Ile Lys Ala

980 985 990

Leu His Ala Asn Gly Met Gln Val Met Ala Asp Phe Val Pro Asp Gln

995 10001005

Leu Tyr Thr Leu Pro Gly Lys Glu Leu Val Gln Val Thr Arg Thr

101010151020

Asn Asn Met Gly Glu Pro Asp Thr His Ser Asp Ile Gln His Ile

102510301035

Leu Tyr Val Thr Ser Thr Arg Gly Gly Gly Glu Tyr Gln Lys Gln

104010451050

Tyr Gly Gly Glu Phe Leu Glu Arg Leu Arg Ala Leu Tyr Pro Asp

105510601065

Leu Phe Thr Thr Arg Gln Ile Ser Thr Gly Gln Thr Ile Asp Asp

107010751080

Ser Val Lys Ile Lys Glu Trp Ser Ala Lys Tyr Leu Asn Gly Thr

108510901095

Ala Ile Gln Gly Arg Gly Ala Gly Tyr Val Leu Arg Asp Asn Gly

110011051110

Thr Asn Ala Tyr Tyr Lys Val Thr Ala Asn Asp Gly Asn Val Asn

111511201125

Leu Pro Lys Gln Leu Leu Gly Gln Pro Val Met Thr Gly Phe Tyr

113011351140

His Glu Ala Asp Gly Tyr His Phe Glu Thr Leu Ser Gly Thr Ser

114511501155

Ala Lys Asp Ala Phe Ile Met Gly Asp Asp Gly Ala Leu Tyr Tyr

116011651170

Phe Asp Asp Gln Gly Val Met Val Thr Gly Lys Gln Arg Val His

117511801185

Gln Asp Gln Tyr Phe Phe Leu Pro Asn Gly Ile Ala Leu Thr Asp

119011951200

Ala Phe Val Gln Ser Ala Asp Gly Gln Arg Gln Tyr Tyr Asp Lys

120512101215

Thr Gly Arg Leu Val Ile Asn Gln Tyr Val Thr Asp His Gln Ala

122012251230

Asn Ala Phe Arg Val Asp Ala Asp Gly Asn Val Val Arg Asn Gln

123512401245

Ala Leu Thr Val Asp Gly His Glu Gln Tyr Phe Gly Thr Asn Gly

125012551260

Val Gln Ala Lys Ala Val Leu Ile Arg Thr Asp Asp Asn Gln Ala

126512701275

Arg Tyr Tyr Glu Ala Asn Ser Gly Asn Leu Val Lys Gln Gln Phe

128012851290

Ile Leu Asp Thr Asp Gly His Trp Leu Tyr Ala Asp Ala Ala Gly

129513001305

Asp Leu Ala Arg Gly Gln Ile Thr Val Gly Gln Asp Thr Leu Tyr

131013151320

Phe Asp Asp Asn Asn His Gln Val Lys Asp Asp Phe Val Tyr Asp

132513301335

Thr Asn Gly Val His Tyr Phe Asn Gly Thr Thr Gly Ala Glu Ile

134013451350

Lys Gln Asp Tyr Ala Phe His Asp Gly Lys Trp Tyr Tyr Phe Asp

135513601365

Asp Leu Gly Arg Met Val Thr Gly Leu Gln Arg Ile Asn Gly Glu

137013751380

Tyr Arg Tyr Phe Asp Ala Asn Gly Val Gln Leu Lys Gly Gly Thr

138513901395

Val Thr Asp Pro Leu Thr His Gln Thr Tyr Thr Phe Asp Ala Gln

140014051410

Thr Gly Val Gly Thr Leu Val Thr Phe

14151420

<210>6

<211>4269

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>具有异源信号序列的2919 gtf

<400>6

gacacagtcc ttccgtcaga acaaagagcc acggagacga cacagacaac acaaacaagc60

gaagacacaa gcgccacaaa gacgcctgct agcgcttcaa cgagcagctc agtgaacgtg 120

gacacatcag atcttccgga cagctcaagc acggtggtgg attcaacgtc agcctcagca 180

agcgtcgtgt cagactcagt cgctgtccct gatacgggat cacagttcac atcatcaagc 240

ggcagcatgt caagcagctt tgttaaaagc tcactggcag ctacgacgtc agatgcttca 300

ggctcacaaa gcgccgctgt gacatcagca acagtttcaa gcgtggcgac gagctcatca 360

gcgtcatcag ttacaacagc cacgagcgaa tcagcggtta ttagctcagc agttagcgat 420

ggctatcacg atgaaggagg cgattgggtt tactacagag ctggcaaaaa actggttggc 480

agacaaacga ttgatacatt tgccgtttac ttcgatgcag atggaaaaca ggttaaagga 540

gactggagag agtcagacgg aaacagagcg tactatgatg gccaagaagg cagagccctt 600

acgcaaacac aggcagttaa cggagtcatc tatggattta atcaatcagg atatcagatt 660

aagaacgatt tcggccagac ggctaacaga gacacgtatt actttgatgc tcaaggacat 720

gtggttacgg gcatccagac aattgcaaat aaagtttatg atttcgatga acaaggaaga 780

atgctgaaag gaattgccac gtcagtcgac gataaaatga tgtatttcga cgaccaaacg 840

ggcgtgggcc aacctgccga ccaccctgag tttaatccgg aaacggagcc ggtcccggat 900

gacaacatta aacataacgc tgcgcacgga acgacacctg ctgattttga tagcatggcc 960

ggatacctta cggcggatac atggtataga cctacagaca ttctggagaa tggcgaaaca1020

tggagagaaa gccagcctac ggagttcaga ccgcttcttg ccacatggtg gcctacgaaa1080

caaacgcaag cagattatgt taattacatg aaccatgctc tggatatgtc aaatgcgagc1140

gtgagcgctg ccgatagcga ggcaacactt acagccgcga cggatgccat ccaagctgca1200

gtcgaacatc aaattacagt gagacagtca acggcatggc ttagagaact tatggcggca1260

tttgtcgtga cgcaaccgca gtggaataaa acatcagagg atgtcaacga cgatcacctg1320

caaggaggag cgcttacatt cgaaaataac ggcgatacgg acgcaaatag cgattacaga1380

cttatgaata gaacgcctac aaaccaaaca ggagaaagac tttaccacat tgacgactca1440

cttggaggat acgaactgct tctggccaac gatgttgata acagcaatcc tcaagtgcag1500

gctgagcaac ttaattggct ttattacctg atgcattttg gcgatattac agctgacgac1560

cctgacgcca acttcgacgc gattagaatc gatgcggtcg ataatgtcga cgcagacctt1620

cttcaactgg ctgctcaata tttcagagac gcatacggaa tggcaacaac agacgctaca1680

agcaataaac atctgtcaat tcttgaagac tggtcacata atgatccggc gtacatgcaa1740

gctcatggaa acgatcaact tacgatggat gactatatgc acacacaact tatttggtca1800

ctgacaaaac cggaggctca aagaggaaca atggctagat ttatggactt ttatcttaca1860

aatagagcga acgatgatac agaaaatacg gctcaacctt catattcatt cgttagagca1920

catgattcag aagttcaaac agtgattgca gaaattgtta caaaactgca tcctgaggcg1980

ggcaatggac tgatgccgac agaagagcaa atggcagaag cctttaagat ctataatgcc2040

gatcagaaaa aagcagtgaa aacatataca cactacaata tgccttcagc ttatgcaatg2100

ctgcttacga ataaagacgt cattcctaga atttactatg gagatcttta tacagatgat2160

ggacaattca tggctacaaa gtcaccttat tttgacgcta tcagcgcgat gctgcaagcg2220

agaacgaagt atgtcgcagg cggccagacg atggcagtgg atcagcacga cgtgcttaca2280

agcgtgagat ttggcaaagg cgcaatgaca gcatcagacc tgggcaatgc agagacaaga2340

acggagggag ttggccttat catttcaaat aatccgaaac tgcaactggg ccagcaggat2400

aacgtcgttc ttcatatggg cctggcgcac gcaaaccagg cctttagagc agttgttctt2460

acaacagcga cgggcctgac aatctacaat gacgatgatg caccgattag atatacagac2520

aataaaggcg acctgatttt caacaaccat gatgtctacg gcgtcctgaa cccgcaggtt2580

tcaggcttcc tggccatgtg ggttcctaca ggcgcacctg ctaaccaaga tgctagatca2640

acagcaagca caaactcatc aacggatggc tcagcatatc attcaaatgc tgcgctggat2700

tcacaagtta ttttcgaatc attctcaaat ttccaagcaa tgccgacgtc acatgacaca2760

tacacgaatg tggttctggc caaccacgcc gaccagcttc acgattgggg cattacatca2820

gtgcagctgg caccgcagta tagaagctca acagacggca cgttcctgga tgcaattatc2880

cagaatggct atgccttcac agatagatac gatcttggct ttggcacacc tacaaaatac2940

ggcgacgaca cggatctgag aaatgtgatt aaggcgcttc atgccaacgg catgcaggtt3000

atggccgact tcgtcccgga ccaactttat acacttccgg gaaaagagct ggtgcaagtc3060

acgagaacga ataacatggg cgaacctgat acacactcag acattcaaca tattctgtac3120

gttacgtcaa cgagaggcgg aggagaatat caaaaacagt atggcggcga gtttcttgaa3180

agactgagag cactgtaccc tgaccttttt acgacaagac aaattagcac aggccaaaca3240

attgacgatt cagtgaagat caaagagtgg tcagctaagt acctgaacgg cacagctatc3300

caaggaagag gcgcaggcta tgttctgaga gataatggca caaatgccta ctacaaagtt3360

acagcgaatg atggaaatgt caatcttcct aaacaacttc ttggacagcc ggttatgacg3420

ggcttctacc acgaggccga tggatatcac ttcgagacac tgtcaggaac atcagccaag3480

gatgcgttta tcatgggaga tgacggagcg ctttattact ttgatgacca aggcgttatg3540

gtgacaggaa aacagagagt tcatcaagac cagtacttct ttctgcctaa cggaattgct3600

ctgacagacg cgttcgttca atcagcagac ggacaaagac agtattatga caaaacggga3660

agacttgtta tcaaccagta tgtgacagat caccaagcta atgcttttag agtcgatgct3720

gatggcaacg tggttagaaa ccaagcactt acagttgatg gacacgaaca atatttcgga3780

acaaatggag tccaggctaa agcggttctg attagaacag atgataatca agcgagatat3840

tacgaagcta actcaggcaa tctggttaag caacaattca ttcttgacac agatggccac3900

tggctgtacg ccgatgcagc cggagatctt gctagaggac agattacagt gggacaggat3960

acactgtatt tcgacgataa taaccaccaa gttaaggatg attttgtcta tgatacaaac4020

ggcgttcatt atttcaatgg aacgacagga gctgagatta aacaagatta cgcatttcac4080

gacggcaaat ggtactactt cgatgatctg ggaagaatgg ttacaggact gcaaagaatt4140

aacggcgaat atagatattt tgacgctaat ggcgtccaac ttaagggagg aacagtcacg4200

gaccctctta cacatcaaac atatacattt gatgctcaaa caggcgttgg aacgctggtc4260

acgttttga4269

<210>7

<211>4392

<212>DNA

<213>发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）

<400>7

ttgcaagacg agtcacagaa gtttagaaaa aagatgtata agtccggaaa gttttgggta60

gctgccggtg ctttgtttgt tgggctggca ttcgctggta acgcgcaggc agatactgta 120

ttaccaagtg aacaacgtgc aacacagacg acacagacga cacagaccag tgaagacacg 180

tccgccacta agacgccggc atcggcgtcg acttcaagct cagacaatgt tgacacgagt 240

gacctgcctg acagtgcaag tgcggtggtt gatagtgcag ttacaagtac aagtacaagt 300

gcaagtgtag tgagtgatag cgtcgccgtg ccagatactg gatcacaatt tatgagttcg 360

tcagcgccag cgtcatcagc gtttgttaaa ccgtcactaa cgtcaacaac tagtggtgct 420

tccggcagtc agtcatcagc ggtgactagc gcaaacgata gttcggtggc aactagtagt 480

tcagcatctt cagtgacaac agccacaagt gaatcggctg tggtaagcag cgccgtgtca 540

gatggttacc atgatgaagg tggtgattgg gtctattatc gagctgggaa aaagttactc 600

ggtcgacaaa cgattgatac gtttgcggtt tactttgacg ccgatggcaa acaagtcaag 660

ggtgattggc gtgaaagtga tggtaaacgt gcgtattatg atgggcaaga aggacgagca 720

ttaacgcaaa cgcaagcagt caatggcgtt atctacggtt ttaatcaaag cggctatcaa 780

atcaagaatg atttcggcca aacagcgaat cgagatacgt attatttcga cgcacaaggt 840

catgttgtca cgggaatcca aacaattgca aacaaggttt atgattttga tgagcaaggt 900

cgaatgctga aaggcattgc cacgtcagtt gatgacaaga tgatgtattt tgatgatcaa 960

acaggtgttg gacaaccggc tgatcatcct gaattcaacc ctgaaacgga accggttcct1020

gacgacaata tcaaacataa tgcagcacat ggtacgacac cagaagattt tgattcgatg1080

gctgactacc tgacggctga tacttggtat cgcccaaccg atattttgga aaatggtgag1140

acgtggcgcg aatcgcaacc aactgaattt cgaccactgt tagcaacttg gtggccaaca1200

aaacaaaccc aggccgatta cgtgaactac atgaatcacg cattagatat ggcaaatgca1260

ggtgtgtcag ctgctgattc agaagccacg ttaactgcgg caaccgatgc tattcaagcg1320

gttgttgagc accaaatcac ggtgcgtcaa tcaacggctt ggttacgtga attaatggcc1380

gcatttgttg tgacacagcc acagtggaat aaaacaagtg aagatgtgaa tgatgatcat1440

ttgcaaggtg gggcattaac atttgaaaat aacggcgaca cagacgctaa ttcggattat1500

cgcctcatga accgcacgcc aacaaatcag actggcgaac gcttgtacca cattgatgac1560

tcacttggtg gttacgaatt attgctggca aatgacgttg acaattcaaa tccacaagtt1620

caggcagaac aattgaattg gttgtactac ttaatgcatt ttggggatat tacagctgat1680

gatccggacg caaattttga tgccatacgg attgatgcgg tcgataatgt cgatgctgat1740

ttacttcaac tagcagccca gtatttccgg gatgcctatg gcatggctac aactgacgca1800

acatcaaata agcatctttc aattcttgag gattggagcc ataacgatcc ggcgtatatg1860

caagcacacg gcaatgatca attaacgatg gatgattata tgcacacaca gttgatttgg1920

tcattaacca agcccgaggc acaacgcggg accatggcac gctttatgga cttctatctc1980

accaaccgtg ctaatgatga tacagaaaac acggcgcaac ctagttactc gtttgtgcgt2040

gcccatgata gcgaagtaca aacagtcatt gctgagatcg tgacgaagct gcatccagaa2100

gcaggaaatg ggttaatgcc tacggaagaa caaatggcag aagcgtttaa gatttacaat2160

gcggaccaaa agaaggccgt taagacttac acacattaca atatgccatc tgcatacgcc2220

atgctgttaa cgaacaagga tgttattcca cgaatttact atggtgactt gtacactgat2280

gatgggcaat tcatggcgac aaaatcacct tattttgatg cgatttcgac catgttacaa2340

gcacgcacga agtatgtagc tggtggacag acgatggcgg ttgaccagca cgacgtcttg2400

actagcgttc ggtttggtaa gggggccatg acggccaatg atttagggga tgctgagacc2460

cggactgagg gtgtgggatt aattattagc aacaacccaa agttgcaatt gggacaacaa2520

gacaacgtgg tgttacacat gggacttgcg cacgcgaatc aggcattccg cgcagtcgta2580

ctaacgaccg cgaccggatt aaccatttat aatgacgatg atgctccgat tcgttatacc2640

gataataagg gtgatttaat tttcactaac catgacgtat atggcgtgtt gaatccacaa2700

gtgtcaggct tcttggcaat gtgggtgcca actggtgcac cagcgaacca ggatgcgcga2760

tctactgcgt caaccaacat gtcaacggat ggatctgcct accattctaa tgcggctttg2820

gatagtcaag taatctttga atcattttcg aatttccagg ctatgccaac aagtcatgac2880

acatacacca acgttgtgtt agccaatcat gctgaccagt tgcacgattg gggaataact2940

tcggtacagt tagcaccaca ataccggtct tcaaccgacg gtaccttttt agacgcgatt3000

attcaaaatg gctatgcctt cactgaccgt tatgatttag ggtttggtac gccaactaaa3060

tacggggatg atacggattt gcggaacgtc atcaaagcat tgcatgcaaa tggcatgcaa3120

gtaatggctg attttgtgcc ggatcaattg tatacattac caggtaagga attggtacaa3180

gtcacccgaa caaacaatat gggtgagcca gatacgcatt ctgacatcca acatatttta3240

tatgtgacga gcactcgtgg tggtggtgac tatcagaaac agtacggtgg tgagttcctt3300

gcacgattgc gtgaacgata cccagattta tttacgacac gtcaaatttc gaccggacaa3360

acaattgatg attcagtaaa aattaaagaa tggtcagcta agtatttgaa tggtaccgca3420

attcaaggac gtggagctgg ctatgtgctg cgtgataatg gtacaaatgc ttattacaag3480

gtgacagcaa atgacggtaa tgtgaactta ccaaagcaat tactcggcca accggtgatg3540

accggattct atcacgaggc agatggttat cattttgaaa cattgagtgg tacgtcggcc3600

aaagatgcct ttattatggg cgacgatggg gcactgtatt attttgatga tcagggtgtt3660

atggtaacgg gtaagcaacg tgtgcaccaa gatcagtatt tcttcctgcc aaatggtatt3720

gctttgacag atgctttcgt acaaactgct gatggtcaac gtcagtacta tgataaaaca3780

ggtcgtctgg tcattaatca atatgtgact gaccaccaag cgaatgcgtt ccgggttgat3840

gcagacggta acgttgtccg caatcaagct ttgactgttg acggccatga acaatatttc3900

ggcacaaacg gtgtccaagc gaaagcagtg ctcattcgaa ctgacgataa tcaggcgcgc3960

tactacgaag ccaatagtgg taatctcgtg aagcaacagt ttattcttga tacagatgga4020

cattggttgt acgcggatgc tgcaggtgac ttggcacgcg gacaaattac aattggccaa4080

gacacgttgt attttgatga taataatcac caggtaaaag atgatttcgt ctatgatact4140

aacggtgtgc attattttaa tggcacaaca ggcgctgaaa tcaaacaaga ttacgcgttt4200

catgatggca aatggtacta ttttgatgat ttgggacgaa tggtaaccgg cttgcagcgt4260

attaatggtg agtatcgcta ttttgatgct aatggtgtgc aactaaaggg cggtaccgtg4320

accgatccac taacgcacca aacgtacact tttgatgcga aaactggtgc tggtacgttg4380

gtgacgattt aa4392

<210>8

<211>1463

<212>PRT

<213>发酵乳杆菌

<400>8

Met Gln Asp Glu Ser Gln Lys Phe Arg Lys Lys Met Tyr Lys Ser Gly

1 5 1015

Lys Phe Trp Val Ala Ala Gly Ala Leu Phe Val Gly Leu Ala Phe Ala

202530

Gly Asn Ala Gln Ala Asp Thr Val Leu Pro Ser Glu Gln Arg Ala Thr

354045

Gln Thr Thr Gln Thr Thr Gln Thr Ser Glu Asp Thr Ser Ala Thr Lys

505560

Thr Pro Ala Ser Ala Ser Thr Ser Ser Ser Asp Asn Val Asp Thr Ser

65707580

Asp Leu Pro Asp Ser Ala Ser Ala Val Val Asp Ser Ala Val Thr Ser

859095

Thr Ser Thr Ser Ala Ser Val Val Ser Asp Ser Val Ala Val Pro Asp

100 105 110

Thr Gly Ser Gln Phe Met Ser Ser Ser Ala Pro Ala Ser Ser Ala Phe

115 120 125

Val Lys Pro Ser Leu Thr Ser Thr Thr Ser Gly Ala Ser Gly Ser Gln

130 135 140

Ser Ser Ala Val Thr Ser Ala Asn Asp Ser Ser Val Ala Thr Ser Ser

145 150 155 160

Ser Ala Ser Ser Val Thr Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Val Val Ser

165 170 175

Ser Ala Val Ser Asp Gly Tyr His Asp Glu Gly Gly Asp Trp Val Tyr

180 185 190

Tyr Arg Ala Gly Lys Lys Leu Leu Gly Arg Gln Thr Ile Asp Thr Phe

195 200 205

Ala Val Tyr Phe Asp Ala Asp Gly Lys Gln Val Lys Gly Asp Trp Arg

210 215 220

Glu Ser Asp Gly Lys Arg Ala Tyr Tyr Asp Gly Gln Glu Gly Arg Ala

225 230 235 240

Leu Thr Gln Thr Gln Ala Val Asn Gly Val Ile Tyr Gly Phe Asn Gln

245 250 255

Ser Gly Tyr Gln Ile Lys Asn Asp Phe Gly Gln Thr Ala Asn Arg Asp

260 265 270

Thr Tyr Tyr Phe Asp Ala Gln Gly His Val Val Thr Gly Ile Gln Thr

275 280 285

Ile Ala Asn Lys Val Tyr Asp Phe Asp Glu Gln Gly Arg Met Leu Lys

290 295 300

Gly Ile Ala Thr Ser Val Asp Asp Lys Met Met Tyr Phe Asp Asp Gln

305 310 315 320

Thr Gly Val Gly Gln Pro Ala Asp His Pro Glu Phe Asn Pro Glu Thr

325 330 335

Glu Pro Val Pro Asp Asp Asn Ile Lys His Asn Ala Ala His Gly Thr

340 345 350

Thr Pro Glu Asp Phe Asp Ser Met Ala Asp Tyr Leu Thr Ala Asp Thr

355 360 365

Trp Tyr Arg Pro Thr Asp Ile Leu Glu Asn Gly Glu Thr Trp Arg Glu

370 375 380

Ser Gln Pro Thr Glu Phe Arg Pro Leu Leu Ala Thr Trp Trp Pro Thr

385 390 395 400

Lys Gln Thr Gln Ala Asp Tyr Val Asn Tyr Met Asn His Ala Leu Asp

405 410 415

Met Ala Asn Ala Gly Val Ser Ala Ala Asp Ser Glu Ala Thr Leu Thr

420 425 430

Ala Ala Thr Asp Ala Ile Gln Ala Val Val Glu His Gln Ile Thr Val

435 440 445

Arg Gln Ser Thr Ala Trp Leu Arg Glu Leu Met Ala Ala Phe Val Val

450 455 460

Thr Gln Pro Gln Trp Asn Lys Thr Ser Glu Asp Val Asn Asp Asp His

465 470 475 480

Leu Gln Gly Gly Ala Leu Thr Phe Glu Asn Asn Gly Asp Thr Asp Ala

485 490 495

Asn Ser Asp Tyr Arg Leu Met Asn Arg Thr Pro Thr Asn Gln Thr Gly

500 505 510

Glu Arg Leu Tyr His Ile Asp Asp Ser Leu Gly Gly Tyr Glu Leu Leu

515 520 525

Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn Ser Asn Pro Gln Val Gln Ala Glu Gln

530 535 540

Leu Asn Trp Leu Tyr Tyr Leu Met His Phe Gly Asp Ile Thr Ala Asp

545 550 555 560

Asp Pro Asp Ala Asn Phe Asp Ala Ile Arg Ile Asp Ala Val Asp Asn

565 570 575

Val Asp Ala Asp Leu Leu Gln Leu Ala Ala Gln Tyr Phe Arg Asp Ala

580 585 590

Tyr Gly Met Ala Thr Thr Asp Ala Thr Ser Asn Lys His Leu Ser Ile

595 600 605

Leu Glu Asp Trp Ser His Asn Asp Pro Ala Tyr Met Gln Ala His Gly

610 615 620

Asn Asp Gln Leu Thr Met Asp Asp Tyr Met His Thr Gln Leu Ile Trp

625 630 635 640

Ser Leu Thr Lys Pro Glu Ala Gln Arg Gly Thr Met Ala Arg Phe Met

645 650 655

Asp Phe Tyr Leu Thr Asn Arg Ala Asn Asp Asp Thr Glu Asn Thr Ala

660 665 670

Gln Pro Ser Tyr Ser Phe Val Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln Thr

675 680 685

Val Ile Ala Glu Ile Val Thr Lys Leu His Pro Glu Ala Gly Asn Gly

690 695 700

Leu Met Pro Thr Glu Glu Gln Met Ala Glu Ala Phe Lys Ile Tyr Asn

705 710 715 720

Ala Asp Gln Lys Lys Ala Val Lys Thr Tyr Thr His Tyr Asn Met Pro

725 730 735

Ser Ala Tyr Ala Met Leu Leu Thr Asn Lys Asp Val Ile Pro Arg Ile

740 745 750

Tyr Tyr Gly Asp Leu Tyr Thr Asp Asp Gly Gln Phe Met Ala Thr Lys

755 760 765

Ser Pro Tyr Phe Asp Ala Ile Ser Thr Met Leu Gln Ala Arg Thr Lys

770 775 780

Tyr Val Ala Gly Gly Gln Thr Met Ala Val Asp Gln His Asp Val Leu

785 790 795 800

Thr Ser Val Arg Phe Gly Lys Gly Ala Met Thr Ala Asn Asp Leu Gly

805 810 815

Asp Ala Glu Thr Arg Thr Glu Gly Val Gly Leu Ile Ile Ser Asn Asn

820 825 830

Pro Lys Leu Gln Leu Gly Gln Gln Asp Asn Val Val Leu His Met Gly

835 840 845

Leu Ala His Ala Asn Gln Ala Phe Arg Ala Val Val Leu Thr Thr Ala

850 855 860

Thr Gly Leu Thr Ile Tyr Asn Asp Asp Asp Ala Pro Ile Arg Tyr Thr

865 870 875 880

Asp Asn Lys Gly Asp Leu Ile Phe Thr Asn His Asp Val Tyr Gly Val

885 890 895

Leu Asn Pro Gln Val Ser Gly Phe Leu Ala Met Trp Val Pro Thr Gly

900 905 910

Ala Pro Ala Asn Gln Asp Ala Arg Ser Thr Ala Ser Thr Asn Met Ser

915 920 925

Thr Asp Gly Ser Ala Tyr His Ser Asn Ala Ala Leu Asp Ser Gln Val

930 935 940

Ile Phe Glu Ser Phe Ser Asn Phe Gln Ala Met Pro Thr Ser His Asp

945 950 955 960

Thr Tyr Thr Asn Val Val Leu Ala Asn His Ala Asp Gln Leu His Asp

965 970 975

Trp Gly Ile Thr Ser Val Gln Leu Ala Pro Gln Tyr Arg Ser Ser Thr

980 985 990

Asp Gly Thr Phe Leu Asp Ala Ile Ile Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Thr

995 10001005

Asp Arg Tyr Asp Leu Gly Phe Gly Thr Pro Thr Lys Tyr Gly Asp

101010151020

Asp Thr Asp Leu Arg Asn Val Ile Lys Ala Leu His Ala Asn Gly

102510301035

Met Gln Val Met Ala Asp Phe Val Pro Asp Gln Leu Tyr Thr Leu

104010451050

Pro Gly Lys Glu Leu Val Gln Val Thr Arg Thr Asn Asn Met Gly

105510601065

Glu Pro Asp Thr His Ser Asp Ile Gln His Ile Leu Tyr Val Thr

107010751080

Ser Thr Arg Gly Gly Gly Asp Tyr Gln Lys Gln Tyr Gly Gly Glu

108510901095

Phe Leu Ala Arg Leu Arg Glu Arg Tyr Pro Asp Leu Phe Thr Thr

110011051110

Arg Gln Ile Ser Thr Gly Gln Thr Ile Asp Asp Ser Val Lys Ile

111511201125

Lys Glu Trp Ser Ala Lys Tyr Leu Asn Gly Thr Ala Ile Gln Gly

113011351140

Arg Gly Ala Gly Tyr Val Leu Arg Asp Asn Gly Thr Asn Ala Tyr

114511501155

Tyr Lys Val Thr Ala Asn Asp Gly Asn Val Asn Leu Pro Lys Gln

116011651170

Leu Leu Gly Gln Pro Val Met Thr Gly Phe Tyr His Glu Ala Asp

117511801185

Gly Tyr His Phe Glu Thr Leu Ser Gly Thr Ser Ala Lys Asp Ala

119011951200

Phe Ile Met Gly Asp Asp Gly Ala Leu Tyr Tyr Phe Asp Asp Gln

120512101215

Gly Val Met Val Thr Gly Lys Gln Arg Val His Gln Asp Gln Tyr

122012251230

Phe Phe Leu Pro Asn Gly Ile Ala Leu Thr Asp Ala Phe Val Gln

123512401245

Thr Ala Asp Gly Gln Arg Gln Tyr Tyr Asp Lys Thr Gly Arg Leu

125012551260

Val Ile Asn Gln Tyr Val Thr Asp His Gln Ala Asn Ala Phe Arg

126512701275

Val Asp Ala Asp Gly Asn Val Val Arg Asn Gln Ala Leu Thr Val

128012851290

Asp Gly His Glu Gln Tyr Phe Gly Thr Asn Gly Val Gln Ala Lys

129513001305

Ala Val Leu Ile Arg Thr Asp Asp Asn Gln Ala Arg Tyr Tyr Glu

131013151320

Ala Asn Ser Gly Asn Leu Val Lys Gln Gln Phe Ile Leu Asp Thr

132513301335

Asp Gly His Trp Leu Tyr Ala Asp Ala Ala Gly Asp Leu Ala Arg

134013451350

Gly Gln Ile Thr Ile Gly Gln Asp Thr Leu Tyr Phe Asp Asp Asn

135513601365

Asn His Gln Val Lys Asp Asp Phe Val Tyr Asp Thr Asn Gly Val

137013751380

His Tyr Phe Asn Gly Thr Thr Gly Ala Glu Ile Lys Gln Asp Tyr

138513901395

Ala Phe His Asp Gly Lys Trp Tyr Tyr Phe Asp Asp Leu Gly Arg

140014051410

Met Val Thr Gly Leu Gln Arg Ile Asn Gly Glu Tyr Arg Tyr Phe

141514201425

Asp Ala Asn Gly Val Gln Leu Lys Gly Gly Thr Val Thr Asp Pro

143014351440

Leu Thr His Gln Thr Tyr Thr Phe Asp Ala Lys Thr Gly Ala Gly

144514501455

Thr Leu Val Thr Ile

1460

<210>9

<211>1426

<212>PRT

<213>发酵乳杆菌

<220>

<221>尚未归类的特征

<222>(1)..(1426)

<223>成熟的2918 gtf

<400>9

Asp Thr Val Leu Pro Ser Glu Gln Arg Ala Thr Gln Thr Thr Gln Thr

1 5 1015

Thr Gln Thr Ser Glu Asp Thr Ser Ala Thr Lys Thr Pro Ala Ser Ala

202530

Ser Thr Ser Ser Ser Asp Asn Val Asp Thr Ser Asp Leu Pro Asp Ser

354045

Ala Ser Ala Val Val Asp Ser Ala Val Thr Ser Thr Ser Thr Ser Ala

505560

Ser Val Val Ser Asp Ser Val Ala Val Pro Asp Thr Gly Ser Gln Phe

65707580

Met Ser Ser Ser Ala Pro Ala Ser Ser Ala Phe Val Lys Pro Ser Leu

859095

Thr Ser Thr Thr Ser Gly Ala Ser Gly Ser Gln Ser Ser Ala Val Thr

100 105 110

Ser Ala Asn Asp Ser Ser Val Ala Thr Ser Ser Ser Ala Ser Ser Val

115 120 125

Thr Thr Ala Thr Ser Glu Ser Ala Val Val Ser Ser Ala Val Ser Asp

130 135 140

Gly Tyr His Asp Glu Gly Gly Asp Trp Val Tyr Tyr Arg Ala Gly Lys

145 150 155 160

Lys Leu Leu Gly Arg Gln Thr Ile Asp Thr Phe Ala Val Tyr Phe Asp

165 170 175

Ala Asp Gly Lys Gln Val Lys Gly Asp Trp Arg Glu Ser Asp Gly Lys

180 185 190

Arg Ala Tyr Tyr Asp Gly Gln Glu Gly Arg Ala Leu Thr Gln Thr Gln

195 200 205

Ala Val Asn Gly Val Ile Tyr Gly Phe Asn Gln Ser Gly Tyr Gln Ile

210 215 220

Lys Asn Asp Phe Gly Gln Thr Ala Asn Arg Asp Thr Tyr Tyr Phe Asp

225 230 235 240

Ala Gln Gly His Val Val Thr Gly Ile Gln Thr Ile Ala Asn Lys Val

245 250 255

Tyr Asp Phe Asp Glu Gln Gly Arg Met Leu Lys Gly Ile Ala Thr Ser

260 265 270

Val Asp Asp Lys Met Met Tyr Phe Asp Asp Gln Thr Gly Val Gly Gln

275 280 285

Pro Ala Asp His Pro Glu Phe Asn Pro Glu Thr Glu Pro Val Pro Asp

290 295 300

Asp Asn Ile Lys His Asn Ala Ala His Gly Thr Thr Pro Glu Asp Phe

305 310 315 320

Asp Ser Met Ala Asp Tyr Leu Thr Ala Asp Thr Trp Tyr Arg Pro Thr

325 330 335

Asp Ile Leu Glu Asn Gly Glu Thr Trp Arg Glu Ser Gln Pro Thr Glu

340 345 350

Phe Arg Pro Leu Leu Ala Thr Trp Trp Pro Thr Lys Gln Thr Gln Ala

355 360 365

Asp Tyr Val Asn Tyr Met Asn His Ala Leu Asp Met Ala Asn Ala Gly

370 375 380

Val Ser Ala Ala Asp Ser Glu Ala Thr Leu Thr Ala Ala Thr Asp Ala

385 390 395 400

Ile Gln Ala Val Val Glu His Gln Ile Thr Val Arg Gln Ser Thr Ala

405 410 415

Trp Leu Arg Glu Leu Met Ala Ala Phe Val Val Thr Gln Pro Gln Trp

420 425 430

Asn Lys Thr Ser Glu Asp Val Asn Asp Asp His Leu Gln Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Thr Phe Glu Asn Asn Gly Asp Thr Asp Ala Asn Ser Asp Tyr Arg

450 455 460

Leu Met Asn Arg Thr Pro Thr Asn Gln Thr Gly Glu Arg Leu Tyr His

465 470 475 480

Ile Asp Asp Ser Leu Gly Gly Tyr Glu Leu Leu Leu Ala Asn Asp Val

485 490 495

Asp Asn Ser Asn Pro Gln Val Gln Ala Glu Gln Leu Asn Trp Leu Tyr

500 505 510

Tyr Leu Met His Phe Gly Asp Ile Thr Ala Asp Asp Pro Asp Ala Asn

515 520 525

Phe Asp Ala Ile Arg Ile Asp Ala Val Asp Asn Val Asp Ala Asp Leu

530 535 540

Leu Gln Leu Ala Ala Gln Tyr Phe Arg Asp Ala Tyr Gly Met Ala Thr

545 550 555 560

Thr Asp Ala Thr Ser Asn Lys His Leu Ser Ile Leu Glu Asp Trp Ser

565 570 575

His Asn Asp Pro Ala Tyr Met Gln Ala His Gly Asn Asp Gln Leu Thr

580 585 590

Met Asp Asp Tyr Met His Thr Gln Leu Ile Trp Ser Leu Thr Lys Pro

595 600 605

Glu Ala Gln Arg Gly Thr Met Ala Arg Phe Met Asp Phe Tyr Leu Thr

610 615 620

Asn Arg Ala Asn Asp Asp Thr Glu Asn Thr Ala Gln Pro Ser Tyr Ser

625 630 635 640

Phe Val Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln Thr Val Ile Ala Glu Ile

645 650 655

Val Thr Lys Leu His Pro Glu Ala Gly Asn Gly Leu Met Pro Thr Glu

660 665 670

Glu Gln Met Ala Glu Ala Phe Lys Ile Tyr Asn Ala Asp Gln Lys Lys

675 680 685

Ala Val Lys Thr Tyr Thr His Tyr Asn Met Pro Ser Ala Tyr Ala Met

690 695 700

Leu Leu Thr Asn Lys Asp Val Ile Pro Arg Ile Tyr Tyr Gly Asp Leu

705 710 715 720

Tyr Thr Asp Asp Gly Gln Phe Met Ala Thr Lys Ser Pro Tyr Phe Asp

725 730 735

Ala Ile Ser Thr Met Leu Gln Ala Arg Thr Lys Tyr Val Ala Gly Gly

740 745 750

Gln Thr Met Ala Val Asp Gln His Asp Val Leu Thr Ser Val Arg Phe

755 760 765

Gly Lys Gly Ala Met Thr Ala Asn Asp Leu Gly Asp Ala Glu Thr Arg

770 775 780

Thr Glu Gly Val Gly Leu Ile Ile Ser Asn Asn Pro Lys Leu Gln Leu

785 790 795 800

Gly Gln Gln Asp Asn Val Val Leu His Met Gly Leu Ala His Ala Asn

805 810 815

Gln Ala Phe Arg Ala Val Val Leu Thr Thr Ala Thr Gly Leu Thr Ile

820 825 830

Tyr Asn Asp Asp Asp Ala Pro Ile Arg Tyr Thr Asp Asn Lys Gly Asp

835 840 845

Leu Ile Phe Thr Asn His Asp Val Tyr Gly Val Leu Asn Pro Gln Val

850 855 860

Ser Gly Phe Leu Ala Met Trp Val Pro Thr Gly Ala Pro Ala Asn Gln

865 870 875 880

Asp Ala Arg Ser Thr Ala Ser Thr Asn Met Ser Thr Asp Gly Ser Ala

885 890 895

Tyr His Ser Asn Ala Ala Leu Asp Ser Gln Val Ile Phe Glu Ser Phe

900 905 910

Ser Asn Phe Gln Ala Met Pro Thr Ser His Asp Thr Tyr Thr Asn Val

915 920 925

Val Leu Ala Asn His Ala Asp Gln Leu His Asp Trp Gly Ile Thr Ser

930 935 940

Val Gln Leu Ala Pro Gln Tyr Arg Ser Ser Thr Asp Gly Thr Phe Leu

945 950 955 960

Asp Ala Ile Ile Gln Asn Gly Tyr Ala Phe Thr Asp Arg Tyr Asp Leu

965 970 975

Gly Phe Gly Thr Pro Thr Lys Tyr Gly Asp Asp Thr Asp Leu Arg Asn

980 985 990

Val Ile Lys Ala Leu His Ala Asn Gly Met Gln Val Met Ala Asp Phe

995 10001005

Val Pro Asp Gln Leu Tyr Thr Leu Pro Gly Lys Glu Leu Val Gln

101010151020

Val Thr Arg Thr Asn Asn Met Gly Glu Pro Asp Thr His Ser Asp

102510301035

Ile Gln His Ile Leu Tyr Val Thr Ser Thr Arg Gly Gly Gly Asp

104010451050

Tyr Gln Lys Gln Tyr Gly Gly Glu Phe Leu Ala Arg Leu Arg Glu

105510601065

Arg Tyr Pro Asp Leu Phe Thr Thr Arg Gln Ile Ser Thr Gly Gln

107010751080

Thr Ile Asp Asp Ser Val Lys Ile Lys Glu Trp Ser Ala Lys Tyr

108510901095

Leu Asn Gly Thr Ala Ile Gln Gly Arg Gly Ala Gly Tyr Val Leu

110011051110

Arg Asp Asn Gly Thr Asn Ala Tyr Tyr Lys Val Thr Ala Asn Asp

111511201125

Gly Asn Val Asn Leu Pro Lys Gln Leu Leu Gly Gln Pro Val Met

113011351140

Thr Gly Phe Tyr His Glu Ala Asp Gly Tyr His Phe Glu Thr Leu

114511501155

Ser Gly Thr Ser Ala Lys Asp Ala Phe Ile Met Gly Asp Asp Gly

116011651170

Ala Leu Tyr Tyr Phe Asp Asp Gln Gly Val Met Val Thr Gly Lys

117511801185

Gln Arg Val His Gln Asp Gln Tyr Phe Phe Leu Pro Asn Gly Ile

119011951200

Ala Leu Thr Asp Ala Phe Val Gln Thr Ala Asp Gly Gln Arg Gln

120512101215

Tyr Tyr Asp Lys Thr Gly Arg Leu Val Ile Asn Gln Tyr Val Thr

122012251230

Asp His Gln Ala Asn Ala Phe Arg Val Asp Ala Asp Gly Asn Val

123512401245

Val Arg Asn Gln Ala Leu Thr Val Asp Gly His Glu Gln Tyr Phe

125012551260

Gly Thr Asn Gly Val Gln Ala Lys Ala Val Leu Ile Arg Thr Asp

126512701275

Asp Asn Gln Ala Arg Tyr Tyr Glu Ala Asn Ser Gly Asn Leu Val

128012851290

Lys Gln Gln Phe Ile Leu Asp Thr Asp Gly His Trp Leu Tyr Ala

129513001305

Asp Ala Ala Gly Asp Leu Ala Arg Gly Gln Ile Thr Ile Gly Gln

131013151320

Asp Thr Leu Tyr Phe Asp Asp Asn Asn His Gln Val Lys Asp Asp

132513301335

Phe Val Tyr Asp Thr Asn Gly Val His Tyr Phe Asn Gly Thr Thr

134013451350

Gly Ala Glu Ile Lys Gln Asp Tyr Ala Phe His Asp Gly Lys Trp

135513601365

Tyr Tyr Phe Asp Asp Leu Gly Arg Met Val Thr Gly Leu Gln Arg

137013751380

Ile Asn Gly Glu Tyr Arg Tyr Phe Asp Ala Asn Gly Val Gln Leu

138513901395

Lys Gly Gly Thr Val Thr Asp Pro Leu Thr His Gln Thr Tyr Thr

140014051410

Phe Asp Ala Lys Thr Gly Ala Gly Thr Leu Val Thr Ile

141514201425

<210>10

<211>4281

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>具有异源信号序列的2918 gtf

<400>10

gatacagtgc tgcctagcga gcaaagagca acacagacga cacaaacaac gcagacatca60

gaggatacga gcgcgacgaa gacaccggca agcgcatcaa cgtcaagcag cgataacgtg 120

gatacgtcag atcttccgga tagcgccagc gcagttgtcg attcagcggt tacatcaaca 180

agcacgtcag cctcagtggt gagcgatagc gttgcagtcc cggatacggg atcacaattt 240

atgtcatcat cagctcctgc gagcagcgcg tttgttaaac ctagccttac gtcaacgacg 300

tcaggagcga gcggctcaca gagctcagca gtgacaagcg ccaatgattc aagcgtcgct 360

acaagctcat cagcttcatc agttacgaca gcaacaagcg agtcagccgt tgtctcaagc 420

gcggtctcag acggctatca tgacgaagga ggagattggg tttactacag agcaggaaaa 480

aaactgcttg gaagacagac aattgatacg tttgctgttt actttgatgc tgacggaaaa 540

caagtgaaag gcgactggag agaatcagat ggaaagagag cgtattatga tggacaagaa 600

ggaagagccc ttacgcaaac gcaagccgtt aatggagtga tctatggatt caatcaatca 660

ggataccaga tcaaaaacga ttttggccag acagcgaaca gagatacata ctacttcgac 720

gcacaaggcc atgtggttac aggcatccaa acaatcgcga ataaagttta tgacttcgat 780

gaacaaggca gaatgcttaa aggaattgcc acatcagtcg atgacaagat gatgtatttt 840

gacgatcaaa caggcgtggg acaacctgca gatcaccctg agtttaaccc ggaaacagaa 900

ccggtgcctg acgataacat caagcataat gcagcccacg gcacaacacc tgaagatttt 960

gatagcatgg cggactatct gacagctgat acatggtata gacctacaga tattctggag1020

aatggagaaa catggagaga gagccaaccg acggaattta gaccgctgct ggcaacgtgg1080

tggcctacaa aacagacaca agcagattat gtgaactata tgaaccacgc acttgacatg1140

gctaatgctg gcgttagcgc tgcggattca gaggcaacac ttacagcggc tacggatgcc1200

attcaggctg ttgttgagca ccaaattacg gttagacaaa gcacggcctg gcttagagaa1260

cttatggcgg cttttgttgt tacacaacct caatggaata agacgagcga agatgtcaat1320

gatgatcacc ttcaaggagg cgcactgaca tttgagaata acggagacac agatgcaaat1380

agcgattata gacttatgaa tagaacaccg acaaatcaaa cgggcgagag actttatcat1440

attgatgact cactgggagg ctacgagctg cttcttgcaa acgatgtgga caactcaaac1500

ccgcaggttc aggcggaaca acttaactgg ctttactatc ttatgcattt cggagatatt1560

acagccgatg acccggatgc taactttgac gcgatcagaa ttgacgccgt tgataatgtc1620

gacgctgacc tgcttcagct tgctgcccaa tactttagag atgcatatgg aatggccaca1680

acagacgcca cgagcaataa acacctttca atccttgagg attggagcca taacgatcct1740

gcttatatgc aggcacatgg aaatgaccag cttacaatgg atgactacat gcacacacaa1800

ctgatttggt cactgacgaa accggaagca caaagaggaa cgatggcaag atttatggac1860

ttttatctta caaatagagc taacgatgat acagaaaaca cagcgcaacc ttcatattca1920

tttgttagag cacacgactc agaagtgcag acagttattg cagaaattgt tacgaaactt1980

cacccggagg caggcaacgg ccttatgcct acggaggaac agatggcaga ggcgtttaag2040

atctacaatg cagaccaaaa gaaagcggtg aaaacatata cacactataa catgccttca2100

gcctacgcta tgctgctgac aaataaggat gtgattccta gaatctacta cggcgatctt2160

tacacggacg acggccagtt catggcaaca aagtcaccgt atttcgatgc aatttcaaca2220

atgctgcaag caagaacaaa atatgttgca ggcggacaaa cgatggcggt tgaccaacat2280

gatgtcctga cgagcgtgag atttggcaaa ggcgcgatga cagcaaatga ccttggagac2340

gcggaaacga gaacagaggg cgtgggactg atcatcagca acaaccctaa gctgcaactg2400

ggacagcagg ataacgtggt ccttcatatg ggcctggcac acgcgaatca ggctttcaga2460

gcagtcgtgc ttacaacagc cacaggactg acgatctaca acgacgatga cgctcctatt2520

agatatacgg acaataaggg cgacctgatc tttacgaatc acgatgttta cggcgttctg2580

aacccgcagg ttagcggctt ccttgctatg tgggttccga cgggcgcacc tgccaatcaa2640

gacgcaagaa gcacggcttc aacgaatatg tcaacggatg gatcagctta tcattcaaac2700

gcagctctgg attcacaagt tatctttgag tcatttagca actttcaagc aatgccgaca2760

tcacacgata catacacgaa tgttgtcctt gcaaaccatg cagaccaact tcacgattgg2820

ggaattacgt cagtgcaact tgcaccgcaa tatagatcaa gcacagacgg aacgtttctg2880

gatgcaatta ttcaaaatgg atatgctttt acagatagat atgatcttgg ctttggaaca2940

cctacgaagt acggcgacga cacggacctg agaaatgtga tcaaagccct tcatgcaaac3000

ggcatgcaag tcatggcaga ttttgttcct gatcaactgt acacacttcc gggcaaagaa3060

ctggttcaag tgacaagaac aaataacatg ggcgaaccgg atacacacag cgatattcaa3120

cacatcctgt atgttacatc aacaagagga ggcggagact atcagaaaca atatggcggc3180

gaatttctgg ctagacttag agaaagatac ccggaccttt ttacgacgag acaaattagc3240

acaggccaaa caattgacga cagcgttaag attaaggagt ggtcagcgaa atatctgaac3300

ggcacagcaa ttcaaggcag aggcgctggc tatgttctga gagataatgg aacgaatgca3360

tactataaag ttacggccaa tgatggaaac gtcaatcttc ctaagcaact gctgggccag3420

ccggttatga caggcttcta tcacgaagca gacggctacc acttcgagac actgtcaggc3480

acatcagcca aggacgcatt tatcatggga gatgatggcg cactgtacta tttcgatgac3540

caaggcgtga tggttacagg aaaacaaaga gttcatcagg atcaatactt ttttctgccg3600

aatggcatcg ctctgacgga cgctttcgtt caaacagctg atggacagag acagtactac3660

gataaaacag gcagactggt tattaaccaa tatgtgacag accatcaggc gaatgccttc3720

agagttgatg cggacggaaa tgtcgttaga aaccaagcac ttacagtgga cggacatgaa3780

cagtatttcg gcacgaacgg agtgcaggca aaagcagttc tgattagaac ggacgataat3840

caagcgagat attatgaggc aaattcaggc aatctggtga aacaacaatt tatccttgac3900

acagatggcc actggctgta cgcagacgca gcaggcgatc ttgctagagg ccagattaca3960

atcggccagg atacgctgta ttttgatgat aacaatcacc aagttaaaga tgacttcgtt4020

tatgatacga atggagtcca ttactttaat ggcacaacag gagcagagat taaacaagat4080

tacgcattcc atgacggcaa atggtactac ttcgacgacc tgggaagaat ggtcacggga4140

cttcaaagaa ttaatggaga gtatagatac tttgacgcga acggcgtcca actgaaagga4200

ggcacagtga cggatcctct gacacatcaa acatatacat ttgatgcaaa aacgggagcc4260

ggcacgcttg ttacaatttg a4281

<210>11

<211>4521

<212>DNA

<213>表兄链球菌（Streptococcus sobrinus）

<400>11

atggaaagaa aattgcatta caaattacac aaggtaaaaa aacagtgggt aacgattgcc60

gttgcctctg ctggtttggc tagcattgtt ggtgctggtt cattaagcca aactgtttct 120

gccgatgact tagccaagga acaagctgcg gctagtcaac aaaaggcagc agccaatcag 180

aatgaggacg aagtggcttc tgatgcagct gatactgcta gtgcaaaagc gacttccgaa 240

aaagaagttg tccaatcttc tgatacaaat tcagaaacta accaagttga aactaaagat 300

caagctagcg ctaaggaaag tgctgacgca gtagccaagc aagcaccaca agctggccct 360

gcaaccacta gccaggttgc aagctcagaa agcagctctg tagcgcctag caaggaagct 420

gataaggcag ctgctggatc agttagccaa aatgaagaag aagcagccct atcgcttgcc 480

aatattaaaa agattgatgg taagtattac tatgttatgg cagacggttc ttataagaag 540

aactttgcca ttacagttga tggtcaaatg ctttactttg atgccaaaac aggtgccctg 600

tcttcaacct ctacctattc tttcagtcaa ggtttgacac caattgtttc tgatttctca 660

gtcaacaaca aggctttcga ttcttctgaa aagagttttg aattggttga tggctatttg 720

acagctgaaa gctggtaccg tcctgctaag attcttgaaa atggtaaaac ttgggttgat 780

tctaaagaaa ctgacctacg cccagttctg atgagctggt ggccaaacaa ggatacgcaa 840

gttgcctacc ttaactacat gagcaaggca cttggtggca aggaagaatt cacaactgaa 900

acctcccaat tgaccttgaa tacagccgct gagttgattc aagctaaaat tgaagctcgc 960

gtttctaaag aacaaggaac aaagtggttg cgtgaagcta tggcagcctt cgttgctacc1020

caatctcgtt ggaataagga cagcgaacaa tacgataagg ctgaccacct gcaaggcgga1080

gccctgctct ataccaataa caacttgaca gagtgggcaa attcaaactg gcgcctgctt1140

aaccgtaccc caactcgtca agatggtaaa acccattact ctaaggctga caaatacggt1200

ggttatgaat tcctcttggc caacgacgtg gataactcta acccagtcgt tcaagcggaa1260

atgctcaacc aaatccacta cctcatgaac tggggtgaaa ttgtgatggg tgataagaat1320

gccaactttg atggtattcg tgtcgatgcc gtggataacg tcaatgcaga tactctgcaa1380

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<210>12

<211>1506

<212>PRT

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<400>12

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<221>尚未归类的特征

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<212>DNA

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<220>

<223>具有异源信号序列的2920 gtf

<400>14

gatgacctgg cgaaggaaca agcagccgcc tcacagcaaa aagcagcggc taaccagaat60

gaagacgaag ttgcatcaga tgcagccgat acagctagcg ccaaagccac gtcagagaaa 120

gaagtggttc agtcaagcga tacaaactca gaaacaaatc aggttgagac gaaagaccaa 180

gcatcagcta aggagagcgc agacgcagtc gcgaaacaag ctcctcaagc aggaccggca 240

acaacgtcac aggtcgccag ctcagagagc agcagcgtgg caccgagcaa ggaggctgac 300

aaggctgccg caggctcagt ctcacagaac gaggaggagg cagccctttc acttgccaac 360

atcaagaaga ttgacggaaa atactattac gttatggccg atggaagcta caagaaaaac 420

tttgcgatta cggttgatgg acagatgctt tactttgacg caaaaacagg cgcactttca 480

tcaacgagca cgtatagctt ttcacaaggc ctgacgccga ttgtctcaga ctttagcgtg 540

aacaataagg ctttcgattc atcagaaaag tcatttgaac ttgtggacgg ctacctgaca 600

gccgaaagct ggtacagacc ggccaaaatc ctggaaaacg gaaagacgtg ggtcgactca 660

aaagaaacag atcttagacc tgtcctgatg tcatggtggc cgaacaaaga cacacaagtc 720

gcatatctga attacatgtc aaaagctctg ggaggcaaag aagagtttac gacagagaca 780

tcacaactga cactgaatac agcggcagaa cttatccagg cgaagatcga agctagagtg 840

agcaaagagc agggcacaaa atggctgaga gaagcaatgg cagcatttgt ggcgacgcaa 900

tcaagatgga ataaagattc agagcaatat gataaagcag atcatcttca aggcggagct 960

ctgctgtaca caaacaacaa ccttacagaa tgggctaatt caaattggag actgcttaat1020

agaacaccga cgagacagga tggaaaaaca cattactcaa aggcagataa gtatggcgga1080

tatgagtttc tgctggctaa tgatgtcgat aactcaaatc cggttgtcca agctgaaatg1140

cttaaccaaa ttcattatct tatgaattgg ggcgaaattg ttatgggcga taagaatgct1200

aacttcgacg gaatcagagt tgatgcagtt gacaacgtta atgcagatac actgcagctt1260

tatacaaatt actttaatag cgtttatgga gtcaacaagt cagaagcaca ggcccttgca1320

catatttcag tccttgaggc atggtcatat aatgataacg actataatca ggatacgaat1380

ggcgcagcac ttgcgatgga taatggcctg agattctcac ttctgtatac gcttacaaga1440

ccgattaatg aaagaacgcc tggcatgagc acactgatta agagcgaata cggactgacg1500

gatagaacga aaaacgacaa gtacggcgac acgcaaccta gctatgtctt cgttagagca1560

catgatagcg aggttcaaac ggttattgcc caaattatca aggagaaaat cgatcctaca1620

acagatggct ttacatttac gctggatcaa ctgaagcaag ccttcgaaat ctataacaag1680

gacatgaact cagtgaataa gcactacacg cattacaata ttcctgctgc atacgctgtt1740

atgctgagca acatggaaag cgtgacaaga gtgtactacg gcgacctttt tacggatgac1800

ggccagtata tggcaagcaa gtcaccttat tatgatgcta tcaatacact tcttagagcg1860

agaattagat acgccgctgg aggacaaatc atggaacata attcatataa gccgagcgcc1920

gcaatgaaag ctgcacaccc ggacgccggc aacgtcctgg gcaattcaga ggtcctggtc1980

tcagtgagat tcggccaaga cgtgatgtca gcagatgata tgacaggcgg aaaacttgcg2040

aaaacatcag gcatgtttac gcttattagc aataacccgg aactggaact tgacgttaat2100

gaggagatca aagtgaatgt gggcaaaatc catgctggac aagcttatag accgcttctg2160

cttacaacag ataagggact tcagaagtac cttaatgatt cagacacaaa actgacgaag2220

atcgctgaca aagacggatt cattacattc aaaggatcag aaattaaggg ctataaacaa2280

gttgaggtta atggctacct ttcagtttgg gtcccggttg gcgctaaagc agaccaagat2340

attagagttg ccccgagcac agccgcaaaa ggagaaaagg ctaaaacgta tacagcatca2400

caggctctgg aatcacagct tatctatgaa ggcttctcaa actttcaaga ctttgttcaa2460

aaagatagcc aatatacgaa taagaaaatt gcagagaaca cagacctgtt taaagcatgg2520

ggagttacgt cattcgagat ggctcctcaa tatgttagcg caacggatgg cacattcctg2580

gattcaatca ttgaaaacgg ctatgcattc acagacagat acgaccttgc tatgagcaag2640

aataacaaat atggatcaaa agaggatctg gctaacgcac ttaaggcact tcacgcagct2700

ggcattcaag ctattgcgga ttgggtgcct gaccaaatct accaactgcc gggcaaagag2760

gttgtgacag ccagcagagt ggataactat ggcagagtta aggtggacca gccgcttgtc2820

gagaagctgt atctggcgaa tacgaaatca tcaggaaaag atttccaggc taagtacggc2880

ggagagttcc ttgcggagct gcagaagaaa tacccggaga tgttcacgac aaaaatgatc2940

agcacaggaa agacaatcga cccgtcagtg aagctgaaag agtggtcagc caagtacttc3000

aatggaacga acgtgctgga tagaggcaca gactatattc ttagcgatga gggaacggga3060

aagtatttca cagtcaacga gaagggcgat ttcctgcctg cgagccttac aggcaacaag3120

gatgccaaaa caggctttta caatgacgga aaaggaattg tttactacac aacagctgga3180

aacaaggcta gaagcgcgtt cgtgacagag gctggcaaca catactattt cgactatacg3240

ggccacatgg tgacaggacc gaatgttatc aacacgaagt tctattactt tcttcctaac3300

ggcatcatgc tgaaggacgc aattaagcaa gatgaaaagg gaagaagcgt ttattacggc3360

aagacaggag ttatgtacaa gggcggcaga gataacgaat ggtttgcaat gacagactca3420

aagggacaga tgagatttag acatttcgat agatatggct tcatgtcaat tggacttgtt3480

acaatcaacc agaatgttca atactatgat gagaatggct ttcaggtgaa aggcgaattt3540

gtcacagatc aggatggaca aacgagatac ttcgaccaag gctcaggcaa tcttgttaaa3600

ggacagtttc ttaacaaaga tggaaattgg tattatctgg atgatcaagg actggttgct3660

aaaggagctc aaacgattaa aggccaaaaa ctgtattttg atacgaagac gggcgtgcag3720

gttaagggag attttgtgac ggacaaggac ggcaatacat tcttctatag cggagatacg3780

ggagatctga ttctgggaca attcttttca acgggcaata atgcatggtt ttatgcggac3840

gagaacggac acgtcgccaa aggcgcaaaa acaatcagag gacagaagct ttacttcgat3900

acaaaaacgg gacaacaagc caagggcaga ttcatcagag acgacaaggg agtcagatac3960

tacgatgcag acacgggcac actggttaca aacgcatttc tggagacgaa ggcgggaagc4020

aatcagtggt actacatggg cgctgatgga tatgccgtga agggaaacca gacgatcaag4080

aaccagcata tgtactttga cgctgaaaca ggacagcaag ctaagggaat catcgttacg4140

gacgcgaacg gcagaaaata cttctatgac acgtttacgg gctcaagagt tgttaatcaa4200

ttcgttcttg tgaacggaaa ctggtacttt tttggatacg atggagcagc agttacagga4260

ttccacgata tcaagggcca acatctttat ttcaactcag acggaacgca agcgaaaggc4320

acgacagtta agatcggaaa tagaagctac acattcgacg cacacacagg cgagcttaca4380

tcagtccatt acggatga4398

<210>15

<211>4360

<212>DNA

<213>汗毛链球菌（Streptococcus downei）

<400>15

atgattttca tggaaagaaa attacattac aaattacaca aggtcaagaa gcagtgggtg60

accatcgctg tcgcctctgc tggtttggcc agcgtagtcg gtgctggctc cttgagccaa 120

accgtttctg ctgacgatct tgctaaggac caagcggcag cgactgagca aaaggcatca 180

gccaatcagg aaaaagaaga agtagtttct gatcaggttg acacgaccag tgccaaagca 240

acctctgaga aggaagttgc tcaagcttcg gacactagtt cagaagccaa ccaagttcca 300

gcccaagaag aaaagaaggc tgaaaaggca gctgctcctg cgacagcgac accagctcca 360

cagactggtg caaaaaacag ccaaacagct agttcagaag caccagcgac aagcaatcaa 420

gcaagtgaga cagctgaaac tggtgcctta agccaaaaag aagaagcagc agttctttcg 480

cttgataata tcaagaagat tgatggaaag tattactatg ttatggcaga cggctcttat 540

aagaagaact ttgccattac tgttgatggg caaatgcttt actttgatgc caaaacaggt 600

gccctgtctt caacctctac ctattctttc agtcaaggtt tgacaccaat tgtttctgat 660

ttctcagtca acaataaggc tttcgattct tctgaaaaga gttttgaact ggtagatggt 720

tacctgacag ctgaaagctg gtaccgtcct gctaagattc ttgaaaatgg caagacctgg 780

gtggactcca aagaaactga ccttcgtcca gttctcatga gctggtggcc aaacaaggat 840

acccaagttg cctacctcaa ctatatgtcc aaggcgcttg gtggcaagga agagtttaca 900

acagaaacct ctcaaacaac cttgaataca gctgctgagt tgattcaaac caagattgaa 960

gctcgtattt ctaaggaaca agggaccaaa tggcttcgtg aagctatggc tgcttttgta1020

gcgactcagt ctcgttggag ttacgctagt gagcaatttg ataaaaacga ccacttgcaa1080

ggtggtgctc tcctttatac taataataaa ttgacccaat gggcagattc taactatcgt1140

ttgcttaacc gcacccctac ccgacaggat ggcaagcctc attattctaa agctgacgaa1200

tacggtggtt acgaattcct cttggctaat gacgtggata actccaaccc agtcgttcaa1260

gcggaaatgc tcaaccaaat ccactacctg atgaactggg gctctattgt catgaatgac1320

aaggatgcca actttgatgg tatccgtgtg gatgcggtgg ataatgtcaa tgcggatacc1380

ctgcaactct acactaacta ttttaattcg gtttatggtg tcaacaagtc agaagcccaa1440

gccctagctc acatttcagt attagaagct tggtcttata atgataatga ctataaccaa1500

gataccaatg gtgcggcctt ggctatggac aatggtctac gcttctccct gctttatacc1560

ctgacacgtc cacttaatga gcggactcct ggtatgtcaa ccttgattaa gtcacaatat1620

ggtttgactg accggaccaa ggatgacaag tatggcgata ctcagccatc ctatgtcttt1680

gttcgggctc atgactcaga agtgcaaacc gttattgcgc aaatcatcaa gaaaaaaatt1740

gatccaacga ctgatggctt taccttcacc ttggaccaat tgaaacaggc ctttgacatc1800

tacaataagg atatgaatag tgttgataag cactataccc actacaatat tccagcagcc1860

tacgctgtta tgttgtccaa catggaatca gtaactcggg tttactatgg agacctcttt1920

accgatgatg gtcaatacat ggaaaccaag tctccttact acgatgctat caataccctc1980

cttagggccc ggattcgtta cgccgctggt ggtcaaacca tggaacacaa ttcctataag2040

gcatcagcag ctatgaaagc taaaaatcct gatagtggta gtgtgcttgg caacagcgaa2100

gttcttgtct ctgttcgttt tggtcaagat gtgatgtctg ctgacgatat gactggtggt2160

aagctggcta aaacctctgg tatgttcagc ctgatttcca acaaccctga attagaattg2220

gatgccaatg aagaaatcag ggtcaatgtt ggtaagattc atgctggtca aacctaccgt2280

ccattgcttt tgacaaccga taagggtctg caaaagtacc tcaatgattc tgatactaag2340

ctgaccaagg ttgccgataa ggatggttat atcaccttca agggcagtga aatcaagggc2400

tacaagcagg ttgaagtcaa tggttacctt tctgtttggg taccagtcgg cgcaaaggca2460

gatcaagata ttcgtgtggc agcttcaact aaggttaatg gtaaggatga caagacttat2520

acagctagtc aagccttaga atcacaatta atctacgaag gtttctcaaa cttccaagat2580

ttcgttaaga aggactccca atataccaat aagaagattg ctgaaaatac cgacctcttt2640

aaggcctggg gcgtgacctc atttgaaatg gcgccacaat acgtttccgc aactgatggt2700

accttcctgg attctattat tgaaaatggt tatgccttca ccgaccgtta tgaccttgcc2760

atgagcaaga acaacaagta cggttctaag gaagacttgg ccaatgctct taaggccctc2820

cacgctgctg gtatccaagc tatcgcagac tgggttccag accaaattta ccaactccca2880

ggtaaggaag tggtaactgc aagtcgtgtt gataactatg gccgtgttaa gattgaccaa2940

ccattggttg aaaaacttta cttggccaat accaagagct caggaaaaga cttccaggct3000

aaatatggtg gtgaattctt agaagacctg caaaagcaat accctgaaat gtttaccgct3060

aagatgattt caaccggtaa aaccattgat ccatctgtca aattgaagga atggtcagct3120

aagtacttga acggaacaaa tgttctgggt cgtggtacag actatgtcct cagcgatgaa3180

ggaactggca aatacttcac tgttaatgaa aagggtgact tcctaccagc agccctgaca3240

ggtgataggg aagccaagac tggtttctac aatgatggta agggaatgac ctactataca3300

acggctggta acaaggctaa atctgccttt gtaaccgtag ctggaaatac ctattacttt3360

gactatactg gttatatggt aacaggacca aacacgatta acagcaaatt ctattacttc3420

ctgccaaatg gggtaatgct caaggatgct attaagcaag atgagttggg ccgttcggtt3480

tactatggta aaactggtac catgtacaag gcgacagata aatctcaatg gtttgccatg3540

accgactcta agggtcaaca acgcttccgt cactttgacc gcttcggtat catgtctgta3600

ggactggtta ccatcaatgg tagtgttcaa tattacgatg aagaaggctt ccaagttaag3660

ggcgaatttg tcactgataa ggatggtcaa acccgttact ttgacgaagg ttctggtaat3720

ctggttaagg accgcttcct caataaggat ggcaagtggt actatcttga tgataaaggc3780

ttgctggtca agggggctca aaccattaag ggtcaaaaac tctactttga caccaagacc3840

ggtgcccaag tcaagggtga ctttgttgcc gacaaggatg gcaacctgac cttctatagt3900

ggtgatagtg gtcaaatggt tcaaagtgat ttcttctcaa caggaaataa tgcttggttc3960

tatgccgatg aaaatggtca tgtcgctaag ggagctaaga ctatcagagg tcagaagctc4020

tactttgata caaaaacagg tcagcaagct aagggacgct ttatccgtga tgacaagggg4080

gttcgttact atgatgctga cacaggtgcc ttggtaacca acgctttcct tgaaactaag4140

gctggttcta accaatggta ttacatggga gcagatggtt atgctgtcaa ggggaaccag4200

accataaaaa atcagcacat gtattttgat gctgaaactg gccaacaagc taagggaatt4260

atagtgacag atgccaatgg tcgcaagtat ttctatgata cttttactgg cagtcgtgtt4320

gtaaaccaat ttgttttggt taatggaaat tggtatttct4360

<210>16

<211>1453

<212>PRT

<213>汗毛链球菌

<400>16

Met Ile Phe Met Glu Arg Lys Leu His Tyr Lys Leu His Lys Val Lys

1 5 1015

Lys Gln Trp Val Thr Ile Ala Val Ala Ser Ala Gly Leu Ala Ser Val

202530

Val Gly Ala Gly Ser Leu Ser Gln Thr Val Ser Ala Asp Asp Leu Ala

354045

Lys Asp Gln Ala Ala Ala Thr Glu Gln Lys Ala Ser Ala Asn Gln Glu

505560

Lys Glu Glu Val Val Ser Asp Gln Val Asp Thr Thr Ser Ala Lys Ala

65707580

Thr Ser Glu Lys Glu Val Ala Gln Ala Ser Asp Thr Ser Ser Glu Ala

859095

Asn Gln Val Pro Ala Gln Glu Glu Lys Lys Ala Glu Lys Ala Ala Ala

100 105 110

Pro Ala Thr Ala Thr Pro Ala Pro Gln Thr Gly Ala Lys Asn Ser Gln

115 120 125

Thr Ala Ser Ser Glu Ala Pro Ala Thr Ser Asn Gln Ala Ser Glu Thr

130 135 140

Ala Glu Thr Gly Ala Leu Ser Gln Lys Glu Glu Ala Ala Val Leu Ser

145 150 155 160

Leu Asp Asn Ile Lys Lys Ile Asp Gly Lys Tyr Tyr Tyr Val Met Ala

165 170 175

Asp Gly Ser Tyr Lys Lys Asn Phe Ala Ile Thr Val Asp Gly Gln Met

180 185 190

Leu Tyr Phe Asp Ala Lys Thr Gly Ala Leu Ser Ser Thr Ser Thr Tyr

195 200 205

Ser Phe Ser Gln Gly Leu Thr Pro Ile Val Ser Asp Phe Ser Val Asn

210 215 220

Asn Lys Ala Phe Asp Ser Ser Glu Lys Ser Phe Glu Leu Val Asp Gly

225 230 235 240

Tyr Leu Thr Ala Glu Ser Trp Tyr Arg Pro Ala Lys Ile Leu Glu Asn

245 250 255

Gly Lys Thr Trp Val Asp Ser Lys Glu Thr Asp Leu Arg Pro Val Leu

260 265 270

Met Ser Trp Trp Pro Asn Lys Asp Thr Gln Val Ala Tyr Leu Asn Tyr

275 280 285

Met Ser Lys Ala Leu Gly Gly Lys Glu Glu Phe Thr Thr Glu Thr Ser

290 295 300

Gln Thr Thr Leu Asn Thr Ala Ala Glu Leu Ile Gln Thr Lys Ile Glu

305 310 315 320

Ala Arg Ile Ser Lys Glu Gln Gly Thr Lys Trp Leu Arg Glu Ala Met

325 330 335

Ala Ala Phe Val Ala Thr Gln Ser Arg Trp Ser Tyr Ala Ser Glu Gln

340 345 350

Phe Asp Lys Asn Asp His Leu Gln Gly Gly Ala Leu Leu Tyr Thr Asn

355 360 365

Asn Lys Leu Thr Gln Trp Ala Asp Ser Asn Tyr Arg Leu Leu Asn Arg

370 375 380

Thr Pro Thr Arg Gln Asp Gly Lys Pro His Tyr Ser Lys Ala Asp Glu

385 390 395 400

Tyr Gly Gly Tyr Glu Phe Leu Leu Ala Asn Asp Val Asp Asn Ser Asn

405 410 415

Pro Val Val Gln Ala Glu Met Leu Asn Gln Ile His Tyr Leu Met Asn

420 425 430

Trp Gly Ser Ile Val Met Asn Asp Lys Asp Ala Asn Phe Asp Gly Ile

435 440 445

Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asn Ala Asp Thr Leu Gln Leu Tyr

450 455 460

Thr Asn Tyr Phe Asn Ser Val Tyr Gly Val Asn Lys Ser Glu Ala Gln

465 470 475 480

Ala Leu Ala His Ile Ser Val Leu Glu Ala Trp Ser Tyr Asn Asp Asn

485 490 495

Asp Tyr Asn Gln Asp Thr Asn Gly Ala Ala Leu Ala Met Asp Asn Gly

500 505 510

Leu Arg Phe Ser Leu Leu Tyr Thr Leu Thr Arg Pro Leu Asn Glu Arg

515 520 525

Thr Pro Gly Met Ser Thr Leu Ile Lys Ser Gln Tyr Gly Leu Thr Asp

530 535 540

Arg Thr Lys Asp Asp Lys Tyr Gly Asp Thr Gln Pro Ser Tyr Val Phe

545 550 555 560

Val Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln Thr Val Ile Ala Gln Ile Ile

565 570 575

Lys Lys Lys Ile Asp Pro Thr Thr Asp Gly Phe Thr Phe Thr Leu Asp

580 585 590

Gln Leu Lys Gln Ala Phe Asp Ile Tyr Asn Lys Asp Met Asn Ser Val

595 600 605

Asp Lys His Tyr Thr His Tyr Asn Ile Pro Ala Ala Tyr Ala Val Met

610 615 620

Leu Ser Asn Met Glu Ser Val Thr Arg Val Tyr Tyr Gly Asp Leu Phe

625 630 635 640

Thr Asp Asp Gly Gln Tyr Met Glu Thr Lys Ser Pro Tyr Tyr Asp Ala

645 650 655

Ile Asn Thr Leu Leu Arg Ala Arg Ile Arg Tyr Ala Ala Gly Gly Gln

660 665 670

Thr Met Glu His Asn Ser Tyr Lys Ala Ser Ala Ala Met Lys Ala Lys

675 680 685

Asn Pro Asp Ser Gly Ser Val Leu Gly Asn Ser Glu Val Leu Val Ser

690 695 700

Val Arg Phe Gly Gln Asp Val Met Ser Ala Asp Asp Met Thr Gly Gly

705 710 715 720

Lys Leu Ala Lys Thr Ser Gly Met Phe Ser Leu Ile Ser Asn Asn Pro

725 730 735

Glu Leu Glu Leu Asp Ala Asn Glu Glu Ile Arg Val Asn Val Gly Lys

740 745 750

Ile His Ala Gly Gln Thr Tyr Arg Pro Leu Leu Leu Thr Thr Asp Lys

755 760 765

Gly Leu Gln Lys Tyr Leu Asn Asp Ser Asp Thr Lys Leu Thr Lys Val

770 775 780

Ala Asp Lys Asp Gly Tyr Ile Thr Phe Lys Gly Ser Glu Ile Lys Gly

785 790 795 800

Tyr Lys Gln Val Glu Val Asn Gly Tyr Leu Ser Val Trp Val Pro Val

805 810 815

Gly Ala Lys Ala Asp Gln Asp Ile Arg Val Ala Ala Ser Thr Lys Val

820 825 830

Asn Gly Lys Asp Asp Lys Thr Tyr Thr Ala Ser Gln Ala Leu Glu Ser

835 840 845

Gln Leu Ile Tyr Glu Gly Phe Ser Asn Phe Gln Asp Phe Val Lys Lys

850 855 860

Asp Ser Gln Tyr Thr Asn Lys Lys Ile Ala Glu Asn Thr Asp Leu Phe

865 870 875 880

Lys Ala Trp Gly Val Thr Ser Phe Glu Met Ala Pro Gln Tyr Val Ser

885 890 895

Ala Thr Asp Gly Thr Phe Leu Asp Ser Ile Ile Glu Asn Gly Tyr Ala

900 905 910

Phe Thr Asp Arg Tyr Asp Leu Ala Met Ser Lys Asn Asn Lys Tyr Gly

915 920 925

Ser Lys Glu Asp Leu Ala Asn Ala Leu Lys Ala Leu His Ala Ala Gly

930 935 940

Ile Gln Ala Ile Ala Asp Trp Val Pro Asp Gln Ile Tyr Gln Leu Pro

945 950 955 960

Gly Lys Glu Val Val Thr Ala Ser Arg Val Asp Asn Tyr Gly Arg Val

965 970 975

Lys Ile Asp Gln Pro Leu Val Glu Lys Leu Tyr Leu Ala Asn Thr Lys

980 985 990

Ser Ser Gly Lys Asp Phe Gln Ala Lys Tyr Gly Gly Glu Phe Leu Glu

995 10001005

Asp Leu Gln Lys Gln Tyr Pro Glu Met Phe Thr Ala Lys Met Ile

101010151020

Ser Thr Gly Lys Thr Ile Asp Pro Ser Val Lys Leu Lys Glu Trp

102510301035

Ser Ala Lys Tyr Leu Asn Gly Thr Asn Val Leu Gly Arg Gly Thr

104010451050

Asp Tyr Val Leu Ser Asp Glu Gly Thr Gly Lys Tyr Phe Thr Val

105510601065

Asn Glu Lys Gly Asp Phe Leu Pro Ala Ala Leu Thr Gly Asp Arg

107010751080

Glu Ala Lys Thr Gly Phe Tyr Asn Asp Gly Lys Gly Met Thr Tyr

108510901095

Tyr Thr Thr Ala Gly Asn Lys Ala Lys Ser Ala Phe Val Thr Val

110011051110

Ala Gly Asn Thr Tyr Tyr Phe Asp Tyr Thr Gly Tyr Met Val Thr

111511201125

Gly Pro Asn Thr Ile Asn Ser Lys Phe Tyr Tyr Phe Leu Pro Asn

113011351140

Gly Val Met Leu Lys Asp Ala Ile Lys Gln Asp Glu Leu Gly Arg

114511501155

Ser Val Tyr Tyr Gly Lys Thr Gly Thr Met Tyr Lys Ala Thr Asp

116011651170

Lys Ser Gln Trp Phe Ala Met Thr Asp Ser Lys Gly Gln Gln Arg

117511801185

Phe Arg His Phe Asp Arg Phe Gly Ile Met Ser Val Gly Leu Val

119011951200

Thr Ile Asn Gly Ser Val Gln Tyr Tyr Asp Glu Glu Gly Phe Gln

120512101215

Val Lys Gly Glu Phe Val Thr Asp Lys Asp Gly Gln Thr Arg Tyr

122012251230

Phe Asp Glu Gly Ser Gly Asn Leu Val Lys Asp Arg Phe Leu Asn

123512401245

Lys Asp Gly Lys Trp Tyr Tyr Leu Asp Asp Lys Gly Leu Leu Val

125012551260

Lys Gly Ala Gln Thr Ile Lys Gly Gln Lys Leu Tyr Phe Asp Thr

126512701275

Lys Thr Gly Ala Gln Val Lys Gly Asp Phe Val Ala Asp Lys Asp

128012851290

Gly Asn Leu Thr Phe Tyr Ser Gly Asp Ser Gly Gln Met Val Gln

129513001305

Ser Asp Phe Phe Ser Thr Gly Asn Asn Ala Trp Phe Tyr Ala Asp

131013151320

Glu Asn Gly His Val Ala Lys Gly Ala Lys Thr Ile Arg Gly Gln

132513301335

Lys Leu Tyr Phe Asp Thr Lys Thr Gly Gln Gln Ala Lys Gly Arg

134013451350

Phe Ile Arg Asp Asp Lys Gly Val Arg Tyr Tyr Asp Ala Asp Thr

135513601365

Gly Ala Leu Val Thr Asn Ala Phe Leu Glu Thr Lys Ala Gly Ser

137013751380

Asn Gln Trp Tyr Tyr Met Gly Ala Asp Gly Tyr Ala Val Lys Gly

138513901395

Asn Gln Thr Ile Lys Asn Gln His Met Tyr Phe Asp Ala Glu Thr

140014051410

Gly Gln Gln Ala Lys Gly Ile Ile Val Thr Asp Ala Asn Gly Arg

141514201425

Lys Tyr Phe Tyr Asp Thr Phe Thr Gly Ser Arg Val Val Asn Gln

143014351440

Phe Val Leu Val Asn Gly Asn Trp Tyr Phe

14451450

<210>17

<211>1409

<212>PRT

<213>汗毛链球菌

<220>

<221>尚未归类的特征

<222>(1)..(1409)

<223>成熟的2921 gtf

<400>17

Asp Asp Leu Ala Lys Asp Gln Ala Ala Ala Thr Glu Gln Lys Ala Ser

1 5 1015

Ala Asn Gln Glu Lys Glu Glu Val Val Ser Asp Gln Val Asp Thr Thr

202530

Ser Ala Lys Ala Thr Ser Glu Lys Glu Val Ala Gln Ala Ser Asp Thr

354045

Ser Ser Glu Ala Asn Gln Val Pro Ala Gln Glu Glu Lys Lys Ala Glu

505560

Lys Ala Ala Ala Pro Ala Thr Ala Thr Pro Ala Pro Gln Thr Gly Ala

65707580

Lys Asn Ser Gln Thr Ala Ser Ser Glu Ala Pro Ala Thr Ser Asn Gln

859095

Ala Ser Glu Thr Ala Glu Thr Gly Ala Leu Ser Gln Lys Glu Glu Ala

100 105 110

Ala Val Leu Ser Leu Asp Asn Ile Lys Lys Ile Asp Gly Lys Tyr Tyr

115 120 125

Tyr Val Met Ala Asp Gly Ser Tyr Lys Lys Asn Phe Ala Ile Thr Val

130 135 140

Asp Gly Gln Met Leu Tyr Phe Asp Ala Lys Thr Gly Ala Leu Ser Ser

145 150 155 160

Thr Ser Thr Tyr Ser Phe Ser Gln Gly Leu Thr Pro Ile Val Ser Asp

165 170 175

Phe Ser Val Asn Asn Lys Ala Phe Asp Ser Ser Glu Lys Ser Phe Glu

180 185 190

Leu Val Asp Gly Tyr Leu Thr Ala Glu Ser Trp Tyr Arg Pro Ala Lys

195 200 205

Ile Leu Glu Asn Gly Lys Thr Trp Val Asp Ser Lys Glu Thr Asp Leu

210 215 220

Arg Pro Val Leu Met Ser Trp Trp Pro Asn Lys Asp Thr Gln Val Ala

225 230 235 240

Tyr Leu Asn Tyr Met Ser Lys Ala Leu Gly Gly Lys Glu Glu Phe Thr

245 250 255

Thr Glu Thr Ser Gln Thr Thr Leu Asn Thr Ala Ala Glu Leu Ile Gln

260 265 270

Thr Lys Ile Glu Ala Arg Ile Ser Lys Glu Gln Gly Thr Lys Trp Leu

275 280 285

Arg Glu Ala Met Ala Ala Phe Val Ala Thr Gln Ser Arg Trp Ser Tyr

290 295 300

Ala Ser Glu Gln Phe Asp Lys Asn Asp His Leu Gln Gly Gly Ala Leu

305 310 315 320

Leu Tyr Thr Asn Asn Lys Leu Thr Gln Trp Ala Asp Ser Asn Tyr Arg

325 330 335

Leu Leu Asn Arg Thr Pro Thr Arg Gln Asp Gly Lys Pro His Tyr Ser

340 345 350

Lys Ala Asp Glu Tyr Gly Gly Tyr Glu Phe Leu Leu Ala Asn Asp Val

355 360 365

Asp Asn Ser Asn Pro Val Val Gln Ala Glu Met Leu Asn Gln Ile His

370 375 380

Tyr Leu Met Asn Trp Gly Ser Ile Val Met Asn Asp Lys Asp Ala Asn

385 390 395 400

Phe Asp Gly Ile Arg Val Asp Ala Val Asp Asn Val Asn Ala Asp Thr

405 410 415

Leu Gln Leu Tyr Thr Asn Tyr Phe Asn Ser Val Tyr Gly Val Asn Lys

420 425 430

Ser Glu Ala Gln Ala Leu Ala His Ile Ser Val Leu Glu Ala Trp Ser

435 440 445

Tyr Asn Asp Asn Asp Tyr Asn Gln Asp Thr Asn Gly Ala Ala Leu Ala

450 455 460

Met Asp Asn Gly Leu Arg Phe Ser Leu Leu Tyr Thr Leu Thr Arg Pro

465 470 475 480

Leu Asn Glu Arg Thr Pro Gly Met Ser Thr Leu Ile Lys Ser Gln Tyr

485 490 495

Gly Leu Thr Asp Arg Thr Lys Asp Asp Lys Tyr Gly Asp Thr Gln Pro

500 505 510

Ser Tyr Val Phe Val Arg Ala His Asp Ser Glu Val Gln Thr Val Ile

515 520 525

Ala Gln Ile Ile Lys Lys Lys Ile Asp Pro Thr Thr Asp Gly Phe Thr

530 535 540

Phe Thr Leu Asp Gln Leu Lys Gln Ala Phe Asp Ile Tyr Asn Lys Asp

545 550 555 560

Met Asn Ser Val Asp Lys His Tyr Thr His Tyr Asn Ile Pro Ala Ala

565 570 575

Tyr Ala Val Met Leu Ser Asn Met Glu Ser Val Thr Arg Val Tyr Tyr

580 585 590

Gly Asp Leu Phe Thr Asp Asp Gly Gln Tyr Met Glu Thr Lys Ser Pro

595 600 605

Tyr Tyr Asp Ala Ile Asn Thr Leu Leu Arg Ala Arg Ile Arg Tyr Ala

610 615 620

Ala Gly Gly Gln Thr Met Glu His Asn Ser Tyr Lys Ala Ser Ala Ala

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Met Lys Ala Lys Asn Pro Asp Ser Gly Ser Val Leu Gly Asn Ser Glu

645 650 655

Val Leu Val Ser Val Arg Phe Gly Gln Asp Val Met Ser Ala Asp Asp

660 665 670

Met Thr Gly Gly Lys Leu Ala Lys Thr Ser Gly Met Phe Ser Leu Ile

675 680 685

Ser Asn Asn Pro Glu Leu Glu Leu Asp Ala Asn Glu Glu Ile Arg Val

690 695 700

Asn Val Gly Lys Ile His Ala Gly Gln Thr Tyr Arg Pro Leu Leu Leu

705 710 715 720

Thr Thr Asp Lys Gly Leu Gln Lys Tyr Leu Asn Asp Ser Asp Thr Lys

725 730 735

Leu Thr Lys Val Ala Asp Lys Asp Gly Tyr Ile Thr Phe Lys Gly Ser

740 745 750

Glu Ile Lys Gly Tyr Lys Gln Val Glu Val Asn Gly Tyr Leu Ser Val

755 760 765

Trp Val Pro Val Gly Ala Lys Ala Asp Gln Asp Ile Arg Val Ala Ala

770 775 780

Ser Thr Lys Val Asn Gly Lys Asp Asp Lys Thr Tyr Thr Ala Ser Gln

785 790 795 800

Ala Leu Glu Ser Gln Leu Ile Tyr Glu Gly Phe Ser Asn Phe Gln Asp

805 810 815

Phe Val Lys Lys Asp Ser Gln Tyr Thr Asn Lys Lys Ile Ala Glu Asn

820 825 830

Thr Asp Leu Phe Lys Ala Trp Gly Val Thr Ser Phe Glu Met Ala Pro

835 840 845

Gln Tyr Val Ser Ala Thr Asp Gly Thr Phe Leu Asp Ser Ile Ile Glu

850 855 860

Asn Gly Tyr Ala Phe Thr Asp Arg Tyr Asp Leu Ala Met Ser Lys Asn

865 870 875 880

Asn Lys Tyr Gly Ser Lys Glu Asp Leu Ala Asn Ala Leu Lys Ala Leu

885 890 895

His Ala Ala Gly Ile Gln Ala Ile Ala Asp Trp Val Pro Asp Gln Ile

900 905 910

Tyr Gln Leu Pro Gly Lys Glu Val Val Thr Ala Ser Arg Val Asp Asn

915 920 925

Tyr Gly Arg Val Lys Ile Asp Gln Pro Leu Val Glu Lys Leu Tyr Leu

930 935 940

Ala Asn Thr Lys Ser Ser Gly Lys Asp Phe Gln Ala Lys Tyr Gly Gly

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Glu Phe Leu Glu Asp Leu Gln Lys Gln Tyr Pro Glu Met Phe Thr Ala

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Lys Met Ile Ser Thr Gly Lys Thr Ile Asp Pro Ser Val Lys Leu Lys

980 985 990

Glu Trp Ser Ala Lys Tyr Leu Asn Gly Thr Asn Val Leu Gly Arg Gly

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104010451050

Tyr Tyr Thr Thr Ala Gly Asn Lys Ala Lys Ser Ala Phe Val Thr

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107010751080

Thr Gly Pro Asn Thr Ile Asn Ser Lys Phe Tyr Tyr Phe Leu Pro

108510901095

Asn Gly Val Met Leu Lys Asp Ala Ile Lys Gln Asp Glu Leu Gly

110011051110

Arg Ser Val Tyr Tyr Gly Lys Thr Gly Thr Met Tyr Lys Ala Thr

111511201125

Asp Lys Ser Gln Trp Phe Ala Met Thr Asp Ser Lys Gly Gln Gln

113011351140

Arg Phe Arg His Phe Asp Arg Phe Gly Ile Met Ser Val Gly Leu

114511501155

Val Thr Ile Asn Gly Ser Val Gln Tyr Tyr Asp Glu Glu Gly Phe

116011651170

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117511801185

Tyr Phe Asp Glu Gly Ser Gly Asn Leu Val Lys Asp Arg Phe Leu

119011951200

Asn Lys Asp Gly Lys Trp Tyr Tyr Leu Asp Asp Lys Gly Leu Leu

120512101215

Val Lys Gly Ala Gln Thr Ile Lys Gly Gln Lys Leu Tyr Phe Asp

122012251230

Thr Lys Thr Gly Ala Gln Val Lys Gly Asp Phe Val Ala Asp Lys

123512401245

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125012551260

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Asp Glu Asn Gly His Val Ala Lys Gly Ala Lys Thr Ile Arg Gly

128012851290

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129513001305

Arg Phe Ile Arg Asp Asp Lys Gly Val Arg Tyr Tyr Asp Ala Asp

131013151320

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132513301335

Ser Asn Gln Trp Tyr Tyr Met Gly Ala Asp Gly Tyr Ala Val Lys

134013451350

Gly Asn Gln Thr Ile Lys Asn Gln His Met Tyr Phe Asp Ala Glu

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Thr Gly Gln Gln Ala Lys Gly Ile Ile Val Thr Asp Ala Asn Gly

137013751380

Arg Lys Tyr Phe Tyr Asp Thr Phe Thr Gly Ser Arg Val Val Asn

138513901395

Gln Phe Val Leu Val Asn Gly Asn Trp Tyr Phe

14001405

<210>18

<211>4230

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>具有异源信号序列的2921 gtf

<400>18

gatgatctgg caaaggacca agcggctgcc acggaacaga aggcatcagc gaatcaagaa60

aaggaggaag ttgtttcaga tcaagttgat acgacaagcg ccaaagcaac gtcagaaaaa 120

gaggtggcac aggctagcga tacatcatca gaggccaacc aggttccggc ccaagaggaa 180

aagaaagccg agaaggccgc agcacctgcg acagctacgc cggcaccgca aacgggagcc 240

aaaaatagcc aaacagcctc aagcgaggca ccggctacat caaatcaagc atcagaaacg 300

gcggaaacag gcgcactgtc acaaaaggaa gaagcagctg tcctttcact tgataatatc 360

aaaaagattg acggaaaata ctactatgtt atggctgatg gatcatataa gaaaaacttt 420

gcgattacag tcgatggcca aatgctgtat tttgatgcaa aaacaggagc tctttcaagc 480

acatcaacat attcattttc acaaggcctg acaccgattg ttagcgactt ctcagtcaat 540

aacaaggcat ttgatagcag cgagaaatca ttcgaacttg tggatggata tcttacggcc 600

gagagctggt acagaccggc aaaaattctg gagaatggaa agacgtgggt tgattcaaaa 660

gagacggacc ttagaccggt gctgatgtca tggtggccga ataaggatac gcaggttgcc 720

tacctgaact atatgtcaaa agcacttggc ggcaaagagg agtttacaac ggagacatca 780

caaacgacac ttaacacggc tgctgaactt atccagacga agatcgaggc aagaattagc 840

aaagaacaag gaacgaagtg gcttagagaa gctatggccg catttgttgc tacgcagtca 900

agatggtcat atgcgtcaga gcagttcgat aaaaacgatc accttcaagg cggagcactt 960

ctgtacacaa ataataagct gacacaatgg gctgactcaa actatagact gcttaacaga1020

acgcctacga gacaggatgg aaaacctcat tacagcaaag cagacgagta tggaggctat1080

gagttcctgc ttgcaaatga cgtcgataac tcaaatccgg tggttcaggc agagatgctt1140

aatcaaattc actatcttat gaactggggc tcaattgtta tgaatgataa ggacgcgaat1200

ttcgatggaa ttagagtgga tgcggttgac aatgttaatg cggacacact tcaactgtat1260

acgaattact ttaactcagt ttacggcgtt aacaaatcag aagctcaggc acttgctcat1320

atcagcgttc ttgaagcatg gagctacaac gacaatgatt acaatcagga tacaaatggc1380

gctgcactgg ccatggataa tggacttaga ttcagccttc tttacacact gacaagaccg1440

cttaacgaga gaacacctgg catgtcaaca cttattaagt cacaatatgg ccttacagac1500

agaacaaaag acgataagta cggcgacacg caaccgtcat acgtgtttgt tagagctcac1560

gacagcgaag ttcaaacagt tattgctcag attattaaga agaaaattga tccgacaaca1620

gacggattca catttacact ggaccaactt aaacaagcct tcgatatcta taacaaagat1680

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ctgtcaaaca tggaatcagt tacaagagtc tattatggcg acctgtttac agatgacggc1800

caatatatgg aaacaaaatc accgtactat gacgccatta atacactgct gagagccaga1860

atcagatatg cagctggcgg acaaacaatg gaacacaaca gctataaggc gtcagctgcg1920

atgaaggcga aaaaccctga tagcggctca gtccttggca attcagaagt tctggttagc1980

gttagatttg gacaagatgt gatgagcgct gacgatatga caggaggcaa acttgctaag2040

acgtcaggaa tgttctcact gatttcaaat aatccggaac tggaacttga cgctaatgaa2100

gagatcagag tgaatgttgg aaaaatccat gccggccaaa cgtacagacc tcttctgctt2160

acgacagata agggcctgca aaagtatctt aatgactcag acacgaaact tacgaaggtt2220

gcagataaag atggctatat tacatttaag ggctcagaga ttaaaggcta taaacaggtt2280

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gattcacaat atacaaataa gaaaatcgcg gaaaatacag atcttttcaa agcatggggc2520

gttacatcat ttgaaatggc gcctcagtat gttagcgcaa cagatggcac atttctggat2580

agcattatcg agaatggata tgcatttacg gatagatatg acctggccat gtcaaaaaac2640

aacaaatacg gatcaaaaga ggatcttgct aatgcgctta aagctctgca cgcagctggc2700

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gttacagcat caagagtcga caattacggc agagtgaaga tcgaccaacc tctggtggaa2820

aagctgtatc tggctaacac aaagagctca ggcaaagatt ttcaggcgaa atatggcgga2880

gaatttcttg aagacctgca gaaacagtat cctgaaatgt ttacagcgaa aatgatttca2940

acaggaaaaa cgattgatcc tagcgttaaa cttaaggagt ggtcagccaa atacctgaat3000

ggaacaaacg tgctgggaag aggcacagat tatgttcttt cagatgaggg aacgggcaaa3060

tactttacgg tcaatgagaa aggcgatttc ctgccggctg cacttacagg cgatagagaa3120

gcaaagacag gattctataa tgacggcaaa ggcatgacgt attacacaac ggccggaaat3180

aaggcgaaga gcgcgttcgt tacagtggcg ggcaacacat actactttga ttatacggga3240

tatatggtta caggacctaa tacaattaac agcaagtttt actatttcct tcctaatggc3300

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attaatggaa gcgtccagta ttacgacgaa gaaggctttc aagttaaggg agagttcgtg3540

acggacaaag atggacagac gagatatttt gacgagggaa gcggcaacct ggttaaggac3600

agattcctga acaaggacgg aaagtggtat taccttgacg ataagggact gcttgtcaag3660

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aaaggagact ttgtggctga taaggatgga aacctgacgt tttatagcgg cgattcagga3780

caaatggtgc agtcagactt ctttagcaca ggcaacaatg catggtttta tgcagatgaa3840

aacggacatg ttgcaaaagg cgcgaagaca atcagaggcc aaaaactgta cttcgacacg3900

aagacgggac agcaggccaa gggcagattc attagagatg acaaaggcgt gagatactat3960

gatgcagaca caggcgcact ggtcacaaat gctttcctgg aaacgaaggc tggctcaaat4020

cagtggtact acatgggagc cgatggatac gcggtgaagg gcaaccagac gatcaagaat4080

cagcacatgt actttgacgc ggagacgggc caacaagcta agggcatcat cgtcacagat4140

gcaaatggca gaaagtactt ctatgacacg ttcacgggca gcagagttgt taaccaattt4200

gttctggtga acggcaattg gtacttttga 4230

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