一种选择性富集N-端丝氨酸/苏氨酸肽段的方法

摘要

本发明涉及一种基于酰肼化学法的选择性富集蛋白样品酶解液中N-端丝氨酸/苏氨酸肽段的方法。取生物样品，使用胰蛋白酶Trypsin酶解，并用PNGase F酶去除糖链，然后用高碘酸钠将蛋白酶解液中的N-端为丝氨酸或者苏氨酸的肽段选择性氧化为N-端为醛基结构的肽段，之后利用酰肼材料富集氧化后的肽段并使用盐酸羟胺处理，最后对释放的肽段进行LC-MS/MS分析来获得肽段和蛋白的鉴定结果。由于只选择性富集其中的N-端丝氨酸/苏氨酸肽段，因此可用于蛋白质组样品酶解液的简化。该富集方法原理简单，容易操作，富集特异性高。