砧木种子的制备方法及砧木种子的应用

摘要

本发明提供了一种砧木种子的制备方法及砧木种子的应用，涉及作物栽培技术领域。本发明提供的砧木种子的制备方法为：选取正常倍体种子，用多倍体诱导剂诱导后，自交1‑3代获得性状稳定的多倍体种子，应用所述多倍体种子进行自交或者杂交获得砧木种子。本发明提供的砧木种子的制备方法，通过多倍体诱导和多代筛选，培育出性状优良的砧木种子，将得到的砧木种子用于嫁接后，能够为接穗提供充足的营养，提高接穗的成活率和茎粗，促进接穗植株的结果和产量。

说明书

技术领域

本发明涉及作物栽培技术领域，尤其是涉及一种砧木种子的制备方法及砧木种子的应用。

背景技术

随着人口的增长，粮食问题成为了世界瞩目的大问题，与之相关联的，就是蔬菜的供应问题。如今，人们生活水平越来越好，为了满足营养平衡，蔬菜的量和种类的需求也越来越高。

传统的蔬菜种植方法为直接种植，而一些蔬菜品种，例如黄瓜或者番茄等，它们的免疫力低下，在自然种植过程中，容易感染各种疾病，导致成活率低、产量下降。目前，也有一些采用砧木嫁接种植的方法，能够在一定程度上缓解上述问题。然而，如何获得性状良好的砧木，仍然是育种相关研究中重要的课题，因此，培育性状优良、适宜嫁接的砧木，具有重要的意义。

因此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种砧木种子的制备方法，以获得性状优良、适宜嫁接的砧木，进而提高接穗植株的性状或者产量。

本发明提供了一种砧木种子的制备方法，所述制备方法为：

选取正常倍体种子，用多倍体诱导剂诱导后，自交1-3代获得性状稳定的多倍体种子，应用所述多倍体种子进行自交或者杂交获得砧木种子。

进一步的，所述应用所述多倍体种子进行自交或者杂交获得砧木种子包括：

应用所述多倍体种子自交获得种子，即为砧木种子；

或者，应用两个性状不相同的所述多倍体种子进行杂交获得种子，即为砧木种子。

进一步的，所述多倍体诱导剂选自秋水仙碱、氟乐灵、二甲戊灵或者安磺灵中的一种或者多种，优选秋水仙碱。

进一步的，所述多倍体诱导剂诱导的浓度为4-6％。

进一步的，所述多倍体诱导剂诱导的温度为28-29℃，优选28℃。

进一步的，所述多倍体诱导剂诱导的时间为20-25h，优选24h。

进一步的，所述制备方法为：

(1)选取正常倍体的“大白南瓜”品种的南瓜种子，于黑暗、温度28℃下，用清水浸泡5～6h，随后用5％的秋水仙素浸泡24h，获得预选“大白南瓜”多倍体种子，对预选“大白南瓜”多倍体种子进行3代自交，获得性状稳定的“大白南瓜”多倍体种子；

(2)选取正常倍体的“日本小南瓜”品种的南瓜种子，于黑暗、温度28℃下，用清水浸泡5～6h，随后用5％的秋水仙素浸泡24h，获得预选“日本小南瓜”多倍体种子，对预选“日本小南瓜”多倍体种子进行3代自交，获得性状稳定的“日本小南瓜”多倍体种子；

(3)将所述性状稳定的“大白南瓜”多倍体种子与所述性状稳定的“日本小南瓜”多倍体种子进行杂交，获得砧木种子。

进一步的，所述正常倍体种子为正常倍体葫芦科种子或者正常倍体茄科种子。

另外，本发明还提供了按照所述制备方法获得的砧木种子的应用，所述砧木种子用于嫁接茄科植物或者葫芦科植物。

本发明提供的砧木种子的制备方法，通过多倍体诱导和多代筛选，培育出性状优良的砧木种子，将得到的砧木种子用于嫁接后，能够为接穗提供充足的营养，提高接穗的成活率和茎粗，促进接穗植株的结果和产量。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1a为实施例1中的南瓜砧木苗；

图1b为实施例1中的南瓜砧木苗；

图2为实施例1中黄瓜接穗嫁接于南瓜砧木苗的嫁接图；

图3a为实施例1中的黄瓜接穗长势情况；

图3b为实施例1中的黄瓜接穗果实情况；

图4为实施例4中的番茄接穗果实情况；

图5为实施例6中的西瓜接穗长势情况。

具体实施方式

下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供了一种砧木种子的制备方法，包括：

选取正常倍体种子，用多倍体诱导剂诱导后，自交1-3代获得性状稳定的多倍体种子，应用多倍体种子进行自交或者杂交获得砧木种子。

其中，应用多倍体种子进行自交或者杂交获得砧木种子包括：应用多倍体种子自交获得种子，即为砧木种子；或者，应用两个性状不相同的多倍体种子进行杂交获得种子，即为砧木种子。

在一个优选的实施方式中，多倍体诱导剂选自秋水仙碱、氟乐灵、二甲戊灵或者安磺灵中的一种或者多种，例如可以为秋水仙碱，或者氟乐灵，或者二甲戊灵，或者安磺灵。

在另一个优选的实施方式中，多倍体诱导剂诱导的浓度为4％-6％，例如可以为4％、5％或者6％。

在另一个优选的实施方式中，多倍体诱导剂诱导的温度为28℃或者29℃。

在另一个优选的实施方式中，多倍体诱导剂诱导的时间为20h，21h，22h，23h，24h或者25h。

在另一个优选的实施方式中，正常倍体种子为正常倍体葫芦科种子或者正常倍体茄科种子，例如南瓜种子、甜瓜种子、番茄种子、茄种子或者辣椒种子。

另外，本发明还提供了按照所述方法获得的砧木种子，在嫁接茄科植物或者葫芦科植物中的应用，其中茄科植物或者葫芦科植物可以为：南瓜、甜瓜、番茄、茄子子或者辣椒。

为了有助于更清楚的理解本发明，现结合具体的实施方式，详细介绍如下。

实施例1南瓜砧木种子的制备及应用

南瓜砧木种子的制备方法：

(1)选取正常倍体的“大白南瓜”品种的南瓜种子，于黑暗、温度28℃下，用清水浸泡5～6h，随后用5％的秋水仙素浸泡24h，获得预选“大白南瓜”多倍体种子，对预选“大白南瓜”多倍体种子进行3代自交，进行筛选，获得性状良好且稳定的“大白南瓜”多倍体种子。

其中，性状良好指，经过性状鉴定，与正常倍体“大白南瓜”品种的南瓜相比，同一时期的茎变粗、叶片加厚、叶片颜色加深，且果实单果平均重量增加。

(2)选取正常倍体的“日本小南瓜”品种的南瓜种子，于黑暗、温度28℃下，用清水浸泡5～6h，随后用5％的秋水仙素浸泡24h，获得预选“日本小南瓜”多倍体种子，对预选“日本小南瓜”多倍体种子进行3代自交，进行筛选，获得性状良好且稳定的“日本小南瓜”多倍体种子。

其中，性状良好指，以“日本小南瓜”多倍体植株作为砧木进行嫁接后，嫁接苗的成活率在80％以上。

(3)将步骤(1)中性状优良且稳定的“大白南瓜”多倍体种子与步骤(2)中性状优良且稳定的“日本小南瓜”多倍体种子进行杂交，获得南瓜砧木种子。

图1a及1b为按照上述方法获得的南瓜砧木种子长成的南瓜砧木苗。

南瓜砧木种子的应用：

先后播种上述南瓜砧木种子和“鲁黄瓜三号”品种的黄瓜种子，其中黄瓜种子作为接穗种子，待南瓜砧木种子出苗后第6天，以插接的嫁接方法，将黄瓜接穗苗嫁接于南瓜砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

图2为按照上述方法，将黄瓜苗嫁接于南瓜苗的生长图，图3a为按照上述嫁接方法获得的黄瓜苗的生长情况，图3b为按照上述嫁接方法获得的黄瓜果实情况。

实施例2南瓜砧木种子的制备及应用

南瓜砧木种子的制备方法：

选取正常倍体的“大白南瓜”品种的南瓜种子，于黑暗、温度28℃下，用清水浸泡5～6h，随后用5％的秋水仙素浸泡24h，获得预选“大白南瓜”多倍体种子，对预选“大白南瓜”多倍体种子进行3代自交，进行筛选，获得性状良好且稳定的“大白南瓜”多倍体种子，直接作为南瓜砧木种子。

其中，性状良好指，经过性状鉴定，与正常倍体“大白南瓜”品种的南瓜相比，同一时期的茎变粗、叶片加厚、叶片颜色加深，且果实单果平均重量增加。

南瓜砧木种子的应用：

先后播种上述南瓜砧木种子和“鲁黄瓜三号”品种的黄瓜种子，其中黄瓜种子作为接穗种子，待南瓜砧木种子出苗后第6天，以插接的嫁接方法，将黄瓜接穗苗嫁接于南瓜砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

实施例3南瓜砧木种子的制备及应用

南瓜砧木种子的制备方法：

选取正常倍体的“日本小南瓜”品种的南瓜种子，于黑暗、温度28℃下，用清水浸泡5～6h，随后用5％的秋水仙素浸泡24h，获得预选“日本小南瓜”多倍体种子，对预选“日本小南瓜”多倍体种子进行3代自交，进行筛选，获得性状良好且稳定的“日本小南瓜”多倍体种子，直接作为南瓜砧木种子。

其中，性状良好指，以“日本小南瓜”多倍体植株作为砧木进行嫁接后，嫁接苗的成活率在80％以上。

南瓜砧木种子的应用：

先后播种上述南瓜砧木种子和“鲁黄瓜三号”品种的黄瓜种子，其中黄瓜种子作为接穗种子，待南瓜砧木种子出苗后第6天，以插接的嫁接方法，将黄瓜接穗苗嫁接于南瓜砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

实施例4茄子砧木种子的制备及应用

茄子砧木种子的制备方法：

(1)选取正常倍体的“托鲁巴姆”品种的茄子种子，于黑暗、温度28℃下，用清水浸泡5～6h，随后用5％的秋水仙素浸泡24h，获得预选“托鲁巴姆”多倍体种子，对预选“托鲁巴姆”多倍体种子进行3代自交，进行筛选，获得性状良好且稳定的“托鲁巴姆”多倍体种子。

其中，性状良好指，经过性状鉴定，与正常倍体植株相比，同一时期的茎变粗、叶片加厚、叶片颜色加深、果实单果平均重量增加且嫁接苗成活率增高。

茄子砧木种子的应用：

同时播种上述茄子砧木种子和“田园保冠”品种的番茄种子，其中番茄种子作为接穗种子，待茄子砧木种子出苗后第30天，以插接的嫁接方法，将番茄接穗苗嫁接于茄子砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

其中，嫁接方法还可采用：贴接、靠接或者劈接的方法。

如图4所示，为按照上述方法将番茄接穗进行嫁接后，番茄接穗的果实情况。

实施例5甜瓜砧木种子的制备及应用

甜瓜砧木种子的制备方法：

选取正常倍体的“金蜜十号”品种的甜瓜种子，于黑暗、温度28℃下，用清水浸泡5～6h，随后用5％的秋水仙素浸泡24h，获得预选“金蜜十号”多倍体种子，对预选“金蜜十号”多倍体种子进行3代自交，进行筛选，获得性状良好且稳定的“金蜜十号”多倍体种子。

其中，性状良好指，经过性状鉴定，与正常倍体植株相比，同一时期的茎变粗、叶片加厚、叶片颜色加深、果实单果平均重量增加且嫁接苗成活率增高。

甜瓜砧木种子的应用：

同时播种上述甜瓜砧木种子和“鲁黄瓜三号”品种的黄瓜种子，其中黄瓜种子作为接穗种子，待南瓜砧木种子出苗后第6天，以插接的嫁接方法，将黄瓜接穗苗嫁接于南瓜砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

其中，嫁接方法还可采用：贴接、靠接或者劈接的方法。

实施例6南瓜砧木种子的制备及应用

南瓜砧木种子的制备方法：

其中南瓜砧木种子的制备方法与实施例1中的制备方法相同，在本实施例中不再叙述。

南瓜砧木种子的应用：

先后播种上述南瓜砧木种子和西瓜种子，其中西瓜种子作为接穗种子，待南瓜砧木种子出苗后第6天，以插接的嫁接方法，将西瓜接穗苗嫁接于南瓜砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

如图5所示，为按照上述方法将西瓜接穗进行嫁接后，西瓜嫁接苗的长势情况。

为了有助于更清楚的理解本发明的效果，现列举具体的对比例如下。

对比例1

选取正常倍体的“大白南瓜”品种的南瓜种子，直接作为南瓜砧木种子。

南瓜砧木种子的应用：

先后播种上述南瓜砧木种子和“鲁黄瓜三号”品种的黄瓜种子，其中黄瓜种子作为接穗种子，待南瓜砧木种子出苗后第6天，以插接的嫁接方法，将黄瓜接穗苗嫁接于南瓜砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

对比例2

选取正常倍体的“日本小南瓜”品种的南瓜种子，直接作为南瓜砧木种子。

南瓜砧木种子的应用：

先后播种上述南瓜砧木种子和“鲁黄瓜三号”品种的黄瓜种子，其中黄瓜种子作为接穗种子，待南瓜砧木种子出苗后第6天，以插接的嫁接方法，将黄瓜接穗苗嫁接于南瓜砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

对比例3

南瓜砧木种子的制备方法：

选取正常倍体的“大白南瓜”品种的南瓜种子和“日本小南瓜”品种的南瓜种子，进行杂交，获得的种子即为南瓜砧木种子。

南瓜砧木种子的应用：

先后播种上述南瓜砧木种子和“鲁黄瓜三号”品种的黄瓜种子，其中黄瓜种子作为接穗种子，待南瓜砧木种子出苗后第6天，以插接的嫁接方法，将黄瓜接穗苗嫁接于南瓜砧木苗，嫁接完成后，正常管理。

为了充分说明按照本发明提供的方法获得的砧木种子的实用效果，现结合效果评价实验，进行详细的说明。

不同砧木种子的嫁接效果

根据实施例1、2、3以及对比例1、2、3中的方法制备南瓜砧木种子，并嫁接黄瓜苗，分别记录嫁接苗的成活率，以及嫁接苗的果实产量，数据见表1。

表1不同砧木种子的嫁接效果

组别嫁接苗成活率果实产量(斤/亩)实施例191％15200实施例269％14950实施例389％12000对比例153％11700对比例262％10050对比例358％11500

由以上数据可以发现，经过多倍体诱导获得的砧木种子，与正常倍体的砧木种子相比，其嫁接苗的成活率以及果实的产量均有较大程度的提高。尤其是实施例1中获得的多倍体砧木种子，通过将性状优良且稳定的“大白南瓜”多倍体种子与性状优良且稳定的“日本小南瓜”多倍体种子进行杂交，结合了两种多倍体种子的优点，进一步提高了砧木种子的嫁接效果。

多倍体诱导条件的优化

以实施例1为例，参照实施例1中制备南瓜砧木种子的方法，将秋水仙素浓度、诱导温度、诱导时间分别设置变量制备南瓜砧木种子(除变量不同外，其他诱导条件相同)，并按照实施例1中南瓜砧木种子的应用方法，嫁接黄瓜。以接穗黄瓜的苗成活率、果实产量为评价标准，进行对比分析。具体实验数据及结果见表2-4。

表2不同秋水仙素浓度对黄瓜接穗的影响

秋水仙素浓度嫁接苗成活率果实产量(斤/亩)0％67％110002％69％120504％87％148006％89％150108％60％15100

从以上实验数据发现，随着秋水仙素浓度的升高，果实亩产量逐渐升高，但当秋水仙素浓度过大时，嫁接苗的成活率会随之下降，因此选择了秋水仙素浓度4～6％作为最佳的诱导浓度。

表3不同诱导温度对黄瓜接穗的影响

诱导温度嫁接苗成活率果实产量(斤/亩)25℃61％980026℃72％1156027℃74％1200028℃89％1497029℃83％1460030℃72％12050

由表3可知，当诱导温度为28℃或者29℃时，嫁接苗的成活率以及果实产量较好，因此选择诱导温度28℃-29℃为最佳诱导温度。

表4不同诱导时间对黄瓜接穗的影响

诱导时间嫁接苗成活率果实产量(斤/亩)10h52％918020h88％1497025h91％1530030h69％1141040h60％11000

从以上实验数据发现，诱导时间过高或者过低，嫁接苗的成活率以及果实产量均会有所下降，因此，选择了诱导时间20～25h最为最佳的诱导时间。

发明人经过大量的筛选，根据本发明的目的，确定了适宜的多倍体诱导剂、试剂浓度、诱导温度以及诱导时间，经过多倍体诱导和筛选，培育出性状优良的砧木种子，将得到的砧木种子用于嫁接后，能够为接穗提供充足的营养，提高接穗的成活率，促进接穗植株的结果和产量。本发明提供的砧木种子的制备方法，操作简单，成本低廉，脱离了实验室的繁琐操作，适用于农业上的大量生产，具有广阔的市场前景和商业价值。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。