一种通过高效液相色谱分析法测定利用邻硝基苯酚制备邻氨基苯酚收率的方法

摘要

本发明涉及收率的测定方法。一种通过高效液相色谱分析法测定利用邻硝基苯酚制备邻氨基苯酚收率的方法，通过高效液相色谱分析法分别获得以峰面积为纵坐标浓度为横坐标的邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的标准曲线图；通过高效液相色谱分析法获得利用邻硝基苯酚制备邻氨基苯酚的最终样品溶液的高效液相色谱图；从高效液相色谱图分别获得邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的峰面积，将它们分别代入步骤一中以峰面积为纵坐标浓度为横坐标的邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的标准曲线图，分别获得邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的浓度。

说明书

技术领域

本发明涉及收率的测定方法，特别是涉及一种通过高效液相色谱分析法测定利用邻硝基苯酚制备邻氨基苯酚收率的方法。

背景技术

邻氨基苯酚是一种重要的化工中间体，广泛应用于染料、医药、印刷业以及生物领域。它可用于制备硫化染料、偶氮染料和荧光增白剂，以及塑料固化剂和医药产品。近年来人们又发现邻氨基苯酚可作为脂肪酸的化学修饰试剂用于分析脂肪酸，由邻氨基苯酚与羰基化合物制成的Schiff碱及其某些金属配合物在催化行为、磁学性质和酶模拟等方面也有着重要作用。

邻氨基苯酚的制备主要由邻硝基苯酚还原得到，其方法主要有铁粉还原法、硫化钠还原法、电解合成法以及加氢还原法。电解合成法与传统的化学法相比，具有产物纯，产率高，污染小等优点而得到研究者的关注。其电解合成路线为：

是通过电还原邻硝基苯酚制备得到邻氨基苯酚。由于电解完毕后的溶液中包含邻氨基苯酚和邻硝基苯酚两种组分需要测定（制备过程中邻硝基苯酚是过量的），而目前公开的文献报道仅见有单独测定邻氨基苯酚或邻硝基苯酚的色谱法。例如，《色谱》，2012，（9）：P870-875上报道的“高效液相色谱法同时测定染发剂中的11种氨基苯酚”；《化学通报》，2011,（12）：P_1140-1144上报道的“微波辅助-顶空液相微萃取高效液相色谱分析水样中的邻硝基苯酚”等，尚未发现能够同时测定这两种化合物的分析方法。因此，建立一种可同时测定邻氨基苯酚和邻硝基苯酚双组份的方法，解决以邻硝基苯酚为原料合成邻氨基苯酚过程中，及时进行反应条件的调整和优化，提高反应效率问题是十分必要的。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：如何针对现有技术的缺陷，提出一种简单可靠测定邻氨基苯酚收率的方法以及时进行反应条件的调整和优化。

本发明所采用的技术方案是：一种通过高效液相色谱分析法测定利用邻硝基苯酚制备邻氨基苯酚收率的方法，按照如下的步骤进行

步骤一、通过高效液相色谱分析法分别获得以峰面积为纵坐标浓度为横坐标的邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的标准曲线图；

步骤二、通过高效液相色谱分析法获得利用邻硝基苯酚制备邻氨基苯酚的最终样品溶液的高效液相色谱图；

步骤三、从步骤二中的高效液相色谱图分别获得邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的峰面积，将它们分别代入步骤一中以峰面积为纵坐标浓度为横坐标的邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的标准曲线图，分别获得邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的浓度，收率=（邻氨基苯酚的实测质量浓度/邻氨基苯酚的理论质量浓度)*100%。

作为一种优选方式：高效液相色谱分析法中，色谱柱为Shim-pack VP-ODS，检测波长在270~300 nm之间，流动相为甲醇：水=60~100%的溶液，流动相流速为0.4~1.4 ml/min，色谱柱柱温范围 25~40℃，进样量为20 uL。

作为一种优选方式：高效液相色谱分析法中，检测波长为285 nm，流动相为100%甲醇，流动相流速为0.80 ml/min，色谱柱柱温为35 ℃。

本发明的有益效果是：本发明对邻氨基苯酚和邻硝基苯酚共存溶液中两种化合物的同时测定，可以快速、准确获得邻氨基苯酚的收率。

附图说明

图1：邻氨基苯酚和邻硝基苯酚混合标准溶液的高效液相色谱图。

图2：供试品溶液的高效液相色谱图。

图3：邻氨基苯酚的标准曲线图。

图4：邻硝基苯酚的标准曲线图。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步的描述：

本实施例所用仪器与试剂

日本岛津公司LC-10A型高效液相色谱仪，配有SHIMADZU SPD-10Avp检测器，N-2000色谱数据工作站，CTO-10ASvp柱箱，SCL-10Avp系统控制器； SK250HP型超声波清洗器（上海科导超声仪器）；BS-1105型精密电子天平（北京赛多利斯）；FB-01T型溶剂过滤器（天津恒奥）。

甲醇为色谱纯（天津四友），邻硝基苯酚标准品（99%）和邻氨基苯酚标准品（98%）（萨恩化学技术（上海）），水为超纯水，所有试剂均用0.22 um的滤膜过滤并超声脱气后使用。

通过高效液相色谱分析法获得邻硝基苯酚以峰面积为纵坐标浓度为横坐标的标准曲线图，通过高效液相色谱分析法获得邻氨基苯酚以峰面积为纵坐标浓度为横坐标的标准曲线图。

标准溶液的配制：准确称取0.10 g邻硝基苯酚用甲醇稀释并定容于一个100 mL容量瓶中，准确称取0.10 g邻氨基苯酚用甲醇稀释并定容于一个100 mL容量瓶中，作为邻硝基苯酚和邻氨基苯酚标准储备液；再分别准确称取0.10 g邻硝基苯酚和邻氨基苯酚标准品于一个100 mL容量瓶中，用甲醇稀释并定容，作为邻硝基苯酚和邻氨基苯酚混合标准储备液。

供试品溶液的配制：准确移取经前处理调至中性的电解合成邻氨基苯酚的样品溶液0.5mL，用流动相稀释定容至10 mL容量瓶中，作为检测邻氨基苯酚和邻硝基苯酚的供试品溶液。

分别精密量取邻氨基苯酚和邻硝基苯酚标准储备液适量，均以流动相稀释配成每1mL中含1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、30.0、35.0、40.0 ug的邻氨基苯酚或邻硝基苯酚；通过色谱仪定量环准确注入20 uL测试液于高效液相色谱仪进行分析，获得色谱图。分别以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得到邻硝基苯酚、邻氨基苯酚的标准曲线图（如图3、4所示），其线性相关系数R分别为0.9995和0.9998。

溶液的稳定性试验

表1 溶液的稳定性试验结果

化合物时间峰面积平均值RSD1359565.6882352199.063邻氨基苯酚3353556.250355743.7941.054352705.7195360692.2501512666.7812502117.906邻硝基苯酚3510128.344505830.2561.054503617.3135500620.938

准确移取邻氨基苯酚、邻硝基苯酚标准储备液各0.20 mL分别置于10 mL容量瓶中，均用流动相稀释至刻度。每隔1 h进样测定一次，连续进样5次，测定其峰面积，RSD均为1.05%，表明样品溶液在5h内基本稳定，具体结果见表1。

方法的精密度试验

表2 方法的精密度

化合物加入量峰面积平均值RSD359565.688353947.500353034.656356157.344邻氨基苯酚20350338.781352464.7921.04352199.063348441.125349877.563348621.406512666.781502117.906510128.344508140.844邻硝基苯酚20504485.156507231.6560.68507891.438503617.313510029.438506007.688

分别准确移取0.20mL邻氨基苯酚、邻硝基苯酚置于两个10 mL容量瓶中，用流动相定容，各平行测定9次，测定其峰面积，RSD分别为1.04%和0.68%，表明该方法具有良好的重复性，测定结果详见表2。

样品分析及加标回收率测定

表3样品含量测定和加标回收率实验结果

准确移取3个批次的供试品溶液各两份，分别置于10 mL容量瓶中，用流动相稀释并定容，其中一份定量加入邻氨基苯酚和邻硝基苯酚的混合标准样，按照优化后的色谱条件进行邻氨基苯酚和邻硝基苯酚的同时分析，并进行加标回收率测定。结果表明，两种化合物的回收率分别在93.0%~105.6%和90.6%~106.2%之间，相对标准偏差分别≤3.75%和≤1.44%，该方法可用于样品溶液中邻硝基苯酚和邻氨基苯酚的同时测定，具体结果见表3。