一种真菌孢子洗筛过滤器及真菌孢子分离方法

摘要

本发明公开了一种真菌孢子洗筛过滤器,包括透明材质的洗筛瓶，洗筛瓶底部设置有纳土器，洗筛瓶与纳土器密封连接，洗筛瓶内自上而下依次设置有分水隔板和滤膜，滤膜上设置有漏斗。本发明还公开了采用上述真菌孢子洗筛过滤器进行真菌孢子分离的方法。本发明一种真菌孢子洗筛过滤器，封闭瓶身设计可借助较大水流打散土粒，并自动冲洗，无需人工操作；漏斗的设计方便样品进入离心管；纳土器能够及时收集滤液中的杂质及泥土，避免了泥土堵塞下水道，有利于废土的处理。采用本发明进行真菌孢子的分离，提高了真菌孢子分离提取的效率及准确率，极大的方便了微生物研究工作，具有专业应用价值。

说明书

技术领域

本发明属于微生物分离提取技术领域，涉及一种真菌孢子洗筛过滤器，本发明还涉及采用上述真菌孢子洗筛过滤器进行真菌孢子分离的方法。

背景技术

在研究真菌微生物过程中，需要将肉眼不可见的真菌从土壤中分离出来，才能进一步计数、鉴定和培养。以丛枝菌根真菌(AM真菌)孢子分离为例，目前通常采用湿筛倾析-蔗糖浮选法，筛选分三步。第一步土壤样品处理：称取定量土壤置于三角瓶中加适量水，摇床振荡约30分钟打散土粒。第二步湿筛倾倒：人工用0.063mm(230目)土壤筛在流水下反复冲洗土壤样品，筛至泥土冲净水澄清，用洗瓶将筛中固体冲洗转移至离心管中离心。第三步蔗糖浮选法：第一次离心后的上清液弃去，加入等量蔗糖溶液(浓度20％)再次离心，过滤上清液后在滤纸上得到真菌孢子。针对前两步样品处理和湿筛倾析的缺点和问题如下：(1)三角瓶中土壤加水后摇床振荡约30分钟，费时低效，且需人工再冲洗倾倒入土壤筛。(2)常规的土壤筛侧壁高度有限，水流过大时水花四溅，使真菌孢子随水流而损失，水流小时清洗过滤速度慢时间长。(3)含有真菌孢子的残余固体沿筛壁冲洗入离心管时，无输移管道，容易流失；或冲洗水量超过离心管容量，造成真菌孢子流失。(4)水流滤洗过程中冲下的杂质及泥土直接流入下水道，易造成堵塞。(5)需人工手持土壤筛反复冲滤，费时费工，且样品众多时因长时间接触冷水造成操 作者身体不适。

发明内容

本发明的目的是提供一种真菌孢子洗筛过滤器，解决了现有人工真菌孢子分离过程，费时低效，孢子易流失导致计数误差大的问题。

本发明的另一目的是提供采用上述真菌孢子洗筛过滤器进行真菌孢子分离的方法。

本发明所采用的技术方案是，一种真菌孢子洗筛过滤器，包括透明材质的洗筛瓶，洗筛瓶底部设置有纳土器，洗筛瓶与纳土器密封连接，洗筛瓶内自上而下依次设置有分水隔板和滤膜，滤膜上设置有漏斗。

本发明的特点还在于，

洗筛瓶瓶口设置有内螺纹。

分水隔板开有中央孔，分水隔板四周与洗筛瓶连接处均匀开有缺口，中央孔和缺口用于使水分流，并且使水流沿瓶壁下流。

滤膜倾斜设置，漏斗位于滤膜最低处，漏斗内设置有堵块。

滤膜与洗筛瓶瓶壁夹角为30°。

堵块底部伸出漏斗颈下口。

洗筛瓶与纳土器通过螺纹密封连接。

纳土器靠近洗筛瓶底部周壁为滤膜，纳土器其余周壁密封。

本发明的另一技术方案是，一种真菌孢子分离方法，所采用的真菌孢子洗筛过滤器结构为：包括透明材质的洗筛瓶，洗筛瓶底部设置有纳土器，洗筛瓶与纳土器密封连接，洗筛瓶内自上而下依次设置有分水隔板和滤膜，滤膜上设置有漏斗；

洗筛瓶瓶口设置有内螺纹；

分水隔板开有中央孔，分水隔板四周与洗筛瓶连接处均匀开有缺口，中央孔和缺口用于使水分流，并且使水流沿瓶壁下流；

滤膜倾斜设置，漏斗位于滤膜最低处设置，漏斗内设置有堵块；

洗筛瓶与纳土器通过螺纹密封连接；

纳土器上部靠近洗筛瓶底部周壁为滤膜，纳土器其余周壁密封；

具体按以下步骤实施：

步骤1，采集的土壤样品研磨后过土壤筛，称取所需重量土样经瓶口加入洗筛瓶，将瓶口旋紧至水龙头；

步骤2，打开水龙头让水流入洗筛瓶，分水隔板使水从中间及周沿分流而下，水流反复冲洗土样，土粒在水流的击打冲洗作用下分散成更小的颗粒，通过洗筛瓶底部的滤膜，进入纳土器，多余的水从纳土器上部滤膜流出；直至下渗水流清澈，关闭水龙头，此时由于真菌孢子直径大于滤膜筛孔尺寸而被留在滤膜上；

步骤3，旋开螺纹，分离洗筛瓶和纳土器；将离心管置于堵块下方，并用离心管侧壁顶起堵块，打开漏斗；打开水龙头，用少量水流将残留在滤膜上的固体以及真菌孢子冲入离心管；

步骤4，将离心管置于离心机离心真菌孢子，然后采用蔗糖溶液离心并过滤，即完成真菌孢子的分离。

本发明的特点还在于，

滤膜与洗筛瓶瓶壁夹角为30°。

本发明的有益效果是，本发明一种真菌孢子洗筛过滤器，封闭瓶身设计可借助较大水流打散土粒，并自动冲洗，无需人工操作；漏斗的设计方便样品进入离心管；纳土器能够及时收集滤液中的杂质及泥土，避免了泥土堵塞 下水道，有利于废土的处理。采用本发明进行真菌孢子的分离，提高了真菌孢子分离提取的效率及准确率，极大的方便了微生物研究工作，具有专业应用价值。

附图说明

图1是本发明真菌孢子洗筛过滤器的结构示意图；

图2是本发明真菌孢子洗筛过滤器中分水隔板的结构示意图；

图3是本发明真菌孢子洗筛过滤器中漏斗的结构示意图。

图中，1.洗筛瓶，2.瓶口，3.分水隔板，4.滤膜，5.漏斗，6.堵块，7.螺纹，8.纳土器。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明进行详细说明。

本发明一种真菌孢子洗筛过滤器，如图1所示，包括透明材质的洗筛瓶1，洗筛瓶1底部设置有纳土器8，洗筛瓶1与纳土器8密封连接，洗筛瓶1内自上而下依次设置有分水隔板3和滤膜4，滤膜4上设置有漏斗5。

其中洗筛瓶1瓶口2设置有内螺纹；如图2所示，分水隔板3开有中央孔，分水隔板3四周与洗筛瓶1连接处均匀开有缺口，中央孔和缺口用于使水分流，并且使水流沿瓶壁下流；滤膜4倾斜设置，漏斗5位于滤膜4最低处，如图3所示，漏斗5内设置有堵块6；滤膜4与洗筛瓶1瓶壁夹角为30°；堵块6底部伸出漏斗5颈下口；洗筛瓶1与纳土器8通过螺纹7密封连接；纳土器8靠近洗筛瓶1底部周壁为滤膜，纳土器8其余周壁密封。

采用上述真菌孢子洗筛过滤器进行真菌孢子分离的方法，具体按以下步骤实施：

步骤1，采集的土壤样品研磨后过土壤筛，称取所需重量土样经瓶口2 加入洗筛瓶1，将瓶口2旋紧至水龙头；

步骤2，打开水龙头让水流入洗筛瓶1，分水隔板3使水从中间及周沿分流而下，水流反复冲洗土样，土粒在水流的击打冲洗作用下分散成更小的颗粒，通过洗筛瓶1底部的滤膜4，进入纳土器8，多余的水从纳土器8上部滤膜流出；直至下渗水流清澈，关闭水龙头，此时由于真菌孢子直径大于滤膜4筛孔尺寸而被留在滤膜4上；

步骤3，旋开螺纹7，分离洗筛瓶1和纳土器8；将离心管置于堵块6下方，并用离心管侧壁顶起堵块6，打开漏斗5；打开水龙头，用少量水流将残留在滤膜4上的固体以及真菌孢子冲入离心管；

步骤4，将离心管置于离心机离心真菌孢子，然后采用蔗糖溶液离心并过滤，即完成真菌孢子的分离。

真菌孢子分离后，旋开瓶口2，将洗筛瓶1和水龙头分离。倾倒掉纳土器8中多余的水，将杂质及泥土收集入垃圾袋，并将纳土器8清洗干净，以备下次使用。

本发明一种真菌孢子洗筛过滤器主体采用瓶状设计，ABS透明塑料材质，可全程观察水量及洗选程度。洗筛瓶1瓶口2通过螺纹连接万能龙头可与实验室各种水龙头相接，并起到固定瓶体的作用，封闭的瓶身，使洗筛过程可借助较大水流自动冲洗。分水隔板也为ABS透明塑料材质，与洗筛瓶瓶身一体合成，与瓶身连接周沿开有缺口孔，可以使水流沿侧壁下流。滤膜4的材质为尼龙，通过纤维平纹编织方式纺织成型，孔径0.063mm(230目)，30℃倾角合成与靠近洗筛瓶1底部位置，滤膜4的倾斜设计，有利于洗筛后真菌孢子的收集。滤膜4最低端设置有斗5，真菌孢子的收集；漏斗5的堵块6为不锈钢合金实体的金属钉材料，以重力阻塞小漏斗口，从下方向上顶 起即可打开漏斗口。洗筛瓶1瓶身和纳土器8通过螺纹7连接，方便纳土器8的拆卸，便于残留物的收集。纳土器8上部1/4周壁为尼龙滤膜，孔径0.063mm(230目)，可使洗筛过程中多余水分及时流出，便于大量水持续洗筛，纳土器8剩余3/4部分为塑料密封结构，便于泥土等残留物的收集。

本发明一种真菌孢子洗筛过滤器，封闭瓶身设计可借助较大水流打散土粒，并自动冲洗，无需人工操作；漏斗的设计方便样品进入离心管；纳土器能够及时收集滤液中的杂质及泥土，避免了泥土堵塞下水道，有利于废土的处理。采用本发明进行真菌孢子的分离，提高了真菌孢子分离提取的效率及准确率，极大的方便了微生物研究工作，具有专业应用价值。