阿魏酸磷脂复合物及其在制备具有美白功效的化妆品中的用途

摘要

本发明公开了一种阿魏酸磷脂复合物及其在制备具有美白功效的化妆品中的用途。本发明的一种阿魏酸磷脂复合物，由阿魏酸和磷脂在非质子性溶剂中经加热搅拌复合后，除去非质子溶剂后得到。本发明还提供了一种含有阿魏酸磷脂复合物的具有美白功效的化妆品，包括具有美白功效的护肤油、乳液和膏霜。本发明通过将阿魏酸和磷脂复合改变了阿魏酸的理化性质，增强了其脂溶性、稳定性和水分散性，改善了其跨膜转运性能，从而提高了其生物利用度。30名25～45女性志愿者使用含有该阿魏酸磷脂复合物的美白护肤乳液30天，面部黑色素含量明显降低，皮肤亮度增加，皮肤MI值、L*值和ITA°值与起始值相比较有显著性差异(P<0.05)，表明该美白乳液具有良好的人体美白效果。

说明书

技术领域

本发明涉及一种阿魏酸磷脂复合物的制备方法，还涉及含有阿魏酸磷脂复合物 的美白化妆品及其制备方法。本发明属于化妆品技术领域。

背景技术

阿魏酸是普遍存在于天然植物细胞壁中的一种酚酸，是阿魏、川芎、当归、升 麻等中药有效成分之一，因其良好的抗氧化、抗菌、抗癌等作用而被广泛的应用在 食品和医药行业。近年来，随着对阿魏酸生物活性研究的深入，发现其不仅具有很 好的药理功效还具有良好的护肤功效。一是阿魏酸在290～330nm附近有良好的紫外 线吸收，可添加到防晒护肤品中保护皮肤免受UVB的损伤；二是阿魏酸有很强的抗 氧化作用，即能够清除引起人体疾病、衰老的自由基如超氧化物、羟基、羟基过氧 化物等；三是有抑制酪氨酸酶的作用。因此，阿魏酸可作为防晒、抗衰老、美白功 效成分应用到化妆品中。目前，日本已经将阿魏酸作为防晒剂应用到化妆品中。虽 然阿魏酸能改善皮肤品质，使其细腻、光泽、富有弹性，但是因其脂溶性差、物化 性质不稳定，使得其在化妆品中的应用受到一定限制。

磷脂是生物膜的基本成分，广泛存在于自然界动植物种子中，具有来源广，无 毒等优点，磷脂分子具有一个亲水性的头部和两条疏水长链，由于其两亲性而具有 乳化、分散、助渗、润湿等特性。磷脂应用于化妆品,一方面是利用它的表面活性、 天然性和胶体性质，另一方面它是皮肤细胞的固有成分，在细胞代谢和细胞膜渗透 性调节方面起着重要作用，且对皮肤还有一定的生理作用。磷脂在化妆品中所起的 功能作用归纳起来如下：抗氧化剂、乳化剂、软化剂、润肤剂、渗透剂、稳定剂、 润滑剂、富脂剂、脂质体的包埋剂、营养增补剂和维生素源。磷脂被认为是皮肤天 然保湿因子(NMF)的基本成分，是维持皮肤正常功能的必要成分，对维持细胞的 水分平衡和协调细胞的新陈代谢起着重要作用。磷脂具有吸湿性和易于渗透入皮肤 中的能力，故可束缚皮肤中的水分，防止皮肤干燥，进而保持皮肤柔软光滑和健康。

磷脂复合物是以磷脂为载体的一种药物传递系统，从固体制剂角度看，磷脂复 合物是一种较为特殊的固体分散体，许多研究发现，很多类型的天然活性成分与磷 脂之间具有特殊的亲和力。通过制备磷脂复合物，可以提高活性成分的生物利用度， 使活性成分具有更好地透过皮肤角质层，发挥护肤功效。

发明内容

本发明目的之一是提供一种由阿魏酸与磷脂复合而成的阿魏酸磷脂复合物及 其制备方法，以改善阿魏酸亲水亲油理化性质，提高阿魏酸的溶解性能，提高其生 物利用度，可有效的解决其不易吸收的问题，并保持或增强其在不同环境的抗氧化 性。

上述目的通过以下的技术方案实现：

本发明的一种阿魏酸磷脂复合物，其是由阿魏酸和磷脂在非质子性溶剂中复 合、除去非质子性溶剂后得到；

其中，所述的磷脂选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨 酸、氢化大豆卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱以及二棕榈酰磷脂酰乙醇胺中的一种或 多种，优选为大豆卵磷脂；

其中，所述的非质子性溶剂选自氯仿、乙醚、二氯甲烷、丙酮、乙醇、四氢呋 喃以及乙酸乙酯中的一种或多种，优选为乙醇；

其中，所述阿魏酸和磷脂的摩尔比为1:0.5～10，优选为1:0.5～4。

在本发明中，优选的，所述阿魏酸为顺式阿魏酸或反式阿魏酸，更优选为反式 阿魏酸。

进一步的，本发明还提出了一种制备所述的阿魏酸磷脂复合物的方法，包括以 下步骤：

a)将阿魏酸和磷脂在非质子性溶剂中加热搅拌复合；

b)除去步骤a)得到的产品中的非质子性溶剂，得到阿魏酸磷脂复合物。 根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述阿魏酸在所述非质子溶剂中的浓度为 8mg/mL以下，优选为1～4mg/mL。

在本发明中，优选的，所述复合的温度为20～60℃，更优选为40～60℃；所述 复合的时间为15min～4h，更优选为15min～2h。

在本发明中，优选的，所述除去步骤a)得到的产品中的非质子溶剂包括减压浓 缩步骤a)得到的产品直至非质子溶剂蒸出，然后将其在真空中干燥24h。

相较于现有技术，本发明的有益效果为：

1)制备工艺简单、重复性好：本发明提供的阿魏酸磷脂复合物为阿魏酸和磷脂 以摩尔比1：0.5～10的复合物，所述的磷脂为天然磷脂或合成磷脂。

2)适合工业化生产：本发明采用阿魏酸为原料，与磷脂以适当的制备方法制成 阿魏酸磷脂复合物，改善了阿魏酸的亲水亲油理化性质，增强溶解性与稳定性，提 高了阿魏酸的生物利用度。

3)用途广泛：本发明制备的阿魏酸磷脂复合物可作为化妆品功效原料，用于美 白、防晒、抗衰老等化妆品乳液、膏霜、护肤油等产品中，通过制备阿魏酸磷脂复 合物可以改善阿魏酸在化妆品应用过程中，溶解度不加，涂抹于皮肤上，吸收效果 不佳等缺陷。

4)溶解度实验证明本发明的阿魏酸磷脂复合物改善了阿魏酸磷脂复合物的溶解 性能，可有效解决其不易吸收的问题。

本发明的目的之二是提供所述的阿魏酸磷脂复合物在制备化妆品中的用途，优 选的，所述化妆品为具有美白效果的化妆品，包括具有美白效果的护肤油、乳液以 及膏霜。

上述目的通过以下的技术方案实现：

一种含有阿魏酸磷脂复合物的美白护肤油，其是通过将本发明所述的阿魏酸磷 脂复合物进一步溶解在油相或加入到含有两性亲表面活性剂的油相中制备而成；

其中，优选的，所述阿魏酸磷脂复合物与油相或者含有两亲性表面活性剂的油 相的质量比为1：1～2；

其中，优选的，所述的油相是中链或长链脂肪酸甘油酯，所述的中链脂肪酸甘 油酯选自具有8～10个碳原子链的脂肪酸甘油单、双、三酯或其混合物；所述的长 链脂肪酸甘油酯选自具有12～18个碳原子链长的甘油单、双、三酯或其混合物；

其中，优选的，所述的两亲性表面活性剂，选自油酸聚乙二醇甘油酯、单硬脂 酸丙二醇、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一种或多种。

一种含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液，其是通过将本发明所述的阿魏酸磷脂 复合物作为功效原料添加到乳化体系中制备而成；

具体的，所述的美白乳液通过以下方法制备得到：

将A相在搅拌下加热到80℃，搅拌均匀后，开始均质A相，并缓慢加入B相， 在17000rpm下继续均质2分钟，搅拌使其冷却；在40℃下将C相加入，并在17000rpm 下均质30秒，得到含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液；

其中，A相由合成角鲨烷，辛酸/癸酸甘油三酯，棕榈酸乙基己酯，鲸蜡硬脂醇， 聚二甲基硅氧烷，阿魏酸磷脂复合物，维生素E以及尼泊金甲酯或尼泊金乙酯组成； 所述的B相由甘油，丁二醇，海藻糖以及去离子水组成；所述的C相由三乙醇胺以 及氮酮/PEG40氢化蓖麻油组成；优选的，各原料的质量百分含量如下所示：

一种含有阿魏酸磷脂复合物的美白膏霜，其是通过将本发明所述的阿魏酸磷脂 复合物作为功效原料按照化妆品的常规制备方法制备成美白膏霜。

本发明通过将阿魏酸和磷脂复合改变了阿魏酸的理化性质，增强了其脂溶性、 稳定性和水分散性，改善了其跨膜转运性能，从而提高了其生物利用度。本发明制 备得到的含有阿魏酸磷脂复合物的美白护肤油、乳液和膏霜，具有良好的人体美白 效果。30名25～45女性志愿者使用含有该阿魏酸磷脂复合物的美白乳液30天，面 部黑色素含量明显降低，皮肤亮度增加，皮肤MI值、L*值和ITA°值与起始值相比 较有显著性差异(P<0.05)。

附图说明

图1为使用本发明的含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液的志愿者在不同时期皮 肤L*值的变化；

图2为使用本发明的含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液的志愿者在不同时期皮 肤ITA°值的变化；

图3为使用本发明的含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液的志愿者在不同时期 皮肤MI值的变化。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述 而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域 技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的 细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

实施例1：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂150mg，加入无水乙醇40ml，40℃加热搅拌 2h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例2：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂150mg，加入无水乙醇80ml，40℃加热搅拌 2h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例3：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂300mg，加入无水乙醇20ml，60℃加热搅拌 1h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例4：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂300mg，加入无水乙醇40ml，60℃加热搅拌 2h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例5：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂600mg，加入无水乙醇40ml，60℃加热搅拌 1h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物

实施例6：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂600mg，加入无水乙醇40ml，40℃加热搅拌 2h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例7：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂900mg，加入无水乙醇40ml，60℃加热搅拌 1h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例8：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂900mg，加入无水乙醇80ml，60℃加热搅拌 2h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例9：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂900mg，加入无水乙醇80ml，60℃加热搅拌 1h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例10：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂1200mg，加入无水乙醇20ml，60℃加热搅 拌2h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例11：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂1200mg，加入无水乙醇40ml，40℃加热搅 拌1h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例12：阿魏酸磷脂复合物的制备

称取阿魏酸77.67mg，大豆卵磷脂1200mg，加入无水乙醇80ml，40℃加热搅 拌2h，旋蒸除去溶剂，真空干燥24h，即得本发明的阿魏酸磷脂复合物。

实施例13含有阿魏酸磷脂复合物的美白护肤油的制备

称取实施例1制备得到的阿魏酸磷脂复合物1g，加入5g辛酸/癸酸三甘油酯， 1g橄榄果油、2.9g聚甘油油酸酯以及0.1g的维生素E，搅拌至形成透明的溶液状， 得到含有阿魏酸磷脂复合物的美白护肤油。

实施例14含有阿魏酸磷脂复合物的美白护肤油的制备

称取实施例2制备得到的阿魏酸磷脂复合物1g，加入2g辛酸/癸酸三甘油酯， 2g牛油树脂，1g霍霍巴油，2g油酸聚乙二醇甘油酯，1.9橄榄果油以及0.1g维生 素C，搅拌至形成透明的溶液状，得到含有阿魏酸磷脂复合物的美白护肤油。

实施例15含有阿魏酸磷脂复合物的美白护肤油的制备

称取实施例3制备得到的阿魏酸磷脂复合物0.8g，加入单硬脂酸丙二醇3.4g， 辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯2.8g，橄榄油2.2g，0.7g的辛酸/癸酸三甘油酯以及0.1g 的维生素E，搅拌至形成透明的溶液状，得到含有阿魏酸磷脂复合物的美白护肤油。

实施例16含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液的制备

原料及用量：

制备方法：搅拌条件下将A相加热到80℃，搅拌均匀后，开始均质A相，并 缓慢加B相，在17000rpm继续均质2分钟，搅拌下使其冷却。在40℃下将C相加 入，并在17000rpm均质30秒，得到含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液。

实施例17含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液的制备

原料及用量：

制备方法：搅拌条件下将A相加热到80℃，搅拌均匀后，开始均质A相，并 缓慢加B相，在17000rpm继续均质2分钟，搅拌下使其冷却。在40℃下将C相加 入，并在17000rpm均质30秒，得到含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液。

试验例1阿魏酸磷脂复合物的表观溶解度实验

分别称量过量的阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物、等比例的阿魏酸和磷脂的物理混 合物溶于10ml去蒸馏水中，室温下搅拌48h，分别取样品5ml各样品，12000r·min^-1离心5min，精密吸取上清液1ml用无水乙醇稀释后，UV测定。

阿魏酸、磷脂复合物、阿魏酸和磷脂的物理混合物在水中的溶解度测定结果见 表1，由表可知物理混合物和磷脂复合物的在水中的溶解度均比阿魏酸在水中的溶 解度高，说明将阿魏酸制备成磷脂复合物增大了其在水中的溶解度。

表1阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物、阿魏酸和磷脂的混合物在25℃的溶解度(n＝3)

试验例2阿魏酸磷脂复合物对DPPH自由基的清除实验

下面通过DPPH自由基清除实验证明本发明的阿魏酸磷脂复合物能够保持或者 一定程度增大物质的抗氧化性能。

分别称量一定量的阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物用无水乙醇分别配制成5个浓度 的样品液。称取20mgDPPH，加入无水乙醇溶解并定容于250mL容量瓶中；0-4℃ 下避光保存，现配现用，4h内有效。按下述实验步骤操作：

1)取1mL的待测液与1mL的DPPH溶液混匀(A1管)；

2)取1mL的无水乙醇与1mL的DPPH溶液混匀(A2管)；

3)取1mL的无水乙醇与1mL的待测液混匀(A3管)；

4)反应20min后，在517nm下测A1、A2、A3管吸光度值。

清除率计算公式为：

清除率(％)＝[(A2+A3)-A1]/A2。

阿魏酸及其磷脂复合物DPPH自由基清除实验中阿魏酸磷脂复合物中所含阿魏 酸与单体阿魏酸量相同。结果如下表2所示：

表2阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物、磷脂对DPPH自由基清除率(n＝3)

试验例3阿魏酸磷脂复合物的体外酪氨酸酶抑制试验

下面通过体外酪氨酸酶抑制试验实验证明本发明的阿魏酸磷脂复合物能够保 持物质的酪氨酸酶活性，从而通过该途径发挥美白功效。

阿魏酸及其磷脂复合物体外酪氨酸酶抑制实验，溶解过程中加入增溶剂HPS， 阿魏酸磷脂复合物中所含阿魏酸与单体阿魏酸量相同。实验步骤如下所述：

1)按照下表3，分别配制C1、C1、T1以及T2四组试剂，酪氨酸酶为后加入；

2)C2管配好摇匀后，在37℃水浴锅中水浴加热10min，波长475nm下调零。

3)C1管溶液配好摇匀，37℃水浴10min后，加酪氨酸酶1ml，继续水浴25分 钟，测定C1吸光度值。

4)按(2)(3)同样方法，以T2调零测定T1吸光度值。

5)计算样品对酪氨酸酶的活性抑制率T(％)。公式：T(％)＝(C1-T1)/C1 ×100％

表3试剂配比表

单位(mL) C1 C2 T1 T2 L-酪氨酸 2 2 2 2 样品 0 0 2 2 PBS 4 5 2 3 酪氨酸酶 1 0 1 0 总体积 7 7 7 7

注：C1和T1加入1mL酪氨酸酶，酶活为100U/mL。

结果如下表4所示。

表4阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物对酪氨酸酶的抑制率(n＝3)

试验例4阿魏酸磷脂复合物对细胞黑色素的抑制试验

下面通过细胞黑色素抑制试验证明本发明的阿魏酸磷脂复合物能够减少黑素 瘤细胞黑色素的生成。

阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物对黑色素瘤细胞中黑色素抑制实验(溶解过程中加 入增溶剂HPS。阿魏酸磷脂复合物中所含阿魏酸与单体阿魏酸量相同)，实验步骤 如下所述：

1)根据计数所得的细胞浓度，将细胞进行稀释，加入6孔板中，使每孔细胞的 数量约10⁵个。向6孔板中加入1ml的培养液，后加入1ml的细胞悬浮液。37℃， 5％CO2条件下孵育24小时。

2)种板培养24h后，取出细胞培养板，换新培养液1800ul，后加入200ul不同 浓度的样品，每个样品做三个平行。37℃，5％CO2条件下孵育72小时。

3)弃去细胞上清液，PBS清洗2次，加入0.5ml的PBS和0.5ml的胰蛋白酶， 37℃，5％CO2条件下消化3～5分钟，拍打使细胞脱落，收集细胞液于2ml的EP管 内，用1ml的PBS再次清洗6孔板，将其与第一次收集的细胞液合并。4℃的条件 下，5000转-min，离心5分钟。弃去上清液。取上述细胞加入1ml的PBS后再次离 心，弃去上清液，即收集得到小鼠黑素瘤细胞。注意：在最后一步弃去上清液收集 细胞的过程中，可使用移液枪吸取EP管内残存的PBS，避免细胞浓度过低影响后 续实验。

4)向收集得到的小鼠黑素瘤细胞中加入50ul的1NNaOH，60℃震荡2h，使细 胞充分破裂，释放出黑色素及其它胞内蛋白质。用移液枪取50ul细胞裂解液转移到 96孔板内，405nm下测定吸光值。50ul1NNaOH做空白对照。

5)总蛋白的测定

取已测定过黑素含量的96孔板内的溶液10ul转移到新的96孔板内，使用考 马斯亮蓝试剂盒测定总蛋白含量(制作蛋白质含量标准曲线)在595nm条件下测定 其吸光值。10ul1NNaOH做空白对照。

黑色素合成抑制率＝[1-A1/C1*C0/A0]*100％

A1：样品黑素含量吸光值

A0：溶剂空白对照吸光值

C1：样品蛋白质含量

C0：溶剂空白对照蛋白质含量

结果如下表5所示。

表5阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物对黑色素生成的抑制率(n＝3)

试验例5阿魏酸磷脂复合物的体外抑制透明质酸酶试验

下面通过体外抑制透明质酸酶试验证明本发明的阿魏酸磷脂复合物有抑制透 明质酸酶的活性，具有潜在的抗炎功效。

阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物体外对透明质酸酶活性的抑制实验，样品配制过程 中，加入增溶剂HPS，其中阿魏酸磷脂复合物中所含阿魏酸与单体阿魏酸量相同。 实验步骤如下所述：

采用透明质酸酶体外抑制实验Elson-Morgan法进行。取0.1mL0.25mmol/LCaCl₂溶液和0.5mL透明质酸酶液37℃保温培养20min；加入样品液0.5mL，继续37℃保 温培养20min；加入0.5mL透明质酸钠液37℃保温30min，常温放置5min；加入 0.1mL0.4mol/LNaOH溶液和0.5mL乙酰丙酮溶液，置于沸水浴中加热15min后立即 用冰水进行冷却5min；加入埃尔利希试剂1.0mL并用3.0mL无水乙醇进行稀释， 放置20min显色，用分光光度计582nm测定其吸光度值。

结果如下表6所示。

表6阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物对透明质酸酶活性的抑制率(n＝3)

试验例6阿魏酸磷脂复合物的渗透性实验

下面通过渗透性实验来证明本发明的阿魏酸磷脂复合物具有很好的渗透性能， 能够很好的渗透至皮肤，而且具有缓释阿魏酸，从而达到长时间的作用的功效。

离体鼠皮的制备，取180～220gWistar大鼠，♀♂兼用，处死，于腹部脱毛， 剪取脱毛后皮肤，除尽皮下组织及脂肪，用生理盐水反复洗涤至无白色混浊物，浸 于生理盐水中，于4℃冰箱中保存，1周内使用。实验前检查鼠皮的完整性，不得 有破损。

供给液的配制，称取过量的阿魏酸和阿魏酸磷脂复合物，配制成供给液，其中 两种供给液所含的阿魏酸的量是相同的。

渗透扩散装置及经皮渗透试验透皮扩散仪的上池为筒状供给池，下室为圆锥状 接收池，其间夹皮肤并固定。经皮渗透面积为3.14cm²，以潜水式电磁搅拌器维持 接收池的动态环境。于接收池中精密加入6.6mL生理盐水，置37℃恒温水浴中， 开动电磁搅拌器并保持恒速搅拌(200r·min^-1)，取供给液1mL于供给池中，于 0.5、1、2、4、8、12h、24h时分别精密吸取接受液2mL(补加等量生理盐水)， 用0.45μm微孔滤膜过滤，紫外分光度法测定吸光值，计算接受液浓度。并求算累 积渗透量Qn(μg·cm^-2)，结果如下表7所示。

表7阿魏酸、阿魏酸磷脂复合物经皮渗透量随时间变化的量

由表7可知，阿魏酸磷脂复合物经皮渗透量明显大于阿魏酸，且在涂抹供给液 阿魏酸磷脂复合物24h后，其所携带的阿魏酸仍然能够透过皮肤，这说明阿魏酸磷 脂复合物能够增大阿魏酸的经皮吸收量，同时可以延长作用时间。

试验例7含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液的美白效果评价

1材料和仪器

样品：实施例16制备得到的含有阿魏酸磷脂复合物的美白乳液

1.2测试仪器

皮肤黑色素和血红素测试仪(MexameterMX18)，德国CK公司生产；多功能 皮肤测试仪及色度测试探头MPA9，德国CK公司生产。

2实验方法：

参考文献进行：吴金昊，刘琦，邓影妹等，美白祛斑化妆品功效评价方法研究 [C]，第十届中国化妆品学术研讨会论文集，2014:276-280。

2.1志愿者

受试者共计30人，25岁-45岁女性。志愿者排除条件符合《化妆品接触性皮 炎诊断标准及处理原则》纳入、排除标准。

2.2测试指标

皮肤黑色素含量(MI)值用来表征黑素指数，MI值越大则表示皮肤黑色素含 量越高。皮肤亮度L值、ITA°值。颜色仪测得的L*表征亮度，用来表示皮肤黑白 色度，其数值越大，皮肤颜色越偏向白色；a*代表红绿色度，其变化表示美白产品 使用前后红绿色度的变化，+a*表示红色，-a*表示绿色；b*代表蓝黄色度，其变化 表示美白产品使用前后皮肤蓝黄色度的变化，+b*表示黄色，-b*表示蓝色。由测得 的L*、a*和b*数值可以计算ITA°值，从而比较人群皮肤颜色的变化，ITA°值越 大，皮肤越明亮，反之，皮肤越晦暗。

2.3测试环境

测试环境要求：恒温恒湿环境，温度：22℃土1℃，湿度：50％土5％。测试前 受试者要在此环境下等待20min。

2.4测试方法

测试部位为面部，要求产品涂抹均匀，使用美白乳液，受试者于每日早晚各涂 抹一次，使用周期为4周。在测试周期内，受试部位不使用其它任何化妆品。

2.5数据采集

测试一共进行5次，分为初始值及使用化妆品一周、两周、三周和四周后，每 周同一时间受试者将涂抹部位洗净，由测试者使用测试仪器测定涂抹部位数值。

2.6数据统计

采用SigmaStat3.5数据分析分软件进行方差分析。统计结果通过皮肤黑色素含 量及皮肤色泽变化，反应化妆品的美白功效。

3结果与讨论

3.1皮肤L*a*b*、ITA°色度分析测试结果，本实验共筛选30人纳入本研究， 没有组间脱落。实验结果见表8和图1，受试部位使用样品后，样品组测试值与初 始值相比，在实验周期第0周到第4周的时间范围内，皮肤L*值呈升高趋势，且在 实验第3周时，有显著性差异(P＜0.05)。

表8不同实验时期皮肤L*值的变化(x±s，n＝30)

(注：与正常对照组比较，*P<0.05)

实验结果见表9和图2，受试部位使用样品后，样品组测试值与初始值相比， 在实验周期0周到第4周的时间范围内，皮肤值呈升高趋势。

表9不同实验时期皮肤ITA°值的变化(x±s，n＝30)

(注：与正常对照组比较，*P<0.05)

3.2黑色素指数分析测试结果

本次实验共筛选30名受试者。实验结果见表10和图3，受试部位使用样品后， 样品组测试值与初始值相比，在实验周期第0周到第4周的时间范围内，皮肤黑色 素含量MI值呈降低，且在实验第3周有显著性差异(P＜0.05)。

表10不同实验时期皮肤黑色素含量MI值的变化(x±s，n＝30)

(注：与正常对照组比较，*P<0.05)