一种用于治疗牙周炎的现代中药制剂及其制备方法

摘要

本发明涉及一种用于治疗牙周炎的现代中药制剂及其制备方法，属于中药领域。是由下列重量份的原料制成的：玄参9～15份，生地9～30份，牡丹皮6～20份，薄荷6～18份。本发明采用玄参、生地、丹皮、薄荷四味药组方，在治疗牙周炎时，注重从整体辨证论治，注意局部与全身的有机联系，具有清胃泻火、生津止痛之功效，在临床上应用于治疗牙周炎多年，疗效确切，处方组成简单，制备成胶囊剂型，便于患者的服用和携带，具有明显抗炎、镇痛、抑菌作用。

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，是以中草药为原料制备的用于治疗牙周炎的现代中药制剂。

背景技术

牙周炎是目前临床上比较多见、常见的口腔疾病。没有一个国家、地区、种族、性别、年龄的人群可以幸免。牙周病的患病率随着年龄的增长而增加，35岁以后患病率明显增高，50-60岁时达到高峰。现代医学认为，牙周炎是发生于牙周组织的慢性炎症性疾病，其可能始动因为菌斑微生物。祖国医学认为，是因多食膏粱厚味、辛辣酒醴而至胃中积热、胃火上蒸，火热循经、熏蒸牙龈，或不注意空腔卫生、食物崁塞、牙垢沉积，腐臭之气、腌渍，或气血虚弱、齿龈失养萎缩。属中医“牙宣”病范畴。

目前已经公认，牙周病对口腔健康的影响至关重要，是成年人牙齿丧失的最主要原因。除口腔范畴外牙周病对人体全身系统健康有所影响，可以诱发或加重一些系统性疾病的发生和发展，已经引起了世界范围内对牙周病的高度关注和重视。我国经过1982、1995和2005年三次的全国口腔健康的调查，结果显示我国牙周病的流行情况和变化不容乐观。即使以更严格而狭义的牙周炎来评估，我国患者人群在40％以上，如果已包含牙龈炎在内的广义牙周病来评估，人群患病率将高达90％以上，目前临床上还没有哪一种疾病会有如此高的发病率。我国人口众多，如此庞大的人群数量所造成的医疗资源消耗、经济花费已经无法估量。以目前的全国范围内有限的口腔医生、口腔诊疗单位的数量和质量来应付这样的局面都是不可能承受的。因此势必造成很多患者病情被延误，得不到有效的治疗或者有可能保留的牙齿被拔除，还有可能引发更严重的系统性疾病。

牙周病是发生在牙齿周围支持组织的慢性进行性破坏性疾病，牙菌斑、牙结石是造成牙周炎和牙龈炎的主要原因。菌斑中的细菌是牙周病发生的始动因素，微生物在牙齿表面或牙龈沟内附着、生长繁殖，通过代谢产物中的有害物质以及其本身产生的多种酶等引起牙周组织破坏，牙石的长期刺激可引起牙龈红肿、萎缩，牙槽骨萎缩，牙齿松动，最终导致牙齿过早脱落。

牙周病的发生既有局部因素，也有全身因素。目前针对牙周病，特别是牙周炎的治疗既要考虑局部治疗，还要重视与牙周病有关的系统性疾病治疗，主要是手术治疗结合西药抗生素的治疗方法。局部手术治疗会存在患者的接受程度，尤其是中老年患者多存在全身系统性疾病，如：高血压、糖尿病、心脑血管疾病等，因此采用手术方法治疗会存在很多安全隐患，还费时费事，但收效甚微；同时抗生素的应用又会带来耐药性、不良反应和抗生素滥用的危险。因此使得牙周炎的治疗处于举步维艰的境地，一方面患者发病率逐渐增多，一方面治疗方法的局限。

发明内容

本发明提供一种用于治疗牙周炎的现代中药制剂及其制备方法，具有清胃泻火、生津止痛之功效，旨在临床上为更多的牙周病患者服务，起到防病治病的目的。

玄参具有清热凉血，滋阴降火，解毒散结功能，主要用于热入营血、温毒发斑、热病伤阴、舌绛煩渴、津伤便秘、骨蒸劳嗽、目赤、咽痛、瘰疬、白喉、痈肿疮毒等症。主要含有环烯醚萜苷类、苯丙素苷类、有机酸类及挥发油等成分，具有抗炎，增强免疫，保肝，抗菌，抗肿瘤，抗氧化，抗疲劳，及神经及脑组织、心血管系统、血液系统等活性。

生地具有清热凉血，养阴生津功效，主要用于热入营血、温毒发斑、吐血衄血、热病伤阴、舌绛煩渴、津伤便秘、阴虚发热、骨蒸发热、内热消渴等症。主要含有苷类、糖类及氨基酸成分，具有增强免疫，调节血糖，抗脑缺血损伤，抗炎，延缓衰老，促进造血功能，保护肾脏等活性。

丹皮具有清热凉血，活血化瘀功效，主要用于热入营血、温毒发斑、吐血衄血、夜热早凉、无汗骨蒸、经闭痛经、跌扑伤痛、痈肿疮毒等症。主要含有牡丹酚、牡丹酚苷、牡丹酚原苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、羟基芍药苷、苯甲酰羟基芍药苷以及丹皮酚新苷，具有镇静催眠，解热降温，镇痛，抗炎，影响免疫力，抗菌，抗心肌缺血，抗心律失常，抗脑缺血，抗血栓形成，降血糖，抗动脉粥样硬化，保肝等活性。

薄荷具有疏散风热，清利头目，利咽，透疹，疏肝行气功能，主要用于风热感冒、风温初起、头痛、目赤、喉痹、口疮、风疹、胸肋胀闷等证。主要含有挥发油类、黄酮类、葡萄糖苷类等成分，具有影响中枢神经，抗脑缺血再灌注损伤、抗病原微生物、抗炎、利胆等活性。

针对牙龈红肿疼痛、出血、出脓、口臭、烦渴多饮、大便秘结、小便黄赤、舌质红、苔黄腻、脉洪数症状，依据中医理论，方中君药玄参，其性凉而不寒、又善滋阴，有清热养阴之功，《本草新编》玄参“入脾、肾、胃经”、《医学衷中参西录·玄参解》“玄参，味甘微苦，性凉多液，原为清补肾经之药”；取生地和丹皮为臣药与佐药，生地养阴生津、有清养胃阴之功，《名医别录》“……，利大小肠，去胃中宿食，补五脏，内伤不足，通血脉，益气力，……”；丹皮活血散瘀，专攻中焦瘀热化火；生地与玄参同用清营养阴，用于热伤津液，而至肠燥便秘，丹皮与玄参同用宣行而不滞，收其凉血之功；薄荷为使药，《本草纲目·卷十四·薄荷》：“薄荷，辛能发散，凉能清利，专于消风散热。故……口齿诸病，……为要药”，《备急千金要方·卷二十六·食治》“却肾气，令人口气香洁”。四药组合清胃中实火，散中焦瘀热，凉血生津，清口气，养阴除燥，共奏清胃泻火、生津止痛之功。

本发明药物组分的用量也是经过发明人进行了大量摸索总结得出来的，各组分用量为在下述重量范围内都具有较好的疗效：

玄参9～15份，生地9～30份，牡丹皮6～20份，薄荷6～18份；

优选为：

玄参12份，生地12份，牡丹皮12份，薄荷12份；

本发明药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂，优选的胶囊剂的制备方法如下：

(1)取玄参、生地，加6～8倍量50～70％乙醇回流提取二至三次，每次1～3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃时测相对密度为1.30～1.32的稠膏备用；

(2)取薄荷，加9～11倍量水，浸泡0.5～1.5小时，提取挥发油3～5小时，收集挥发油，将挥发油溶于乙醇，挥发油：乙醇＝1：5，加入到30℃的β-环糊精饱合水溶液中，挥发油：β环糊精：水＝1：9：90，30℃恒温搅拌1～2小时，400转/min，冷藏24小时，滤过，40℃干燥，过80目筛，备用，蒸馏后的水液另器收集，药渣备用；

(3)取牡丹皮，加9～11倍量水，浸泡1～2小时，收集6～8倍量馏出液，冷藏,过滤,收集沉淀物，40℃干燥，过80目筛，备用；

(4)将步骤(3)中蒸馏后的水液另器收集，药渣与薄荷药渣合并，加7～9倍量水，煎煮1～3小时，滤过，滤液与上述水液合并，浓缩至60℃时测相对密度为1.30～1.32的稠膏与上述备用稠膏合并，减压干燥，0.08Mpa，80℃，粉碎成细粉，加入上述挥发油包合物、蒸馏物及淀粉适量，混匀，装入胶囊，即得。

优选的：

(1)取玄参、生地，加7倍量60％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃时测相对密度为1.30～1.32的稠膏备用；

(2)取薄荷，加10倍量水，浸泡1小时，提取挥发油4小时，收集挥发油，将挥发油溶于乙醇，挥发油：乙醇＝1：5，加入到30℃的β-环糊精饱合水溶液中，挥发油：β环糊精：水＝1：9：90，30℃恒温搅拌1.5小时，400转/min，冷藏24小时，滤过，40℃干燥，过80目筛，备用，蒸馏后的水液另器收集，药渣备用；

(3)取牡丹皮，加10倍量水，浸泡1.5小时，收集7倍量馏出液，冷藏,过滤,收集沉淀物，40℃干燥，过80目筛，备用；

(4)将步骤(3)中蒸馏后的水液另器收集，药渣与薄荷药渣合并，加8倍量水，煎煮2小时，滤过，滤液与上述水液合并，浓缩至60℃时测相对密度为1.30～1.32的稠膏与上述备用稠膏合并，减压干燥，0.08Mpa，80℃，粉碎成细粉，加入上述挥发油包合物、蒸馏物及淀粉适量，混匀，装入胶囊，即得。

本发明采用玄参、生地、丹皮、薄荷四味药组方，在治疗牙周炎时，注重从整体辨证论治，注意局部与全身的有机联系，具有清胃泻火、生津止痛之功效，在临床上应用于治疗牙周炎多年，疗效确切，处方组成简单，制备成胶囊剂型，便于患者的服用和携带，具有明显抗炎、镇痛、抑菌作用。

具体实施方式

实施例1

玄参9g，生地9g，牡丹皮6g，薄荷6g；

(1)取玄参、生地，加108ml50％乙醇回流提取二次，每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃时测相对密度为1.30的稠膏备用；

(2)取薄荷，加水54ml，浸泡0.5小时，提取挥发油3小时，收集挥发油，将挥发油溶于乙醇，挥发油：乙醇＝1：5，加入到30℃的β-环糊精饱合水溶液中，挥发油：β环糊精：水＝1：9：90，30℃恒温搅拌1小时，400转/min，冷藏24小时，滤过，40℃干燥，过80目筛，备用，蒸馏后的水液另器收集，药渣备用；

(3)取牡丹皮，加水54ml，浸泡1小时，收集馏出液36ml，冷藏,过滤,收集沉淀物，40℃干燥，过80目筛，备用；

(4)将步骤(3)中蒸馏后的水液另器收集，药渣与薄荷药渣合并，加7倍量水，煎煮1小时，滤过，滤液与上述水液合并，浓缩至60℃时测相对密度为1.30的稠膏与上述备用稠膏合并，减压干燥，0.08Mpa，80℃，粉碎成细粉，加入上述挥发油包合物、蒸馏物及淀粉适量，混匀，装入胶囊，即得。

实施例2

玄参12g，生地12g，牡丹皮12g，薄荷12g；

(1)取玄参、生地，加168ml60％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃时测相对密度为1.31的稠膏备用；

(2)取薄荷，加水120ml，浸泡1小时，提取挥发油4小时，收集挥发油，将挥发油溶于乙醇，挥发油：乙醇＝1：5，加入到30℃的β-环糊精饱合水溶液中，挥发油：β环糊精：水＝1：9：90，30℃恒温搅拌1.5小时，400转/min，冷藏24小时，滤过，40℃干燥，过80目筛，备用，蒸馏后的水液另器收集，药渣备用；

(3)取牡丹皮，加水120ml，浸泡1.5小时，收集7倍量馏出液，冷藏,过滤,收集沉淀物，40℃干燥，过80目筛，备用；

(4)将步骤(3)中蒸馏后的水液另器收集，药渣与薄荷药渣合并，加8倍量水，煎煮2小时，滤过，滤液与上述水液合并，浓缩至60℃时测相对密度为1.31的稠膏与上述备用稠膏合并，减压干燥，0.08Mpa，80℃，粉碎成细粉，加入上述挥发油包合物、蒸馏物及淀粉适量，混匀，装入胶囊，即得。

实施例3

玄参15g，生地30g，牡丹皮20g，薄荷18g；

(1)取玄参、生地，加360ml70％乙醇回流提取三次，每次3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃时测相对密度为1.32的稠膏备用；

(2)取薄荷，加水198ml，浸泡1.5小时，提取挥发油5小时，收集挥发油，将挥发油溶于乙醇，挥发油：乙醇＝1：5，加入到30℃的β-环糊精饱合水溶液中，挥发油：β环糊精：水＝1：9：90，30℃恒温搅拌2小时，400转/min，冷藏24小时，滤过，40℃干燥，过80目筛，备用，蒸馏后的水液另器收集，药渣备用；

(3)取牡丹皮，加水220ml，浸泡2小时，收集馏出液160ml，冷藏,过滤,收集沉淀物，40℃干燥，过80目筛，备用；

(4)将步骤(3)中蒸馏后的水液另器收集，药渣与薄荷药渣合并，加9倍量水，煎煮3小时，滤过，滤液与上述水液合并，浓缩至60℃时测相对密度为1.32的稠膏与上述备用稠膏合并，减压干燥，0.08Mpa，80℃，粉碎成细粉，加入上述挥发油包合物、蒸馏物及淀粉适量，混匀，装入胶囊，即得。

实施例4

玄参12g，生地19.5g，牡丹皮13g，薄荷12g；

(1)取玄参、生地，加168ml60％乙醇回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至60℃时测相对密度为1.31的稠膏备用；

(2)取薄荷，加水120ml，浸泡1小时，提取挥发油4小时，收集挥发油，将挥发油溶于乙醇，挥发油：乙醇＝1：5，加入到30℃的β-环糊精饱合水溶液中，挥发油：β环糊精：水＝1：9：90，30℃恒温搅拌1.5小时，400转/min，冷藏24小时，滤过，40℃干燥，过80目筛，备用，蒸馏后的水液另器收集，药渣备用；

(3)取牡丹皮，加水120ml，浸泡1.5小时，收集7倍量馏出液，冷藏,过滤,收集沉淀物，40℃干燥，过80目筛，备用；

(4)将步骤(3)中蒸馏后的水液另器收集，药渣与薄荷药渣合并，加8倍量水，煎煮2小时，滤过，滤液与上述水液合并，浓缩至60℃时测相对密度为1.31的稠膏与上述备用稠膏合并，减压干燥，0.08Mpa，80℃，粉碎成细粉，加入上述挥发油包合物、蒸馏物及淀粉适量，混匀，装入胶囊，即得。

以下通过试验例来进一步阐述发明所述药物的有益效果。

制备药物实施例

配方：薄荷350g、生地350g、丹皮350g、玄参350g，共1400g；

制成总量：制成1000粒，每粒0.56g(相当于1.4g生药)；

服用方法：每天三次，每次5粒。

制备方法：

(1)取生地350g、玄参350g，加7倍量60％乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对浓度为1.30～1.32的稠膏备用；

(2)取薄荷350g，加10倍量水，浸泡1小时，提取挥发油4小时，收集挥发油，将挥发油溶于乙醇(挥发油：乙醇＝1:5)，加入到30℃的β-环糊精饱和水溶液中，(挥发油：β-环糊精：水＝1:9:90),30℃恒温搅拌，400转/min，1.5小时，冷藏24小时，滤过，40℃干燥，过80目筛，备用，蒸馏后的水液另器收集，药渣备用；

(3)取牡丹皮350g，加10倍量水，浸泡1.5小时，收集7倍量馏出液，冷藏，过滤，收集沉淀物，40℃干燥，过80目筛，备用，蒸馏后的水液另器收集；

(4)将(3)所得药渣与薄荷药渣合并，加8倍量水，煎煮2小时，滤过，滤液与(3)所得水液合并，浓缩至相对密度为1.30～1.32(60℃)的稠膏与(1)中所得稠膏合并，减压干燥(0.08Mpa，80℃)，粉碎成细粉，加入(2)所得挥发油包合物、蒸馏物及淀粉适量，混匀，装入胶囊，即得，以下简称牙周康胶囊。

试验例1对内毒素致大鼠牙周炎的影响

1、试验材料

1.1动物：Wistar大鼠，雄性，SPF级，购自长春市亿斯实验动物技术有限责任公司，许可证号：SCXK(吉)2011-0004。

1.2药物及试剂：牙周康胶囊，由本院剂型室提供；大肠杆菌内毒素(LPS)，美国Sigma公司；水合氯醛，天津市光复精细化工研究所。

2、试验方法与结果

取68只大鼠，动物适应环境后，随机分为7组：正常对照组(8只)，假手术组(10只)，牙周炎模型组(10只)，阳性药人工牛黄甲硝唑胶囊251mg/kg组(10只)，牙周康胶囊6.4、3.2、1.6g生药/kg三个剂量给药组(每组各10只)。每日灌服给药一次，连续给药10天，正常对照组、假手术组及牙周炎模型组同时给同体积蒸馏水。从给药第6天开始，正常对照组动物不做任何处理，其余各组动物连续局部造模处理5天，每天腹腔注射3％水合氯醛麻醉，之后用探针锐性分离左右侧第1、2磨牙的颊侧、腭侧牙龈，用加样枪滴10mg/ml内毒素混悬液于颊、腭侧龈袋内各10μl，假手术组同时局部滴生理盐水，所有动物每天造模处理前先观察并记录牙周炎形成情况。给药第10天即造模处理第5天，造模处理后4小时，腹腔注射3％水合氯醛麻醉，腹主动脉采血，分离血清备用，同时取上颌完整磨牙牙体、牙周组织标本，浸泡在10％福尔马林液中固定，脱钙，切片，HE染色，观察牙周组织病理变化。结果如下。

2.1肉眼观察

(1)正常对照组牙龈组织呈粉红色，无充血水肿，无炎症性改变。

(2)假手术组有4只动物牙龈组织呈粉红色，无充血水肿，无炎症性改变，其余6只动物牙龈组织轻微红肿，未见溃疡、糜烂。

(3)模型组牙龈肿胀充血明显，出现溃疡、糜烂，触之易出血，有深牙周袋形成。

(4)阳性药及牙周康胶囊各剂量组牙龈充血、水肿明显减轻，个别动物触之易出血，牙周袋变浅。

2.2病理形态观察结果：

按照牙周组织炎症程度进行分级，共分5级，0级：未见炎症改变；1级：轻微炎症改变，主要集中在牙周组织内可见轻微组织水肿，组织内可见轻微炎细胞浸润，少量纤维细胞增生；2级：轻度炎症改变，主要集中在牙周组织内可见轻度组织水肿，组织内可见轻度炎细胞浸润，可见轻度纤维细胞增生；3级：中等程度的炎症改变，主要集中在牙周组织内内可见中等程度的组织水肿，大量的炎细胞浸润，多量的纤维素性渗出，在咀嚼肌间隙内可见炎症性水肿和渗出；4级：严重的炎症改变，主要表现为在牙周组织中存在脓肿，在组织中存在大量的炎细胞浸润与水肿和渗出，炎症向组织深层扩散，可累及腮腺，或累及咀嚼肌间隙出现大量炎细胞浸润，或累及牙髓。

(1)正常对照组8/8只动物组织内未见炎症改变。

(2)假手术组(滴加生理盐水)：6/10例动物可见在浅表的牙周组织和上颚内浅表组织层次内存在轻微的炎症反应，可见轻微的炎细胞浸润和渗出，轻微少量的纤维细胞增多。属于操作中采用锐性分离颊腭侧牙龈所致轻微炎症，主要表现特点为炎症处于浅表粘膜内，同时炎症程度轻微。4/10例动物组织内未见炎症改变。

(3)模型组：10只动物中有9/10例牙周组织存在大量炎细胞浸润，可见大量脓肿形成，炎症扩散面积较大，可累及牙髓并向深层组织扩散，可累及腮腺，或累及咀嚼肌间隙出现大量炎细胞浸润，可见组织内出血，牙槽骨吸收明显处于严重的牙周炎症。1/10例处于中等程度的炎症改变，主要集中在牙周组织内内可见中等程度的组织水肿，大量的炎细胞浸润，多量的纤维素性渗出，在咀嚼肌间隙内可见炎症性水肿和渗出。证明模型复制是成功的。

(4)阳性药物组中2/10例有轻度炎症改变，主要集中在牙周组织内可见轻度组织水肿，组织内可见轻度炎细胞浸润，可见轻度纤维细胞增生；6/10例有中度炎症改变，中等程度的炎症改变，主要集中在牙周组织内内可见中等程度的组织水肿，大量的炎细胞浸润，多量的纤维素性渗出；2/10例有严重的炎症改变，主要表现为在牙周组织中存在脓肿，在组织中存在大量的炎细胞浸润与水肿和渗出。与模型组统计比较，表明阳性药物组可以有效治疗动物牙周炎。

(5)药物高剂量组中1/10例未见炎症改变，1/10例有轻微炎症改变，组织内可见轻微炎细胞浸润，少量纤维细胞增生；1/10例有轻度炎症改变，主要集中在牙周组织内可见轻度组织水肿，组织内可见轻度炎细胞浸润，可见轻度纤维细胞增生；4/10例有中度炎症改变，中等程度的炎症改变，主要集中在牙周组织内内可见中等程度的组织水肿，大量的炎细胞浸润，多量的纤维素性渗出；3/10例有严重的炎症改变，主要表现为在牙周组织中存在脓肿，在组织中存在大量的炎细胞浸润与水肿和渗出。统计显示，高剂量组与模型组比较可以有效治疗治疗动物牙周炎。

(6)药物中剂量组中1/10例有轻微炎症改变，组织内可见轻微炎细胞浸润，少量纤维细胞增生；2/10例有轻度炎症改变，主要集中在牙周组织内可见轻度组织水肿，组织内可见轻度炎细胞浸润，可见轻度纤维细胞增生；3/10例有中度炎症改变，中等程度的炎症改变，主要集中在牙周组织内内可见中等程度的组织水肿，大量的炎细胞浸润，多量的纤维素性渗出；4/10例有严重的炎症改变，主要表现为在牙周组织中存在脓肿，在组织中存在大量的炎细胞浸润与水肿和渗出。统计显示，中剂量组与模型组比较可以有效治疗治疗动物牙周炎。

(7)药物低剂量组中5/10例有轻度炎症改变，主要集中在牙周组织内可见轻度组织水肿，组织内可见轻度炎细胞浸润，可见轻度纤维细胞增生；2/10例有中度炎症改变，中等程度的炎症改变，主要集中在牙周组织内内可见中等程度的组织水肿，大量的炎细胞浸润，多量的纤维素性渗出；3/10例有严重的炎症改变，主要表现为在牙周组织中存在脓肿，在组织中存在大量的炎细胞浸润与水肿和渗出。统计显示，低剂量组与模型组比较可以有效治疗治疗动物牙周炎。结果统计见表1、表2。

表1各组大鼠组织炎症评分

表2各组大鼠组织炎症评分结果

注：Δ与模型组比较P<0.05，ΔΔ与模型组比较P<0.01，ΔΔΔ与模型组比较P<0.001；

*与对照组比较P<0.05，**与对照组比较P<0.01，***与对照组比较P<0.001，下同。

以上结果可见，牙周康胶囊对内毒素引起的牙周炎具有明显的抑制作用，表明牙周康胶囊具有明显的抗炎作用。

试验例2对小鼠醋酸扭体反应的影响

1、试验材料

1.1动物：KM小鼠，SPF级，购自长春生物制品研究所有限责任公司，许可证号：SCXK(吉)-2011-0003。

1.2药物及试剂：牙周康胶囊，由本院剂型室提供；醋酸，北京化工厂。

2、试验方法与结果

取60只小鼠，动物适应环境后，随机分为5组：空白对照组，人工牛黄甲硝唑胶囊358.57mg/kg，牙周康胶囊9.14、4.57、2.29g生药/kg三个剂量给药组。每日灌服给药一次，连续给药10天。末次给药后1h，于小鼠腹腔注射0.7％醋酸溶液10ml/kg，记录给醋酸5min后10min内小鼠发生的扭体次数。结果见表3。

表3对小鼠醋酸扭体反应的影响

表3结果可见，牙周康胶囊可明显抑制小鼠醋酸扭体次数，表明牙周康胶囊具有明显的镇痛作用。

实验例3抑菌作用

1试验材料

1.1实验菌株

临床分离株：共计39株，均自临床标本中分离，鉴定后本实验室保存，其中表皮葡萄球菌10株，金黄色葡萄球菌14株，甲型溶血性链球菌10株，伴放线放线杆菌2株，产黑色素杆菌、核梭杆菌和消化链球菌各1株。

1.2药物

待测样品：牙周康胶囊，棕褐色粉末，由长春市朝阳区莱沃口腔门诊提供，作为本试验待测药物。

对照药：人工牛黄甲硝唑胶囊，四平正和制药有限公司，批准文号：国药准字H22024844。

1.3培养基

普通琼脂培养基：营养琼脂45g，加水1000ml，高压灭菌。用于培养营养要求不高的细菌，如表皮葡萄球菌，金黄色葡萄球菌等。

血琼脂培养基：将普通琼脂培养基加热溶化后，约55℃时注入羊全血混匀，用于培养甲型溶血性链球菌。

药物培养基：于M-H培养基中，分别加入待测药物，配成终浓度为200mg/ml、100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml，相当于500mg生药/ml、250mg生药/ml、125mg生药/ml、62.5mg生药/ml、31.25mg生药/ml。同样对照药物配成终浓度分别为2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml、32mg/ml、64mg/ml、128mg/ml、256mg/ml，用于MIC测定。

2试验方法

2.1最小抑菌浓度(MIC)的测定

将细菌分别接种于上述培养基上，37℃培养24h后，从平板中刮取菌落，以无菌生理盐水稀释，用麦氏比浊管测细菌浓度，配制成9×10⁶CFU/ml细菌稀释液，从各种细菌稀释管中分别取0.05ml菌液，点种于各浓度药物平板及不含药物的对照平板上，37℃培养24h后观察并记录结果。

3结果

3.1牙周康胶囊对引起牙周炎常见需氧菌或兼性厌氧菌MIC试验结果见表4。表4牙周康胶囊对需氧菌或兼性厌氧菌株的MIC₅₀、MIC₉₀测定结果(单位：mg生药/ml)

从表4可见牙周康胶囊对甲型溶血性链球菌抑制作用最好，其次为表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌。

3.2牙周康胶囊对引起牙周炎常见厌氧菌的MIC试验结果见表5。

表5牙周康胶囊性厌氧离菌株的MIC测定结果(单位：mg生药/ml)

从表5可见牙周康胶囊对引起牙周炎的专属性厌氧菌有一定的抑制作用，其中对消化链球菌和伴放线放线杆菌的抑制效果好于产黑色素杆菌、核梭杆菌。

试验例4毒性反应

1、试验材料

1.1动物：KM小鼠，SPF级，购自长春生物制品研究所有限责任公司，许可证号：SCXK(吉)-2011-0003。

1.2药物及试剂：牙周康胶囊，由本院剂型室提供。

2、试验方法与结果

取40只小鼠，动物适应环境后禁食16小时，之后蛇形分组：空白对照组，牙周康胶囊组，每组20只，雌雄各半。24小时灌胃给药3次，40ml/kg。给药后持续观察14天，记录动物状态和死亡时间，称量死亡及存活动物体重，解剖死亡动物和存活动物并计算最大给药量。

结果灌胃给予牙周康30.19g/kg，相当于75.47g生药/kg(40ml/kg)，24小时给药3次，动物无明显异常变化，无死亡动物出现，14天后存活动物处死解剖，肉眼观察其主要脏器亦无异常变化。牙周康胶囊灌胃给予动物的最大给药量为120ml，90.57g牙周康胶囊，相当于226.41g生药。体重变化见表6。

表6牙周康胶囊对小鼠体重的影响

表7牙周康胶囊对小鼠体重的影响

表8牙周康胶囊对小鼠(♀)体重的影响

本发明配方口服对内毒素致牙周炎的形成具有明显的保护作用，具有明显的镇痛作用，同时具有明显的抑菌作用；且毒性较小。适用于具有牙周病的人群，是一个很好的治疗牙周炎现代中药制剂。