一种利用家蚕普通斑纹品种构建实用性茶斑限性系统的简捷方法

摘要

本专利公开了一种利用家蚕普通斑纹品种构建实用性茶斑限性系统的简捷方法，以基础斑纹限性品种为母本，实用性普斑品种为父本，杂交得到F1，选取F1雌与基础普茶品种雄杂交得到F2；肉眼选除F2中深普茶个体，鉴蛹选取雌个体与实用性普斑品种回交，BC1起回交各代连续淘汰后代中非茶斑个体与茶斑中深普茶个体，鉴蛹选取雌个体回交；BCn代按相同方法淘汰后代个体，将普茶与淡普茶个体分开饲养，在普茶中鉴蛹选取雌与淡普茶雄自交，F3在分开饲养的淡普茶中选留雌与姬茶雄自交；F4选除非茶斑个体后自交，F5起淘汰出现非茶斑个体的蛾区，直至连续无非茶斑个体出现。本发明解决了普通斑纹品种不能连续回交继代的困难，操作简单，过程快捷。

说明书

技术领域

本发明涉及家蚕的遗传育种领域，具体涉及一种利用家蚕普通斑纹品种构建实用 性茶斑限性系统的简捷方法。

背景技术

目前，斑纹限性品种是应用最为成功的省力化家蚕品种之一，该类家蚕品种中凡 是有斑纹的幼虫个体就为雌，无斑的幼虫个体（素斑蚕）就为雄，它能根据幼虫斑纹的有无， 肉眼鉴别不同个体的性别，减少家蚕各级蚕种繁育过程中在蛹期开展人工“鉴蛹”区分雌雄 的传统工序，可以降低蚕种繁育的人工成本20%以上。但是，该类型品种只有在幼虫发育到 大蚕期（4-5龄蚕，一般将1-3龄划分为小蚕；也有将1-2龄蚕划分为小蚕、3龄蚕为中蚕、4-5 龄蚕为大蚕的划分方法）才能根据斑纹来区分雌雄。而依据现在我国各地农村蚕种繁育基 地普遍情况，到大蚕期就已经将共育的3龄小蚕从共育室分发到基地各分散的原蚕饲育户， 每一个饲育户还是既要繁育雄蚕，又要繁育雌蚕，仍存在因混淆导致一代杂交种杂交率不 彻底现象发生的可能。

西南大学蒋同庆教授、向仲怀院士根据基因互作原理，将茶斑显性基因L导入到斑 纹限性系统中，建立家蚕3龄期就可分别雌雄的系统，又称中蚕期鉴别法（家蚕遗传育种学， 向仲怀主编，农业出版社，1994年，226.）。西南大学朱勇教授于1986开始利用茶斑材料 （ZZp/pL/L，姬茶斑雄个体）与实用性普通斑限性品种的雌蚕（ZW^⁺p/p+^L/+^L）杂交，并利用 其后代中姬茶雄个体（ZZp/pL/+^L，本申请中+/p表示位于第二染色上普通斑纹基因对，+表 示普斑显性，p表示普斑隐性；L/+^L表示位于第四染色上茶斑基因对，L表示茶斑显性，+^L表示 茶斑隐性；ZW^⁺表示性别基因对，W^⁺表示含有易位普斑显性控制基因，W具有对雌完全决定 作用）连续与实用性普通斑限性系统雌蚕（ZW^⁺p/p+^L/+^L）回交，育成了既具有茶斑限性系 统特点又达到一定实用性的新品种（家蚕限性茶斑系的选育，朱勇，向仲怀，卢效葵，陈萍， 蚕学通讯，1991，14-16.）。如果繁育该类品种，就可在小蚕共育室开展雌雄鉴别工作，即：淡 普茶斑为雌个体，姬茶斑为雄个体，使雌雄鉴别工作提早在共育室中进行，确保各分散的原 蚕饲育户要么专养雄蚕，要么专养雌蚕，避免出现雌雄蚕均要饲养的局面。肉眼分别该类特 点家蚕品种的雌雄比鉴别斑纹限性特点品种的雌雄更加明显更加易于区分，该技术推广起 来会更加简单。

而根据朱勇教授等研究方法，只能实现第二染色上普通斑纹基因为隐性基因p/p 材料的实用化转育，但是在众多家蚕品种中还存在大量普斑品种+/+的现象，如绝大多数日 系实用性品种，其实用化就难以根据上述方法完成。且参照目前相似的遗传育种方法，首先 将实用性普斑品种+/+转育成实用性素斑品种p/p后，再开始构建茶斑限性系统，所需要代 数会更多，时间会更长。

发明内容

本发明要解决的技术问题是利用实用化普斑品种构建实用化茶斑限性系统存在 的遗传困难，做到能连续回交实用性普斑品种，快速使新选育茶斑限性系统材料含有更多 的实用化普斑品种血缘。

为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：一种利用家蚕普通斑纹品种 构建实用性茶斑限性系统的简捷方法，包括杂交、连续回交和自交，其操作步骤如下：

杂交：以基础斑纹限性品种为母本，实用性普斑品种为父本，进行杂交，得到F₁代，选取 F₁代中的雌个体与基础普茶斑品种的雄个体杂交得到F₂；

连续回交：肉眼除去F₂中深普茶个体，鉴蛹选取雌个体与实用性普斑品种的雄个体回 交，BC₁代起的回交各代中，连续淘汰后代中非茶斑个体与茶斑中深普茶个体，鉴蛹选取雌 个体与实用性普斑品种的雄个体回交；

自交：BCn代淘汰非茶斑个体与茶斑中深普茶个体，并将普茶与淡普茶个体分开饲养， 在普茶个体中鉴蛹选取雌个体与淡普茶雄个体自交，F₃代在分开饲养的淡普茶个体中鉴蛹 选取雌个体与姬茶雄个体自交得F₄代，F₄代起淘汰非茶斑个体后自交，F₅代起淘汰出现的非 茶斑个体蛾区后自交，直至各蛾区连续无非茶斑个体出现为止。

采用本发明技术方案的一种利用家蚕普通斑纹品种构建实用性茶斑限性系统的 简捷方法，本发明的有益效果在于：紧紧扣住转育各代在继代群体中均不能遗失斑纹限性 基因（W^⁺）、斑纹隐性基因（p）与茶斑显性基因（L）的遗传本质，通过普通斑个体与茶斑个体 间斑纹形状差异、茶斑群体中斑纹深浅差异，淘汰后代群体中非茶斑个体与茶斑中斑纹最 深的深茶斑个体，结合传统的鉴蛹方法可准确选取含有斑纹限性基因（W^⁺）、斑纹隐性基因 （p）与茶斑显性基因（L）的个体，即普茶雌个体（ZW^⁺+/pL/+^L），利用它可实现连续回交，解 决目前难以连续导入实用性普斑品种血缘的难题。除增加淘汰后代群体中特定表现型个体 外，其转育代数、选育步骤、选育方法与家蚕经典遗传育种技术完全保持一致，做到了茶斑 限性系统构建与新材料实用化选育两不误。

附图说明

图1为本发明实施例的示意图。

具体实施方式

如图1所示，本发明一种利用家蚕普通斑纹品种构建实用性茶斑限性系统的简捷 方法，

杂交：以基础斑纹限性品种ZW^⁺p/p+^L/+^L（淡普斑,♀）为母本，实用性普斑品种ZZ+/ ++^L/+^L（普斑,♂）为父本，进行杂交，得到F₁代，选取F₁代中的雌个体ZW^⁺+/p+^L/+^L(普斑, ♀)与基础普茶品种的雄个体ZZ+/+L/L(基础普茶品种,♂)杂交得到F₂；

连续回交：肉眼除去F₂中深普茶个体，鉴蛹选取雌个体ZW^⁺+/pL/+^L（普茶,♀）与实用 性普斑品种ZZ+/++^L/+^L(轮回亲本，普斑,♂)的雄个体回交，BC₁代起至BC_n-1的回交各代中， 连续淘汰后代中非茶斑个体与茶斑中深普茶个体，鉴蛹选取雌个体ZW^⁺+/pL/+^L（普茶,♀） 与实用性普斑品种ZZ+/++^L/+^L(轮回亲本，普斑,♂)的雄个体回交；

自交：BCn代淘汰非茶斑个体与茶斑中深普茶个体，并将普茶ZW^⁺+/pL/+^L（普茶，♀） 与淡普茶ZZ+/pL/+^L（淡普茶，♂）个体分开饲养，在普茶个体中鉴蛹选取雌个体ZW^⁺+/pL/ +^L与淡普茶雄个体ZZ+/pL/+^L自交；F₃代肉眼选留斑纹最淡的二种茶斑个体并分开饲养，鉴 蛹选取淡普茶雌个体（ZW^⁺p/pL/+^L或ZW^⁺p/pL/L，淡普茶，♀）与姬茶雄个体（ZZp/pL/+^L或ZZp/pL/L，姬茶，♂）自交得F₄代；F₄代起淘汰非茶斑个体后自交，F₅代起淘汰出现非茶斑 个体的蛾区后自交，直至各蛾区连续无非茶斑个体出现为止，得淡普茶雌个体ZW^⁺p/pL/L （淡普茶,♀）和姬茶雄个体ZZp/pL/L（姬茶,♂）。

附图中：虚线框中表现型个体可根据非茶斑与茶斑深浅来区分淘汰，BCn代可根据 普茶（ZZ+/+L/+^L，ZW^⁺+/pL/+^L）与淡普茶（ZZ+/pL/+^L）的茶斑深浅来将其分开饲养，在普 茶个体中通过鉴蛹选留雌个体（ZW^⁺+/pL/+^L）与淡普茶个体自交继代，这样可提高隐性基 因p的频率。从F₅代起单蛾饲育多个蛾区，其中凡是出现淡普斑或素蚕的蛾区整区淘汰（理 论上F₅代出现该现象的频率于1/9，其后逐代快速降低），达到急速减低茶斑隐性基因+^L的基 因频率，促进茶斑显性基因L纯合的目的。其间也可用非茶斑个体测交检验，如出现了非茶 斑蛾区淘汰，直接可得到茶斑显性基因L纯合的蛾区。

对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变 形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利 的实用性。